奶牛早孕现场快速简易诊断方法

基于酶免疫分析原理，建立了现场测定乳汁孕酮诊断乳牛早孕的简易方法。应用时取乳牛配种后２１天的前乳为样品，将一定量的抗孕酮抗体、酶标记物，奶样品或孕酮标准液均匀混合后吸入经致敏剂处理的聚乙烯小管中，在０—３７℃范围内避光放置１５—３０分钟，甩弃管中反应液，用洗液冲洗小管后吸入底物液，５分钟后用肉眼观察比较样品管与标准管的颜色（兰色）差异。样品管颜色深于标准管时标志该乳牛未孕，浅于或相当于标准管时为已孕。用此法检查１１０头（次）乳牛，对未孕牛的诊断准确率为９５％，对孕牛为８３％。此法对于判断乳牛是否处于发情期，亦有一定价值     

测定奶孕酮分析奶牛胚胎死亡

测定奶孕酮分析奶牛胚胎死亡○中国农业科学院畜牧研究所（北京１０００９４）蔡正华卢雁平○北京奶牛中心良种场宣柏华○北京西郊农场奶牛公司郑明国孙永芳测定奶孕酮作奶牛早期妊娠诊断，检出未孕牛（负诊断）的准确率相当高，一般都在９５％以上。但是确定妊娠牛（正诊...     

根据牛奶及血浆中的孕酮浓度诊断牛的妊娠

近年来已可对牛奶中的孕酮进行精确的测定。牛奶孕酮与血浆孕酮密切相关,而后者因与黄体功能直接相关故被认为是奶牛生殖状态的一个有用指标。Laing(1971)、Heap(1976)等人曾用全奶孕酮浓度作为指标对配种后21—25天的奶牛进行妊娠诊断,都认为这种早期测定可作为未孕的一种指标而不能作为怀孕指标,因为测定后     

测定奶中的孕酮水平作为母牛妊娠诊断的两个试验

(一)Roche,J.F.,Gosling,J.等人的试验: 在输精后21天取奶样测定孕酮水平,用以判定是否娠娠,如果孕酮水平<4ng/ml者为不孕,如果>12ng/ml者为已孕。117头未孕母牛和217头已孕母牛诊断的准确率,根据产犊数,分别为86％和74％。369     

用奶孕酮试验改善奶牛繁殖力

通过测定奶孕酮来监测奶牛的繁殖状态在国外已有二十多年的历史，美国、英国和加拿大等畜牧业发达国家已应用相当普遍，作为奶牛生产常规服务工具。通过奶样测定，奶中的孕酮浓度可用作卵巢活动的指标。近二十年，国内已有一些农业院校和研究所采用牛奶中孕酮测定（放免或酶免）作奶牛早期妊娠诊断、发情鉴定、甚至繁殖疾患诊断。但所报道中诊断牛的数目偏少（奶样少于５００个），对生产的作用有限；或者因为采样点少（一般每个发情周期采一个奶样），提供的诊断信息不够丰富。本试验选择６个项目区，代表了我国奶牛业的不同环境条件。在采…     

用奶孕酮试验改善奶牛繁殖力

通过测定奶孕酮来监测奶牛的繁殖状态在国外已有二十多年的历史，美国、英国和加拿大等畜牧业发达国家已应用相当普遍，作为奶牛生产常规服务工具。通过奶样测定，奶中的孕酮浓度可用作卵巢活动的指标。近二十年，国内已有一些农业院校和研究所采用牛奶中孕酮测定（放免或酶免）作奶牛早期妊娠诊断、发情鉴定、甚至繁殖疾患诊断。但所报道中诊断牛的数目偏少（奶样少于５００个），对生产的作用有限；或者因为采样点少（一般每个发情周期采一个奶样），提供的诊断信息不够丰富。本试验选择６个项目区，代表了我国奶牛业的不同环境条件。在采…     

通讯干奶样的奶牛早期妊娠诊断技术的应用

1987年我站从浙江农大核农所引进吴美文副教授发明的“通讯奶样RIA 奶牛早妊及难孕诊断”技术,对来自齐齐哈尔、富裕等20多个县、场的奶牛通讯干奶样进行了奶牛早期妊娠诊断。该项早妊诊断技术,要求奶牛在配后的19天、23天各采一个奶样,制成干奶样滤纸片,装信封邮至本站放免室测定。根据放射性同位素的灵敏性和抗原—抗体反应的特异性相结合的超微量分析法测定奶中孕酮含量。     

