利用CAPS标记推测花生品种(系)FAD2位点基因型的研究

以5个高油酸含量花生品种(系)和2个普通油酸含量花生品种为试材,利用CAPS标记对这些品种(系)的FAD2位点基因型进行分析.结果表明:5个高油酸含量花生品种(系)的油酸含量均在80％以上,普通油酸含量品种花育22号和花育28号油酸含量分别为51.62％和41.38％.基于CAPS标记在7个品种(系)中的扩增产物及酶切带型分析推测,AhFAD2A位点花育28号为野生型,其他6个品种(系)符合448 G＞A突变类型;AhFAD2B位点花育28号和花育22号为野生型,开农H03-3、花育32号、P76和F18符合441-442insA突变类型,而06B16在该位点不符合441-442insA突变类型.     

大白菜抽薹相关基因BrFLC1的KASP标记开发

为了提高大白菜耐抽薹品种的分子育种效率,本研究针对大白菜抽薹相关基因BrFLC1第6个内含子的第一个碱基(Pi6+1)G-A的SNP变异开发进行高通量检测的竞争性等位基因特异性PCR(KASP)标记。结果表明,开发的KASP标记BrFLC1-KASP1可有效将晚抽薹类型材料Y177-12(G)和早抽薹类型材料Y195-93(A)分为2组。利用BrFLC1-KASP1标记可以对57份大白菜材料的基因型进行有效鉴别,且鉴定结果与酶切扩增多态性标记(CAPS)G-MvaI以及直接测序法的鉴定结果完全一致。综上所述, BrFLC1-KASP1标记在大白菜材料中具有通用性,且具有准确率高、成本低、效率高的特点。本研究结果对大白菜耐抽薹性的分子标记辅助选择具有重要的育种实践价值。     

分子标记和近红外技术辅助选育高油酸花生新品种花育662

为选育高油酸、高产花生新品种,以高油酸亲本CTWE为父本、高蔗糖亲本06-I8B4为母本搭配杂交组合,结合近红外分析技术与分子标记辅助选择技术育成FAD2B/ FAD2A双突变高油酸小花生新品种花育662.该品种油酸含量82.11％,油亚比25.98,出米率高达79.7％.在2012年山东省花生研究所莱西试验农场产量试验中,子仁产量5 132.4 kg·hm-2,略低于对照品种花育33号5 224.5kg·hm-2的产量水平,2014年通过安徽省品种鉴定.本研究为加速高油酸花生育种进程提供了良好的技术方法.     

AS-PCR技术检测鸡EX-FABP基因型方法的建立

摘要： 鸡(Gallus gallus )胞外脂肪酸结合蛋白(extracelluar fatty acid binding protein, EX-FABP)基因型与鸡腹脂量的积累密切相关。尝试了用等位基因特异性PCR(allele-Specific PCR, AS-PCR) 技术检测EX-FABP基因型的方法，确定了检测的参数和方案, 对AS-PCR检验单碱基突变的方法和策略进行了讨论,并在此基础上对该技术进行了改进，建立了等位基因特异性片段长度差异PCR（allele-specific and length-different PCR, ASLD PCR）技术。     

洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系的建立

唐菖蒲伯克霍尔德菌洋葱致病型(Burkholderia gladioli pv.alliicola),是重要的植物病原细菌检疫性有害生物.本研究的目的是建立特异、灵敏、快速的TaqMan探针荧光定量PCR方法用于检测洋葱腐烂病菌(B.gladioli pv.alliicola).利用洋葱腐烂病菌保守基因序列设计和筛选特异性引物和TaqMan探针,优化PCR反应体系和反应条件.荧光定量PCR菌液检测灵敏度达到1.02×102 CFU/mL,DNA检测灵敏度达到1.73×10-4 ng/μL,反应时间仅需1h左右,对14种伯克氏菌属Burkholderia)参比菌种的特异性检测结果显示,洋葱腐烂病菌具有明显的扩增曲线生长,表明建立的荧光定量PCR体系具有非常高的特异性.同时对洋葱(Allium cepa)种子进行了模拟带菌检测,结果表明,建立的洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系能够检出模拟样品中的洋葱腐烂病菌,验证了检测体系的实用性.本研究建立的洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系能够有效用于洋葱腐烂病菌的鉴定,为进出口口岸和基层检验检疫部门提供了一种简便、快速、准确的洋葱腐烂病菌分子检测手段.     

