携带人血清白蛋白cDNA的逆转录病毒质粒载体的构建

采用粘平端定向基因克隆技术,成功地构建了携带ＨＳＡｃＤＮＡ基因片段的重组逆转录病毒质粒载体ＧＩＮＨＳＡａ。经限制性酶切鉴定和菌落原位杂交证明ＨＳＡｃＤＮＡ已克隆到Ｇ１Ｎａ当中并得到９个重组病毒质粒载体阳性克隆。     

表面活性剂类型对超氧化物歧化酶活力的影响研究

本文研究了阴离子Ｃ１２Ｈ２５ＳＯ４Ｎａ（Ｃ１２Ｓ），Ｃ１２Ｈ２５（ＯＣ２Ｈ４）７ＳＯ４Ｎａ（Ｃ１２Ｅ７Ｓ），阳离子Ｃ１２Ｈ２５ＮＣ（ＣＨ３）３·Ｂｒ（Ｃ１２ＮＭｅ３）和非离子Ｃ８Ｈ１７Ｃ６Ｈ４（ＯＣ２Ｈ４）１０ＯＨ（Ｔｘ－１００）表面活性剂对超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力的影响以及变性后的复性。结果表明，Ｃ１２Ｅ７Ｓ和Ｔｘ－１００对ＳＯＤ的活力几乎无破坏，Ｃ１２Ｓ对ＳＯＤ只具有一定的破坏性，Ｃ１２ＮＭｅ３对ＳＯＤ具有较强的变性能力     

不同染色体组小麦种叶片光合功能衰退的生理原因研究

不同小麦种旗叶的光合功能期以野生一粒小麦最短,粗山羊草次之,普通小麦扬麦１５８最长。反映光合机构“光碳”运转平衡状况的ＲｊＢＰｃａｓｅ活性／ＰＳＩ,ＰＳⅡ活性比值以ＡＡＢＢＤＤ明显高于ＤＤ,ＤＤ又高于ＡＡ。在叶片老化期间尤其中后期,ＡＡＢＢＤＤ具有相对高的ＳＯＤ,ＣＡＴ活性,低的Ｏ＾＿２产生速率和Ｈ２Ｏ２含量;而ＤＤ,尤其ＡＡ的ＳＯＤ,ＣＡＴ活性较低,Ｏ＾－２产生速率和Ｈ２Ｏ２含量较高。     

不同方法提取鸡血清IgG及纯度鉴定

本文用Ｎａ_２ＳＯ_４和（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４两种盐沉淀鸡血清ｒ－球蛋白，再经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００柱和ＤＥＡＥ－３２柱进一步纯化，将获得的ＩｇＧ利用免疫电泳和聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＧＥ）电泳进行纯度鉴定，结果表明：在本试验条件下，盐析方法获得的ｒ－球蛋白经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００柱分离获得高纯度的鸡ＩｇＧ，ＤＥＡＥ－３２柱经０．１ＭＰＢＳ（ＰＨ７．４）洗脱，２ＭＮａＣｌ解离获得的ＩｇＧ纯度较差。     

Fenridazon—K产品流动相离子色谱分析方法研究

建立了一个Ｆｅｎｒｉｄａｚｏｎ－Ｋ流动相离子色谱分析方法。用Ｄｉｏｎｅｘ ｓｅｒｉｅｓ ４０００ｉ离子色谱仪，ＭＰＩＣ－ＮＳＩ分离柱，ＡＭＭＳ－ＭＰＩＣ抑制柱和电导检测器，分别以ＮＨ３．Ｈ２Ｏ，ＴＭＡＯＨ，ＴＥＡＯＨ和ＴＢＡＯＨ为离子对试剂，ＣＨ３ＣＮ为有机改性剂，对Ｆｅｎｒｉｄａｚｏｎ－Ｋ皆可获得符合残留分析检测水平的灵敏度，最小检出量２－５ｎｇ，在２ｎｇ－１０μｇ范围内线性关系良好。据此建立了     

肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白基因快速克隆和鉴定

以提纯的肠炎沙门氏菌染色体ＤＮＡ为材料,在一对含有ＣＵＡＣＵＡＣＵＡＣＵＡ的特殊引物引导下,应用ＰＣＲ扩增出鞭毛蛋白基因ｆｌｉＣｇ．ｍ,允１．８ｋｂ左右大小,然后以ＵＤＧ法快速克隆到质粒,ｐＡＭＰ１０中,转化第１宿主大肠杆菌ＴＧ１或大肠杆菌ＤＨ５ａ,在氨苄青霉素平板上筛选转化子,小量制备重组质粒ＤＮＡ,再转入第２宿主大肠杆菌ＬＣ－２ａ（ｈａｇ－,ｒｅｃＡ－）,所有转化子均出现动力。其中的一个克隆ｐ     

预处理对高铁土壤颗粒分析结果的影响

不同预处理方法对高铁土壤颗粒分散能力，表现为ＤＣＢ处理－ＮａＯＨ超声波分散〉草酸铵处理－ＮａＯＨ超声波分散〉ＮａＯＨ－Ｎａ２Ｃ２Ｏ４超声波分散〉ＮａＯＨ超声波分散〉ＮａＯＨ煮沸法分散。高铁土壤中，由于氧化铁的强胶结作用，使部分团聚体很难用ＮａＯＨ超声波分散；用ＮａＯＨ超声波分散获得的各类级中都包含较小的土壤颗粒。所用５种分散方法对低铁酸性土壤的分散效果基本相似。用常规方法分散高铁土壤，测得的细颗粒     

CaCl2,AsA和GSH对冷害低温下茄子果实氧化胁迫的抑制作用

ＣａＣｌ２（２％）处理可显著提高冷害低温（２℃）下茄子果实组织中ＳＯＤ和ＣＡＴ活性（Ｐ＜０．０１），延缓ＰＯＤ活性高峰的出现，降低ＭＤＡ含量（Ｐ＜０．０１），并明显减轻了果实冷害的程度；ＡｓＡ和ＧＳＨ处理可提高ＣＡＴ活性，降低ＰＯＤ活性和ＭＤＡ含量（Ｐ＜０．０５），但对ＳＯＤ活性无显著影响，对果实冷害的抑制效果也不如ＣａＣｌ２处理明显。结果表明：ＣａＣｌ２及ＡｓＡ和ＧＳＨ对茄子果实冷害的抑制作用与其提高了组织的抗氧化胁迫能力有关。     

鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究：鸭乙型肝炎病毒表面抗…

应用氯化铯密度梯度离心技术，结合Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验，３２Ｐ标记的鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）ＤＮＡ探针进行斑点杂交试验，从ＤＨＢＶ阳性的的启东鸭血清中分离得到高纯度的ＤＨＢｓＡｇ颗粒，直径范围４０－６０ｎｍ，在ＣｓＣｌ溶液中的浮密度为１．１５ｋｇ／Ｌ大多数呈１０ｎｍ厚的密心结构，形态不规则，近似球形，部分颗粒表面有凹陷结构，少数颗粒表面出现缺刻。以纯化的ＤＨＢｓＡｇ免疫新西兰大白兔，制备了高度特     

用电导仪测定植物组织呼吸速率

Ｂａ（ＯＨ）２溶液在０．０００５～０．００４５Ｎ范围内、浓度（Ｎ）和电导率（μΩ－１成直线相关ｒ＝０．９６２１５３＊＊。根据Ｂａ（ＯＨ）２＋ＣＯ２→ＢａＣＯ３↓＋Ｈ２Ｏ这一当量反应，植物组织呼吸释放的ＣＯ２量，可由Ｂａ（ＯＨ）２待测液下降的电导率显示，用此电导率查Ｂａ（ＯＨ）２标准曲线浓度，可计算出呼吸速率ＣＯ２ｍｇ／ｇ·ｈ。     

