规模化养殖场猪粪源沙门氏菌的耐药性调查

为了解新疆乌鲁木齐周边某规模化猪场猪粪源沙门氏菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,并将耐药数据用于指导该养殖场临床合理用药,采用琼脂稀释法对550 份粪样中分离出的58 株沙门氏菌进行最小抑菌浓度测定。结果显示：沙门氏菌对四环素(100.0%)、环丙沙星(96.6%)、恩诺沙星(94.8%)、阿莫西林/克拉维酸(91.4%)、卡那霉素(89.6%)、氟苯尼考(84.5%)和氨苄西林(75.9%)7 种药物呈现高水平耐药;对阿米卡星(58.6%)、安普霉素(55.2%)、诺氟沙星(51.7%)和庆大霉素(50.0%)呈现中等水平耐药;仅对头孢噻呋(8.6%)敏感。该养殖场猪粪源沙门氏菌对临床常用抗菌药物耐药情况严重,临床应考虑联合用药、轮换用药。     

新疆牛羊源耐药大肠杆菌β-内酰胺酶及16S rRNA甲基化酶基因检测

摘要：【目的】了解新疆某羊场、牛场耐药大肠杆菌携带 β-内酰胺酶和/或 16S rRNA 甲基化酶基因及其共存情况。【方法】通过 PCR 方法对 168 株羊源和32株牛源耐β-内酰胺类药物大肠杆菌进行 β-内酰胺酶及 16S rRNA 甲基化酶基因检测,并对检出基因的 PCR 产物测序。【结果】检测结果为：羊源大肠杆菌携带的 -内酰胺酶基因为blaTEM（42.26%,71/168）和blaCTX-M（2.98%,5/168）;牛源大肠杆菌携带的-内酰胺酶基因为blaTEM（15.63%,5/32）基因,未检出blaCTX-M;两个养殖场均未检出其他被检基因。羊源、牛源大肠杆菌携带的16S rRNA甲基化酶基因为rmtB基因,其检出率分别为4.17%（7/168）和50.00%（16/32）,均未检出armA基因。基因共存情况：3（1.79%）株羊源菌同时携带blaTEM和blaCTX-M基因,7（4.17%）株羊源菌同时携带blaTEM 和rmtB 基因;2（6.25% ）株牛源菌同时携带blaTEM 和rmtB基因。【结论】羊源和牛源分离的大肠杆菌中存在-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因介导的细菌耐药,均以blaTEM和rmtB基因为主。此外,存在不同类型耐药基因共存于同一株耐药菌的现象。     

鸡、 猪大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析

为检测不同动物源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,探究ESBLs对大肠杆菌耐药性的影响,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病.采用NCCLS标准方法和双纸片协同法,对102株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定和和ESBLs检测,设计合成4对引物,用PCR方法进行了ESBLs耐药质粒的DNA扩增和基因型分析.结果表明:以产ESBLs细菌的耐药质粒为模板扩增出了与预期片段大小相符的TEM、CTX-M型ESBLs产物,但均未扩增出SHV、OVA型ESBLs产物.鸡源、猪源产ESBLs菌株检出率分别为81％、6％.CTX-M、TEM型为山东莱西地区动物源产ESBLs大肠杆菌菌株的流行基因型,且鸡源产ESBLs大肠杆菌菌株分布广泛,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,以有效防治此类细菌引发的疾病.     

长春地区鹿源性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

调查吉林省长春市周边地区（榆树、农安、九台、双阳和德惠）腹泻梅花鹿源大肠杆菌的血清型分布和耐药性。对梅花鹿源大肠杆菌进行分离、培养和生化反应鉴定;并对所得菌株进行玻片凝集法确定血清型;用平板扩散法或肉汤微量稀释法测定其对15种抗菌药物的敏感性;利用PCR方法检测9种耐药基因。共得到127株大肠杆菌,84株大肠杆菌属于36种不同的血清型,其中47株属于11种血清型,即O2,O7,O9,O21,O26,O87,O126,O128,O138,O142和O154;所得菌株对15种抗菌药物呈现不同程度的耐药性;耐药基因strB、strA、aadA、tetA和sul2在被检菌株中最为流行。菌株对磺胺类和四环素耐药性最严重, 而且大多数菌株呈多重耐药性;对阿莫西林、卡那霉素较为敏感。对临床用药有指导意义。     

