杨树锈菌种和生理小种鉴别方法述评

杨树锈病是我国杨树生产的主要病害之一,对锈病的不同种和生理小种进行鉴别,是杨树抗锈病育种的前提和基础。作者对杨树锈菌种和生理小种的不同鉴别方法进行了述评,介绍了依据形态学标记、寄生专化型、同工酶技术和可溶性蛋白分析、分子标记技术以及ITS测序进行杨树锈菌生理小种鉴别的一些研究实例。通过分析发现,杨树锈菌和生理小种的鉴定不能仅靠其中的一种技术,而是需要将几种方法结合起来使用才能得到准确的鉴定结果。     

松杨栅锈菌无毒基因型性状分离及AvrL567同源序列分析

【目的】分析松杨栅锈菌小种无毒基因型性状分离规律和其无毒基因序列与欧美小种无毒基因序列的差异和系统学关系。【方法】以秦岭厚畛子落叶松上松杨栅锈菌2号小种HZ3542的性子器为雄性亲本,与秦岭火地塘落叶松上2号小种HF2369性子器为雌性亲本进行人工有性杂交,初步获得F1代锈孢子堆。通过对太白杨离体叶片接种反应型统计,分析松杨栅锈菌2号生理小种无毒基因型,并根据亚麻锈菌无毒基因Avr L567(accession:AAS66952)设计和筛选引物,利用同源扩增技术,对松杨栅锈菌无毒基因片段进行PCR扩增,经测序、比对后构建最大似然系统树。【结果】2号生理小种无毒基因表现型符合孟德尔分离定律,来自秦岭厚畛子太白杨不亲和性亲本为Aa无毒基因型,来自秦岭火地塘的亲和性亲本为aa基因型。在F1代锈孢子堆群体(P=0.01)和F1代夏孢子堆群体(P=0.05)中,抗∶感表现型均按1∶1分离。无毒基因型以坏死斑有无和褪绿斑大小为重要标准,潜育期长短和夏孢子堆密度、直径大小等数量性状为辅助标准进行判断,并在PCR扩增中得到检验和证实。筛选引物对Avr Pr1(5'-TAATCCTCGTTGACATCAGTC-3',5'-AAGCTTGAGAGCTCCGCTC-3',Tm=53.5℃)可以稳定扩增出800~900 bp的产物。ML系统树表明,真菌无毒基因序列总体上同源性较低,但本研究所供试的17条序列可分为2个群,栅锈菌无毒基因序列聚在一个分支上,其中5条中国松杨栅锈菌无毒基因序列同加拿大2条MLP无毒基因序列聚在同一个亚分枝上,另一条序列与法国松杨栅锈菌、美国亚麻锈菌等菌聚在另一个亚分支上。【结论】中国松杨栅锈菌2号小种无毒基因为单显性遗传,其无毒基因序列同加拿大的小种无毒基因序列同源性高。     

桉树青枯病流行区病菌小种和生物型的鉴定

从广东、广西、海南桉树青枯病流行区采集病菌标样51个菌株进行病菌和生物型的鉴定.结果表明:3个省(区)的桉树青枯病菌主要是小种1号;在广西、海南的菌株中,还有小种2号和3号病菌;生物型主要归属Ⅲ号,Ⅱ号和Ⅴ号出现频率较少;有的菌株生物型鉴定结果难归入Hayward的5个生物型中,可能有其他生物型.     

