连续使用苏云金杆菌时蚊虫的敏感性测定

苏云金杆菌以色列变种(血清型H—14)(以下称苏云金杆菌H—14)对蚊幼虫有高度毒效,国内外已做了很多不同规模的现场试验,国外已有几种剂型的商品,具有较好的应用前景。由于苏云金杆菌H—14的毒性机制主要是蚊幼虫吞食本菌的伴孢晶体,这与感染性因子有所不同,而有些类似于化学杀虫剂。为了预测在连续使用的情况下,     

苏云金杆菌以色列变种与化学杀虫剂混用对淡色库蚊幼虫毒效初步观察

苏云金杆菌血清型14以色列变种(下称 B.T—H_(14)对多种蚊幼虫具有一定毒杀效果,被认为是目前最好的灭蚊幼生物制剂,在实践中,探讨化学杀虫剂与 B.t—H_(14)混合应用的问题,具有一定的实际意义。我们对该菌与几种化学杀虫剂混用的毒效,初步研究结果如下;     

苏芸金杆菌以色列变种对蚊幼虫的毒效及其影响因素的研究

苏芸金杆菌以色列变种Bacillus thuringiensis var. israelensis(简称B.t.i),对蚊幼虫具有较高的毒效,而对哺乳类动物和非靶生物是安全的。因此被认为是目前有实用前途的灭蚊幼虫制剂。我们就这一变种对不同蚊种幼虫的毒效差异及影响毒效的因素进行了实验观察,现将结果报道如下。     

三株产晶体芽孢杆菌的分离及对蚊幼虫的致病性

苏云金杆菌Bacillus thuringiensis早已作为一种微生物杀虫剂广泛地应用。我们从广州地区蚊幼虫孳生地的土壤中分离到三株产晶体的芽孢杆菌,属苏云金杆菌,代号分别为009、18—1、42—2。我们对其对蚊幼虫的致病性作了测定,并对这三个菌株的生理生化及鞭毛抗原特性作了分析,现将结果报道如下。材料与方法 (一)菌种来源 42—2,009,18—1从市郊蚊幼虫孳生地土壤中分离得到,参考菌株来源见表一。     

苏芸金杆菌以色列变种对脊椎动物的安全试验

苏芸金杆菌以色列变种Bacillus thuringiensis var.israelensis(以下简称B.t.i.)对蚊幼虫毒力强,杀虫效果好。世界卫生组织已向世界各国发起了进行B.t.i.杀虫效果、标准化及安全性试验的倡议。到目前为止,B.t.i.对动物的安全性试验,国外仅有某些方面的报道,国内尚未见有系统的报告。因此,进行这方面的试验研究有其实际意义。我们在开展B.t.i.灭蚊试验研究的基础上,进行了B:t.i.对脊椎动物的安全性试验,现将结果报道如下。     

B.t.杀虫剂的发展、问题及对策

一.B.t.杀虫剂的发展历史1901年日本细菌学家 S.Ishiwata 从患病的家蚕幼虫分离得到了一种芽孢杆菌,并在1905年发表的另一报告中称之为“猝倒芽孢杆菌”。但直到1911年 Berliner 从德国苏云金地区谷仓中的患病地中海粉螟幼虫上分离得到了另一株类似的细菌之后,1915才正式将此昆虫病原细菌命名为“苏云金杆菌”(Bacillus thuringiensis)。简称 B.t.。     

苏云金杆菌晶体蛋白基因在培育抗虫作物上的应用

苏云金杆菌Bacillus thuringiensic,简称B.t)。是10多个目500多种昆虫的病原细菌。其杀虫作用主要是晶体蛋白(也称δ—内毒素)在幼虫中肠酶液作用下溶解,活化而显示毒,引起中肠上皮细胞组织肿胀和破裂,致使昆虫死亡。长期以来,人们把B.t产品当作一种杀虫剂,直接施于作物上。直到70年代,基因工程脱颖而出,人们     

亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种对大蜡螟幼虫物质代谢的影响

本文研究了亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种(Bacillus thuringiensis galleriae)晶体蛋白对大蜡螟(Galleria mellonella)幼虫物质代谢的影响。结果表明,大蜡螟幼虫经亚致死剂量B.t.galleriae晶体蛋白处理后,中肠糖原、组蛋白及RNA的量均较正常幼虫减少。处理组幼虫整体匀浆物中可溶性蛋白质含量也较正常幼虫低。大蜡螟幼虫经B.t.galleriae晶体蛋白处理后中肠上皮细胞明显空泡化,并发生解体。     

一种有希望的微生物灭蚊剂(简报)

