细胞凋亡基因P53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义

【研究目的】探讨细胞凋亡基因p53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义;【方法】应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统;【结果】p53阳性蛋白表达于法氏囊和胸腺内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核。在不同发育阶段固始鸡法氏囊内均有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于黏膜上皮层与淋巴小结之间靠近上皮层的固有膜内,其次是淋巴小结边缘及淋巴小结与淋巴小结之间的固有膜层内。在1周龄和12周龄固始鸡胸腺内有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于胸腺小叶皮质与髓质交界处,其次是皮质内,很少出现在髓质内。p53在不同发育阶段固始鸡脾脏内均无表达;【结论】在正常生理情况下,细胞凋亡基因p53参与了固始鸡中枢免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

PPARγ基因在荷斯坦公牛不同组织部位表达差异性研究

为研究P以脚基因在荷斯坦公牛组织及月龄间的相对表达差异性。运用实时荧光定量PCR法检测了PPARy基因在15和17月龄荷斯坦公牛脂肪组织（背部脂肪、腰部脂肪、肾周脂肪、肠系膜脂肪）和肌肉组织（背最长肌和半腱肌）间的相对表达差异性。结果表明：PPARY基因的表达在荷斯坦公牛不同月龄问没有发现差异性,而组织间差异表达分析表明：肠系膜脂肪、肾周脂肪和腰部脂肪的相对表达量显著高于背最长肌和半腱肌（P〈0．05）;肠系膜脂肪和肾周脂肪相对表达量显著高于背部脂肪俨〈0．05）。由此可见,PPARY基因在荷斯坦公牛不同部位脂肪组织和肌肉组织中均有表达且部位不同表达不同,存在部位差异性。     

日粮VE水平对荷斯坦种公牛精液品质和血液抗氧化指标的影响

为探讨VE的不同添加水平对荷斯坦种公牛精液品质和血液抗氧化指标的影响,选取年龄和体重相近、采精正常的荷斯坦成年种公牛24头,单因子实验设计,采用随机区组法分为4组,每组6头牛,分别饲喂VE添加水平为30 mg/kg、150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg（按日粮干物质计）的试验日粮,试验期9个月。结果表明：①日粮中添加300mg/kgVE,种公牛的鲜精活力和精液密度显著高于30mg/kg添加组（P<0.05）,但与150mg/kg和600mg/kg组间差异不显著（P>0.05）;种公牛的畸形率以添加300mg/kgVE组最低,极显著低于30mg/kg添加组（P<0.01）,但与150mg/kg和600mg/kg添加组间差异不显著（P>0.05）;采精量和冻后活力各组间差异均无显著性差异（P>0.05）。②不同VE添加水平对荷斯坦种公牛血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、羟自由基（?OH）和丙二醛（MDA）的影响极显著（P<0.01）。综合分析表明：荷斯坦种公牛日粮中VE较为的适宜添加水平为300 mg/kg。     

谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官胚后发育的影响

160只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分成4组,分别饲喂添加0％、0.2％、0.4％和0.8％谷氨酰胺饲粮28天。每周末取鸡24只,每组6只,颈静脉放血致死,取胸腺、法氏囊和脾脏,电子分析天平称重,Bouin液固定,制作石蜡切片,HE染色,光镜观察,显微摄影,研究基础日粮中添加谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官胚后发育的影响。结果为（1）试验3组1、4周龄和试验2组2、4周龄胸腺重量显著高于对照组（P<0.05）,试验3组2周龄极显著高于对照组（P<0.01）;试验2组1、2、4周龄和试验3组4周龄法氏囊重量显著高于对照组（P<0.05）,试验3组1、2周龄极显著高于对照组（P<0.01）。（2）试验组胸腺小叶增多,皮质增厚,淋巴细胞密集,髓质比例减小,胸腺小体减少、减小;法氏囊皱襞内淋巴滤泡增多,皮质增厚,滤泡内淋巴细胞增多,但对照组4周龄皱襞内淋巴滤泡急剧减少。添加0.8%谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官的作用最为明显。结果说明,日粮中添加谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官胚后发育的促进作用较为明显,对中枢淋巴器官,尤其是法氏囊的退化具有延缓作用。从组织学角度证明谷氨酰胺能够促进中枢淋巴器官的胚后发育及其内T、B淋巴细胞的增殖与分化,进而提高机体的免疫功能。     