小叶臭黄皮的化学成分研究

从小叶臭黄皮(Clausena excavata Burm F.)的茎和叶中分离得到10个单萜基香豆素,分别鉴定为7-((E)-3'-甲基-4'-(8'-羰基-7',9'-烯-呋喃)-2'-烯)-香豆素(1)、7-((E)-3'-甲基-4'-(7'-甲基-8'-羰基-6'-烯-呋喃)-2'-烯)-香豆素(2)、7-((E)-3'-甲基-4'-(7'-甲基-6'-亚甲基-8'-羰基-呋喃)-2'-烯)-香豆素(3)、7-((E)-3'-甲基-4'-(9'-羟基-8'-羰基-6'-烯-呋喃)-2'-烯)-香豆素(4)、7-(3'-甲基-4'-(7'-甲基-8'-羰基-6'-烯-呋喃)-2',3'-环氧丁烷)-香豆素(5)、7-(3'-甲基-4'-(9'-羟基-8'-羰基-6'-烯-呋喃)-2',3'-环氧丁烷)-香豆素(6)、7-(3'-甲基-4'-(7'-甲基-7'-羟基-8'-羰基-6'-烯-呋喃)-2',3'-环氧丁烷)-香豆素(7)、7-(3'-甲基-4'-(7'-甲基-8'-羰基-呋喃)-2',3'-环氧丁烷)-香豆素(8)、5'-羟基葡萄内酯(9)和7-((E)-7'-羟基-3',7'-二甲基-2',5'-二烯)-香豆素(10),2个四降三萜,鉴定为11β-羟基-1α-乙酰基黄柏酮(11)、11β-羟基黄柏酮(12)和1个木脂素,鉴定为(-)-丁香脂素(13)。其中化合物11和13为首次从该植物中分离得到。测定了化合物1、2、3、11和12对癌细胞株A549、Hela和BGC-823的细胞毒活性,及其对白色念珠菌(Candida albicans)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌活性。结果显示,化合物1对Hela和A549均有细胞毒活性,其半数抑制质量浓度(IC_(50))值分别为11.26和13.55 mg/L,化合物3对BGC-823有细胞毒活性,其IC_(50)值为16.65 mg/L,5个化合物对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌均没有抗菌活性。     

铁皮石斛叶的化学成分研究

从铁皮石斛 (Dendrobium officinale) 叶的乙醇提取物中分离得到 12 个化合物。通过光谱数据分 析，分别鉴定为：4- 羟基苯乙酮 (1)、对羟基苯甲醛 (2)、丁香醛 (3)、α- 萘酚 (4)、香草酸 -4-O-β-D- 吡喃葡 萄糖苷 (5)、5- 羟甲基糠醛 (6)、 (3S,5R,6R,7E,9S)-3,5,6,9-tetrahydroxy-7-megastigmene (7)、(6R,9S)-9-hydroxymegastigma-4,7-dien-3-one-9-O-β-D- glucopyranoside (8)、 (3R,9R )-9-O-β-D-glucopyranosyl-3-hydroxy-7,8- didehydro-β-ionol (9)、cyclomargenol (10)、N-p- 香豆酰酪胺 (11)、肌苷 (inosine, 12)。化合物 4、5、7、8、 9、10 为首次从石斛属中分离获得，化合物 1、2、6、12 为首次自铁皮石斛植物中分离得到。     

美洲黑杨×青杨木材性状QTLs定位研究

利用来自 87个F2 代单株的 81 0个标记 (784个AFLP标记和 2 6个SSR标记 )构建了美洲黑杨×青杨杂种分子连锁遗传图谱。该图谱包括 1 9个主要连锁群 ,共有 36 8个标记 (35 6个AFLP标记和 1 2个SSR标记 )。框架图总图距为 3382 4cM ,平均标记间距为 9 6 9cM。利用区间作图法在LOD≥ 2 ,检测区间为 2cM条件下检测到 8个与木材性状有关的QTLs。其中与木材基本密度关联的 3个QTLs贡献率分别为 2 7 1 %、2 7 1 %、2 5 5 % ,与微纤丝角关联的QTLs贡献率为 1 8 6 % ,与纤维长度关联的QTLs贡献率为 4 8 9% ,与纤维宽关联的 3个QTLs贡献率分别为 1 7 4 %、2 7 4 %和 4 8 3%。这 8个QTLs遗传作用方式均为超显性 ,其中只有 2个与基本密度关联的QTLs来自于美洲黑杨 ,其余 6个均来自于青杨。     

沉香叶抗肿瘤活性化学成分研究

在抗肿瘤活性部位筛选的基础上,利用多种柱色谱方法对沉香属白木香叶中的化学成分进行了分离,通过理化常数和波谱分析鉴定其中所分得化合物的结构.从该植物中共分得10个化合物,结构分别鉴定为:洋芹素-7,4'-二甲醚(1)、木犀草素-7,3',4'-三甲醚(2)、木犀草素-7,4'-二甲醚(3)、芫花素(4)、木犀草素(5)、羟基芫花素(6)、2-O-α-L-鼠李糖-4,6,4'-三羟基二苯甲酮(7)、对羟基苯甲酸(8)、β-胡萝卜苷(9)、7α-羟基-β-谷甾醇(10).化合物7为新化合物,化合物1～6及8、10为首次从该植物中分到.     

