烟草BY-2细胞和蚕豆叶肉细胞原生质体微丝骨架及latrunculin B处理对其分布的影响

用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀网络结构;共聚焦显微成像显示了随latrunculin B处理时间的延长微丝解聚和微丝骨架分布的动态过程.建立原生质体制备、微丝骨架荧光染色、latrunculin B处理及激光共聚焦显微观察的实验体系为进一步研究植物微丝骨架的功能奠定了基础.     

油杉花粉发育进程的共聚焦显微镜观察

油杉为我国特有易危树种.为探究油杉花粉发育过程,其花粉样品经荧光染料曙红和Hoechst 33342双染并以冬青油透明后,在激光扫描共聚焦显微镜下观察.结果表明:单核小孢子经过连续4次有丝分裂后形成5-细胞型花粉粒,成熟花粉由2个退化的原叶细胞、1个精原细胞(体细胞)、1个不育细胞(柄细胞)和1个管细胞组成.应用激光扫描共聚焦显微术结合荧光染色技术能更清晰地显示出油杉花粉发育过程中的核相变化,观察效果远较常规的醋酸洋红染色法理想.此技术可用于其他花粉发育阶段的鉴定.      

激光共聚焦显微镜的样品前处理技术研究

激光共聚焦显微镜是近代生物医学图像应用中最重要的仪器之一,在定量共聚焦图像分析、定量荧光测量、三维重组分析生物结构等方面具有重要的作用.该研究主要介绍了实验室中最常用的激光共聚焦显微镜的几种样品前处理技术,即FM4-64染色法、BFA处理、双分子荧光互补技术（BiFC）等,同时介绍这些方法的原理、使用范围以及在相关领域中的应用情况等,以期更好地将激光共聚焦显微镜技术应用于科研实践中.     

激光共聚焦扫描显微镜技术简介及其应用

激光共聚焦显微镜(共聚焦显微镜)是在生物学研究中最通用的荧光显微镜工具之一。它的广泛流行是因为其优越的光学切片和3维(3D)重建功能。不同于普通显微镜观测厚样本时由于被聚焦外光线干扰导致模糊图像,激光共聚焦显微镜可以从比较厚的生物样本在短期内获得清晰的光学切片。激光共聚焦显微镜所得到的一幅完全对齐的3D图像系列允许对样本在虚拟空间的任意角度观测。该技术越来越成为现代生命科学研究中必不可少的一项研究工具。本文的目的是为研究生和青年研究人员提供一些使用激光共聚焦显微镜的基础知识并对它的应用做简单的介绍。     

激光扫描共聚焦显微镜在园艺植物研究中的应用

综述了激光共聚焦显微镜的原理以及激光扫描共聚焦显微镜技术在园艺植物细胞学、植物荧光方面、发育生物学和遗传学的应用研究进展,并对其在园艺植物研究中的应用前景进行了展望。     

激光共聚焦显微技术在乳腺细胞凋亡研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是普通荧光显微镜、激光和计算机及相应软件组合的产物,它实现了连续光学切片,并广泛应用于活细胞三维重构及动态分析。乳腺细胞凋亡是乳腺生物学的重要研究内容,是乳腺发育、泌乳及退化过程的一个关键特征。近年来有关乳腺细胞凋亡的研究已经有了长足进展,文章综述了激光扫描共聚焦显微镜技术在乳腺细胞凋亡研究中的应用。     

显微镜技术研究进展

对光学显微镜以及电子显微镜的发展进行了回顾,重点介绍了自20世纪以来显微镜技术的重大进展,并对激光共聚焦显微镜和扫描隧道显微镜进行了重点介绍。     

犬精液品质的荧光染色评价方法

为了探索荧光染色技术在犬精液品质检测中的应用,将犬精子标记相应的荧光染料,用荧光显微镜观察精子的质膜完整性、线粒体活性与顶体完整性.在荧光显微镜下,死精子经PI染色后,头部核区呈红色;具有活性线粒体的精子经Rh123染色后,尾部中端线粒体部分呈现绿色荧光;顶体完整的精子经FITC-PNA染色后,顶体区可见绿色强荧光.说明PI染色、Rh123染色及FITC-PNA染色分别用于评价精子质膜完整性、线粒体活性和顶体完整性,是评价犬精液质量的有效方法.     

