蓝莓丛生芽的诱导及植株再生

利用蓝莓的茎段作为外植体,在添加各种激素的培养基上培养,研究蓝莓茎段离体繁殖影响因素,筛选出蓝莓离体最佳增殖和生根培养基及培养条件.结果表明:在MS 2mg/L ZT 0.2mg/L NAA的增殖培养基上,经过两次继代培养后蓝莓的增殖系数可达到30～50倍左右,在1/2 WPM 0.5 mg/L IBA的生根培养基上单株试管苗平均可产生7.5条根系,生根率可达到95%以上,通过炼苗和移栽试管苗的成活率可达95%左右,从而建立了蓝莓工厂化育苗技术体系,为蓝莓产业的发展提供了充足的优良种苗.     

蓝莓瓶内生根培养基的筛选

组培技术对于近几年新兴的蓝莓产业来说具有繁殖系数高、不受季节限制、短期内可获得大量繁殖体等优点,该方法是目前解决蓝莓产业化发展中种苗短缺的关键技术,但是蓝莓生根难的问题制约了组培技术的广泛应用。为进一步探究生长素种类和浓度对蓝莓生根的影响,本研究以奥尼尔、乔治、都克及美登这4个蓝莓品种当年新生嫩枝作为外植体建立了无菌株系,在此基础上经过扩繁5~7代并进行壮苗培养。以1/2WPM为基本培养基,通过添加不同种类和浓度的生长素(IBA和NAA),选用生根率、生根数及根长等指标评价生长素对不同基因型蓝莓生根的影响。研究结果表明,对不同基因型蓝莓来说,其生根难易程度不同。对于同一品种的蓝莓,其生根率、生根数及根长随着IBA浓度的不同而有所变化。综合分析认为蓝莓4个品种的最佳生根培养基配方为1/2 WPM+2.0 mg/L IBA+0.2%活性炭。本研究为优化蓝莓组培技术,筛选出适宜北京地区生长的蓝莓,以及为北京地区蓝莓的产业化发展提供了技术支持。     

白纹草的组织培养和快速繁殖技术研究

为提高白纹草(Chorophytum bichetii)种苗质量和繁殖效率,以其顶芽或茎段为外植体材料,比较不同实验时间外植体的灭菌效果,筛选诱导丛生芽和继代繁殖的最佳激素配比,建立白纹草离体快繁的技术体系。结果表明,3月取材,外植体的灭菌效果最好,顶芽和嫩茎段的灭菌率分别为74.7%和82.7%;以MS为基本培养基,附加6-BA 2 mg/L+ IBA 0.2 mg/L为最佳诱导丛生芽的培养基;以 6-BA 2 mg/L+ KT 0.2 mg/L为最佳继代增殖培养基,增殖系数达5.1;使用较高浓度6-BA时会发生较严重的玻璃化现象。以1/2MS+ NAA 0.1 mg/L为最佳生根培养基,生根率100%;根长0.5 cm左右时最适宜移栽。用泥炭和珍珠岩按2:1混合的基质移栽,移栽成活率达99%以上,并且种苗健壮。在保证繁殖系数前提下尽量降低细胞分裂素浓度,并在继代中不断进行筛选剔除变异株。该技术体系能够满足规模化生产的要求。     

矮丛蓝莓茎段再生植株研究

以矮丛蓝莓‘Blomidon’品种的试管苗茎段为外植体,研究了不同的培养基、激素、pH值、暗培养时间、接种茎段部位对植株再生的影响以及不同封口材料对再生植株茎段繁殖的影响。结果表明：适宜的培养基为WPM;ZT 1.0 mg?L- 诱导茎段后植株直接再生效果最佳,ZT 5.0 mg?L-1+IBA 1.0 mg?L-1诱导茎段后植株经由愈伤组织再生效果最佳,再生频率分别为100%和91.67%;适宜的茎段再生pH值为5.0±0.2;适宜的暗培养时间为0 d或10 d;接种的最佳部位为茎段上部;适宜的封口材料为玻璃纸。     