砷化镓和其它砷化物对大豆种子萌发和异柠檬酸裂解酶（ICL）及超氧物歧化酶（SOD）活性的影响

以砷化物为污染源，研究砷对大豆种子萌发及生理活性物质的影响，结果表明：砷化镓（ＧａＡｓ）和砷酸钠（Ｎａ＿３ＡｓＯ＿３三价砷和Ｎａ＿２ＨＡｓＯ＿４五价砷）对大豆种子萌发的影响，在五价砷（ＧａＡｓ和Ｎａ＿２ＨＡｓＯ＿４）１－５ｍｇ／Ｌ，三价砷０．１－１ｍｇ／Ｌ对大豆萌发有促进作用，随着浓度提高，发芽率有所下降；五价砷５０ｍｇ／Ｌ和三价砷１０ｍｇ／Ｌ显著受抑制；五价砷５００ｍｇ／Ｌ和三价砷１００ｍｇ／Ｌ种子萌发完全受抑制，砷化镓与五价砷相类同，砷对异柠檬酸裂解酶（ＩＣＬ）和超氧物岐化酶（ＳＯＤ）活性的影响与发芽能力呈正相关，三价砷对ＩＣＬ和ＳＯＤ的致钝作用大于五价砷２．５倍，五价砷Ｎａ＿２ＨＡｓＯ＿４大于ＧａＡｓ。     

从重组人Bcl—2质粒中制备pBluescriptⅡKS（—）载体

目的：从重组人Ｂｃｌ－２质粒中制备对基因重组和ＤＮＡ测序等有用的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。方法：先将重组人Ｂｃｌ－２质粒转化ＤＨ５α菌株,小规模制备此质粒ＤＮＡ,然后从低熔点琼脂糖凝胶中回收其中用ＥｃｏＲ Ⅰ酶切的线性ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体,用Ｔ４ＤＮＡ连接酶催化连接并再次转化ＤＨ５α细菌,并用限制酶切鉴定,最后进行冻存和大量制备及纯化。结果：限制酶切分析证明两次转化     

辽东半岛滨海盐土脱盐过程中pH上升及碱化问题探讨

对鸭绿江口和辽河口滨海盐土脱盐过程的分析研究结果表明：不同母质的盐土脱盐,随着含盐量的下降,Ｎａ＾＋、Ｃｌ＾－、ＳＯ４＾（２－）、Ｍｇ＾（２＋）、Ｃａ＾（２＋）、Ｋ＾＋的绝对含量都逐渐减少,ＨＣＯ３＾－逐渐增加;ＣＬ＾－ＮＡ＾＋的相对含量逐渐下降,而ＳＯ４＾（２－）、Ｍｇ＾（２＋）、Ｋ＾＋特别是Ｃａ＾（２＋）、ＨＣＯ３＾－的相对含量增加。由于各离子的迁移能力不同,导致土壤的盐分化学类型由Ｃｌ－Ｎａ     

牛生长激cDNA的表达与检测

利用低融点琼脂糖凝胶电泳，回收牛生长激素ｃＤＮＡ全序列，克隆于原核表达载体ＰＴ７７－７中Ｔ７启动子下游，转化大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α，经分离，酶切分析，获得６个牛生长有质粒ＰＴＧＨ１－６，选取其中两质粒ＰＴＧＨ１１－２，转化Ｅ．ｃｏｌｉＫ８３＝ｐＧ１－２，４２℃诱导３０ｍｉｎ，收集，破裂菌体，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测，于２２ＫＤ处有一特异性蛋白带，经ＳｈａｍａｄｚｕＣＳ９３０扫描测定，其表达量     

不同类型表面活性剂对肌酸激酶活力影响研究

本文系统地研究了阴离子Ｃ１２Ｈ２５ＳＯ４Ｎａ（Ｃ１２Ｓ），Ｃ１２Ｈ２５（ＯＣ２Ｈ４）７ＳＯ４Ｎａ（Ｃ１２Ｅ７Ｓ）、阳离子Ｃ１２Ｈ２５Ｎ（ＣＨ３）３．Ｂｒ（Ｃ１２ＮＭｅ３）和非离子Ｃ８Ｈ１７．Ｃ６Ｈ４．（ＯＣ２Ｈ４）１０ＯＨ（ＴＸ－１００）表面活性剂对肌酸激酶（Ｃ．Ｋ．）活力的影响以及变性后的复性，结果表明，Ｃ１２Ｅ７Ｓ和Ｔｘ－１００对Ｃ．Ｋ．的活力破坏较小，Ｃ．Ｋ．经Ｃ１２Ｅ７Ｓ和ＴＸ－１００变性     

