鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

鸽新城疫病毒野毒PB9601株的致病性研究

用不同方法测试了从新城疫患鸽分离到的新城疫病毒（ＮＤＶ）野毒ＰＢ９６０１株的致病性。结果,该毒株对１日龄ＳＰＦ雏鸡的脑内接种致病指数为２．００,对６周龄ＳＰＦ鸡静脉接种致病指数为０．００;该毒株对６周龄左右鸽有很强的致病性,有的血清中已有一定量的抗鸽ＮＤＶ抗体;经ＳＰＦ鸡胚传１３代的尿囊液病毒对鸽的半数致死量约为１２个ＴＣＩＤ５０。由此认为,ＰＢ９６０１株ＮＤＶ是对鸡致病性很弱但对鸽呈高度致病性的毒株,可作为国内鸽ＮＤＶ强毒的参考株。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联油乳剂灭活疫苗研制及应用

用新城疫病毒（ Ｎ Ｄ Ｖ） Ｌａ Ｓｏｔａ 株、鸡传染性支气管炎病毒 （ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｍ４ １ 株接种鸡胚, 收获含毒鸡胚尿液。用传染性法氏囊病病毒 （ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ） 地方强毒 Ｈ Ｂ９ ０ ９ 株接种３０ ～４０ 日龄肉用鸡, 发病后取囊组织 （ 或收集 Ｉ Ｂ Ｄ 典型发病鸡囊组织） 制备成含毒组织悬液。将三种病毒液按一定比例混合, 制备成三联油乳剂灭活苗。三联苗免疫１８ 日～２８ 日龄雏鸡, 免疫后２１ 天攻毒测保护力, 三种传染病保护率均在９０ ％ ～１００ ％ , Ｎ Ｄ Ｈ Ｉ抗体≥１∶３２ , Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ Ａ Ｇ Ｐ阳性率１００ ％ , Ｉ Ｂ Ｖ Ｎ 抗体≥１∶８ , 疫苗免疫期可达４ 个月以上。疫苗在４ ℃～８ ℃保存期为１８ 个月, １０ ℃～２０ ℃保存为６ 个月, 该疫苗在全省不同地区、不同品种鸡应用１５ 万羽份, 取得理想免疫效果。     

对几种血清I型鸡鸡马立克氏病疫苗的比较性评估

本文比较了４种血清Ｉ型马立克氏病（ＭＤ）单价弱毒疫苗其及其与血清ＩＩ型和ＩＩＩ型病毒混合多价疫苗在安全性及效力方面的差异,以０．２ｍｌ的剂量皮下接种１日龄母源抗体阳性的雏鸡。接种后５天,所有的疫苗接种鸡及时对照鸡都用ＭＤ强毒株－Ｍｄ－５或ＲＢ１／Ｂ株攻毒。血清Ｉ型单价疫苗的保护指数由５６至８０以上不等。Ｉ型毒＋ＨＶＴ（ＩＩＩ型）疫苗的保护指数亦有很大的提高。用ＨＶＴ＋ＳＢ－１或ＨＶＴ＋３０１Ｂ／１     

鸽新城疫病毒的分离及其生物学特性测定

用ＳＰＦ鸡胚从疑似鸽新城疫（鸽ＮＤ）病鸽群中分离到一株病毒ＱＬ株,该病毒株能凝集鸡红细胞（ＲＢＣ）,这种凝集作用能被抗新城疫病毒（ＮＤＶ）阳性血清抑制;用抗ＮＤＶ单抗ＰＥＧ夹心ＥＬＩＳＡ测定分离株为阳性。分离株经肌肉注射能使鸽发病和死亡,出现与自然发病鸽一致的症状和病变,但肌注ＳＰＦ鸡只感染,不见临床症状。对该分离株作进一步生物学特性鉴定,按照国际上规定的ＮＤＶ毒力判定标准,测定了该毒株最低致死量致死鸡胚的平均死亡时间（ＭＤＴ）、１日龄雏鸡脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄雏鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）,结果ＭＤＴ为１０５小时、ＩＣＰＩ为１．３３、ＩＶＰＩ为１．０。试验结果表明本分离株为鸽新城疫病毒。     

鸡新城疫,减蛋综合征和肾型传染性支气管炎三联油乳剂灭活苗的研制和 …

采用Ｌａｓｏｔａ种毒和ＮＩＢＶ同胚接种，ＥＤＳ－７６种毒鸭胚培养的方法研制了ＮＤ－ＥＤＳ－７６－ＮＩＢＯＥＶ，并依据有关标准进行了安检和效检试验，３０日龄雏鸡接苗１毫升／只，临床无不良反应；接苗０．０２毫升／只，２１天后ＮＤ攻毒保护率为１００％，接苗０．２毫升／只，２１天后ＮＩＢ攻毒保护率为８０％，接种０．５毫升／只，２天天后采血测ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体ＧＭＴ为２２２．８试验结果表明本疫苗安全，有效     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅲ）

