水稻外源DNA导入系的创建及主要性状分析

通过花粉管通道法将稗草总体DNA和玉米总体DNA导入水稻受体R122中,获得的D1代变异频率分别高达1．487％和3．81％。对稳定的3个玉米DNA导入系和4个稗草DNA导入系研究表明,与受体R122相比,导入系在株型、株高、生育期、分蘖力、着粒密度、粒形、稃尖颜色、稻瘟病抗性、稻米品质、恢复力和耐储藏性等生物学性状方面发生了广泛的变异。同时讨论了外源DNA导入水稻的变异频率和在水稻育种中的应用前景。     

转水稻OsSIK1基因玉米植株的获得及抗旱性分析

类受体激酶基因Os SIK1具有通过激活抗氧化系统,增强水稻对于干旱和盐胁迫抗性的作用。为了丰富可利用的作物抗旱基因,获得具有较高抗旱水平的玉米新种质,通过超声波辅助花粉介导法,将水稻类受体激酶基因Os SIK1导入玉米自交系郑58中,并对转化株进行卡那霉素筛选及T1、T2、T3的PCR及Southern Blotting杂交等分子检测,获得转化植株并在T3获得转基因纯合株系。对T3转基因玉米和非转基因玉米对照以16.1%的PEG模拟水分胁迫进行抗旱性分析。结果表明,与对照相比,在水分胁迫处理下,转基因玉米株系叶片相对含水量提高了7.4%~19.8%,叶绿素含量提高了11.3%~106.9%,SOD活性上升45.8%~93.4%,而转基因玉米叶片的相对电导率下降了35.4%~58.1%,MDA含量下降了25.7%~50.4%,说明转Os SIK1基因玉米植株抗旱性得到提高,其中,5个转化株系与对照在抗旱性方面有显著差异,且生长状况明显优于对照。综上所述,研究最终获得5个转Os SIK1基因玉米株系,并证明导入水稻Os SIK1基因可以提高玉米植株的抗旱性。     

采用花粉管通道法将蛋白激酶基因导入玉米自交系的研究

通过花粉管通道法将ZmPtil,ZmPtil-1,ZmCIPK2三种蛋白激酶基因植物表达载体分别导入玉米自交系吉444,经草丁膦筛选后得40株抗性植株,通过PCR检测其中28株为PCR阳性植株,平均转化率为1.33％,最后收获11株转基因植株.干旱条件下通过对转基因T1植株的单株籽粒产量、千粒重两个指标进行差异显著性和...     

新疆甘草DNA导入大豆性状变异的研究初报

1996年以大豆为受体，新疆甘草为供体，采用花粉管通道技术，将新疆甘 草DNA导入受体大豆中，当代种子全部收获（D0代） 。     

几种水土保持先峰牧草叶浸提液化感作用效应的研究

采用生物检测方法,以萝卜为受体植物,探讨了先峰牧草宽叶雀稗、百喜草、平托花生、圆叶决明4种牧草叶浸提液对萝卜种子发芽和幼苗生长的化感效应。牧草水提液对萝卜发芽率在高浓度百喜草、平托花生处理时受体罗卜萌发受到极显著抑制,平托花生与宽叶雀稗、圆叶决明处理所产生的抑制作用的差异达极显著水平。牧草叶浸提液对罗卜根长有显著的影响;7.5％、10.0％浓度时,对受体萝卜单株根干重影响表现为平托花生都表现出为促进作用,而其它3种牧草处理则都表现为抑制作用,且与百喜草处理间有显著差异;10.0％浓度下,4种牧草叶浸提液处理都促进幼苗生长,且圆叶决明、百喜草处理比对照有极显著差异;牧草叶浸提液对幼苗和植株干重影响都不显著。     

