稻瘟病菌对新型模式植物二穗短柄草的致病性研究

 建立了稻瘟病菌对二穗短柄草的接种体系,观察了稻瘟病菌在二穗短柄草上的发病过程和特点,并与在水稻和大麦上的发病情况进行了比较。在人为接种稻瘟病菌的条件下,二穗短柄草的叶片、叶鞘、茎秆、穗部均可获病。利用稻瘟病菌孢子悬浮液对二穗短柄草进行苗期活体或离体接种,都能引发典型病斑。与大麦相比,二穗短柄草叶片上病斑的出现时间及发展速度更接近水稻。同时,二穗短柄草叶片上的接种和发病条件比水稻更易控制,病斑更具一致性。另外,稻瘟病菌致病突变体在二穗短柄草叶片上致病性变化（降低或丧失）趋势与在水稻上的情况一致。显微观察及组织化学染色表明,稻瘟病菌在二穗短柄草叶片上可有效形成附着胞,侵入叶片表皮细胞,形成典型的侵染菌丝,其过程与水稻近似。因此,二穗短柄草可以作为稻瘟病菌与寄主互作的研究材料,并有望为杂草上梨孢菌的研究提供可能的模式植物以及为农作物的抗病育种提供参考。     

稗草病原真菌AAE的分子鉴定及其粗蛋白诱导水稻的稻瘟病抗性

从感病稗草标样上分离到一株病原真菌AAE,其粗蛋白预处理的水稻幼苗接种稻瘟病菌后,稻瘟病的发病显著减轻,诱抗效果达23.55%。用PCR技术扩增了该菌的内转录间隔区基因序列,并进行了测序,GenBank登录号为EF192234。BLAST同源检索结果显示与该序列高度同源的均为链格孢属的内转录间隔区基因序列。选取同源性高的菌株的内转录间隔区基因序列进行系统发育分析,发现菌株AAE与Alternaria alternata处于同一分枝,相似性为99.2%,结合形态特征将它鉴定为Alternaria alternata。     

玉米穗腐病研究初报

吉林省玉米穗腐病逐年严重,全省平均发病率达13.79％。其病原菌有13属19种,主要菌为串珠镰刀菌、串珠镰刀菌胶孢变种、禾谷镰刀菌和炭黑蠕孢,优势种为串珠镰刀菌。除米黑孢外,所有分离菌都能通过接种引起发病,牙签接种和喷雾接种的病情指数较高,四种主要菌的致病力均较强。自然发病和人工接种抗性鉴定结果表明,不同杂交种和不同自交系对穗腐病的抗性具有明显差异。优势病原菌串珠镰刀菌的生长最适温度为25℃,菊糖、山梨糖、果糖、乳糖及天门各酸钠是最好的碳氮营养源。     

水稻病虫害防治

一、水稻病虫害种类 我县常见的主要病害有纹枯病、稻瘟病、稻曲病、细菌性条斑病、恶苗病、秧苗绵腐病、立枯病和病毒普矮病、黄矮病等。害虫有54种，常见主要害虫有三化螟、稻丛卷叶螟、稻飞虱、稻叶蝉、稻瘿蚊、稻蓟马等。 二、常见主要病虫害发生规律（条件）与防治 (一)病害： 1、稻瘟病：真菌，半知菌纲梨孢菌属。 ①发病条件：菌丝在稻草、稻谷越冬，气温≥15℃，湿度80%以上，即可发病，稻苗感病，“一路青”苗，气温24-28℃，湿度90%以上，寡照，将暴流行。 ②病状：叶瘟：叶片病斑：梭形褐色，灰绿豆圆目，密生灰色霉层，嫩叶…     

水稻抗稻瘟病菌防卫反应的细胞学分析与防卫基因表达

对水稻类病变坏死突变体 lmm1　(LmmKaty)与原亲本及双单倍体YT14和YT16接种稻瘟病菌24 h内的抗病反应、细胞学和分子作用机理进行了研究。人工接种实验表明,与原亲本相比,该突变体对稻瘟病菌具有更强的抗性。突变体接种20~24 h后,自动荧光检测到细胞死亡,而对照则未检测到。表明该突变体通过细胞程序性死亡阻止稻瘟病菌的蔓延,从而提高了抗病性。Northern blotting结果发现,抗病品系YT14中的防卫相关基因、苯丙氨酸解氨酶基因和β 葡聚糖酶基因在人工接种稻瘟病菌6 h后开始表达,16~24 h后上述基因表达量快速增加;而病程相关蛋白基因 PR 1和几丁质酶基因在人工接种稻瘟病菌24 h后才开始表达。与YT14相比,感病品系中上述基因的表达明显延迟。表明在人工接种稻瘟病菌24 h内水稻可启动抗病防卫反应,从而对稻瘟病菌产生抗性。     