鸡源、猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因flor的克隆与序列分析

为监测大肠杆菌的耐药性,了解不同动物源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因flor的差异及其对大肠杆菌耐药性影响,对从保定及其周边地区分离的23株鸡源、14株猪源大肠杆菌进行耐药性测定,并对其氟苯尼考耐药基因flor进行了变异性分析.结果表明,氟苯尼考耐药菌株检出率分别为62%和58%,不同动物源flor基因同源性为99.8%,与GenBank报道的flor基因比较存在3个氨基酸替代,鸡源flor基因在开放阅读框的第439,479,683等位存在点突变,猪源flor基因在开放阅读框的第439,683,1 100等位出现点突变.     

动物源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性分析

摘 要：为了了解动物源金黄色葡萄球菌的耐药情况,采集不同地区动物源临床样品,采用科玛嘉金黄色葡萄球菌显色培养基对样品中的金葡菌进行分离鉴定,微量肉汤稀释法对分离出的部分金葡菌进行耐药性分析。结果显示,青岛、济南和扬州等地犬源及山东平度鸡源总样品中金葡菌的分离率分别为8.2%、9.5%、5.8%、3.3%;犬源金葡菌对苯唑西林钠、头孢唑林钠、头孢曲松钠、氨苄西林钠、阿莫西林+克拉维酸钾、庆大霉素和阿米卡星的耐药率较低,而对磺胺甲噁唑钠、林可霉素、青霉素钾、硫氰酸红霉素、磷酸替米考星的耐药率均高于68.0%;鸡源金葡菌对多数药物产生高度耐药性,仅对庆大霉素和阿米卡星的耐药率较低,均为25%。表明,动物源金葡菌的分离率较低,鸡源金葡菌的分离率低于犬源临床样品;不同地区动物源金葡菌对临床常用药物产生了不同程度的耐药性,与犬源金葡菌的耐药情况相比,鸡源金葡菌的耐药性范围大、耐药程度严重。本研究为这些地区临床用药提供了一定的参考。     

新疆部分地区致犊牛腹泻轮状病毒病的调查

为了调查规模化牛场致犊牛腹泻轮状病毒病的感染情况,在石河子、昌吉、奎屯等地区的主要牛场采集犊牛腹泻样品共172份。通过设计并合成牛轮状病毒VP6基因引物,采用反转录聚合酶链试反应和ELISA双抗体夹心技术进行牛轮状病毒抗原检测,结果显示:172份样品中有127份牛轮状病毒RT-PCR检测阳性,阳性率73.83%,经序列同源分析,VP6基因与标准序列同源性达到100%;采用ELISA方法,检测出显示阳性样品100份,阳性率72%。新疆部分地区主要规模化奶牛场和部分肉牛场犊牛遭受牛轮状病毒病的感染,部分规模化奶牛场犊牛感染严重。     

不同菌属的氟苯尼考耐药特点及floR基因的序列分析

为了解福建宁德地区猪源细菌对氟苯尼考耐药性及耐药基因floR的遗传特性。本研究从宁德地区6个猪场分别采集了50份仔猪粪便样品。从中分离得到氟苯尼考耐药大肠杆菌17株、沙门氏菌2株、肺炎克雷伯菌5株和鲍曼不动杆菌8株。并对其耐药基因floR进行同源性分析。结果显示,宁德地区猪源大肠杆菌、沙门氏菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对氟苯尼考的耐药检出率分别为34%、4%、10%和16%。且所有的分离细菌都呈现了多重耐药性。同源性分析发现不同细菌间的耐药基因floR存在高度同源性。这些结果表明氟苯尼考耐药基因floR广泛存在于不同细菌间,且可在不同细菌间进行水平传播。该研究为氟苯尼考耐药基因floR的广泛传播奠定了一定的理论基础,对临床合理用药提供了依据。     

锦州地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

由锦州地区不同类型鸡场采集疑似大肠杆菌病病料,分离出大肠杆菌15株。血清型鉴定试验确定14株的血清型,优势血清型为O15 、O35。并选择10种抗生素进行药敏试验,结果表明实验菌株耐药程度和多重耐药较为严重,耐药率在46.67%～100%,对5种以上抗生素耐药的菌株共有13株,占86.67%。     

