美国黄松离体胚培养条件下不定芽的形成与根产生的研究

以美国黄松成熟胚为外植体在MS、GD、SH和N6 培养基上诱导不定芽 ,试验结果表明 ,基本培养基的种类对外植体不定芽的诱导起主要作用 ,GD最好 ,SH次之 ,MS和N6 最差。GD 0 5mg·L- 1 6 BA ,对外植体不定芽的诱导率达 5 5 % ,平均增殖率为 6 ,最大增殖率达 10 ;NAA不利于外植体不定芽的诱导 ;培养基中加入适量的活性炭有利于不定芽的形成和生长。对不定芽在GD、SH和 1 2SH培养基上进行生根诱导 ,试验结果表明 ,基本培养基的种类对不定芽形成根起主要作用 ,GD、SH不能诱导不定芽生根 ,1 2SH可以使不定芽生根 ,其对不定芽的诱导率为 2 2 % ,1 2SH NAA 0 5mg·L- 1 对不定芽生根的诱导率为 3 3% ;NAA对不定芽生根具有促进作用。在离体培养条件下 ,以美国黄松种胚为外植体获得了再生小植株     

湿地松成熟合子胚直接器官发生及植株再生

以湿地松成熟胚为外植体诱导不定芽发生,初步建立植株再生体系.先用含不同浓度6-BA的液体培养基处理湿地松成熟胚12～36 h,吸干后转移到无激素的培养基上培养.6周后,经60mg·L-1 6-BA液体培养基预处理12 h的胚不定芽诱导率最高达69%,预处理24 h平均每个外植体产芽数达到最高(9～12个),但芽体较小,在继代培养基中伸长较慢;经30 mg·L-1 6-BA液体培养基预处理的胚不定芽诱导频率较低,仅25%～38%,但芽体健壮,在继代培养基中伸长较快;6-BA浓度大于80 mg·L-1时不利于不定芽分化.不定根诱导的研究结果表明,NAA对不定芽生根具有促进作用,在改良1/2GD NAA0.05mg·L-1培养基中培养4周后,生根率达50%,移栽成活率为60%左右.     

孔雀草杂交F1代的植株再生

以孔雀草（Tagetes patula）子叶、下胚轴和叶片为外植体,通过器官直接发生途径诱导形成不定芽,探讨植物生长调节剂组合、AgNO3浓度、蔗糖浓度和外植体类型等因素对植株再生的影响,建立了再生体系。结果表明：MS＋6-BA 1.0 · L^- 1＋NAA 0.5 · L^- 1＋AgNO31.0 · L^- 1＋蔗糖40 g·L^-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,子叶不定芽分化率达90%以上,平均每外植体分化不定芽数达5.3个。不定芽较适生根培养基为1/2MS＋IAA 0.2 · L^- 1＋NAA 0.1 · L^- 1,生根率达到90%。     

杉木成熟合子胚器官发生和体胚发生

以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究基本培养基、不同种类的细胞分裂素及生长素对杉木器官发生和体胚发生及不定芽生根的影响,并用石蜡切片法观察不定芽和体胚的发生和发育过程.结果表明:DCR 6-BA 1.0mg·L-1 TDZ 0.002 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1对成熟合子胚诱导不定芽最有效;DCR 6-BA 1.0 mg·L-1 TDZ 0.003mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1是成熟合子胚诱导体胚的最佳培养基;不定芽在DCR基本培养基中可有效伸长;1/4MS IBA 0.2 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1对不定芽生根最有效.石蜡切片观察表明:不定芽有2种发生方式,一种是表皮及表皮下的3～4层细胞分生组织化发育而成,另一种是外植体内部的小维管束脱分化发育而成.2种发生方式均为直接器官发生途径.     