OsLOX10正调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性

【目的】由稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）引起的稻瘟病和由水稻黄单胞菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae，Xoo）引起的白叶枯病严重影响水稻的产量和品质。创制转OsLOX10基因水稻材料，进行稻瘟菌和白叶枯菌的抗病性分析，有助于揭示其调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性机制。【方法】采用CRISPR/Cas9系统构建OsLOX10的敲除载体，利用限制性内切酶XcmⅠ线性化pCXUN-HA，TA连接构建OsLOX10的过表达载体，遗传转化获得OsLOX10转基因水稻，筛选过表达株系和纯合敲除株系进行真菌和细菌的抗病性分析。在稻瘟菌（Guy11）侵染水稻后，对水杨酸（salicylic acid，SA）、茉莉酸（jasmonic acid，JA）途径的标志基因进行qRT-PCR分析;在几丁质（chitin）和flg22诱导下，观测水稻活性氧（reactive oxygen species，ROS）的暴发情况。【结果】 qRT-PCR分析表明，接种稻瘟菌和白叶枯菌24 h后，OsLOX10表达量上调;OsLOX10的纯合敲除和过表达水稻转基因株系接种稻瘟病菌Guy11孢子悬浮液，与野生型（日本晴）相比，OsLOX10敲除株系更易感病，过表达株系则无典型的病斑症状;接种 6、12、24和36 h时，3个病程相关蛋白基因OsPBZ1、OsPR1a、OsPR1b和SA通路基因OsPAL1，以及JA合成通路上的2个基因OsAOS2、OsLOX5的转录水平在敲除转基因株系中显著下调，而在过表达转基因株系中显著上调。对转OsLOX10基因水稻接种白叶枯菌（PXO99A），发现敲除OsLOX10的转基因水稻对白叶枯菌更易感病。qRT-PCR分析OsPR1b和OsPAL1以及JA合成通路上的3个基因OsAOS2、OsAOC和OsJAZ在OsLOX10过表达基因水稻中表达量明显上调，而在敲除OsLOX10的转基因水稻中却保持在较低水平，在接种7 d后表现出显著性差异。在几丁质和flg22诱导下，OsLOX10敲除株系的ROS水平显著性降低，而且在几丁质诱导下，ROS的起峰时间推迟。【结论】稻瘟病菌和白叶枯病菌能够诱导OsLOX10的表达，OsLOX10通过病原菌分子模式触发的免疫途径（PTI）参与抗病反应，其在水稻抵御稻瘟病和白叶枯病中起着正调控作用。同时，OsLOX10可能通过调节SA和JA介导的信号通路来正调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性。     

航喷富士一号防治稻瘟病的效果

稻瘟病是水稻主要病害之一。稻瘟病的病原菌属于半知菌类，丛梗孢科梨形孢属。以分生孢子或菌丝体在病谷病草上越冬。菌丝体发有温度范围8～37℃，以26～28℃为最适宜。稻瘟病在水稻整个生育期内都可以发生，危害秧苗、叶片、茎节、穗节，造成苗瘟、叶瘟、穗瘟及节瘟等。尤其是穗颈稻瘟病，对水稻产量和米质影响最大，一般减产10％－20％，重者40％－50％，甚至颗粒无收。营口稻区处于辽河下游，濒临渤海，地势低洼，地下水位高，盐碱较重。年降水量640～750mm，以7、8月份降水最多。由于地理环境的局限，一定程度上制约着水稻的正常生育，…     

马唐瘟菌与稻瘟病发生的关系研究

交互接种试结果表明，来自马唐草的梨孢属菌对水稻苗叶和穗颈瘟的致病力极弱，严自水稻的梨孢属菌对马唐草的致病力也极弱，田间马唐瘟菌不是稻瘟病的菌源。     

稻瘟病菌致病性变异研究

１９９７年对四川省东南部稻瘟病菌２３０个有效单孢菌测定结果表明，病菌生理小种组成由４群１７个小种组成，以ＺＢ群小种为优势种群，出现频率为７０．２％，不同生态区及不同水稻品种间病菌生理小种组成有明显差异，同一水稻品种叶曾和穗颈瘟生理小种组成也有显著差异，穗颈瘟生理小种组成比叶瘟复杂，致病力比叶瘟强，同一水稻品种不同叶片，不同病穗乃同一叶片不同病斑间都可测出不同生理小种，表明稻瘟病菌的致病性存在复杂的     