预处理对高铁土壤颗粒分析结果的影响

不同预处理方法对高铁土壤颗粒分散能力，表现为ＤＣＢ处理－ＮａＯＨ超声波分散＞草酸铵处理－ＮａＯＨ超声波分散＞ＮａＯＨ＋Ｎａ＿２Ｃ＿２Ｏ＿４超声波分散＞ＮａＯＨ超声波分散＞ＮａＯＨ煮沸法分散。高铁土壤中，由于氧化铁的强胶结作用，使部分团聚体很难用ＮａＯＨ超声波分散；用ＮａＯＨ超声波分散获得的各粒级中都包含较小的土壤颗粒。所用５种分散方法对低铁酸性土壤的分散效果基本相似。用常规方法分散高铁土壤，测得的细颗粒（特别是粘粒）含量偏低。     

生物样品中铁、锰、锌，铜快速分光光度测定法的研究

基于用ＨＮＯ３－ＨＣｌＯ４法消化样品、用２．２’－联吡啶法测定铁、用５－Ｂｒ－ＰＡＤＡＰ法测定锰、用Ｚｎ（ＨＤ２）２一次萃取混色法测定锌、用ＣＵ（ＤＤＴＣ）２一次萃取法测定铜，建立了测定生物样品中铁、锰、铜的快速分光光度法。不计样品消化时间，一次测定一般２～３ｈ即可完成。     

提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法

该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰。ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析。     

从重组人Bcl-2质粒中制备pBluescript Ⅱ KS(-)载体

目的：从重组人Ｂｃｌ－２质粒中制备对基因重组和ＤＮＡ测序等有用的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。方法：先将重组人Ｂｃ１－２质粒转化ＤＨ５α菌株,小规模制备此质粒ＤＮＡ,然后从低熔点琼脂糖凝胶中回收其中用ＥｃｏＲⅠ酶切的线性ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体,用Ｔ４ＤＮＡ连接酶催化连接并再次转化ＤＨ５α细菌,并用限制酶切鉴定,最后进行冻存和大量制备及纯化。结果：限制酶切分析证明两次转化的细菌分别是含重组人Ｂｃｌ－２质粒和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体的工程菌。实验还大量制备了这两种质粒或载体ＤＮＡ,并用聚乙二醇沉淀法进行了纯化。结论：利用分子生物学技术成功地从重组人Ｂｃｌ－２质粒制备出ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。     

家蚕核多角体病毒Lef—1和DA26基因的克隆及部分序列分析

ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因分别位于ｅｇｔ基因的上游和下游．从ｐＵＡｃ－ｅｇｔ中分离出ＥｃｏＲＩ－ＸｂａＩ１．１ｋｂ的ｅｇｔ基因片段，进行缺口平移标记，获得探针。与ＢｍＮＰＶＤＮＡ经ＨｉｎｄⅢ酶切、电泳、转移至ＮＣ膜的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，发现ＢｍＮＰＶＤＮＡ的ＨｉｎｄⅢＤ片段呈阳性。从ＢｍＮＰＶ基因组中分离出１０．４ｋｂ的ＨｉｎｄⅢＤ片段，用ＥｃｏＲＩ酶切得到ＨｉｎｄⅢ－ＥｃｏＲＩ２．２ｋｂ、ＥｃｏＲＩ１．４ｋｂ和ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ６．８ｋｂ３个片段，分别克隆于ｐＵＣ１９中，命名为ｐＵＨＥ２．２、ｐＵＥ１．４和ｐＵＥＨ６．８。经双链测序并与ＡｃＮＰＶ相关基因序列进行比较，发现ｌｅｆ－１基因被克隆于ｐＵＨＥ２．２中，ＤＡ２６基因克隆于ｐＵＥＨ６．８中。从所测定的ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因的启动子及５＇端部分序列来看，它们在ＡｃＮＰＶ和ＢｍＮＰＶ之间有极高的同源性。