潍坊地区肉鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定及药敏试验

从山东潍坊地区不同鸡场采集病料,经生化试验和血清型鉴定了95株大肠杆菌,78株为致病性大肠杆菌,它们覆盖了14种血清型,其中O78、O2、O15、O11优势血清型。对这些致病性大肠杆菌进行药敏试验,受试菌的平均耐药率为40.6%,同时多重耐药现象普遍。在21种受试药物中,高敏的药物有4种,分别为头孢噻肟钠、磷霉素钠、氟苯尼考、头孢曲松钠。这一结果对指导本地区肉鸡大肠杆菌病防治具有参考价值。     

香蕉茎叶青贮饲料对肉牛育肥效能研究

饲喂效果是评价一种草料应用推广的重要指标。香蕉茎叶作为一种新型非常规饲草料资源，通过与常规饲草料的饲喂比较，明确其饲喂效能为生产应用提供科学依据。连续2 年在不同肉牛养殖场选取18~24 月龄的育肥肉牛，分别进行香蕉茎叶青贮饲料对育肥肉牛增重效果、香蕉茎叶青贮饲料与甘蔗稍叶青贮饲料、玉米秸秆鲜草料、玉米秸秆青贮料、皇竹草鲜草料、带苞全株玉米青贮饲料等不同饲草料对育肥肉牛增重效能的比较试验。于饲喂前和饲喂后的30、60、90、120 天分别对供试牛只进行称重，通过牛只的日增质量评价香蕉茎叶青贮饲料对肉牛的育肥效能。结果表明：香蕉茎叶青贮饲料对西杂牛育肥增重效果明显高于本地黄牛，饲喂西杂牛日增重可达0.92~1.26 kg/头，饲喂本地黄牛日增重为0.41~0.59 kg/头；与其他饲草料饲喂效果相比，香蕉茎叶青贮饲料仅在饲喂30 天的日增质量低于全株玉米青贮饲料0.106 kg/头(P＞0.05)，与玉米秸秆青贮饲料、甘蔗稍叶青贮饲料效果相当(P＞0.05)，略高于玉米秸秆鲜料、皇竹草鲜料饲喂效果(P＞0.05)。香蕉茎叶青贮饲料对育肥肉牛饲喂效果可替代玉米植株、甘蔗稍叶、皇竹草等常规饲草料在肉牛养殖生产中推广应用。     

动物转基因技术在转基因牛中的研究进展

本研究综述了目前应用于转基因牛中原核显微注射法、体细胞克隆法、病毒载体法等传统动物转基因技术以及具有应用前景的ZFN技术、TALEN技术和iPS技术等。概述了20年来国内外转基因牛重要的研究进展,并就目前转基因牛在乳腺生物反应器、抗病育种、品种改良主要3个方面的应用进行了介绍。在此基础上,就目前转基因牛育种中存在的问题及今后发展趋势进行了讨论,以促进转基因牛研究的发展。     

多种因素对牛超数排卵效果影响的研究

为了扩大中国牛群体繁殖、超数排卵和胚胎移植在中国能得到有效利用来限制进口牛。试验通过对供体牛进行超数排卵,比较了不同品种、供体牛经产与否、不同营养水平、重复超排间隔时间、起针时间5个因素对供体超数排卵效果的影响。结果表明：不同品种之间大部分超排效果无显著影响(P>0.05);育成牛与经产牛的胚胎可利用率极显著差异(P<0.01);不同营养水平组的胚胎可利用率极显著差异(P<0.01);试验结果显示能使二次超排之间的间隔时间缩短为 39天以内;第 9~10天 起针时间的超排效果最佳。本研究显示成体牛育成与否、营养水平高低、起针时间对供体牛超数排卵效果的影响极显著,而供体牛品种、重复超排次数对供体牛超数排卵效果不显著。     

