咖啡因和维生素E对小尾寒羊精液冷冻保存的影响

研究冷冻稀释液中分别添加不同浓度的咖啡因和维生素E后对小尾寒羊精液冷冻保存的影响。将不同浓度的咖啡因和维生素E分别添加于冷冻前的小尾寒羊精液稀释液中,用精子活率、顶体完整率和畸形率,作为判定精子冷冻品质的指标,初步确定2种稀释液添加成分对小尾寒羊精液品质的影响。当添加维生素E的浓度为0.4mg/mL时,冷冻后的精子活率较高,畸形率较低,且精子顶体完整率也较高;添加5mg/mL咖啡因能显著提高精子的解冻后活率,其活率为0.35,对精子畸形率和顶体完整率无显著影响。在冷冻精液稀释液中添加适当浓度维生素E可以减缓冷冻对精子的伤害,提高小尾寒羊冷冻精子活率,改善冷冻精液的品质;当添加5mg/mL的咖啡因于稀释液中冷冻时,解冻后精液活率显著提高,但不影响精子畸形率和顶体完整率。     

不同浓度乙二醇和甘油对犬精液冷冻效果的影响

研究在常规冷冻稀释液中分别添加不同浓度的乙二醇作为保护剂,并与甘油作为冷冻保护剂进行对比,以优化犬精液冷冻方案,提高解冻后精子质量。在犬的常规精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度的乙二醇(2%,4%,6%,8%,10%),经细管冷冻、解冻后通过分别评价其精子的活率、顶体完整率、畸形率等来筛选其最佳添加浓度。结果表明:添加浓度为6%的乙二醇时,冷冻后精子活力为0.37,顶体完整率为43%,显著好于其他处理组(P0.05);添加浓度为4%的乙二醇时,冷冻后精子畸形率为15%,略优于其他处理组。6%浓度的乙二醇可代替甘油作为冷冻保护剂,且对犬的冷冻效果有显著的促进作用。     

稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响

【摘要】目的：研究在冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响,以优化犬精液冷冻方案,提高解冻后精子质量。方法：在犬的常规精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因和谷胱甘肽,经细管冷冻,解冻后通过分别评价其精子的活率、形态（包括顶体完整率和畸形率等）等来筛选其最佳添加浓度。结果：经解冻后的精液质量评价如下：（1）向稀释液中添加5mmol/L咖啡因对解冻后精子活率明显改善,为0.33±0.04（P﹤0.01）,显著高于其他组;当添加浓度为12.5mmol/L时,活率仅为0.230±0.04（P﹤0.01）,显著低于对照组;添加浓度为5mmol/L时精子畸形率最低,为0.174±0.036（P﹤0.01）,较其它组差异显著。（2）向稀释液中添加谷胱甘肽5mmol/L,精子活率为0.31±0.054,顶体完整率为0.438±0.022,畸形率仅为0.162±0.025,均优于其他浓度组,差异显著（P﹤0.01）。 结论：在犬的精液冷冻液中分别添加适量浓度的咖啡因或谷胱甘肽均对冷冻效果有显著的促进作用。     

提高西门塔尔牛冷冻精液使用效果的研究

为提高西门塔尔牛冷冻精液的使用效果,从筛选稀释液配方、选择最佳解冻温度与解冻后保存温度三个方面进行了研究。实验结果表明：（1）通过比较三种冷冻精液保存稀释液对冷冻后精子活力的影响,表明稀释液Ⅲ和稀释液Ⅱ的保存效果均极显著优于稀释液Ⅰ的保存效果（P<0.01）,稀释液Ⅲ与稀释液Ⅱ间的保存效果差异不显著（P>0.05）（2）将牛细管冻精在不同温度、不同时间下进行解冻,解冻后精子活率随解冻温度升高（40℃~65℃）而升高,但高温下（80℃）解冻精子活率低于解冻温度为（40℃~65℃）（3）在两个温度范围进行精液解冻后保存试验,结果以（0℃~5℃）范围解冻后保存效果较好。     

不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液,在37℃下离心,弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,用7种不同的稀释液进行稀释,应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精.结果表明,在7种稀释液中,7号稀释液优于其他6种稀释液(p＜0.05);与其他的冷冻保护剂相比,甘油的冷冻保护性能较好(p＜0.01),其适宜浓度为2～4 ml/l;干解冻(40～45℃)效果优于湿解冻,解冻后精子活率达0.46～0.49(p＜0.05);稀释液中添加安钠咖可有效地延长精子的冻后存活时间(p＜0.01).     