简介激光共聚焦扫描显微镜

介绍了激光共聚焦扫描显微镜的工作原理,基本构造,适用领域及其在生物学和农业研究中的应用前景。     

玉米AGPase-bt2与GPN1蛋白互作的双分子荧光互补技术研究

【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase-bt2)与糖酵解关键酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GPN1)在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得AGPase-bt2和GPN1基因,然后采用双分子荧光互补技术(BiFC),构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-GPN1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,并用2种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞,48h后在激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2与GPN1的相互作用。【结果】AGPase-bt2基因长1 428bp,GPN1基因长1 497bp。双酶切鉴定结果表明,326-CYCHA-AGPasebt2、326-CYNEE-GPN1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;携带有共转化基因的烟草叶肉细胞在激光共聚焦显微镜下观察到明显的黄色荧光现象,且黄色荧光与叶绿体自发的红色荧光位置重合。【结论】AGPase-bt2与GPN1在植物细胞中真实地存在蛋白互作。     

蓝猪耳研究进展

由于特殊的花器官结构和开花习性,蓝猪耳成为一种理想的适于进行科学研究的观赏花卉。介绍了蓝猪耳组织培养和遗传转化国内外研究的概况,并详细论述了利用蓝猪耳为材料进行授粉受精机理和花色代谢研究的一些最新成果。     

夏堇花成色色素分析

从夏堇2个栽培品种‘粉月’和‘蓝月’的花中提取色素,用紫外分光光度计法、薄层层析色谱法和高效液相色谱法对其成色色素进行了检测。结果表明:夏堇花的主要成色色素为黄酮类化合物,其中‘粉月’中主要成色色素为矢车菊素、芍药素、芹菜素和木犀草素,‘蓝月’中主要成色色素为飞燕草素、锦葵素、矮牵牛素、芹菜素和木犀草素。     

蓝猪耳大孢子发生和雌配子体发育

[目的]研究蓝猪耳大孢子发生和雌配子体发育。[方法]采用常规石蜡切片和超薄切片技术研究蓝猪耳大孢子发生和雌配子体发育过程。[结果]蓝猪耳为中轴胎座,倒生胚珠,单珠被,薄珠心。大孢子母细胞减数分裂形成T-形和直线形四分体。T-形四分体合点端大孢子具功能,胚囊为蓼型发育形式;直线形四分体中珠孔端大孢子具功能,最终形成八核七细胞的成熟胚囊。胚囊发育异常偶有发生,但大部分胚囊都能发育成正常的7-细胞胚囊。[结论]蓝猪耳雌性生殖细胞发育异常并不是其结实率低的主要原因。     

蓝猪耳的繁殖及其在荆州园林应用的调查分析

以蓝猪耳(Torenia fournieri)为试验材料,研究了近年来其在华中地区(以荆州市为代表)的繁育及园林应用可行性状况.结果表明,蓝猪耳在荆州的生长状态良好,单株花朵数可达147朵左右,花期长达133 d,结实率达到41.89%.通过对荆州市典型小区(油院小区,城南春天,悉尼印象,荆州花园)、重点街道(江津路,北京路)和典型性公共园林绿地(沙隆达广场)的园林植物进行应用性评估,发现当地的园林植物应用存在系列问题,如植物造景材料老化、园林绿化所选用的植物与建筑风格不符以及绿化未能与时俱进等缺陷.采用典型绿地实地考察与模拟应用相结合的形式,对蓝猪耳在荆州园林绿地的应用效果及前景进行了可行性分析.总体而言,蓝猪耳在荆州的园林绿化中可以大规模引进和采用.     