水稻抗稻瘟病分子机制研究进展

稻瘟病是危害世界水稻生产最严重的真菌病害之一。稻瘟病菌生理小种变异快，水稻品种的抗性一般仅能维持3~5年。培育和种植抗性品种是目前最经济有效的措施。近年来，对稻瘟病菌致病机制和抗性基因分子机理的系统研究，加深了对该病原菌-宿主系统中病原相关分子模式诱导的免疫反应机制和病原菌效应蛋白诱导的免疫反应机制的了解。本文综述了水稻抗稻瘟病的两种天然免疫机制研究的最新进展，并对目前水稻抗稻瘟病分子机制研究中急需解决的问题和挑战进行探讨和展望。     

Physiological Macro-lesions Enhanced Resistance to Blast （Magnaporthe grisea） in Rice Near-isogenic Lines

Roll-leaf-1 （rl-1） and spot-leaf-1 （spl-1） were two near-isogenic lines, which were obtained after 3 to 4 backcrosses with early season indica rice Zhefu 802 as recurrent parent. Henna macro-lesions, referred as physiological or morphological markers, began to appear on leaves at 4.5- to 6.0-leaf stage. The rice seedlings were inoculated at 3.5-, 5.0- and 7.0-leaf stages with high pathogenic races Zhong A1 and Zhong B1 of Magnaporthe grisea, respectively. The resistance of rl-1, spl-1 and Zhefu 802 against blast was significantly different. The seedlings of Zhefu 802 at 3.5- to 7.0-leaf stage were susceptible to races Zhong A1 and Zhong B1 of M. grisea, whereas those of rl-1 and spl-1 at 3.5-, 5.0- and 7.0-leaf stages were susceptible, moderately resistant and resistant, respectively. These results suggested that the enhanced resistance of rl-1 and spl-1 related to the appearance of their morphological marker lesions. The experiment provided a basis for studying lesion mimic and hypersensitive response in association with disease resistance.     

农杆菌介导的稻瘟病菌转化及致病缺陷突变体筛选

在构建了两个含有潮霉素B磷酸转移酶基因双元载体的基础上,成功地实现了农杆菌介导的稻瘟病菌转化,转化效率达每1×106个分生孢子>300个转化子,并得到了4000多个转化子。通过继代培养和PCR检测,证明插入到稻瘟病菌基因组中的潮霉素抗性基因可稳定遗传。Southern杂交分析表明,大约有2/3转化子的T DNA插入是单拷贝的。用大麦叶片离体接种的方法快速测定部分稻瘟病菌转化子的致病性,发现一个致病缺陷突变体：A1 412。该突变体不能侵入水稻叶片及擦伤的大麦或水稻叶片,说明A1 412突变体在寄主组织中扩展进程被阻断。进一步的表型分析发现A1 412突变体的产孢量显著下降,仅为野生菌株的7%,在疏水表面不能形成附着胞,部分分生孢子萌发也略有延迟。Southern 杂交显示A1 412基因组中T DNA插入是单拷贝的。上述结果表明,A1 412突变体表型的改变可能是由于T DNA插入而使某一具有重要生物学功能的基因失活所致。     

Resistance Evaluation of Some Chinese Leading Rice Maintainer, Restorer lines and Their Hybrids to Magnaporthe grisea

Six isolates of Magnaporthe grisea were selected to inoculate on 10 Chinese leading maintainer lines (B-lines), 14 restorer lines (R-lines) and their F1 hybrid plants. In the tested rice materials, R-lines were proved to be more resistant to blast than B-lines.The resistance frequency of about 25% F1 hybrid plants was less than their parents. In addition, 26 isolates of M. grisea collected from different rice growing areas of China were inoculated on 13 new improved hybrid rice combinations. The resistance frequencies of 5 improved hybrids were better than those of the controls and leading varieties in rice production of China.     

Resistance Evaluation of Some Chinese Leading Rice Maintainer, Restorer lines and Their Hybrids to Magnaporthe grisea

Six isolates of Magnaporthe grisea were selected to inoculate on 10 Chinese leading maintainer lines (B-lines), 14 restorer lines (R-lines) and their F1 hybrid plants. In the tested rice materials, R-lines were proved to be more resistant to blast than B-lines. The resistance frequency of about 25% F1 hybrid plants was less than their parents. In addition, 26 isolates of M. grisea collected from different rice growing areas of China were inoculated on 13 new improved hybrid rice combinations. The resistance frequencies of 5 improved hybrids were better than those of the controls and leading varieties in rice production of China.     