忍冬花蕾的化学成分研究

采用硅胶柱层析、反相硅胶(ODS)柱层析,从忍冬花蕾乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分分离得到9个化合物,经理化常数对照及波谱分析,鉴定它们的结构分别为环烯醚萜苷类:马钱子素(1), 獐牙菜苷(2),7-epi-vogeloside (3),7-epi-loganin(4),secoxyloganin(5);有机酸类:咖啡酸(6),对 -羟基苯甲酸(7);植物甾醇类:β-谷甾醇(8),胡萝卜苷(9).化合物4、5、6、7为首次从忍冬花蕾中分离得到.经初步药理实验,发现化合物1、4、5具有保肝作用.     

四川山姜的化学成分研究

采用正相硅胶和Sephalex LH-20凝胶色谱柱层析等分离方法对姜科山姜属植物四川山姜的乙酸乙酯部位的成分进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.分离得到了8个化合物,分别鉴定为3,5-二羟基-4′,7-二甲氧基黄酮(1)、4′,7-二羟基-5-甲氧基二氢黄酮(2)、4′,5,7-三羟基黄酮(3)、5,7-二羟基-4′甲氧基黄酮(4)、对香豆酸(5)、β-胡萝卜苷(6)、β-谷甾醇(7)和豆甾醇(8).化合物1～5为首次从该植物中获得.     

几个杜仲无性系光合特性比较研究

利用Li-6400便携式光合系统仪、光合助手软件(Photosyn Assist)等,在陕西杨凌对9个杜仲品系(品种)日光合速率(Pn)、光合有效辐射(PAR)、最大净光合速率(Pmax)、表观光量子效率(Φ)、暗呼吸速率(Rd)、光补偿点(LCP)、光饱和点(LSP)等进行了测定或计算,结果为,杜仲无性系日光合速率变化曲线在5月、9—10月呈单峰曲线,6—8月呈双峰曲线;在光饱和下的最大净光合速率Pn存在差异,依次为无性系6号8号=5号7号4号秦仲2号2号(为显著性大于,p0.05;=为差异不显著),光辐射强度高于1 200μmol·m-2s-1时4、5、6号无性系降Pn低明显,而7、8号无性系及秦仲2号品种变化不大;杜仲无性系光补偿点LCP值为11.9~30.1μmol·m-2s-1,从低到高排列为4号5号6号=2号8号=7号秦仲2号;光饱和点LSP值为286~522μmol·m-2s-1,从高到低排列为6号8号5号=7号4号=秦仲2号2号;暗呼吸速率Rd值为0.583~1.86mol·m-2s-1,从低到高依次为4号=6号(6号=5号)5号2号8号=7号秦仲2号;最大净光合速率Pmax值为16.1~22.6μmol·m-2s-1,由高到低排列次序为8号7号=秦仲2号=6号(秦仲2号=6号=5号)5号4号=2号;表观光量子效率Φ值为0.039 3~0.061 8,由高到低次序为秦仲2号(=2号)(2号=7号)7号=8号5号4号6号;在以光合能力作为良种选择参考指标时,8号、6号、秦仲2号无性系可优先予以考虑。     

科技期刊(森林病虫害部分)题录选

赤眼蜂分子鉴定技术研究 .李正西 ,等 .昆虫学报 ,2 0 0 2( 5 ) :5 5 9- 5 6 6 .白蚁信息素研究进展 .邓晓军 ,等 .昆虫学报 ,2 0 0 2 ( 5 ) :6 6 6 - 6 72 .大竹缘蝽生物学习性观察及防治初探 .许皓 ,等 .竹子研究汇刊 ,2 0 0 2 ( 3) :5 1- 5 4 .毛竹主要食叶害虫研究进展 .张飞萍 ,等 .竹子研究汇刊 ,2 0 0 2 ( 3) :5 5 - 6 0 .西双版纳橡胶小蠹虫优势种类和为害规律调查 .阿红昌 ,等 .云南热作科技 ,2 0 0 2 ( 3) :9- 11.云南小粒咖啡新病虫害 .莫丽珍 .云南热作科技 ,2 0 0 2( 3) :14 - 15 .橄榄星室木虱发育起点温度与有效积温 .艾洪木…     

不同肥料养分配比对油茶叶片营养和生理特性的影响

以5年生岑溪软枝油茶(Camellia oleifera)林为研究对象,研究不同肥料养分配比对油茶叶片营养和叶绿素等生理指标的影响。结果显示,与对照对比,不同肥料养分配比油茶叶片营养元素含量均有所提高,按大小排列依次为F3(N∶P2O5∶K2O为16∶6∶8)F2(N∶P2O5∶K2O为15∶7∶8)F1(N∶P2O5∶K2O为14∶7∶9);就生理指标而言,与对照相比,不同肥料养分配比处理油茶叶片叶绿素a+b、硝酸还原酶活性和过氧化物酶活性变化的幅度分别为1.19%~11.90%、9.92%~43.65%、-8.05%~42.95%;处理F3(N∶P2O5∶K2O为16∶6∶8)在提高叶片营养和生理特性方面效果最佳。     