用同胚培养的含ＮＤＶ、ＩＢＶ胚液制备的二联油乳剂灭活苗，经免疫效力试验表明，用５０倍稀释的鸡二联灭活苗，０．５ｍｌ／只剂量免疫１８日龄鸡，４周后试验免疫鸡分别进行ＮＤＶ、ＩＢＶ强毒攻击，攻毒保护率在５０％以上，证明０．５ｍｌ剂量含有５０个半数保护量（５０个ＰＤ５０），ＮＤＨＩ抗体≥１：１６，ＩＢＶＮ抗体≥１：８便可保护。三批疫苗免疫１８日龄鸡，０．５ｍｌ／只组免疫鸡体现人有效抗体可维持１６周以上，     

鸡肾型传染性支气管炎病毒弱毒株的选育

从南京地区分离的肾病变型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）经ＳＰＦ鸡胚连续传代至６５代时,对雏鸡无致病性,命名为ＩＢＶ－ＡＴ６５,感染鸡胚的ＥＩＫ５０为１０＾－７．６６/０．２mＬ,鸡胚于接种后５１h开始死亡,存活鸡胚表现为发育受阻、卷缩,肾脏有尿酸盐沉积,其尿囊液对１％鸡红细胞凝集反应为阴性。用ＡＴ６５原液０．２mＬ分别于气 管内接种１０日龄ＡＡ鸡（攻毒前经血凝抑制试验检测ＩＢＶ抗体为阴性）,以及攻毒后将     

鸡对传染性法氏囊病病毒强毒株的易感性试验

无病传染性法氏囊病的病毒（ＨＢＤＶ）母源抗体不同日龄的鸡,经人工感染强主ＨＢＤＶ,按法氏囊肉眼眼病变判断,３周龄的鸡不易感,而４周龄￣１０周龄的鸡都易感,不管ＳＰＦ欢度呈是普通鸡,对强毒ＢＤＶ的易感性,主要取决于其日龄。     

雏鸡新城疫母源抗体保护力及Clone—30弱毒疫苗点眼免疫效果观察试验

本试验对不同日龄,不同新城疫母源抗体水平的艾维茵商品肉鸡进行了新城疫（ＮＤ）攻毒,同时对经Ｃｌｏｎｅ－３０弱毒疫苗１次点眼免疫后的鸡只攻毒,并对每只鸡的抗体水平作跟踪监测,结果表明,非经免疫的,１０日龄以内的雏鸡,只有在母源抗体水平很高（ＮＤ－ＨＩ效价〉６Ｌｏｇ２）的情况下才能抵抗瓣城疫强毒的攻击,母源抗体较低的鸡只（抗体效价≤６Ｌｏｇ２）大多数不能抵抗新城疫强毒的攻击,雏鸡经Ｃｌｏｎｅ－３０弱毒     

带母源抗体的青年鸡皮下接种传染性法氏囊病活疫苗的效果

在１日龄和３周龄鸡的脾粘着（ＣＳＡ）细胞中，检测到了被正常鸡血清（ＮＣＳ）中和过的传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）的感染性，有３周龄鸡的（ＣＳＡ）细胞中，检测到了被母源抗体（ＭＮ－Ａｂ）中和过的ＩＢＤＶ的感染性。此外，发现１日龄鸡制备的ＣＳＡ细胞含有补体受体（ＣＲ），１周龄鸡制备的ＣＳＡ细胞既含有ＣＲ又有Ｆｃ受体（ＦｃＲ）。然而，即使ＣＳＡ细胞上的ＦｃＲ被热凝集ＮＣＳ（５６℃，６０分钟）阻断的情况下，     

新城疫V4株弱毒变种的选育

应用有限稀释法通过ＳＰＦ鸡胚传代，从新城疫Ｖ２弱毒中克隆出一个变各，即２０代以后的继代毒，命名为新城疫Ｖ４克隆２０弱毒株，（ＮＤ－Ｖ４Ｃ２０）。毒以１０＾－１－１０＾１３×０．１ｍｌ接种１０日龄ＳＰＦ鸡胚尿囊腔１５０小时内，鸡胚极少死亡。每个滴度５个胚有尿液均可凝集鸡红血球。第１０代和第２０代的每个滴度５个胚有的混合尿液以１０＾－６×０．５ｍｌ一次饮水免疫鸡，即能引起ＨＩ抗体反应，也能抵抗新城疫强     

新城疫鸡胚免疫的研究

本文应用鸡新城疫（ＮＤ）Ⅱ系和Ｖ４弱毒疫苗分别气室接种不同孵化日龄鸡胚,出雏后计算其孵化率并在不同日龄测定血清ＨＩ抗体效价,结果表明,ＮＤⅡ系和Ｖ４疫苗１∶１０稀释,于１８、１９胚龄气室接种,对孵化率无显著影响（Ｐ＞００５）,两种疫苗间也无明显差异（Ｐ＞００５）,均能产生良好的免疫保护力。     