猪附红细胞体荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要: 根据GenBank已登录的猪附红细胞体（M.suis）推测的功能性蛋白基因ORF2序列设计引物和TaqMan荧光探针,以定量的10倍系列稀释含M.suis部分ORF2基因的T载体重组质粒（pGEX-T/M.suis）为标准品,进行荧光定量PCR扩增并制作了标准曲线,经对荧光定量PCR的反应条件进行优化,建立了M.suis的TaqMan荧光定量PCR检测方法（Taqman FQ-PCR）;对所建立的FQ-PCR检测方法进行了敏感性、特异性和重复性实验,并对疑似M.suis感染临床抗凝全血样品进行了检测应用。结果显示：标准曲线的曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,相关系数为0.998;所建立的FQ-PCR方法检测灵敏度可达10个拷贝/μL,比对照常规PCR灵敏度高100倍;FQ-PCR方法特异性高,对pGEX-T/M.suis重组质粒扩增呈现阳性反应曲线,而对8个对照细菌、病毒和寄生虫DNA扩增曲线均呈现阴性反应;对不同浓度的pGEX-T/M.suis重组质粒分别重复扩增2次,重复结果良好;用该方法对24份临床疑似M.suis感染样品进行了应用检测,结果有20份样品为阳性,阳性检出率高于常规PCR方法。     

分子标记和近红外技术辅助选育高油酸花生新品种花育66

为选育高油酸、高产花生新品种,以高油酸亲本CTWE为父本、高蔗糖亲本06-I8B4为母本搭配杂交组合,结合近红外分析技术与分子标记辅助选择技术育成FAD2B/FAD2A双突变高油酸小花生新品种花育662。该品种油酸含量82.11%,油亚比25.98,出米率高达79.7%。在2012年山东省花生研究所莱西试验农场产量试验中,子仁产量5 132.4 kg·hm-2,略低于对照品种花育33号5 224.5kg·hm-2的产量水平,2014年通过安徽省品种鉴定。本研究为加速高油酸花生育种进程提供了良好的技术方法。     

DNA条形码与实时荧光定量PCR技术在铁皮石斛鉴定中的应用

为建立铁皮石斛准确、高效的鉴定体系,本研究以101份石斛属和蝴蝶兰属植物样品为试验材料,通过对比ITS、psbA-trnH、matK及rbcL基因在石斛属植物中的鉴定能力,筛选出ITS作为本研究最理想的DNA条形码。以ITS序列作为靶基因,设计铁皮石斛特异引物和特异探针,以及石斛属通用引物和探针,利用实时荧光定量PCR(TaqMan)技术,建立铁皮石斛多重实时荧光PCR检测新体系,通过特异性、灵敏度和实际样本验证,发现参试样品中的25份铁皮石斛均可被有效鉴定,与其他鉴定方法相比,该方法具有特异性强、灵敏度高(高出普通PCR 100倍)、重复性好且高效经济的优势。本研究结果对铁皮石斛的资源保护与利用起到了积极作用。     

高油酸花生萌发期耐冷性综合评价及种质筛选

为筛选高油酸花生萌发期耐冷鉴定指标,构建高油酸花生萌发期耐冷性综合评价体系,挖掘高油酸花生耐冷种质资源。本研究利用隶属函数法、主成分因子分析法、相关性分析及聚类分析法对56份高油酸花生种质资源进行耐冷性综合评价及耐冷种质筛选。结果表明,11个耐冷鉴定指标按贡献率大小依次为露白萌发因子、发芽时间因子及子叶鲜重因子,发芽指数及萌发耐冷指数可以作为高油酸花生萌发期耐冷性的最优鉴定指标,高油酸花生种质资源萌发期耐冷性强弱受多指标影响。高油酸花生萌发期耐冷性状综合评价D值范围为0.080~0.754,均值为0.497,不同高油酸花生品种萌发期耐冷性存在较大差异。56份高油酸花生种质资源分为5个耐冷级别,筛选到萌发期耐冷较强材料1份、中等耐冷材料20份、耐冷较差材料29份、耐冷差材料5份及冷敏感型材料1份。本试验筛选到的耐冷种质可以作为高油酸花生耐冷育种和耐冷机理的研究材料。本研究为探明高油酸花生种质资源耐冷性提供了理论参考。     