东京樱花组培快繁技术研究

以春季萌发的东京樱花嫩枝为外植体,研究植物激素、GA3等因素对东京樱花的组织培养的影响。实验结果表明:在MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1的培养基上,不定芽诱导率达95.83%;不定芽的最佳增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+GA30.5mg·L-1;当芽伸长至2cm时,将其切下置于生根培养基1/2MS+NAA0.1mg·L-1+IBA0.5mg·L-1中,生根率达95%以上,移栽成活率达90%。     

思茅松丛生芽诱导及植株再生

以思茅松成熟合子胚培育的无菌苗的带子叶顶芽为外植体,建立了思茅松组培的丛生芽诱导、伸长和生根的植株再生体系。丛生芽诱导培养基为1/2MS+2.0～3.0 mg.L-16-BA+0.05～0.1 mg.L-1NAA,其诱导率为93.3%;丛生芽伸长诱导培养基为1/2 MS+0.05 mg.L-1NAA;丛生芽小芽不定根诱导培养基为1/2MS+2.0 mg.L-1IBA,其生根率为46.67%。     

新西伯利亚银白杨组织培养基配方的筛选与应用

以新西伯利亚银白杨叶片为外植体,建立了再生体系。经正交试验筛选出此组织培养的最适外植体产生不定芽诱导培养基为MS＋6-BA0．1mg·L^-1＋GA0．1mg·L^-1＋NAA0．05mg·L^-1,最佳不定芽生根培养基为1／2MS＋NAA0．1mg·L^-1‘＋IBA0．02mg·L^-1。     

火焰卫矛组织培养及植株再生研究

以火焰卫矛成熟胚培养长出的子叶为外植体进行组织培养及植株再生研究,建立了火焰卫矛再生体系,成熟胚培养基为WPM+TDZ 0.5 mg.L-1;子叶愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为WPM+6-BA 6 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg.L-1+活性碳0.5 g.L-1。     

激素在红掌叶片再生体系建立中的应用

以红掌嫩叶为外植体,研究了激素在不定芽的诱导、增殖、生根过程中的作用。结果表明:叶片外植体不定芽诱导的最适培养基为MS+NAA0.50+BA2.00,最佳增殖培养基为MS+NAA0.10+BA1.50,最适合生根的培养基为1/2MS+NAA0.2。     

桃幼胚及幼胚子叶再生的研究

以玉露桃和湖景蜜露桃幼胚及幼胚子叶为试材,研究基本培养基类型、激素、损伤方式等因素对再生的影响。结果表明:培养基是影响幼胚诱导愈伤组织的最重要因素,MS适合供试材料诱导愈伤组织;激素诱导愈伤组织因品种而异,NAA1.0mg·L-1对45d、0.5mg·L-1对55d玉露,BA0.5mg·L-1对55d湖景蜜露效果较好,在试验浓度范围内2,4-D对供试幼胚均无明显效果;幼胚的发育状态是影响诱导愈伤组织的另一因素,玉露桃45d愈伤组织诱导率最高,达96.6%,而55d诱导率为81.6%。愈伤组织可在MS 0.05mg·L-1NAA 1.0mg·L-1BA培养基上分化成芽,再生芽在1/2MS 1.0mg·L-1IBA培养基上生根。幼胚子叶不定芽再生培养基的激素配比为NAA0.50mg·L-1 BA10.0mg·L-1、NAA0.05mg·L-1 TDZ3.0mg·L-1;带胚芽子叶纵向刻伤再生率高;不定梢(芽)在1/2MS 2%蔗糖 7.5g·L-1琼脂 IBA1.0mg·L-1 Ad20mg·L-1的培养基上能生根。     

长白落叶松离体再生体系的建立

以长白落叶松成熟合子胚诱导出的不定芽为外植体,通过筛选不定芽增殖的最适培养基及激素配比、探讨不同浓度赤霉素(GA_3)及活性炭(AC)对不定芽伸长的作用以及比较不同处理对试管内及试管外生根的影响,最终建立离体再生体系。结果表明:BM+1.0 mg/L TDZ时,不定芽增殖最快,增殖系数为5.0;GA_3对不定芽的伸长有毒害,2.0 g/L活性炭(AC)对不定芽伸长促进作用明显,伸长比率达262%;1/2BM+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA为试管内生根的最佳组合,生根率达26%,不定芽在750 mg/L NAA中浸泡25 s,试管外生根率(37%)最高。     