目前世界各国正在研究应用病原微生物防治蚊虫的可能性。1977年Goldberg从以色列蚊虫孳生的水塘泥土中分离出对蚊幼虫毒性高的杆状细菌。经对按蚊、伊蚊和库蚊等儿种蚊幼虫的毒力试验,其毒力比效果较好的球状杆菌(Bacillus sphaericus)大30～100倍。后经de Barjac(1978)鉴定为苏云金杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis     

粉纹夜蛾离体细胞对Bt Cry1Ac毒素的抗性发展及其交互抗性

以Cry1Ac活性毒素逐代筛选抗性粉纹夜蛾离体细胞BTI-TN-5B1,抗性发展速度呈S形曲线,经56代选择后,抗性比上升至1 280倍.在去除选择压力后,抗性比逐渐下降.低水平抗性细胞抗性衰退较快,而高水平抗性细胞抗性衰退较缓慢.抗性比衰退至1.5倍的细胞在复筛后抗性比恢复较快.抗性细胞对苏云金杆菌工程菌GC-91(Bt GC-91)、苏云金杆菌鲇泽亚种(B.t.awazai)和苏云金杆菌库斯塔克亚种(B.t.kurstaki)的复合毒素晶体的活性毒素都具有较高的交互抗性,但对农药无交互抗性,对杆状病毒的敏感性也没发生变化.     

生物农药防治双孢蘑菇菇蚊菇蝇效果初探——以苏云金杆菌以色列亚种为例

为指导双孢蘑菇菇蚊菇蝇的科学防治,保障农产品质量安全,采用室内培养与田间试验的方法,对生物农药苏云金杆菌以色列亚种开展室内生测试验与田间药效试验。室内生测试验表明,1 000ITU/mg苏云金杆菌(以色列亚种)对菌蛆(短脉异蚤蝇)的致死中浓度LC_(50)为7.314 8ITU/mg,田间药效试验结果表明,在菇蚊菇蝇发生严重的情况下,800ITU/mg苏云金杆菌(以色列亚种)悬浮剂500~1 000倍对菇蚊菇蝇的防效在59.4%~76.8%之间。从持效期和农药使用准则考虑,在生产中可选用800ITU/mg苏云金杆菌(以色列亚种)悬浮剂稀释500~1000倍液,在菇蚊菇蝇低龄幼虫盛发期喷雾使用。     

粉纹夜蛾离体细胞对Bt Cry1Ac毒素的抗性发展及其交互抗性

以CrylAc活性毒素逐代筛选抗性粉纹夜蛾离体细胞BTI-TN-5B1抗性发展速度呈S形曲线，经56代选择后，抗性比上升至1280倍。在去除选择压力后，抗性比逐渐下降。低水平抗性细胞抗性衰退较快，而高水平抗性细胞抗性衰退较缓慢。抗性比衰退至1．5倍的细胞在复筛后抗性比恢复较快。抗性细胞对苏云金杆菌工程菌GC-91(BtGC-91)、苏云金杆菌鲇泽亚种(B.t.atoazai)和苏云金杆菌库斯塔克亚种(B．t．kurstaki)的复合毒素晶体的活性毒素都具有较高的交互抗性，但对农药无交互抗性，对杆状病毒的敏感性也没发生变化。     

酶联免疫吸附测定法检测青虫菌工业产品中晶体蛋白的含量

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)的研究和应用在国内有很大进展。用于生物防治的青虫菌(B.t.subsp.galleriae)已进入工业化生产,其产品中伴孢晶体蛋白含量的检测方法在探索中。酶联免疫吸附测定法(ELISA),作为一项新兴的免疫化学技术,具有灵敏、精确、迅速的特点,已被用于苏云金杆菌晶体蛋的测定。     

球形芽孢杆菌杀蚊毒素的作用方式和蚊虫的抗性特征

球形芽孢杆菌（Bacillussphaericus）是一种对蚊幼虫有毒杀作用的好气芽孢杆菌。高毒力菌株在芽孢形成过程中能产生有51．4和41．9kDa蛋白组成的伴孢晶体。蚊幼虫取食芽孢／晶体混合物后,晶体蛋白被降解形成活性蛋白而结合到中肠上皮细胞的特异性结合位点上,最后导致蚊幼虫死亡;低毒力菌株和部分高毒力菌株在其营养体生长阶段可产生可溶性的100、30．5和38．5kDa的Mix毒素（Mtx1、Mtx2和Mix3）。该毒素同晶体毒素和其它杀虫毒素无同源性,其杀蚊作用机理不详。在实验室和野外长期高选择性压力下,蚊幼虫会通过中肠上皮细胞二元毒素特异性结合位点的改变而对球形芽孢杆菌产生不同水平的抗性,其抗性特性是由位于染色体上的单一隐性基因决定的。本文简述了球形芽孢杆菌的杀蚊毒素的作用方式及抗性蚊虫的抗性特性。     