桃叶卫矛茎段愈伤组织诱导及不定芽再生体系的建立

为完善及优化桃叶卫矛组培繁殖再生体系,解决以腋芽萌发为再生途径进行组培增殖时增殖系数小的问题,以桃叶卫矛幼嫩茎段为材料,分别用20%的次氯酸钠和0.10%的升汞进行消毒处理,处理时间分别为8、10、12 min获取其消毒最佳方案;以桃叶卫矛茎段为材料,通过调节6-BA和NAA浓度,诱导桃叶卫矛茎段产生愈伤组织;以桃叶卫矛愈伤组织为材料,采用6-BA和NAA正交试验诱导产生不定芽;以桃叶卫矛不定芽为材料,调节6-BA和NAA浓度,提高继代增殖系数;以桃叶卫矛继代增殖苗为材料,调节IBA和NAA浓度,获取桃叶卫矛生根苗。研究结果表明：（1）桃叶卫矛幼嫩茎段消毒最佳方案为20%的次氯酸钠处理12 min,污染率2%;（2）茎段愈伤组织诱导最佳培养基为1.0 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,诱导率80.00%;（3）不定芽诱导最佳培养基为0.5 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,诱导率91.11%;（4）继代增殖最佳培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,增殖系数6;（5）生根培养最佳培养基为1/2MS+ IBA 0.3 mg/L,生根条数平均为5条。本研究利用桃叶卫矛无芽茎段诱导出愈伤组织,并将继代增殖系数提高至6,且完成了桃叶卫矛组培再生体系的优化。     

月季茎段组织培养的研究

以MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素(BA)和生长素(NAA)，对月季茎段组培快繁进行了研究。结果表明：初代培养阶段，以较低浓度的细胞分裂素和生长素配比对侧芽萌发具有较好的促进作用，适宜的培养基为MS BA1.2mg/L NAA0．3mg/L。继代增殖阶段，以培养基MS BA1.5mg/L NAA0.05mg/L效果较好。生根阶段，最适宜的培养基为1／2MS IBA0．5mg/L。     

滇红食用玫瑰茎段增殖培养基的试验筛选研究

植物组织培养育苗是解决食用玫瑰种苗市场紧缺的一种重要技术途径,但其中最为关键的问题是如何高效高质量地实现茎段增殖。以滇红食用玫瑰为对象,通过实施L₉(3⁴)正交试验,研究不同因素对玫瑰茎段增殖的影响规律,并分析筛选适宜茎段增殖的最佳培养基。结果表明：不同的试验处理,滇红食用玫瑰的茎段分化增殖差异较大,表现出了4 种主要的植物形态类型;基础培养基对茎段的增殖系数影响显著(P＜0.05),而6-BA、NAA 和GA₃ 3 个因素对茎段增殖系数的影响没有达到显著水平(P＞0.05),4 种因素对增殖系数影响的主次关系为：基础培养基＞6-BA＞NAA＞GA₃;最佳茎段增殖培养基为WPM+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+GA₃ 0.5 mg/L+白砂糖30 g/L,其具备的优点为茎段成株率高、植株高、笔直整齐、茎杆粗壮、节间较长、枝条多、节段数多、增殖系数大。研究结果可应用于滇红食用玫瑰的工厂化组织培养育苗。     

新优花卉红冠桉腋芽快繁体系优化

为优化新兴的、现存量稀少的木本花卉红冠桉(Corymbia ptychocarpa)腋芽快繁体系。本研究以15年生母树无菌茎段为外植体,利用茎段萌发腋芽的方式,筛选多腋芽启动方法;通过正交试验设计方法对丛生芽形成、芽增殖和生根诱导等培养基进行优化,研究不同栽培基质对幼苗移栽驯化的影响。结果表明,经预处理的茎段以MS+0.5 mg/L 6-BA为腋芽启动培养基较适宜,萌发率达97.1%,平均发芽系数3.6;不同浓度6-BA与ZT组合试验表明,在MS+0.5 mg/L ZT+6-BA 3.0 mg/L培养基中,丛生芽最大体积达2.51 cm3;不同激素配比试验表明,MS+0.8 mg/L 6-BA+0.03 mg/L ZT+0.04 mg/L IBA培养基对促进芽增殖、生长最佳,增殖系数6.2±1.34,嫩茎平均高度2.60 cm;生根试验中,提高MS培养基中铁盐浓度,生根率可达96.30%,平均根条数6条/株;组培苗移栽至当地土(红壤)基质中,平均成活率达85.4%。本研究建立了一套完整的红冠桉快繁体系,为其工厂化育苗提供系统的组培技术及遗传改良提供科学依据。     