Organogenesis and embryogenesis in mature zygotic embryos of Picea sitchensis

Differentiation of adventitious buds and somatic embryos from mature zygotic embryos of Picea sitchensis (Bong.) Carr. is described. Adventitious buds were formed on embryos pulse-treated with 250 microM benzyladenine for 2 h and cultured on medium lacking growth regulators. Buds were initiated at different frequencies and sites depending on when the BA-pulsed embryos were transferred to fresh culture medium. Embryogenic callus was formed when the zygotic embryos were cultured on medium containing 10 microM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 5 microM benzyladenine. Although 50% of the embryos gave rise to embryogenic callus, only 20% of the callus continued to proliferate after subculture. Proliferation of new somatic embryos occurred from both the embryonic region and the suspensor region on previously formed somatic embryos. The pattern for development of adventitious buds and somatic embryos in Picea sitchensis is compared to that in Picea abies under similar culture conditions.     

不同美国黄松成熟胚对组织培养的反应

以美国黄松成熟胚为外植体在GD 6—BA0．5mg／L培养基进行离体培养诱导不定芽,附加20g／kg蔗糖、0．6g／kg琼脂,pH为5．8,研究不同成熟胚对组织培养的反应。试验结果表明,不同成熟胚的生理状态对组织培养具有重要的影响。     

Field performance of Pinus contorta trees propagated vegetatively via adventitious buds

Abstract

Pinus contorta plants regenerated from adventitious buds induced on zygotic embryos were planted in a field trial where growth, straightness and flowering were followed over 7 years. Seedlings were taller than the plants derived from adventitious buds at the start of the field trial. Adventitious plants did not catch up with seedlings in height after 7 years in the field, but the relative height growth was equal. The higher frequency of plagiotropic growth that was displayed by adventitious plants the first year in the field was not reflected by differences in the frequency of basal sweeps 6 years later. However, the frequency of crooked stems was comparatively high but similar among the plant types. Flowering was more abundant for the seedlings than for adventitious plants. Taken together, the results show that P. contorta can be cloned via adventitious buds from zygotic embryos, and that the resulting plants show satisfactory growth for inclusion in breeding.     

柔枝松组培苗不定根形成的影响因子探讨

试验以组织培养获得的柔枝松不定芽为对象,对其进行不定根诱导研究。结果发现：IBA对不定根的诱导无明显影响。IBA和NAA配合使用时,形成了大量畸形不定根。NAA对不定芽的伸长生长有明显的促进作用,当培养基中添加0．05mg·L^-1NAA时,苗高达3．12cm,显著高于其他处理。不同浓度NAA及其不同诱导时间对不定根的形成无明显促进作用,反而促进了大量愈伤组织的形成。总之,柔枝松不定芽在无植物生长调节剂的1／2GD培养基能稳定诱导不定根形成,最高生根率为16．67％,说明柔枝松不定芽可能易诱导潜伏根原基,并在无植物生长调节剂的刺激的培养条件下伸长生长。IBA和NAA的使用浓度和诱导时间仍需进一步研究。     

樟子松成熟胚的离体培养与不定芽的形成

沙藏45d的樟子松种子,剥胚培养在5个系列17种培养基上.在6BA0.2～2.0(mg/L,单位下同)+NAA0.05～0.5以及6BA1.0+IAA0.2～0.5的激素配比范围内,可诱导胚形成不定芽.KT与NAA或IAA配合时无不定芽形成.不定芽分化部位明显受激素种类控制,6BA与NAA配合可诱导胚轴分化出不定芽,而6BA与IAA配合,则可从子叶顶端和基部诱导出不定芽。     

Caulogenic callus induction and adventitious bud formation from embryos of long-term stored seeds ofPicea jezoensis

Caulogenic calli with a high differentiation potency were induced from mature embryos ofPicea jezoensis seeds stored over a long time, for 29 years, resulting in the active formation of adventitious buds. Embryos began to induce calli within 3 weeks of cultivating on LP medium containing 3 μM BAP and 1 μM 2,4-D. Then, the calli proliferated and transformed into caulogenic calli with bud primordia in 8 weeks. The caulogenic calli increased actively with the addition of 500 mg/l ofl-glutamine in the medium. Furthermore, caulogenic calli, induced on LP medium containingl-glutamine, resulted in the formation of adventitious buds, which elongated after transferring the calli into LP medium with 0.1 μM BAP, but withoutl-glutamine. It appears that the number of adventitious buds and the process of shoot elongation are influenced by the kind of nitrogen contained in the medium for callus induction. A part of this study was presented at the 107th Annual Meeting of the Japanese Forestry Society (1996).     