两种鳞翅目幼虫对Bt敏感性的差异及其机理的探讨

本文用生物鉴定和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等方法研究了两种鳞翅目昆虫家蚕与菜粉蝶幼虫对４株苏云金杆菌的敏感性差异及其机理。生物鉴定结果表明菜粉蝶幼虫对Ｂｔ的敏感性比家蚕低。用两种昆虫的胃液体外活化伴孢晶体，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，菜粉蝶幼虫胃液对伴孢晶体的活化能力低，不能将无杀虫活性的原毒素在短时间内转化为毒性肽。将伴孢晶体称经家蚕胃液化再饲喂菜粉蝶幼虫，同样条件下死亡率提高３－５倍。当菜粉蝶幼虫胃液的ｐ     

化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响

研究了7种常用化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响及作用,结果表明,常用浓度下,2.5%溴氰菊酯乳油、48%毒死蜱乳油对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体无影响,可与苏云金杆菌制剂事先做成混剂;4.5%高效氯氰菊酯乳油、2.5%高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威和40%辛硫磷在短时期内对芽孢及伴胞晶体无明显影响,可与苏云金杆菌制剂现混现用;80%敌敌畏乳油(500倍稀释)对苏云金杆菌伴胞晶体有明显损伤作用,不宜与苏云金杆菌制剂混合使用。     

苏云金杆菌芽孢与晶体不同配比对亚洲玉米螟的毒效

苏云金杆菌3个变种的芽孢与晶体按重量百分比混合,以亚洲玉米螟1龄和2龄幼虫测定毒力。对1龄幼虫主要致病因素是晶体。对2龄幼虫,“HD—1”以晶体为主;SB—14菌株当芽孢与晶体1:1时,杀虫效果最好;E743—4菌株以芽孢为主。     

目前 B.t.生产和使用的一些问题

B.t.即苏云金杆菌,是一种微生物农药.主要用于防治鳞翅日幼虫.由于它对人畜低毒、对作物害虫的天敌安全,所以逐渐受到人们的重视。在当前棉铃虫日益猖獗、对化学农药抗药性日趋严重的形势下,B.t.在对一、二代棉铃虫的防治和缓解抗性产生方面起了一定的积极作用.农业生产对 B.t.需求量的增加使其产量大幅度提高.B.t 制剂年产量由1990年的3000吨猛增到去年的1万吨,今年预计将达到3～4万吨。B.t.生产单位也由80年代初的几家增到今年的70多家(其中仅30家办理农药登记),可以说我国 B.t.生产出现了“过热”现象.     

球形芽孢杆菌在死蚊幼体内的再循环及其对持效期的影响

球形芽孢杆菌Ｃ３┐４１杀蚊幼实验制剂对３～４龄致倦库蚊和大劣按蚊幼虫有较强的毒性,其４８小时的ＬＣ５０值分别为０．００７９５和０．９８５００ｍｇ／Ｌ。蚊幼虫死亡后,球形芽孢杆菌芽孢能在死蚊幼体内正常萌发、繁殖和发育,并产生有杀蚊活性的芽孢和晶体混合物。在含有死蚊幼虫的处理组,两种蚊幼虫的死亡率２０天内一直维持在９５％以上;在无死蚊幼的对照组,大劣按蚊幼虫１４天后的死亡率下降为０,致倦库蚊幼虫２０天后的死亡率下降到１０％以下。证明经球形芽孢杆菌处理致死的蚊幼尸体可以延长制剂在水体中的持效期     

苏云金杆菌10亚种的质粒DNA图谱分析和杀蚊晶体毒素蛋白基因在质粒上的定位

对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称B.t.)血清型H_1-H_9和H_(14)10个亚种的12个菌株质粒DNA图谱作了琼脂糖凝胶电泳分析。质粒DNA分子量在3.3～150MD之间,其中苏云金亚种(B.t.subsp.thuringiensis)HD-2菌株、戈尔斯德亚种(subsp.kurstaki)HD-1菌株和鲇泽亚种(subsp.aizawai)含有质粒10个;以色列亚种(subsp.israelensis)质粒6个;苏云金亚种berliner菌株和莫里逊亚种(subsp.morrisoni)质粒6个;质粒5个的有戈尔斯德亚种的HD-73菌株和多窝亚种(subsp.tolworthi);猝倒亚种(Subsp.sotto)和有蜡螟亚种(subsp.galleriae)分别有3和4个;而幕虫亚种(subsp.finitimus)和亚毒亚种(subsp.subtoxicus)有质粒2个。以色列和莫里逊亚种编码的杀蚊毒素蛋白基因分别定位于75MD和98MD的质粒上,它们与苏云金杆菌PG-14的cryIVD基因的同源性大于85％。