安宁思茅松毛虫6龄幼虫肠道可培养细菌的多样性研究

为给思茅松毛虫的综合防治提供参考措施,以安宁地区思茅松毛虫(Dendrolimu kikuchii)6龄幼虫为对象,采用纯培养法对其肠道细菌进行分离纯化,并进行形态特征观察及生理生化指标测定,对菌株进行初步鉴定,再结合16S rDNA分子鉴定技术进行分析,初步判定细菌的分类学地位,研究其肠道细菌的多样性。结果显示:从6龄思茅松毛虫幼虫肠道中共分离到104株细菌,初步鉴定隶属于10个属14个类群,分别为55株芽孢杆菌属(5个类群)、9株类芽孢杆菌属(1个类群)、2株苍白杆菌属(1个类群)、5株短芽孢杆菌属(1个类群)、4株微球菌属(1个类群)、6株莫拉菌属(1个类群)、8株栖水菌属(1个类群)、2株土壤芽孢杆菌属(1个类群)、7株葡萄球菌属(1个类群)、6株普罗威登斯菌属(1个类群)。其中芽孢杆菌属具有最高的相对分离率,为53.00%。6龄幼虫肠道细菌的Shannon多样性指数、Simpson优势度指数、Margalef丰富度指数分别为2.5217、0.9129、2.7991。思茅松毛虫6龄幼虫肠道细菌的多样性丰富,芽孢杆菌属为优势菌属,这些菌种为研究思茅松毛虫综合防治奠定了基础。     

引起I-107杨树溃疡病的病原菌大孢不高双胞菌的研究

2008年4月～2011年6月，通过对I-107杨溃疡病病原分离、野外接种致病性测定试验、病原菌的形态观察及ITS序列分子鉴定，结果表明，该病的病原菌鉴定为大孢不高双胞菌，在我国的杨树上属于首次报道，由它引起I-107杨溃疡病为杨树新病害。野外接种1年生I-107杨树幼苗，10天后的发病率为100％；该病原菌的分生孢子器为黑色，分生孢子梗缺；产孢细胞瓶梗状，无色，4．5～9．6μm×4．5—7．4μm；分生孢子圆柱形到长圆形，或窄卵圆形，成熟的分生孢子有2个细胞，无色，基部细胞窄，顶部细胞略宽，分隔处缢缩，2个细胞的分生孢子比单细胞的分生孢子更大，23．1—31．6Iμm×6．7～9．8μm，平均为27．7μm×8．9μm；未成熟的分生孢子为单细胞，16．5—26．1μm×6．2—8．5μm，平均为22．7μm×8．9μm。     

大花栀子果实的化学成分研究

对茜草科植物大花栀子果实进行化学成分研究,分离得到8个化合物.经理化数据对照和波谱分析,鉴定化合物的结构为:(4R) - 4 - 羟基 - 2,6,6 - 三甲基 - 1 - 环己烯 - 1 - 甲酸(1)、西红花酸(2)、西红花苷 - 4(3)、西红花苷 - 3(4)、西红花苷 - 2(5)、西红花苷 - 1(6)、京尼平苷(7)和京尼平 -1 - β - D - 龙胆二糖苷(8).经检索,其中化合物2 ～ 6为首次从该植物中分离得到.     