绒毛白蜡组培快繁研究

为探索建立绒毛白蜡组织培养快速繁育体系，本研究以绒毛白蜡带芽茎段为材料，探讨了基本培养基、植物生长调节剂浓度及配比对绒毛白蜡组培快繁效果的影响。结果表明，MS、DKW均可作为绒毛白蜡繁殖的基本培养基，最佳增殖培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA，平均增殖系数达7.1，最佳壮苗培养基为MS+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L TDZ+0.01 mg/L NAA，平均苗高达7.15 cm。     

石斛茎段在简易培养基上快速繁殖

石斛兰用分株、扦插的常规繁殖方法,繁殖系数低,不能满足大规模生产用苗。而采用组织培养则可以提高其繁殖系数,缩短培养时间,短期内获得大量种苗。国内外已有关于石斛兰组培育苗报道,但再生过程总的来说比较复杂,在培养基的应用上,都是选用营养成分齐全的培养基,且要经过固体和液体培养,先通过叶尖或茎尖诱导出原球体,再从原球体上诱导成苗。整个过程时间长,且因为外植体特别小,接种不易成功。本试验以茎段为外植体,以简易培养基培养,在适宜的条件下,诱导出腋芽,再进行增繁、生根培养,不仅缩短了时间,也能保持品种的优良性状。     

山药种苗3种快繁技术比较研究

为解决生产中山药品种退化、种苗繁殖慢的问题,以‘晋山药1号’为试验材料,对山药组织培养快繁、山药段快繁、山药扦插3种快繁技术进行比较研究。对培养程序、种苗成活率、繁殖特点、繁殖系数等各项指标的考察分析。结果得出：采用组织培养时,以茎尖作为外植体优于有节茎段和无节茎段,不仅污染率低、繁殖系数高,同时还可对种苗进行脱毒,但生产程序复杂,对生产场地要求高;而采用扦插繁殖生产程序简单、周期短,但只适合种植周期为1~2年的品种;山药段快繁出苗晚,且需要消耗山药成品部分,在3种快繁方法中处于最劣势。由此得出结论,在生产中进行山药种苗快繁时,针对多年种植品种,应采用茎尖作为外植体的组织培养快繁,而种植周期短的品种,可采用扦插繁殖。     

金钱树小叶扦插

金钱树繁殖方法很多,可分株、组培、扦插等。分株繁殖系数低;组培虽繁殖系数高,却不易为普通花农具备和掌握;扦插系数虽比组培低些,但易掌握,且成活率几乎可达100％,是值得提倡的好方法。     

核桃楸化感作用的研究

以蓝莓组培苗单芽茎段为受体,对核桃楸树皮、枝条、叶及外果皮的化感作用进行了生物测定试验。结果表明,核桃楸树皮、枝条、叶及外果皮不同浓度浸提液对蓝莓苗茎段芽的萌发、新稍增殖系数和新稍长度有不同的化感作用,与对照相比,其作用效应均表现为高浓度浸提液抑制蓝莓苗茎段芽萌发和新稍增殖,降低新稍长度,随着浸提液浓度的降低,其抑制作用减弱、消失或转变为促进作用。其中核桃楸叶和外果皮的化感作用强于枝条和树皮的化感作用。     

细梗蔷薇种子发芽及组织培养技术研究

为获得细梗蔷薇(Rosa graciliflora)完整的植株并建立其组培快繁体系,试验研究了不同低温层积时间对细梗蔷薇种子发芽率的影响;同时,选择其嫩茎段为试验材料,研究了不同消毒试剂、消毒时间、植物生长调节剂配比对外植体腋芽诱导、丛生芽增殖及生根培养的影响,并筛选出适宜各阶段培养的最佳培养基配方。结果表明,低温沙藏9个月的种子发芽率最高,为35%;适宜茎段灭菌处理的组合为10%次氯酸钠溶液15 min+0.05%升汞10 min;丛生芽增殖的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L;组培苗生根的最佳培养基为WPM+IBA 0.3 mg/L,生根率达到90%。笔者研究了细梗蔷薇发芽所需的最佳低温层积时间,建立了细梗蔷薇组培快繁技术体系,为细梗蔷薇的大量繁殖、推广和应用提供参考。     