未予治疗的卵巢囊肿患牛奶孕酮水平的变化

奶孕酮测定已被用于诊断奶牛低生殖力和监测对卵巢囊肿治疗的效果(Booth,1988)。虽然这种方法很有用,但对测定的结果解释会遇到不少困难。 Mcl.eod和Williams(1991)在英国的5个农场中对463头奶牛作了四年的研究,将每周3次的奶孕酮测定与直肠检查作比较后     

奶牛早孕诊断试纸条的研制及临床试验

用抗孕酮单克隆抗体S3B2D4A6和羊抗鼠IgG分别固定于硝酸纤维膜，并与胶体金标记的抗孕酮单克隆抗体S3B3E1G1及其它试剂，应用层析式双抗体夹心法原理研制奶牛早孕诊断试纸，在北京10家奶牛场进行临床检测试验，对1559头荷斯坦奶牛乳汁中孕酮含量进行临床符合验证。结果表明。该试纸条灵敏度高，最低检出量达5～8ng／mL。与无关抗原均无交叉，且批内、批间变异小；检测1559头奶牛。孕牛1316头，其中试纸检测结果阳性1274头。可疑32头。复测阳性22头，孕牛阳性临床符合率96．8％；复测后阳性总符合率达98．5％。阴性对照243头，其中试纸检测结果阴性236头。可疑6头。复测阴性2头。阴性临床符合率为97．1％。复测后阴性总符合率97．9％。结论：北京万华生物工程有限公司研制的奶牛早孕诊断试纸能够快速、准确地进行奶牛早期妊娠诊断。     

奶牛早期妊娠诊断—应用放射免疫测定乳汁孕酮含量的研究

应用放射免疫测定91头黑白花母牛,(配种后21—28天和42天)的混合全乳的孕酮含量,进行早期妊娠诊断研究。结果显示怀孕与未孕牛之间孕酮值差异非常显著(P<0.01)。据此确定全乳孕酮值的判定标准:>11毫微克/毫升为怀孕,<8毫微克/毫升为未孕,8.1～10.9毫微克/毫升为疑似。经直肠妊检核实,用这标准衡量配后21,23,24天妊娠牛的确诊率分别为85.7％,90.2％,91.4％,未孕牛确诊率是100％,因此,最佳采样时间以配后23—24天为宜。     

测定奶中孕酮含量作奶牛早期妊娠诊断的研究

用RIA方法对703头配种后21～24天的母牛,测定其奶中孕酮含量,作了早期妊娠诊断的研究。通过研究,确定乳脂孕酮的判别值大于1.0ng/10μl为妊娠,小于0.8m/10μl为未妊娠,0.8～1.0ng/10μl为可疑;全奶孕酮是根据Eastman的研究结果,以5.0ng/ml作为判别值,大于此值为妊娠,小于此值为未妊娠。通过直肠检查和产犊资料验证,利用乳脂孕酮值判别为妊娠的准确率为86.60％(336/388),未妊娠的准确率为97.40％(187/192),可疑的为5.84％(36/616);全奶孕酮值判别为妊娠和未妊娠的准确率分别为87.76％(43/49)和94.74％(36/38)。以配种后第21～24天和第42天乳脂孕酮值两次判别结果,妊娠的准确率提高到93.2％。本结果已在乌鲁木齐地区有关奶牛场推广应用,对提高奶牛繁殖率起到积极作用。     

酶联免疫分析法诊断奶牛早孕

酶联免疫分析,是诊断奶牛早孕的新方法。它简便、快速、灵敏、准确,诊断费用又便宜。诊断已孕准确率在85％以上;诊断未孕率为95％以上。所需设备主要为冰箱和酶联免疫药盒,此药盒需在0～8℃的温度下保存。检测步骤如下:在奶牛配种后24天,取一滴鲜奶稀释后放入小玻璃管中,加入药盒中所提供的药品,放置10～15分钟,然后与药盒中的标     

