大苞鞘石斛原球茎悬浮培养研究

以大苞鞘石斛类原球茎为材料,通过悬浮培养,研究基础培养基、添加物和激素对其原球茎增殖及多糖含量的影响。结果表明:适合大苞鞘石斛原球茎悬浮培养的基本培养基为MS和B5培养基,增殖系数分别为4.31和4.03,多糖含量分别为7.08%和7.12%;添加物为香蕉+椰子汁时,增殖系数和多糖含量最高,分别为3.91和9.97%;适合原球茎悬浮培养的激素组合为0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA。     

几种因素对反应器铁皮石斛原球茎生长及有效物质的影响

以铁皮石斛原球茎为试材,应用3L气升式生物反应器,研究了反应器不同培养时期、通气方式和接种量对铁皮石斛原球茎生物量及有效物质积累的影响,并比较了铁皮石斛不同来源材料的多糖与生物碱含量。结果表明:铁皮石斛原球茎的生物量及多糖和生物碱的积累量均在培养至30d时达到最大值,在反应器培养过程中逐步调节通气量由0.1vvm至0.3vvm,可提高原球茎的生物量及有效物质的含量,接种量为20~25g/L均可获得较高的原球茎生物量且有效物质含量和产量也较高,铁皮石斛原球茎的多糖和生物碱含量均高于1年生植株和组培苗。因此,铁皮石斛原球茎反应器培养30d,培养期间将通气量由0.1vvm调节至0.3vvm,接种量为20~25g/L有利于大量生产原球茎及其有效物质。     

天然添加物对铁皮石斛类原球茎增殖、分化及生根的影响

以云南软脚铁皮石斛为试材,研究了不同天然添加物对其类原球茎增殖、分化及小苗生根的影响。结果表明:高浓度的香蕉汁抑制类原球茎的增殖,而高浓度的马铃薯汁促进类原球茎的增殖,铁皮石斛类原球茎增殖最适培养基为MS+6-BA 1mg/L+NAA 1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+活性炭2g/L+马铃薯汁200g/L,接种60d后类原球茎增殖倍数为6.8,继续培养30d分化率达97%。培养基中添加香蕉汁、马铃薯汁均有利于铁皮石斛小苗生根,最适生根的天然添加物为马铃薯汁100g/L。     

促进铁皮石斛原球茎中多糖和生物碱积累研究

以铁皮石斛原球茎为试材,为优化原球茎培养和提高有效物质的积累,研究了培养液中不同pH对原球茎生物量及有效物质含量的影响。同时,在培养初期向培养液中分别添加不同浓度的诱导子(壳聚糖、普鲁兰多糖)以及2种诱导子的混合液,以未加入诱导子的培养基作为对照,对原球茎生物量及有效物质含量进行了测定。结果表明:当培养液pH为5.8时,原球茎生长最好,且多糖(4.93g·L~(-1))和生物碱(3.15mg·L~(-1))生产量达到最高。30mg·L~(-1)壳聚糖和200mg·L~(-1)普鲁兰多糖单独处理,有利于原球茎中多糖和生物碱的积累。但当壳聚糖浓度为15mg·L~(-1),普鲁兰多糖浓度为100mg·L~(-1)混合处理后,发现原球茎中多糖和生物碱的积累量明显提高,多糖含量达到322.8mg·g-1 DW,生产量达到6.75g·L~(-1),而生物碱含量达到242.7μg·g-1 DW,生产量达到5.07mg·L~(-1)。因此,通过调节培养条件可有效地促进铁皮石斛原球茎中多糖和生物碱积累,为铁皮石斛产品生产提供了一种新的材料。     

铁皮石斛原球茎高效增殖体系的构建

以铁皮石斛T4种群原球茎为试材,研究了原球茎团块直径、接种密度、不同激素配合及继代周期对原球茎的增殖和长势的影响,以期构建铁皮石斛原球茎的高效增殖体系。结果表明:在铁皮石斛原球茎的增殖过程中具有明显的群体效应,适当增大原球茎团块直径和接种密度有利于提高增殖率;不同浓度的激动素(KT)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)与萘乙酸(NAA)配合试验中,NAA 0.02mg/L+KT 0.5mg/L能更有效地促进原球茎的增殖和生长;铁皮石斛原球茎增殖培养的适宜继代周期是50d。     