有机附加物对蓝猪耳试管开花的影响

[目的]探讨蓝猪耳试管开花的最佳条件。[方法]以蓝猪耳茎段为外植体,通过不同的培养基处理进行开花诱导,探讨有机附加物对蓝猪耳试管开花的影响。[结果]水解酪蛋白(CH)和酵母浸出液(YE)对蓝猪耳试管苗的生长发育有促进作用,缩短了蓝猪耳试管成花时间,促进根生长。[结论]以1/2MS为基本培养基,蔗糖浓度为60 g/L和有机物为50 mg/L CH时,蓝猪耳试管开花的效果最好。     

蓝猪耳再生条件优化及不同外植体再生比较

为了寻求一种最佳的蓝猪耳再生体系, 比较了叶片诱芽、诱愈及幼苗生根的几种培养基, 结果表明,1 /2MS+BA1mg/L+NAA0 1mg/L、MS+BA1mg/L+ 2 .4 D0 1mg/L和1 /2MS分别是诱芽、诱愈及生根的最佳培养基。不同外植体诱芽结果显示, 根、茎和叶片都可以诱导不定芽的产生, 但以叶片诱导的效率为最高。几种再生体系比较的结果表明, 蓝猪耳叶片诱芽的再生体系为最佳再生体系。     

转化pCAMBIA1301载体蓝猪耳F_1代植株的花粉育性研究

通过自花和异花授粉、电镜扫描、花粉活力测定等方法,对转pCAMBIA1301基因蓝猪耳的9个转基因株系的F1代植株的育性进行了研究.结果表明:蓝猪耳不存在自交不亲和现象但其转基因植株出现花粉败育;对9个转基因株系进行测定,发现其花粉活力与对照(77.3%)差异显著,仅为9.8%~30.6%,表明转基因蓝猪耳花粉败育不是由于基因的插入引起的,普通培养基组培瓶蓝猪耳花药活力与在土壤中萌发的蓝猪耳花粉活力均为75%左右,表明组培环境也不是引起花粉败育的原因,因此继代培养基是引起花粉不育的唯一原因.     

蓝猪耳花粉萌发和花粉管生长的影响因素

[目的]探讨蓝猪耳花粉管的最佳培养条件,为建立植物离体受精体系奠定基础。[方法]采用离体培养技术,研究了蓝猪耳花粉离体萌发和花粉管体外生长的主要影响因素。[结果]蓝猪耳花粉萌发及花粉管生长的最佳培养基为:5.00%(V/V)蔗糖、0.01%(V/V)氯化钙、0.01%(V/V)硼酸和0.01%(V/V)磷酸二氢钾,其培养基的渗透压主要靠蔗糖调节。[结论]硼是蓝猪耳花粉萌发中必不可少的微量元素;钙对花粉管生长起着非常重要的调节作用,并推测钙离子主要是通过电压依赖型钙通道进入花粉管内部。     

蓝猪耳花粉管细胞壁超微结构的FESEM和AFM比较研究

[目的]比较场发射扫描电镜（FESEM）和原子力显微镜（AFM）观察蓝猪耳花粉管表面形貌和细胞壁中纤维素微纤丝排列的效果。[方法]蓝猪耳花粉离体培养2 h后,利用FESEM和AFM原位观察无损的花粉管表面形貌和细胞壁的精细结构。[结果]FESEM可见花粉管表面粗糙的网状结构;AFM可获得花粉管的三维立体图像,并可见花粉管细胞壁物质的精细结构和纤维素微纤丝的排列情况。[结论]AFM是一种观察花粉管表面结构和细胞壁中纤维素微纤丝排向的有效手段。     

电子显微技术在家兔研究上的应用

通过研究文献，综合评述了近年来电子显微技术在家兔研究方面的最新进展，尤其是在家兔疾病诊断、组织器官超微结构的形态学观察、产品鉴定以及以家兔为实验动物确定人类疾病病因和疾病临床诊断方面的研究成果。