酶免疫法奶牛发情鉴定和早期妊娠诊断

孕酮测定法可用于奶牛发情鉴定和早期妊娠诊断。孕酮是黄体所产生的一种激素。黄体是从卵巢上滤泡破裂和释放卵子的部位发育起来的组织。孕酮分泌进入血液,随后进入牛奶,奶孕酮在发情后约4天开始增加,并维持较高浓度直至发情后17—18天,于性周期末由于黄体退化而下降。近十年来应用“放射免疫法“(Radioimmunoassay,RIA)测定奶孕酮浓度。这种方法需要精密仪器设备和放射性化合物,只能在试验     

孕酮固相放免法的建立及其应用初探

利用孕酮 (Progesterone ,P4 )单克隆抗体 ,建立P4 自包被固相放免分析法 (Self -coatingRadioim munoassay,Sc -RIA)。其灵敏度为 0 .0 6nmol/L ,回收率达 95 .73 %批内CV6.8% ,,批间CV9.3 %。对 5头正常健康未孕奶牛的一个发情周期的奶样进行检测 ,检测范围在 0 .0 9～ 2 1 .3 7nmol/L ;同时对 2 0头配种奶牛进行早期妊娠诊断 ,妊娠诊断准确率达 89.4 7% ,未孕诊断准确率达 1 0 0 %。     

奶牛早孕诊断乳汁孕酮临界值的确定

随机选择健康荷斯坦母牛６３头，其中发情周期牛５头，配后１８－２４天牛３０头和通过直接确定的怀孕牛２８头，按程序采集末乳乳样。用放射免疫测定法（ＲＬＡ）测定乳汁孕酮（ＭＰ４）浓度。以发情第３天ＭＰ４浓度加上２倍标准差为未孕临界值的土限，以配后１８－２４天怀孕牛ＭＰ４浓度的平均值减去１倍标准差为怀孕临界值的下限。结果表明，奶牛ＭＰ４早孕诊断临界值为：≥７．１９ｎｇ／ｍｌ为怀孕，〈４．７２ｎｇ／ｍｌ为未     

奶牛奶中孕铜含量变化模式及其对繁殖率的影响

通过３３２头奶牛孕酮含量变化周期的分析,获得孕酮谷点超前、居中和滞后３种模式,其排卵对应有超前、适中和延缓３种。这３种模式的奶牛情期受胎率分别为１９．２％,６３．６％和４１．４％。奶牛配种后,怀孕和未孕对孕酮含量变化有影响：怀孕牛,配种后从孕酮谷点至第１４天孕酮含量有提高（Ｐ＜０．０５）,特别是第１４天提高更显著（Ｐ＜０．０１）;未孕牛,配种后除谷点处孕酮含量较一致外,其余各处平均值都下降（Ｐ＜０．０５）。     

奶牛妊娠早期血浆孕酮的变化规律

通过孕酮监测奶牛的繁殖状态在国内外已有20多年的历史,美国、英国和加拿大等畜牧业发达国家已应用相当普遍,并作为奶牛生产常规服务手段,在国内孕酮方面的研究相关报道也比较多,主要集中在乳汁孕酮方面,但是在孕酮变化水平和判定妊娠标准上不太一致。因此,本试验通过对妊娠牛和空怀牛不同时期的血浆孕酮的测定,为早孕妊娠诊断提供依据。现将试验结果报道如下。     

妊娠母猪尿雌酮水平以及作早期妊娠诊断

<正> 我们已研究了妊娠母猪外用血浆中硫酸雌酮(E_1S)含量,并以它为标准作早期妊娠诊断(未发表)。由于猪只采血比较困难,费人力,特别是妊娠母猪,还有可能因采血的应激反应导致流产,因此作为妊娠诊断手段在实际应用上有局限性,不象奶牛用乳汁中孕酮含量作妊娠诊断那样易于推广。     

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现：配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9～8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。     

奶牛乳汁孕酮免疫检测的方法

孕酮(P4)是奶牛和黄牛在发情周期(一般为21天)中由卵巢黄体中产生的激素,可以进入血液、乳汁和唾液中。在母牛配种后21～24天期间采集奶测定孕酮浓度,可以判断牛是否受孕。发情期间奶中孕酮浓度可判断奶牛是否处于发情期。临床上,孕酮