铁皮石斛组培苗生长的影响因素研究

以铁皮石斛组培苗为材料,研究不同蔗糖浓度对铁皮石斛原球茎(PLB)生长的影响,6-BA用量对铁皮石斛增殖芽生长的影响,不同糠源及添加物香蕉对铁皮石斛壮苗、生根的影响。结果表明:当蔗糖30g/L最有利于铁皮石斛PLB增殖,最适合PLB的培养基为MS+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L。6-BA对铁皮石斛丛生芽形态建成有着很重要的作用,有利于促进芽的分化,适合继代的培养基为MS+BA 4mg/L+NAA0.1mg/L+CW5%+蔗糖30g/L。香蕉对铁皮石斛组培苗的根系生长具有显著的促进作用,以50 g/L葡萄糖为糖源更有利于铁皮石斛壮苗生长,适合生根苗生长的培养基为1/2MS+香蕉70g/L+活性炭0.1%+葡萄糖50g/L。     

铁皮石斛的种子培养

以铁皮石斛成熟种子为外植体,研究原球茎的诱导、增殖、分化和生根的最佳培养条件。结果表明:1/2 MS基础培养基最适合铁皮石斛的种子培养,45 d时原球茎诱导率达到95%;原球茎增殖的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+20%马铃薯提取液,每代增殖16倍,原球茎形态好、变异少;原球茎团于1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.25 mg/L+20%马铃薯提取液的培养基上可诱导丛芽分化,于MS+NAA 0.5 mg/L+20%香蕉汁+活性炭5g/L的培养基上易于诱导不定根的形成,60 d后可形成健壮的完整小植株。     

不同培养条件对金钗石斛原球茎增殖的影响

本试验研究了基本培养基、培养天数及培养方式、激素浓度对金钗石斛原球茎增殖的影响,采用方差分析方法来探讨不同培养条件与原球茎增殖的影响关系。结果表明:B 5培养基为最佳培养基;4个培养天数之间存在极显著差异,培养期为30 d时显示最好;4种培养方式之间存在显著差异,固体培养和液体悬浮培养是较好的培养方式;原球茎最佳增殖激素浓度为6-BA 0.5 m g/L+NAA 0.2 m g/L。     

金线莲原球茎增殖研究

以金线莲原球茎为试材,研究了基本培养基、添加物以及不同培养方式对原球茎增殖的影响.结果表明:以B5为基本培养基最适合金线莲原球茎的增殖;天然添加物对金线莲原球茎增殖有明显的促进作用,椰汁对增殖的促进作用最大,培养45 d后原球茎重量平均增加6.146倍;液体悬浮培养的增殖效果最佳,培养30 d增殖倍数达2.150,原球茎生长健壮.     

不同激素配比对铁皮石斛组培丛生芽增殖的影响

以铁皮石斛为试材,以MS为基本培养基,研究了不同激素配比对铁皮石斛组培丛生芽增殖的影响。结果表明:铁皮石斛丛生芽增殖的培养条件为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+土豆汁100g/L+蔗糖30g/L,90d增殖系数达7.00,丛生芽芽高、茎径、含水量和叶绿素含量均高于其它处理。     

培养基和容器对铁皮石斛组培苗生长的影响

本试验以云南滇枫种苗有限公司提供的铁皮石斛种苗和原球茎为试验材料,分别设置N6+玻璃瓶、N6+塑料杯、1/2 N6+玻璃瓶、1/2 N6+塑料杯4组处理进行增殖培养。结果表明:塑料杯的污染率为8%,大于玻璃瓶的污染率3%;N6培养基在玻璃瓶下对铁皮石斛原球茎分化最好;根据方差分析,N6+玻璃瓶更有利于苗的发芽生长,且根系最发达、短粗且绿色;N6+塑料杯中培育的种苗长势最为良好,叶宽长,深绿色;塑料杯培育种苗有利于苗的增高。试验结果可为今后发展组培苗快速繁殖提供指导依据。     

石斛原球茎的组织培养研究进展

石斛是名贵的中草药之一,含有多糖、生物碱、氨基酸和微量元素等多种成分,具有增强免疫、抗肿瘤、抗疲劳、降血糖和养阴生津等多种生物活性。现对影响石斛原球茎增殖和分化的培养基、植物生长调节剂、金属元素与附加物、碳源和多胺、培养方式等因素以及原球茎的保存和有效成分积累进行了综述;总结了石斛原球茎多糖的生物活性作用;并对今后的研究重点进行了展望,建议应该在寻找影响石斛原球茎生长速度和生物产量的各种理化因素上进行深入研究。     

铁皮石斛试管苗培养技术的研究

研究了不同量激素浓度、天然添加物及植入密度对石斛试管苗生长的影响.结果表明:使用1/2MS培养基并且在其他条件不变的情况下,当6-BA的含量在3.0 mg/L时,丛生芽数量多且有原球茎的发生;香蕉汁具有明显的壮苗和诱导芽增殖的效果;当铁皮石斛茎段植入密度为10～12个/瓶时,对其分蘖和生长有利.     