不同锌水平对荷斯坦种公牛精液品质及血液理化指标的影响

【研究目的】本文旨在研究不同锌水平日粮对荷斯坦种公牛精液品质和血液理化指标的影响。【方法】选取30头荷斯坦种公牛,随机分为5组,A为对照组,饲喂基础日粮,B、C、D、E组锌的添加水平分别为50、80、110、200mg/kg,试验期8个月。【结果】结果表明,（1）不同锌水平对荷斯坦种公牛精子活力、射精量、精子密度影响极显著（P<0.01）;对精子顶体完整率无显著影响(P>0.05),能显著降低精子畸形率（P<0.05）。（2）不同锌水平对荷斯坦种公牛血清中睾酮含量影响极显著（P<0.01）,对血清锌、精清锌和精清睾酮含量无显著影响(P>0.05)。（3）不同锌水平对荷斯坦种公牛精清中谷草转氨酶（GOT）活性影响极显著（P<0.01）,对碱性磷酸酶（AKP）和谷丙转氨酶（GPT）活性有显著影响（P<0.05）,对乳酸脱氢酶（LDH）活性无显著影响(P>0.05);对血清中GOT和GPT活性影响极显著（P<0.01）,对AKP和LDH活性无显著影响(P>0.05)。【结论】综合分析不同锌水平试验牛生理生化指标的变化,本次试验研究表明：锌的适宜添加量为110mg/kg日粮干物质。     

荷斯坦公牛生长性能与血清中GPT、GOT及LDH活性的相关性研究

为探讨不同生长阶段荷斯坦公牛生长性能血清中GPT、GOT及LDH活性的相关关系,以期为荷斯坦公牛的选育提供初步的理论依据。测定12头6-12月龄荷斯坦公牛血液中GPT、GOT及LDH活性,比较各时期血液酶的变化趋势,用SPSS软件分析不同月龄3种血液酶活性与其相应时期生长性能的相关性及回归方程。结果表明：GPT活性与11-12月龄日增重相关系数分别为0.358和0.400,均达到显著水平(P＜0.05),GOT活性与9月龄日增重的相关系数为0.399(P＜0.05);LDH活性同9、11月龄日增重的相关系数分别为0.550(P＜0.01)和0.466(P＜0.05)。因此,可考虑将GPT活性作为11-12月龄阶段;GOT活性作为9月龄阶段;LDH活性作为9、11月龄阶段的生化辅助选择标记进行选育工作。     

不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清抗氧化指标的影响

【研究目的】本试验旨在研究不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清抗氧化指标的影响。【方法】试验选取40头荷斯坦种公牛,随机分为10组,对照组饲喂基础日粮,试验组采用3×3试验设计,分别饲喂不同铜、锰水平的日粮,铜的添加水平分别为4、8、12mg/kg（按日粮干物质计）,锰的添加水平分别为50,125,200mg/kg,试验期8个月。【结果】结果表明：不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）、锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）活性及血清一氧化氮（NO）含量差异极显著（P<0.01）,对总抗氧化能力（T-AOC）、铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）差异显著（P<0.05）,对血清过氧化氢酶（CAT）,铜兰蛋白（CP）活性及丙二醛（MDA）含量无显著差异(P>0.05)。【结论】综合分析不同铜、锰水平下试验牛抗氧化指标的变化,铜的适宜添加水平为4-8mg/kg日粮干物质,锰的适宜添加水平为50mg/kg日粮干物质。     

TUNEL法检测类猪圆环病毒2型因子P1诱导猪免疫器官细胞凋亡的研究

研究类猪圆环病毒2型因子P1体内诱导的细胞凋亡作用。将P1分子克隆接种普通仔猪,用原位末端标记技术(TUNEL)检测猪的扁桃体、脾脏、腹股沟淋巴结等免疫器官细胞的凋亡情况。猪感染P1后21和35 d的扁桃体、脾脏和腹股沟淋巴结等免疫器官细胞出现了凋亡。P1可能引起猪的免疫抑制。     

中国发展千万头优质奶牛的战略思考

畜群遗传改良的原始动力来自一代超过一代的优秀公牛 ,发达国家优秀公牛的精液是全球化高科技高投入的遗传材料 ,国内外遗传改良的成果 95 %以上归功于人工授精。中国完全可以依靠现有的 30 0万头荷斯坦母牛基础群 ,大面积采用国外相对廉价而优秀的公牛精液进行人工授精 ;同时结合使用国外顶尖公母牛胚胎培育小公牛 ,不经后测直接做种的方法 ,经过 1 0a (约5个世代 )的繁育 ,生产出 1 0 0 0万头左右达到北美当时遗传水平和生产能力的优质母牛。采用人工授精方案的资金投入为胚胎移植方案的 1 2 2～ 1 1 2 ,可达到相同的改良效果     