灭活苗接种部位对鸡免疫应答的影响

笼养商品蛋鸡在２、５和９周龄时喷雾免疫新成疫－传染性支气管炎（ＮＤ／ＩＢ）二联弱毒苗作为基础免疫，１６周龄时，在胸，翼，腿部肌肉或颈背部皮下接种ＮＤ／ＩＢ二联灭活苗，实验鸡接种前及接种后每隔８周用ＥＬＳＩＡ二联灭活苗。实验鸡接种前及接种后每隔８周用ＥＬＩＳＡ检测ＮＤＶ和ＩＢＶ特异性血清抗体直至４８周龄，皮下或翼部肌肉免疫接种后，１６周产生较高的ＮＤ特异性抗体；然而，由于接种前的基础免疫在这些组之间     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。     

雏鸡新城疫母源抗体保护力及Clone-30弱毒疫苗点眼免疫效果观察试验

本试验对不同日龄、不同新城疫母源抗体水平的艾维茵商品肉鸡进行新城疫（ＮＤ）攻毒,同时对经Ｃｌｏｎｅ－３０弱毒疫苗１次点眼免疫后的鸡只攻毒,并对每只鸡的抗体水平作跟踪监测。结果表明,非经免疫的、１０日龄以内的雏鸡,只有在母源抗体水平很高（ＮＤ－ＨＩ效价＞６Ｌｏｇ２）的情况下才能抵抗新城疫强毒的攻击;母源抗体较低的鸡只（抗体效价６Ｌｏｇ２）大多数不能抵抗新城疫强毒的攻击。雏鸡经Ｃｌｏｎｅ－３０弱毒疫苗点眼免疫１周后,尽管其体液抗体水平很低,但在一定时期内可获得较好的保护力。     

鸡新城疫油乳剂灭活疫苗的免疫效力试验

对本室研制的鸡新城疫油乳剂灭活疫苗（ＮＤ－ＯＥＶ）的免疫效果进行了实验室与田间试验评价，并与美国同类疫苗进行了对比。结果表明，自制ＮＤ－ＯＥＶ与Ｌａ Ｓｏｔａ系弱毒疫苗同时接种雏鸡后，可生产高水平的抗体，且抗体维持时间长，能很好地抵抗ＮＤＶ强毒的攻击；在抗体水平与持续时间和抵御强毒方面均优于美国进口的ＮＤ－ＯＥＶ；接种雏鸡后，可使原有抗体水平相差悬殊的鸡群产生高效价、较为整齐的抗体；免疫成年鸡后６     

蛋鸡非典型新城疫一例及其病原鉴定

１９９７年３月下旬，上海市郊区某蛋鸡场发生以产蛋下降为第一指征的非典型新城疫，通过临诊调查、抗体测定、病毒分离与鉴定进行了确诊。结果：感染鸡群产蛋下降的幅度可高达５０％；新城疫ＨＩ抗体滴度高达１２ｌｏｇ２或以上；用泄殖腔棉拭接种鸡胚的分离物用标准血清鉴定为新城疫病毒（ＮＤＶ），初代尿囊液的ＥＬＤ５０为１０－７．５（０．２ｍＬ），１日龄ＳＰＦ鸡胚脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄ＳＰＦ鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）分别为１．７２５和２．３２，其毒力接近标准毒株—ＮＤＶ北京株Ｆ４８Ｅ９。     

鸡新城疫,传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（I报）：NDV,…

本研究根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二种病毒能在鸡胚中繁殖的特点，通过筛选上述二种病毒的最适稀释比例，将混合毒种接种９～１０日龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养）使接种鸡胚尿囊液９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，每０．１ｍｌ尿素液含ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０，ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。本试验用兔抗ＮＤＶ，ＩＢＶ血清抗体封闭相应病毒测定混合毒获得成功，本研究目的在于为制备鸡二联油乳灭活功时改进繁毒方法，降低疫苗成本。     

鉴别新城疫病毒弱毒株的抗多肽抗体制备

针对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）弱毒株Ｆ蛋白前体（Ｆ０）Ｆ２片段的特异结构,人工合成特异性多肽,将多肽与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）化学偶联制和轩成全抗原后免疫小鼠,制备抗多肽血清。经ＥＬＩＳＡ检测,该抗体与ＭＤＶ弱毒株呈阳性反应,而与鸡痘病毒（ＦＰＶ）,鸡传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）,ＭＤＶ强毒Ｆ４８Ｅ８株和四平析呈阴性反应,试验结果证明该抗体可以用于鉴别ＮＤＶ弱毒株。