天山云杉体细胞胚的成熟及萌发条件

【目的】建立天山云杉体细胞胚成熟及萌发阶段的适宜培养条件,为该树种的体细胞胚大规模繁殖和工厂化生产提供基础。【方法】以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导形成的胚性愈伤组织为材料,通过14个株系、4种成熟培养基、接种量(100、150、200mg的新鲜胚性愈伤组织)、ABA浓度(1.9、3.8、7.6、19、38μmol·L^-1)等体细胞胚成熟培养条件,以及对不同起源(体细胞胚、合子胚和种子)的幼苗形态特征的比较,筛选出最优的天山云杉体细胞胚成熟与萌发条件。采用SPSS18.0等统计软件对体细胞胚进行统计分析。【结果】1)天山云杉14个株系诱导体细胞胚的结果表明,不同株系在同一成熟培养基上诱导体细胞胚的数量存在差异;其中4个株系及其接种量对体细胞胚形成数量影响的结果表明,不同株系及其接种量诱导体细胞胚的数量也存在差异,当接种量为100mg时,T36株系的体细胞胚诱导数量最高,为3470±546个,显著高于其他接种量和株系(P<0.05)。2)在4种不同成熟培养基上,均形成了成熟的体细胞胚,在1/2BLG+30g·L^-1麦芽糖培养基上形成的体细胞胚数量高于其他培养基,分别为2044个(T6株系)和2282个(T36株系),且与其他培养基差异显著(P<0.05)。3)不同ABA浓度对天山云杉体细胞胚诱导数量的影响无显著性差异(P>0.05),在ABA浓度为1.9~38μmol·L^-1时,其体细胞胚平均诱导数量为2850~2913个,其中以7.6μmol·L^-1ABA的浓度处理效果较好,平均获得2913个正常体细胞胚,高于其他处理。4)将不同起源(体细胞胚、合子胚和成熟种子)萌发的小植株进行对比,结果表明,体细胞胚和合子胚幼苗发育阶段基本一致,但合子胚的幼苗比体细胞胚的幼苗约大1倍,但二者间差异不显著(P>0.05);体细胞胚与合子胚子叶的平均数量一致,二者无显著差异(P>0.05),多数幼苗子叶数量为7~8个。【结论】天山云杉体细胞胚成熟阶段的适宜培养条件为胚性愈伤组织接种量100mg,1/2BLG培养基添加7.6μmol·L^-1的ABA及75%PEG4000、30g·L^-1麦芽糖,并添加750mg·L^-1的L-谷氨酰胺或50mg·L^-1L-天冬酰胺。不同株系在诱导体细胞胚的数量上存在差异。体细胞胚再生植株与合子胚植株在形态上相似。研究结果可为天山云杉体细胞胚的大规模繁殖和工厂化生产提供基础。     

竹子的离体培养研究

近２０ａ来已对２０个属７０余种竹子进行离体培养研究,以侧芽,顶芽,成熟胚作外植体诱导愈伤组织,由愈伤组织制备悬浮细胞进行细胞悬浮培养,由悬浮细胞制备原生质体进行原生质体培养。竹子愈伤组织经不定芽途径或体细胞胚发生途径再生完整植株。通过芽尖培养增殖新生芽进行竹微繁殖,并获得脱病毒种苗。以芽为外植体增殖的新芽或组织再生苗经继代培养诱导竹试管开花结实。     

红松愈伤组织诱导的初步研究

以未成熟和成熟合子胚为外植体进行了红松愈伤组织的诱导,其结果表明,成熟胚的诱导效果明显好于幼胚;鉴于诱导产生褐化的主要部位来自胚根,所以外植体应选用子叶、胚轴或去除胚根的胚;诱导培养基采用LM＋2,4-D2．0mg／L＋6-BA0．5mg／L可诱导出较大量Ⅱ型有效愈伤组织,经组织学观察,可见早期原胚团,疑似胚性愈伤组织;继代增殖培养基可采用LM＋2．4-D0．5mg／L＋6-BA0．2mg,／L。