小鼠ES细胞在不同饲养层上培养nanog基因的表达水平与生长行为的研究

观察小鼠ES-D3细胞在MEF、新生牛睾丸支持细胞(nBTSCs)和新生兔睾丸支持细胞(nRTSCs)饲养层上生长4dnanog基因的表达水平和生长行为。RT-PCR分析显示,MEF饲养层上培养4d的ES-D3nanog基因含量高;nBTSC饲养层上培养nanog基因表达较低;而RTSC饲养层上培养nanog基因表达最低。结果显示:不同饲养层上的ES-D3细胞集落形态和培养4d分化程度有差异。在MEF饲养层上的ES-D3细胞培养4d,集落形态仍然很规则,细胞间紧密,集落表面少见大细胞,AKP染色强阳性。在nBTSC饲养层上的ES-D3细胞,集落界限清晰,AKP染色显示,集落大部分细胞呈阳性,少数的细胞集落为弱阳性,可见集落表面分散有较多的大细胞。在nRTSC饲养层上的饲养层上的ES-D3,集落隆起不明显,集落界限不清晰,大部分集落形态不太规则,AKP染色显示集落中部分细胞呈阳性,少数的细胞集落为全阴性,集落表面有较少的大细胞,集落周围有伸出的成纤维细胞。     

中药蟾酥免疫增强剂对肉仔鸡免疫器官生长发育及免疫活性细胞影响的研究

本研究对肉仔鸡饲料中添加中药蟾酥免疫增强剂后,免疫器官的生长发育情况及免疫器官中免疫活性细胞的变化进行了观察。结果显示,中药蟾酥免疫增强剂组雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的重量和指数明显高于空白对照组,各免疫器官不同区域的T淋巴细胞和浆细胞数也明显增多,说明中药蟾酥免疫增强剂对肉仔鸡免疫器官的生长发育和免疫活性细胞的增殖都有明显的促进作用。     

海参加工废液中皂苷的提取及其抗肿瘤作用的研究

为了研究其对肿瘤小鼠的抑瘤作用,以及对免疫器官的影响。从海参废液中提取海参皂苷,通过建立S180皮下肿瘤小鼠模型,采用经口灌胃和腹腔注射2种方式给药后,将小鼠称重,断颈处死,然后剥离的肿瘤组织、胸腺、脾脏,称重并进行统计学分析。结果表明：海参皂苷能显著抑制S180皮下瘤小鼠的肿瘤生长;通过2种给药方式相比较,腹腔注射给药方式抑瘤效果(60.29%,P＜0.01)明显优于经口灌胃给药方式(37.70%;P＜0.05);与阳性对照环磷酰胺相比,海参皂苷对小鼠的生长影响较小,而且提高小鼠的脾脏指数和胸腺指数,对小鼠免疫器官有促进作用。本实验为今后海参皂苷抗肿瘤活性的进一步研究提供了有效依据。     

白菜的内多倍化现象

研究和了解植物内多倍化现象的发生规律和特点对于有效调控器官分化过程, 加速有用器官形成具有重要意义。本文分别以白菜及其近缘属种为材料, 运用流式DNA分析技术, 系统检测了不同发育阶段、不同组织器官以及不同种属植物叶片的内多倍化水平。结果表明, 白菜的内多倍化特点同样具有组织、发育阶段和种属特异性。一些木质化程度较高的输导组织如幼根、胚轴、茎和叶柄比其他非输导组织的叶片、子叶、苞叶具有更高的内多倍化程度; 在给定的组织器官中内多倍化水平随该器官的发育进程而提高, 当器官成熟时, 内多倍化水平也趋于稳定; 显微观察结果表明, 不同倍性的细胞核大小差异悬殊, 呈无规律状态散布于白菜表皮组织相邻的细胞内; 最高倍性水平的细胞核, 在白菜叶片中为64C, 而在甘蓝、芥菜和拟南芥中分别为32C、16C、16C, 在同科的不同植物中显示了不同的内多倍化水平。     

异育银鲫组织中γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)的免疫组织化学定位

观察γ-氨基丁酸A受体(GABA_AR)异育银鲫中枢神经系统和外周组织中的特异性分布情况,探讨其在不同组织中的作用。本试验以GABA_AR的α1亚基(GABA_ARα1)作为GABA_AR的检测指标,采用免疫组织化学方法对异育银鲫端脑、中脑、小脑、延脑、肝脏、肾脏组织中的GABA_AR进行定位研究。结果表明：在异育银鲫端脑、中脑、小脑、延脑、肝脏、肾脏中均有GABA_AR存在,各组织中的GABA_AR密度从高到低依次为：小脑、中脑、延脑、端脑、肾脏、肝脏。其中,小脑的分子层和蒲氏细胞层、中脑的视盖、延脑的迷走叶、端脑的纹状体、肾脏的肾小管以及肝细胞中GABA_AR的密度较高。研究显示,GABA_AR主要分布于异育银鲫的中枢神经系统,外周组织中也有少量分布。本研究旨在为异育银鲫GABA_AR分布的定位研究奠定一定的科学基础。     