黑龙江省稻瘟病菌生理小种毒力基因分析与抗病育种策略

近年来黑龙江省稻瘟病危害程度加重,给水稻生产造成巨大损失。为了解当地稻瘟病菌生理小种及其毒性基因的组成与分布,有针对性地利用抗性基因,选育抗病品种和使之合理布局,本文利用9个日本鉴别品种、7个中国鉴别品种、31个抗稻瘟病单基因系及12个当地主栽品种,对2006年采自该省主要积温区不同水稻品种的173个稻瘟病菌株进行致病性测定。结果鉴定出55个日本小种,优势小种为017、077、037、377和047,总频率为42.29%。鉴别力比较结果证实日本鉴别品种比中国鉴别品种更适合于当地稻瘟病菌致病性变异与小种分化研究。在12个主栽品种中,除龙粳14、龙盾104外,其他品种已经或正在丧失对稻瘟病的抗性。Pi9基因在所有积温区对稻瘟病菌株的抗谱都最广(平均94.80%),是当前黑龙江省水稻育种上极有价值的抗性基因;基因Piz-5(CA)、Piz-5(R)、Pita-2(R)、Pita-2(P)、Pi12(t)和Pi20(t)对供试菌株有高于70%的抗谱,也具有较高的利用价值。黑龙江省当前抗稻瘟病育种的策略应该是,在利用抗源龙粳14、龙盾104和Pi9的基础上,通过分子标记辅助选择方法聚合一至多个广谱抗性基因;同时加强对稻瘟病菌种群的监测和新抗源的发掘,有针对性地向主栽品种导入新的抗性基因。     

牦牛和普通牛DRB1* Intron 1-exon2序列变异分析

为揭示牦牛抗逆性及抗病育种积累更多的分子遗传学资料,通过检测DRB1基因在牦牛和普通牛群体中的变异,分析该基因检测区域遗传参数。以甘南牦牛、青海牦牛、天祝白牦牛、大通牦牛和普通牛为研究对象。应用PCR-SSCP方法检测BoLA-DRB1基因第1内含子及第2外显子部分序列多态性。DRB1基因第1内含子区检测到4处SNPs及1处插入/缺失突变,第2外显子区检测到17处SNPs,两区域均表现为高度多态;单倍型连锁分析发现21种intron 1-exon 2单倍型组型且存在单倍型连锁不平衡现象,A-A1、A-B1、B-A1和B-B1单倍型在牦牛和普通牛中频率较高;聚类分析表明,牦牛DRB1基因第2外显子区碱基序列与普通牛及山羊的同源性最高,系统进化情况与它们亲缘关系远近一致。牦牛和普通牛BoLA-DRB1基因第1内含子及第2外显子多态性丰富,可作为牦牛和普通牛BoLADRB1的遗传标记。     

Characterization of resistance genes against scald (Rhynchosporium secalis (Oudem.) J.J. Davis) in barley (Hordeum vulgare L.) lines from central Norway, by means of genetic markers and pathotype tests

Rhynchosporium secalis is a serious pathogen of barley (Hordeum vulgare L.) in central Norway. A breeding effort was initiated in 1977 to introduce resistance from different sources into adapted genotypes, and the first cultivar from the program was recently released. However, little is known about the resistance genes introgressed in this cultivar or in advanced breeding lines. An effort was made to address this issue through a set of isolates and available molecular markers. Fourteen breeding lines and their resistance donors were investigated by evaluating their reactions to 11 R. secalis isolates. Bulked segregant analysis was used to identify molecular markers linked to resistance genes in 12 of the breeding lines. The isolates were found to be of less discriminating value than the markers. Useful information has been obtained as to the nature of several of the resistance genes introgressed. Eight of the 12 breeding lines contained introgressed genes that were located at the `complex Rh' locus on chromosome 3H and hence may not easily be pyramided into the same genotype. Previous information about the nature of the resistance in `Jet' is questioned. Neither of the resistance genes Rh or Rh2 seems to have been incorporated into Norwegian breeding material.     

Inheritance of partial resistance to spot blotch in barley

Diallel crosses (without reciprocals) were made among 10 different barley genotypes with genetic variability for spot blotch resistance. Forty‐five F₁ hybrids and their parents were assessed for their combining abilities for the disease resistance. Three experiments, two in a growth chamber on detached leaf and seedlings tests and one in the field on adult plant stages, were undertaken using a randomized complete block design with five replicates. A mixed conidial suspension of nine virulent isolates of the pathogen was used for inoculation. Statistical analysis showed genetic variability for spot blotch resistance. Results showed that the cultivar Banteng, the Ethiopian line CI‐5791 and the Syrian line 79‐SIO‐9 had partial resistance in all experiments. General combining ability was significant, with either positive or negative values. Resistant genotypes show favourable GCA‐effects, and they could therefore be successfully used for breeding purposes.