适用于分子育种的玉米种子无损基因型鉴定技术优化

随着分子标记技术的快速发展,分子标记辅助育种已被广泛应用于玉米育种,迫切需要高通量、高效的技术方法。基于单粒种子苗前的分子生物学分析来预测表型性状是提高分子标记辅助选择效率的方法,但还需要发展一种切实有效的方法来保证苗前的分子生物学分析和种子播种后的正常发芽及生长。本研究通过对玉米单粒种子进行切取部分胚乳取样,对样品进行CTAB和碱煮法DNA提取的比较,而后对切去部分胚乳的种子进行包衣处理,然后对正常种子(T1)、只切除部分胚乳的种子(T2)、只包衣的种子(T3)以及既切除部分胚乳又包衣的种子(T4)进行室内沙盘发芽试验和田间种植试验分析,结果表明通过包衣的方法可以提高切除部分胚乳种子的发芽率,室内和田间试验中T4处理和T1处理的发芽率、株高及简易活力指数基本相近,差异均不显著。T4处理在室内和田间试验中的发芽率比T2处理分别提高了3.35%和14.90%,差异分别达到显著和极显著水平;T4处理的株高和简易活力指数均比T2处理的高,差异均达到了极显著水平。切除部分胚乳又包衣种子的发芽率高于国家标准发芽率,十天后的株高、简易活力指数基本达到正常种子的水平。对切除部分胚乳的种子包衣的方法可以解决播种前的分子生物学方面的检测又能使种子正常的发芽及生长,大大提高了玉米分子育种效率。     

chyb基因的玉米遗传转化及后代性状分析

采用"成熟胚原位转化法"用带有质粒p Cambia2300-Lcchyb-bar的根癌农杆菌C58,侵染玉米芽尖生长点,将chyb基因转入玉米优良品系7922中。T0代植株不进行筛选,T1代植株用浓度为250 mg/L草铵膦筛选,存活植株进行PCR和RT-PCR检测,T1代获得24株阳性植株。T2代植株用500 mg/L草铵膦筛选,PCR阳性植株HPLC分析结果表明转基因植株总类胡萝卜素含量较野生型显著提高,其中玉米黄质含量提高了55.81%。转基因玉米叶片净光合速率明显高于野生型。本研究初步证明目的基因chyb已经成功整合到玉米基因组中,为进一步验证chyb基因在玉米中的功能,以及通过基因工程获得高品质的玉米种质资源奠定基础。     

分子标记结合田间观察快速鉴定外源DNA导入玉米的变异后代

本研究通过花粉管通道导入技术将甜高粱总DNA导入优良玉米自交系4112和8902中,并应用RAPD标记技术从导入后代中筛选出变异后代。从306个RAPD引物中筛选出79个引物对供受体及导入后代进行鉴定,其中10个随机引物在供、受体和导入后代间有多态性。对D1和D2代进行田间茎秆糖分调查,并对D2代室内考种,发现糖分含量和穗长、穗重、轴粗、穗粒重等穗部性状都发生了明显变异。结合分子鉴定结果,最终获得了一批变异材料。     

盐穗木耐盐基因通过花粉管通道法对棉花遗传转化的研究

以新疆主栽陆地棉品种为实验材料,通过花粉管通道法导入盐穗木耐盐相关基因HcNHX1和HcVP1.经过连续两代筛选繁育,结果显示:外源基因已经整合进棉花受体材料基因组中,并且在RNA水平有表达:外源基因对T1代棉花转基因植株生长影响很大,表现为生长势弱,植株矮小,株铃少,但T2代的棉花转基因植株在株高、果枝数和株铃等方面...     

玉米核DNA导入小麦获得矮秆优质和早熟二个新品系

用浸胚法将玉米核DNA导入小麦,从转化后的D2代和D3代10多种变异中筛选出矮秆(株高55cm)优质(籽粒蛋白质含量比对照提高2%、赖氨酸含量提高0.05%)和早熟〔比对照早熟5-8天)两个新品系,并能稳定遗传。经对供体、受体和转化后代进行RAPD和POD同工酶分析,证明供体DNA片段已进人受体并导致DNA重组,使后代基因组发生了变异。