The Effect of Arbutin on Mice Brain Cells after Ischemia-reperfusion Injury

[Objective]To study the effect of the Chinese traditional medicine arbutin on brain cells after ischemia-reperfusion injury and provide a theoretical foundation for its clinical application. [Methods]Forty Kunming mice were randomly divided into four groups,namely the blank group,the ischemia-reperfusion group,the chemoprophylaxis group and the medication group. The cerebral ischemia-reprefusion model,made according to the principle of brain damage caused by ischemia,was stained with TTC and HE to observe cells' morphological changes.SOD activity,MDA content and GSH-Px activity in brain tissues were tested. [Results]Compared with the ischemia-reperfusion group,necrosis of ischemia areas stained by TTC in the chemoprophylaxis group and the medication group was less obvious. HE staining showed the alleviation of cells damage. The enhancement of SOD activity and that of GSH-Px activity showed significant differences. MDA content was reduced(P 0.05 for both). [Conclusions]Arbutin had antioxidant properties which can effectively prevent and protect brain cells from damage.     

人工饲养朱鹮沙门氏菌感染致死的病理学观察

对一只突然死亡朱鹮进行了系统的病理学检查。结果表明,该朱鹮与禽类感染沙门氏菌的病理变化相似。眼观显著的病变是肝脏、肺脏、脾、肾脏肿胀、出血、淤血;输卵管出血并与多数脏器粘连。病理组织学变化为肝细胞颗粒变性,肿胀,坏死,有炎性细胞浸润;肝窦隙扩张,淤血明显;肾小管上皮细胞肿胀变性,部分坏死、脱落。间质毛细血管扩张、充血,部分地方有出血现象;肺脏严重出血,毛细血管扩张、充血;肠黏膜脱落,黏膜下层血管扩张、充血,有炎性细胞浸润。微生物学诊断为沙门氏菌感染引起的卵黄性腹膜炎。     

小叶杨TMM基因启动子克隆及表达模式分析

气孔作为植物与外界进行气体交换的通道,对植物自身的生长发育至关重要。研究表明植物TMM蛋白与植物气孔的形成发育密切相关。本研究利用PCR技术克隆了小叶杨(Populus simonii Carr.)TMM基因5’端上游的调控序列pPsTMM,长度为2336 bp。生物信息学分析结果表明:小叶杨启动子pPsTMM除了含有TATA-box、CAAT-box等核心启动子元件之外,还含有多种光响应元件、植物激素响应元件、抗逆胁迫相关元件以及生理代谢和生长发育相关元件等,说明转录活性还可能受到光、植物激素、逆境胁迫等因素诱导。利用双酶切法构建植物表达载体pBI121-pPsTMM-GUS,叶盘法稳定遗传转化烟草,GUS化学组织染色显示GUS主要集中在叶芽起始发育部位表达,说明pPsTMM启动活性具有组织特异性。对非生物胁迫的转基因烟草进行GUS化学染色以及进行荧光定量PCR,结果显示pPsTMM对不同因素的非生物胁迫响应程度存在差异性,干旱和盐胁迫下启动活性很低,高温和低温对其调控作用也不明显,但对外在施加的植物激素(GA,NAA,ABA)和水杨酸(SA)响应程度很高,说明pPsTMM启动子对物理因素的响应值要远低于化学因素的诱导。本研究为进一步阐明TMM蛋白表达模式与小叶杨气孔发育特性及抗旱性之间的分子机制提供理论基础。     

NaCl胁迫对扁桃砧木叶片显微结构的影响

采用新疆常用的扁桃砧木石头扁桃和桃扁桃的1年生实生苗为材料,研究了不同浓度NaCl对其叶片显微结构的影响。结果表明：（1）两个砧木在75mmol/LNaCl处理10d和20d后叶片结构没有明显变化。（2）石头扁桃在150mmol/LNaCl处理10d后表现出叶肉极显著加厚;栅栏组织细胞和海绵组织细胞显著变长,同时栅栏组织细胞数目增多排列比较紧密。随着盐浓度的增加和胁迫时间的延长也发生了类似的变化,但是栅栏组织细胞和海面组织细胞形状变的很不规则。（3）桃扁桃在300mmol/LNaCl处理10d后才表现出明显反应,栅栏组织细胞和海绵组织细胞变长,栅栏细胞排列紧密且发达。300mmol/LNaCl处理20d后出现类似的变化,但不显著。不同盐浓度间叶肉厚度变化不显著。综合比较发现石头扁桃对NaCl比较敏感,同样时间的NaCl胁迫后,石头扁桃的叶片在150mmol/LNaCl胁迫下变化极显著,而桃扁桃在300mmol/LNaCl胁迫后变化明显;整个处理过程中桃扁桃的叶片结构变化幅度不及石头扁桃。