携带稻瘟病菌的大麦粒作为载体在杀菌剂筛选中的应用

介绍提供携带稻瘟病菌的大麦粒在稻瘟病杀菌剂筛选中的应用方法,该方法的稻瘟病菌载体(即携带稻瘟病菌的大麦粒)在药剂筛选中制作简单,不易染菌,且成本低,进而可大大提高稻瘟病杀菌剂筛选的效率,利于大批量快速筛选稻瘟病杀菌剂。     

稻秆还田对水稻主要病害发生的影响

通过水稻秸秆还田小区试验,初步探讨了多年秸秆还田对15个水稻品种病害的影响。试验结果表明：秸秆还田的老稻田15个水稻品种的稻瘟病、鞘腐病、纹枯病的病情指数都高于对照稻田的病情指数。黑龙江省农垦总局建三江分局主栽品种空育131,叶瘟病情指数增加了2．3％,穗颈瘟增加了2．6％,鞘腐病增加了2．2％,纹枯病增加了0．4％。     

江苏省稻瘟病菌群体分布及优势小种的毒力研究

用中国7个统一鉴别品种对2000~2002年江苏省5大稻区采集的342个稻瘟病菌单孢分离菌株进行了小种鉴定。结果表明3年累计出现7群30个小种,其中ZG1为优势小种,3年的频率分别为65.00%、56.90%和60.38%,ZB群和ZC群生理小种也是重要的小种类型,有较高的出现频率。用130个ZG1小种的菌株对日本13个已知抗性基因品种进行毒力测定,出现42种类型毒力,其中30.77％的ZG1小种的菌株同时对品种新2号（Pita-k[sup]s[/sup],Pi-sh）、K1（Pi-ta）、Pi-4号（Pi-ta[sup]2[/sup],Pi-sh）致病,为优势毒力类型, 表明品种新2号（Pita-ks,Pi-sh）、K1（Pi-ta）、Pi-4号（Pi-ta[sup]2[/sup],Pi-sh)与江苏省稻瘟病菌有较高的适合度。品种K3（Pi-k[sup]h[/sup]）在江苏省有较好的抗性,其抗性频率为100%。用两种毒力类型的不同菌株2003-184(ZC[sub]5[/sub])和 2003-14-1(ZG[sub]1[/sub]) 混合接种13个日本已知抗性基因品种后,发现对上述两个单个菌株表现抗病的K3（Pi-k[sup]h[/sup]）品种表现为感病,提示不同毒力的菌株之间的相互作用导致菌株毒力的改变可能是品种抗性丧失的原因之一。     

Race Specificity of Major Rice Blast Resistance Genes to Magnaporthe grisea Isolates Collected from indica Rice in Guangdong, China

Race-specific resistance and field resistance of 30 rice blast resistance monogenic lines dedved from different resources were evaluated. The spectra of resistance to 163 Magnaporthe grisea isolates collected from indica rice in Guangdong Province, China ranged from 0.6% to 89.6%. Most of the monogenic lines showed a narrow resistance spectrum and high susceptibility in rice blast area, whereas the lines with Pikh and Pi1(t) had the broad resistance spectra of 89.6% and 82.2% respectively, showing a high and stable blast resistance in fields. According to the cluster analysis of specific resistance to 163 blast isolates tested, the 30 monogenic lines were divided into 15 groups, and based on the principal factor analysis, nine kinds of race-specific resistance were identified. Pik, Piz5, Pi9 and Pish can be used as candidate resistance genes for rice breeding since their specific resistance differed from those of the backbone parents in Guangdong, China. Gene pyramiding of Pikh [or Pi1(t)], Pi9 (or Piz5) and Pish (or Pita2) will be effective to obtain broad-spectrum blast resistance in rice breeding program in Guangdong, China. The strategies for studying and application of rice blast resistance genes were discussed.     

稻瘟病菌对异稻瘟净、多菌灵和三环唑的敏感性检测及抗药性变异研究

用区分剂量法检测了2000年采自中国广东、广西、安徽和江苏四省129株稻瘟病菌对异稻瘟净和多菌灵的抗药性频率。稻瘟病菌对生产上已停用10年左右的异稻瘟净的抗药性频率仍高达79.1%;在广东省高要市检测到了一例多菌灵抗药性菌株GY5,频率为0.78%。利用抑制菌丝黑色素化的最小抑制浓度（MIC）离体检测了稻瘟病菌对三环唑的敏感性,结果表明稻瘟病菌黑色素的生物合成对三环唑存在着不同的敏感性基因水平,但没有观察到上述MIC值与活体条件下测定的防治稻瘟病的[i]EC[/i][sub]50[/sub]间存在相关性。用药剂驯化和紫外诱变的方法都获得了稻瘟病菌抗异稻瘟净突变体和抗多菌灵突变体,但未能获得抗三环唑突变体。