EMS诱变花生珍珠红1号创制优良新种质

为创制花生优良新种质,以花生品种珍珠红1号的干种子为材料,采用浸泡法开展甲基磺酸乙酯(EMS)诱变研究。结果表明,以半致死剂量为选择标准,适宜诱变条件为0.8% EMS处理10 h;筛选获得9个优良M₅突变系,其中4个表现出产量高、品质优、综合性状优良等特点。上述4个M₅突变系干荚果产量较对照(珍珠红1号)增加10.93% ~ 26.78%,出仁率均高于对照;在品质方面,诱珍珠红1号2Ⅱ/19油酸含量为56.68%、油酸/亚油酸比值(O/L)为1.92,分别较对照提高8.44个百分点和0.57;诱珍珠红1号2Ⅲ/8亚油酸含量为39.05%,较对照提高3.28个百分点;诱珍珠红1号2Ⅲ/10粗脂肪含量为54.52%,较对照提高1.50个百分点;诱珍珠红1号3Ⅰ/8油酸含量为53.70%、O/L为1.71,分别较对照提高5.46个百分点和0.36。ISSR分子标记结果表明,9个优良M₄突变系与珍珠红1号在分子水平上均存在明显差异,突变系之间在分子水平上也存在明显差异。本研究结果为花生遗传改良和功能基因研究提供了优良的新种质,为花生EMS诱变育种研究提供了参考。     

外源水杨酸对UV-B增强下花生叶片光合特性的影响

通过大田模拟试验,设置自然光（CK）和UV-B辐射增强（E,增加量相当于当地4-5月UV-B辐射量的20%）两个大区,在每个大区内又分2个小区,从花针期（7月25日）开始,分别用蒸馏水（S0处理）和水杨酸水溶液（SA处理）连续3d在固定时段喷施花生植株的所有叶片后,用Li-6400型便携式光合作用测定仪观测和计算指定叶片的净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）和水分利用效率（WUE）的日变化过程,并进行对比分析。结果表明：不施水杨酸条件下（S0）,UV-B增强处理的花生叶片Pn、Tr、Gs和WUE的日均值比自然光（CK）处理分别下降35.7%、25.0%、25.0%、10.0%;而喷施水杨酸条件下（SA）则分别下降30.4%、17.9%、33.3%、19.4%,说明UV-B增强可降低花生叶片的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度和水分利用效率,而喷施水杨酸可缓解UV-B增强对花生净光合速率的抑制作用,但并不能缓解UV-B增强对花生蒸腾作用、气孔导度及水分利用效率的抑制。     