不同稀释剂对猪冷冻精液的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液,在37 ℃下离心,弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,用7种不同的稀释液进行稀释,应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明,在7种稀释液中,7号稀释液 优于其他6种稀释液(p<0.05);与其他的冷冻保护剂相比,甘油的冷冻保护性能较好(p<0.01),其适宜浓度为2~4 ml·l-1;干解冻（40~45 ℃）效果优于湿解冻,解冻后精子活率达0.46~0.49（p<0.05）;稀释液中添加安钠咖可有效地延长精子的冻后存活时间(p<0.01)。     

除去精浆对内蒙古白绒山羊精液冷冻保存效果的研究

采用阿尔巴斯白绒山羊精液,用三种不同离心方法洗涤除去精浆后,对精液进行冷冻处理,结果表明750rpm/min一次或两次离心除精浆,精子冷冻解冻后的活率,质膜完整率,线粒体活性显著高于对照组（P＜0.05）。750rpm/min一次离心处理后顶体完整率显著高于750rpm/min两次离心处理。1500rpm/min一次离心处理后,精子冷冻解冻后的的活率,顶替完整率,线粒体活性显著（P＜0.05）低于其它各组,解冻后活率与对照组无显著差异。这是由于离心速度的偏高会对精子形成一定的机械损伤。     

不同双糖组合对猪精子冷冻保存效果的影响

为了评价不同的双糖（乳糖、蔗糖和海藻糖）添加于卵黄基础稀释液中对猪精子的冷冻保护作用,实验采用了7个冷冻保护液配方,其中第一个配方为前期实验筛选得到的乳糖卵黄稀释液（LEY）,将蔗糖和海藻糖以不同的比例完全或部分替代第一个配方中的乳糖成分而获得另6个配方。精子冻后质量评价活力、顶体完整率、低渗肿胀率及畸形率等指标。结果表明,当稀释液中只添加乳糖时（LEY液,A组）,猪精子的冻后活力最低;当用蔗糖或海藻糖部分替代或完全替代乳糖时,猪精子冻后各项指标都有所改善。当33.3%的乳糖和66.7%的蔗糖进行组合（F组）时,猪精子冻后活力达37.0%±2.6%,显著优于其他各组（P＜0.05）,其他各项指标也显著高于单一的乳糖组（A组）。研究结果表明,将不同双糖以不同比例组合添加于猪精液冷冻保护液后,以33.3%的乳糖和66.7%的蔗糖的组合（F组）对猪精液冷冻保护的效果最好。     

抗冻剂和冷冻速率对蛋用种公鸡精液冷冻保存效果的影响

为提高蛋用种公鸡精液冷冻效果,本试验研究了抗冻剂和冷冻速率对海兰褐蛋用种公鸡精液冷冻效果的影响。试验一：采用的冷冻保护剂为二甲基乙酰胺(DMA)与二甲基亚砜(DMSO),浓度分别是6%、10%、15%。结果显示：10%DMSO处理组冷冻解冻后精子总活力达到37.4%,复苏率达到50%,活率达到58.3%;试验二：比较了3组冷冻速率,其中,以速率为7℃/min,从5℃下降至-35℃,再以速率为9℃/min ,从-35℃下降至-120℃处理组,冷冻解冻后精子总活力达到44.3%,总复苏率达到了53%,畸形率为41.9%,顶体完整率为42.9%;试验三：通过人工输精来评价其最终冷冻解冻效果（冻精解冻后的平均受精率为24.9%）。综上所述：在本试验条件下,以10%的DMSO作为冷冻保护剂,以7℃/min,从 5℃下降至-35℃,再以9℃/min,从-35℃下降至-120℃处理过的精子冷冻解冻效果最好。     