挪威槭‘缤纷秋色’组培快繁再生体系的建立

以带腋芽茎段为试验材料，采用不同浓度和种类的试剂及培养基进行组培的方法，研究杀菌剂、培养基、生长激素对外植体灭菌、芽萌发、组培苗生根和移栽的影响，为构建全面、高效的‘缤纷秋色’快繁体系提供参考。结果表明，外植体最佳灭菌方法为10%NaClO溶液消毒12 min，污染率减少至19.6%，萌芽数为8.76个。最适启动培养基为WPM+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L TDZ+2.0 mg/L PVP+30 g/L蔗糖；壮苗培养基为WPM+0.8 mg/L ZT+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L PVP+30 g/L蔗糖；生根培养基为1/2WPM+0.8 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA+0.5 g/L活性炭+15 g/L蔗糖，用草炭土和珍珠岩混合比例2:1移栽效果最好，移栽成活率为89%。研究建立的‘缤纷秋色’快速繁殖体系可为优良种质扩大培养和推广应用提供技术参考。     

毛水苏组织培养技术研究

为了保护濒危植物毛水苏,繁殖幼苗用于湿地植被修复,以毛水苏茎段为外植体,通过基础培养基及激素的筛选,研究了其组织培养技术体系。结果表明:基础培养基为WPM,最佳的增殖培养基为WPM+6-BA 1.0 mg·L~(-1);最佳生根培养基为1/2 WPM+NAA 0.30 mg·L~(-1);生根苗和不生根苗均可用于移栽,生根苗移栽成活率100%,不生根苗移栽成活率71.36%,不生根苗用于移栽可以节省生产成本,提高经济效益。     

虎榛子组织培养及其菌根化技术研究

为了获得大量的虎榛子组培幼苗,并对其进行瓶内菌根合成试验研究,以虎榛子带腋芽的茎段为外植体,进行外植体的灭菌,基础培养基的筛选,增殖培养和生根培养并对虎榛子组培幼苗进行瓶内菌根化研究。结果表明：经75%酒精处理30 s,5%NaClO处理7 min,虎榛子成活发芽率达到66%;WPM为最佳基础培养基;诱导虎榛子芽增殖的最佳培养基为WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.03 mg/L,增殖率达到436.7%;最佳生根培养基为WPM+NAA 0.2 mg/L,生根率达到100.0%。对生根10天的虎榛子幼苗进行瓶内菌根合成试验,结果显示：接种土生空团菌[Cenococcum geophilum Fr. (Cg)]CgO5后虎榛子组培苗各项生长指标均显著提高,试验结果将为虎榛子幼苗快繁及其组培苗菌根化技术提供依据。     

太子参组织培养与快速繁殖研究

以贵州省施秉县牛大场镇药材基地种植的太子参茎尖、茎段、种根、叶片为材料进行组织培养和快速繁殖研究,结果表明:茎尖和茎段较适合作为组培快繁的材料,初代培养的最适宜培养基为MS+ZT2.0 mg/L+NAA0.01～0.08mg/L+3.0%糖+1.2%琼脂;芽诱导率可达90%以上;增殖培养最适培养基为MS+ZT 3.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+3.0%糖+1.2%琼脂,最高增殖倍数为10.5;壮苗生根培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+3.0%糖+1.2%琼脂,壮苗培养的同时产生根系和块根,省略了根诱导环节,极大的缩短的培养时间.当石英砂与泥土体积配比为1∶2时移栽存活率最高,达到90%.     

顶坛花椒组织培养再生体系的建立

为建立顶坛花椒组培再生体系,以贵州地方品种顶坛花椒的未成熟果实为外植体,研究不同浓度细胞分裂素(6-BA)和生长素(2,4-D)组合对珠心组织诱导的影响,并对其再生培养过程进行了研究。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.4 mg/L为珠心组织初期培养和胚状体诱导的最佳培养基,WPM+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最佳分化培养基,1/2WPM+IBA 0.2 mg/L为生根培养基。以流式细胞仪对再生植株进行染色体倍性分析,结果表明珠心组织再生植株与母株染色体倍性一致,均为二倍体。     

黑提葡萄组培快繁过程中初代培养基的筛选

本实验以黑提葡萄新生枝条的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的IBA、6-BA对组培芽生根及增殖的影响,探索适宜黑提葡萄苗的培养条件,对激素不同浓度的培养效果进行对比,以筛选出最佳的培养基配方。实验结果表明,在MS培养基中加入0.5 mg/L IBA、0.2 mg/L 6-BA时,初代培养的生根效果最佳;在MS培养基中加入0.2 mg/L IBA、0.5 mg/L 6-BA时,初代培养的增殖效果最佳。