铁还原和硫酸盐还原对红壤中二苯砷酸释放与硫化的影响

二苯砷酸（diphenylarsinic acid，DPAA）是含砷化学武器在环境中的主要降解产物之一，研究铁还原和硫酸盐还原对土壤中DPAA释放与硫化的影响对于深入认识DPAA的环境地球化学行为至关重要。考察了在淹水和添加不同浓度乳酸钠（C）和硫酸钠（S）培养时花生地和林地红壤中DPAA的释放与硫化情况，并分析铁还原和硫酸盐还原的影响。结果显示：（1）对花生地而言，与不添加硫酸钠和乳酸钠（S-C-）以及仅添加硫酸钠（426 μg?g-1，以S计，S+C-）的处理相比，同时添加硫酸钠和乳酸钠（1 300 μg?g-1（以C计，下同），S+C+；2 170 μg?g-1，S+C++）的处理中DPAA释放明显增强，这与乳酸钠促进了铁还原（>45%）从而有利于DPAA的释放有关；（2）在花生地的S+C+处理中硫酸盐还原最为显著（13周时溶解态硫化物浓度为11.28 mg?L-1），DPAA的去除率（59.6%）最高且主要发生硫化，而在S+C++处理中铁还原程度的增加和硫酸盐还原程度的降低不利于DPAA的硫化；（3）与花生地不同，无论是否添加乳酸钠和硫酸盐，林地中未见DPAA的释放与硫化现象，这与其铁还原程度较低（<25%）和硫酸盐未发生还原（未检测到溶解态硫化物）有关；（4）与林地相比，花生地中梭菌属、芽孢杆菌属和脱硫芽孢杆菌属的丰度明显增加，这很可能分别促进了铁还原和硫酸盐还原，最终对DPAA释放和硫化产生了更显著的影响。总体而言，与铁还原促进DPAA的释放和进一步的硫化相比，硫酸盐的还原程度以及溶液相中硫化物的浓度很可能是控制淹水红壤中DPAA硫化的一个更重要的因素。研究结果将为深入认识DPAA的环境行为和发展DPAA污染红壤的生物刺激修复技术提供理论基础。     

花生仁品质的光特性分选技术

采用荧光显微镜、荧光分光光度计和多功能光特性检测系统，研究了花生仁品质的荧光特性和光反射特性，得到用以区分低品质花生仁的反射光谱特征波长。为了提高花生仁的总体品质，研制了利用分叉光纤作为检测和导光元件，以及由微机控制的光特性分选试验机，并对花生仁进行了分选试验     

Nutrient indexing of peanut in some selected villages of the Punjab

Abstract

Samples of peanut plants from 5 selected villages of Ludhiana and Kapurthala (Punjab, India) were analysed for P, K, Ca, Mg, S, Zn, Cu, Mn and B. The dominant nutrient deficiencies were of B > K > S > Zn> P >Mn> Cu. Potassium and magnesium seem to interact antagonistically for their absorption. The inherent low status of nutrients in these soils appears to be the reason for their wide‐spread deficiency and consequent low yield of peanut crop.     

辽宁花生测土配方施肥技术参数研究

采用二次回归"3414"试验设计,对辽宁花生种植区测土配方施肥中的一些重要参数进行了研究,得出了以下结论:百公斤经济产量需肥量,N为4.69kg,P2O5为1.13kg,K2O为1.81kg;土壤养分校正系数,N为0.82,P2O5为0.31,K2O为0.30;肥料利用率,N为35.76%,P2O5为10.68%,K2O为25.78%。施肥参数在地区之间差异较大。     

花生壳热解试验及其剩余物特性红外光谱分析

为有效控制生物质热解反应终温，本文在热分仪上，分别以40℃／min和60℃／min二种不同升温速率进行了花生壳热解试验，并以花生壳及其热解反应过程中缓慢热解反应阶段（≥400℃）剩余物为原料，对其进行傅里叶变换红外（FTIR）光谱分析。结果表明：不同升温速率对不同温度时的热解试验剩余物成分影响不大，光谱曲线趋于一致，在450℃以下，剩余物的成分随着温度而变化，从450℃到600℃，FTIR光谱图上的透光率已经没有明显变化。因此，生物质热解反应终温应控制在450℃左右。     

贵州省铜仁地区花生平衡施肥试验研究

贵州省铜仁地区的花生平衡施肥试验证明 ,花生的合理施肥有极显著的增产增收效益。其中施氮 ( N) 2 8kg/ hm2 可增产花生 4 0 .7%～ 4 2 .3% ,施磷 ( P2 O5) 12 0 kg/ hm2 可增产花生34 .7%～ 61.5% ,施钾 ( K2 O) 75kg/ hm2可增产花生 2 3.0 %～ 2 3.2 %。施微肥 (硼、锌、钼、铜、铁 )可增产花生 7.0 7%～ 15.2 %。平均每投入一元氮磷钾微肥可分别增收 2 8.6～ 2 9.6,15.6～2 2 .3,9.1～ 9.5,3.8～ 7.4元。建议花生的 N∶ P2 O5∶K2 O配比为 10 0∶ 4 30∶ 2 60并添加微肥适量。平衡施肥在贵州的增产潜力很大 ,在贵州铜仁地区及其他相应地区有很大推广价值     