除精浆提高冷冻精液品质的实验研究

采用离心洗涤法去除精浆后,对精液进行冷冻处理。发现：1、除精浆精子冻后的活率、Ⅰ类顶体率和精子畸形率与未除精浆组存在显著差异(P<0.05);2、除精浆使稀释后精液精浆中GOT和LDH活性明显升高(P<0.05)。从平衡后到解冻后各组GOT和LDH活性都呈上升趋势。但除精浆试验组比未除精浆试验组上升缓慢;3、除精浆试验组精子的穿卵率、卵内平均精子数都显著高于未除精浆试验组(P<0.05);4除精浆离心洗涤液用生理盐水和脱脂乳-卵柠液,两者之间无显著差异(P>0.05)。     

奶牛性控冻精人工授精效果的研究

为研究奶牛性控冻精人工授精效果并合理制定人工授精方案,采用流式细胞仪制备性控冻精,对3 947头健康荷斯坦牛进行人工授精。结果表明:①性控冻精和常规冻精的受胎率、产犊率差异不显著(P0.05),但性控冻精的雌犊率和繁殖率分别达到92.01%和50.03%,对照组仅为51.13%和34.97%,差异极显著(P0.01)。②青年牛的情期受胎率达到55.25%,极显著高于经产牛(P0.01);青年牛的产犊率达到98.31%,显著高于经产牛(P0.05);青年牛的繁殖率为51.84%,经产牛为42.12%,存在极显著差异(P0.01)。③采用第1次人工授精后10~11 h重复授精1次,每次1支性控冻精的授精方案,其情期受胎率为55.17%,繁殖率达到55.81%,同其他方案相比,差异极显著(P0.01)。应用性控冻精进行人工授精可以显著提高母牛的繁殖效率。     

我国牛冷冻精液质量性状的评估与分析

为进一步探索冷冻精液的质量提高与技术关键，本研究对近年来国内各牛冷冻精液生产企业1720头份精液样品进行了质量分析，涉及品种有奶牛、肉牛类（包括乳肉兼用、黄牛、牦牛等）和奶水牛等。结果：剂量值(0.20±0.008)mL、活力(40.9±2.3)%、每剂量前进运动精子数(1224.3±291.7)万个、畸形率(12.6±3.8)%、细菌菌落数(38.9±192.7)个。年度间比较，活力呈不规则的起伏变化；畸形率2016年均值显著低于前二个年度，分别下降0.8%和1.3%，3个年度间均差异显著(P＜0.05)，细菌菌落数2014年显著高于其他二个年度(P＜0.05)；品种间比较，奶牛活力分别高于奶水牛0.5%、肉、兼用牛0.2%(P＜0.05)，奶水牛与肉牛及兼用牛之间差异不显著(P＞0.05)，奶水牛畸形率分别高于奶牛1.9%、肉用牛0.9%，均差异显著(P＜0.05)，前进运动精子数，奶水牛最高，奶牛最低，品种间均差异显著(P＜0.05)；生产企业间比较，活力、前进运动精子数、畸形率均分别存在不同差异。通过数据分析，反映了目前国内牛冷冻精液的质量概况，为冷冻精液的技术研究提供依据。     

犬精液冷冻方法的优化试验

摘要：本试验为提高犬的精液冷冻效果,冷冻保存液配方中添加不同浓度糖（葡萄糖,果糖）,平衡时间以及熏蒸时间做系统对比。经系列分组试验发现,含0.5 %果糖组中精子活力显著高于其它组别（P<0.05）;平衡时间120 min（P<0.05）;熏蒸时间20 min冷冻效果较好。结果表明犬精子冷冻液添加低浓度果糖优于葡萄糖,而且平衡时间为120 min,熏蒸时间为20 min可得到稳定的冷冻效果。关键词：犬;:精子;葡萄糖;果糖;:冷冻保存     