铁皮石斛人工繁育技术

以铁皮石斛商品瓶苗和盆栽苗茎段为试材,添加不同浓度6-BA、NAA,诱导茎段腋芽、原球茎和不定根,建立再生体系,快速繁殖铁皮石斛组培苗,以期为秦岭淮河一线以北地区人工繁殖铁皮石斛提供参考依据。结果表明:外植体宜采用70%酒精浸泡20 s,0.1%升汞浸泡8 min消毒;MS+6-BA 3.0~5.0 mg·L^-1+NAA 0.1~1.0 mg·L^-1适合腋芽分化和增殖,分化率92%~100%;1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+土豆泥15%适合原球茎诱导增殖,增殖倍数7.7;1/2MS+NAA 0.3 mg·L^-1生根率为100%;以松针土移栽,成活率83%。     

遮荫对一年生铁皮石斛生长特性、光合特性及多糖含量的影响

以1a生铁皮石斛为试材,采用人工遮荫方法,研究了不同光照强度对铁皮石斛生长特性、光合特性及多糖含量的影响,以期探明光强对铁皮石斛生长特性和品质的影响。结果表明:在55%透光率的条件下,铁皮石斛的株高、茎粗、净增鲜重值最大,长势最好;在透光率为43%时,更利于铁皮石斛多糖的积累。     

铁皮石斛一次成苗技术初探

为了筛选出铁皮石斛一次成苗的最适培养基,简化铁皮石斛组培种苗培育的流程,以铁皮石斛茎段为外植体,研究不同种类和浓度配比的激素对组培过程中不定芽的诱导和丛生芽的增殖的影响,对基本培养基类型以及各个激素的浓度进行筛选,最终得出铁皮石斛一次成苗最适的培养基配方为:1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+香蕉泥100g/L+NAA 0.5mg/L+6-BA 3mg/L,pH值5.8,这一培养基最利于铁皮石斛组培苗不定芽的诱导与生长,且组培苗不定芽的诱导与生长情况皆为最佳状态。     

铁皮石斛丛生芽增殖培养条件的优化

为筛选出铁皮石斛从生芽继代增殖的最适培养基和培养条件,以MS为基本培养基,研究比较了活性炭、植物激素、有机添加物以及温度和光照等因素对铁皮石斛生长状况的影响.结果表明:丛生芽继代增殖的最佳配方为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+香蕉100 g/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖30 g/L,丛生芽长势好,60 d增殖系数达到7.16;最适培养温度为25℃,最佳的光照强度为2 000 lx.     

药用植物马鞭石斛组织培养与快速繁殖

以马鞭石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.var.oculatum.Hook.)的种子为外植体进行了组织培养快速繁殖技术研究,以期筛选出适合各个阶段培养的培养基配方.结果表明:马鞭石斛种子萌发原球茎诱导的最佳培养基为MS+GA 0.1 mg/L+6-BA 1.5mg/L,诱导率达85％;KT 0.5 mg/L+6-BA 2.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L的MS培养基最适宜马鞭石斛原球茎增殖及幼苗分化,分化率为90％;最适宜马鞭石斛生根的培养基为MS+AC 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L,生根率为100％.     

铁皮石斛增殖培养培养基配方的优化

以铁皮石斛不定芽为材料,采用单因素随机区组试验和正交试验设计方法,在25℃,2 000 lx,12 h·d-1条件下,研究基本培养基、NAA、6-BA、BR、蔗糖对铁皮石斛不定芽增殖的影响。结果表明:1/2 MS为铁皮石斛不定芽增殖的最佳基本培养基;NAA是影响铁皮石斛增殖有效芽倍增率和生根有效芽倍增率的主要因素;组合1/2 MS+花宝1号3 g·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1+BR 0.001 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+水解络蛋白0.25 g·L-1有利于不定芽增殖,增殖有效芽倍增率(17.31±0.09)、生根有效芽倍增率(5.68±0.03)均极显著高于其他处理。     

杜鹃兰原球茎增殖培养条件

以杜鹃兰种子萌发的原球茎为试材,研究不同培养基、不同植物生长调节物质(6-BA、NAA和IBA)、活性炭、温度及光照强度对杜鹃兰原球茎增殖的影响。结果表明:1/2MS培养基为适于原球茎增殖的基本培养基;添加一定浓度的6-BA、NAA和IBA均有利于原球茎的增殖,IBA的浓度为1.0mg·L~(-1)时,原球茎增殖率较高,40d可达170.07%;适量添加活性炭对原球茎增殖有促进作用;温度及光照强度的控制对原球茎增殖是必需的。杜鹃兰原球茎增殖的适宜培养条件为1/2MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) IBA+0.5g·L~(-1)活性炭,温度为15℃,光照强度为2 000lx。