Symbiotic and genomic diversity of ‘cowpea’ bradyrhizobia from soils in Botswana and South Africa

Strain CB756 is usually an effective competitor against indigenous bradyrhizobia for nodulation of peanut in South Africa. Recently, inoculation of peanut and cowpea with CB756 in loamy sand soils of Botswana or a sandy clay loam in South Africa proved unsuccessful, achieving <2% nodule occupancy. A survey of ‘cowpea’ bradyrhizobia from five soils in Botswana and one in South Africa showed that many were effective in ability to fix N₂ on peanut and cowpea. However, 15 isolates from Good Hope, Botswana were all effective on cowpea but ineffective on peanut, three failing to nodulate the latter. Selected cowpea isolates were significantly more competitive than CB756 for nodulation of cowpea in Leonard jars, but four were unsuccessful when inoculated at Roodeplaat, South Africa. When strain CB756 and two isolates were inoculated in pots containing Roodeplaat soil, at a 4:1 inoculant to soil bradyrhizobia ratio, their average nodule occupancy was 8% on cowpea compared to 40% on peanut. Significant differences in strain nodule occupancy were not detected on either cowpea or peanut. In contrast, nodule occupancy in loamy sand from Good Hope, Botswana, inoculated at a 40:1 inoculant to soil bradyrhizobia ratio, was 22.4% on cowpea and only 6.8% on peanut. In Good Hope soil, strain CB756 was the weakest competitor on cowpea but strain differences were insignificant on peanut. Whereas the Good Hope soil population was effective on cowpea, it was ineffective on peanut. DNA fingerprinting showed that isolates from Gaborone, Francistown and Roodeplaat contained several different genotypes, whereas those from Good Hope, Rasesa and Maun were more homogeneous. The dominance at Good Hope of genotypes effective on cowpea but ineffective on peanut emphasises the value of assessing the symbiotic capabilities and structures of indigenous populations.     

不同铁制剂与施用方法对矫正花生缺铁黄化症的效果

研究了在盆栽和田间小区试验条件下,叶面和土壤施用铁肥以及土施酸化肥料对纠正花生缺铁黄化症的作用效果。在盆栽条件下,叶面喷施黄腐酸铁(FeFA)、土施硫酸亚铁及酸化肥料都可以提高花生新叶中活性铁以及叶绿素含量,促进花生植株的生长;在田间小区栽培条件下,叶面喷施FeFA可以提高花生的叶绿素含量,尿素与FeFA结合使用的作用效果大于单喷FeFA。土施硫酸亚铁在花生生长前期提高了花生叶绿素含量,后期作用不明显。叶面喷施与土施铁肥都可以增加花生产量,土施铁肥的作用效果不如叶面喷施效果明显,酸化肥料对提高花生叶绿素含量及产量没有明显效果。     

花生连作土壤微生物区系变化研究

通过盆栽试验研究了不同连作年限花生根际及非根际土壤微生物区系变化。结果表明,随着连作年限的增加,花生根际及非根际土壤中的细菌、放线菌数量明显减少,真菌数量明显增加。4个处理根际土壤中细菌数量在整个生育期的变化均为先上升后下降的单峰曲线,不同之处为连作5年在结荚期时达到峰值,其他3个处理峰值出现在花针期。连作1年花生根际土壤中真菌数量动态变化曲线为先上升后下降再上升,峰值出现在花针期。其他3个处理均为先上升后下降的单峰曲线。CK和连作3年根际土壤中放线菌在整个生育期的菌量动态变化曲线较为一致,总体上均呈现先上升后下降的趋势,峰值均出现在结荚期,连作1年和5年的动态变化曲线较为一致,总体均呈现先上升后下降再缓慢上升的趋势,峰值均出现在花针期。