卵黄和低密度脂蛋白对冷冻保存绵羊精子胆固醇、磷脂含量的影响

为了探索绵羊冷冻精液受精率低的原因,在稀释液中用低密度脂蛋白代替卵黄冷冻绵羊精液,研究LDL对冷冻中精子脂类含量的影响。结果表明,以卵黄稀释液冷冻精液,精子胆固醇含量从鲜精的234．54nmol／10^9降低到163．76nmol／10^9精子,胆固醇与磷脂的比值（c／p）从0．54下降到0．36;以9g／100mL LDL代替卵黄,冷冻后胆固醇含量为243．73nmol／10^9精子,c／p值保持在0．50。研究得出在卵黄稀释液中冷冻绵羊精液,精子胆固醇流失,c／p值下降;以LDL代替卵黄,可有效保护精子胆固醇,避免流失,维持了精子c／p值。     

不同冻精处理方法和添加咖啡因对牛体外受精的影响

【目的】为了探讨不同冻精处理方法以及添加精子活力激活剂并孵育不同时间获能对体外受精及受精卵发育的影响。【方法】研究对体外受精前的牛冷冻精液分别采用直接离心法、上游法和Percoll法3种方法处理,并对处理后的精液分别用含2.5mM或5.0mM咖啡因的获能液（BO液＋10μg/ml肝素钠）在培养箱内预先孵育10min或30min进行获能,不同处理的精子经体外受精后。【结果】结果表明：（1）3种冻精处理方法（直接离心洗涤法、上游法、Percoll法）对精子处理获能,IVF后受精卵的卵裂率（依次为51.58%、52.83%、53.20%）均无显著差异（P＞0.05）;桑椹胚、囊胚发育率Percoll法处理组（16.66%、10.18%）与上游法处理组（17.85%、16.07%）以及Percoll法处理组与直接离心洗涤法组（8.77%、7.01%）均无统计学差异（P＞0.05）,同时实验结果还表现出上游法处理组比Percoll处理组的桑囊胚率有所提高,且上游法处理组与洗涤法处理组在桑、囊率上出现了显著差异（P＜0.05）。（2）获能液中添加咖啡因组比非添加组(对照组)卵裂率和桑囊胚率有所增加,其中添加5.0mM咖啡因组精子孵育30min的获能效果最佳,卵裂率、桑囊率达到68.59%、28.50%。【结论】以上结果表明上游法处理牛冷冻精液稍优,更有利于以后的受精卵发育;添加咖啡因能提高精子活力,且高浓度的咖啡因维持精子高活力持续时间较长。     

Effects of Mango Seed Kernels on Mice with Kidney-Yang Deficiency and Oligoasthenospermia

[Objective] To discuss the effects of mango seed kernels on mice with kidney-Yang deficiency and oligoasthenospermia.[Methods]Mice model with kindey-Yang deficiency was established by intramuscular hydrocortisone,so as to observe the effects of mango seed kernels on swimming time,viscera index and freeze resistance capability of mice with kindey-Yang deficiency. The mice model with oligoasthenospermia was established by administration of tripterygium glycosides,so as to observe the effects of mango seed kernels on sperm quality of mice with oligoasthenospermia. [Results]Mango seed kernels could improve the swimming time,viscera index and freeze resistance capability of mice with kindey-Yang deficiency. Besides,mango seed kernels could enhance the sperm density,sperm survival rate,sperm motility,and reduce the malformation rate of mice with oligoasthenospermia. [Conclusions] Mango seed kernels had the function of tonifying kidney-Yang and showed certain therapeutical effects on oligoasthenotspermia.     

奶牛性控胚胎体外生产的影响因素及控制措施

针对奶牛胚胎体外生产环节,对体外受精和培养等技术进行了研究,旨在建立奶牛性控胚胎体外生产技术体系。结果表明,卵母细胞外周卵丘细胞至少保持3层以上,在成熟基础液中添加10 ng/ml的EGF,利于核质成熟;在精子获能液中添加咖啡因降低精子的存活时间;牛胚胎前3 d用CR1aa+BSA培养,再用SOFaa+5%FBS培养,获得高的囊胚发育率,并且添加50 ng/ml IGF-I后胚胎的发育得到了很大的改善。利用性控精液进行体外受精,受精率有轻微下降,但对生产的胚胎发育质量无明显（P>0.05）影响,胚胎移植后受胎率为40%左右。