基于非线性分位数回归的落叶松树干削度方程

【目的】采用非线性分位数回归法构建落叶松树干削度方程,比较分析不同分位数(τ=0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9)及其组合分位数的拟合及检验结果,以提高模型预测精度。【方法】基于大兴安岭落叶松干形数据,采用Koenker和Bassett提出的分位数回归法,利用SAS软件的NLP拟合基于各分位数的Max-Burkhart分段削度方程,选取确定系数(R2)、平均误差(MAB)、均方根误差(RMSE)、相对误差(MPB)和预估精度(P%)对削度方程进行对比分析。【结果】1) Max-Burkhart分段削度方程在9个不同分位点(τ=0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9)均能收敛,说明分位数回归可以提供许多不同分位数的估计结果,进而可预测任意分位点处干形的变化趋势; 2)基本模型和分位点处(τ=0. 4、0. 5、0. 6)的分位数模型拟合结果相近,分位数组合(3、5、7、9)可提高模型拟合效果,其中基于3个分位数组合(τ=0. 3、0. 5、0. 7)、5个分位数组合(τ=0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7)、7个分位数组合(τ=0. 1、0. 2、0. 4、0. 5、0. 6、0. 8、0. 9)、9个分位数组合(τ=0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9)在分位数组合相同时分别表现最优; 3)模型检验表明,大多数分位数回归组合的检验统计量都优于基本模型和各分位数模型,相对于基本模型,5个分位数组合(τ=0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7)模型的MPB、MAB、RMSE分别降低13. 9%、13. 9%、13%。【结论】分位数回归能够提高模型预测精度,基于5个分位数组合的Max-Burkhart分段削度方程在拟合及检验统计量等方面表现较好,适合于大兴安岭落叶松树干削度预测。     

青枯菌的不同生理小种及生物型对桉树的侵染风险

为了进一步探究青枯菌(Ralstonia solanacearum)的不同生理小种和生物型对桉树的潜在侵染风险,应用2种接种方法分别检测青枯菌生理小种1～5号和生物型Ⅱ、Ⅲ对尾叶桉(Eucalyptus urophylla)的侵染能力。结果发现,桉树分别接种生理小种2号菌株GIM 1.76和生理小种3号菌株Po 88后均有典型的青枯病症状,与对照桉树青枯病菌生理小种1号菌株Rrp~r引起的症状一致,且使用2种接种方法测得的桉树发病率和病情指数与对照菌株Rrp~r相比无显著性差异(P0.05),生理小种4号菌株Z 2013-1和5号菌株GIM 1.73均不能使尾叶桉发病;分别接种生物型Ⅱ菌株Po 88和生物型Ⅲ菌株Po 43后,桉树的发病症状与接种生物型Ⅲ菌株Rrp~r的症状一致,且发病率和病情指数与对照菌株Rrp~r相比也无显著性差异(P0.05)。研究揭示了青枯病菌生理小种2号和3号对桉树也具有很强的侵染能力,因此,在有青枯菌生理小种2号和3号分布和危害的区域种植桉树具有潜在的风险,对生产上桉树栽培的合理布局具有参考价值。     

光皮树优良无性系光合生理特性对光强的响应

采用LI-6400便携式光合测定系统对光皮树优良无性系光合生理特性对光强的响应进行了研究。结果表明：①13个光皮树优良无性系具有较高的LCP（20．7～64．7μmol·m^-2·s^-1）、较低的LSP（349．7～563．9μmol·m^-2·s^-1）和较弱的最大光合作用能力,对弱光的利用能力较弱,对多种光照环境的适应性较差。光皮树优良无性系对弱光的利用能力大为G-13〉G-14〉G-3〉G-10〉G-2〉G-8〉G-15〉G-7〉G-9〉G-11〉G-6〉G-4〉G-5,对强光利用能力的大小为G-14〉G-6〉G-10〉G-9〉G-15〉G-4〉G-13〉G-2〉G-11〉G-7〉G-5〉G-8〉G-3：②13个光皮树优良元性系的表观量子效率在5月份的变化范围为0．0194～0．0317,比-般植物的小（0．03～0．05）;③影响光皮树不同无性系净光合速率的主要生理生态因子为胞间C02浓度（Ci）、光照强度（PaR）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（白）等。Ci为光皮树无性系净光合速率的第-影响因子,PAR、Tr、Gs的影响在其次,PAR对Pn起主要调节作用。     

青梅叶化学成分研究

采用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱等柱色谱及高效液相色谱等方法对青梅叶的化学成分进行分离纯化,并通过理化性质和核磁共振等方法鉴定化合物的结构。从青梅叶75%乙醇提取物中分离了13个化合物,分别鉴定为岩白菜素(1),1,3,4/2,5-环己五醇(2),3-(1-C-β-葡萄糖)-2,6-二羟基-5-甲氧基苯甲酸(3),木栓酮(4),木栓醇(5),羽扇豆醇(6),4-叔丁基苯甲醚(7),对甲氧基苯甲酸(8),邻苯二甲酸二异丁酯(9),邻苯二甲酸二丁酯(10),熊果酸(11),β-谷甾醇(12),β-胡萝卜苷(13)。化合物2～9均为首次从青梅属植物中分离得到,化合物1为青梅中具有保肝护肝的主要活性成分之一。     

我国松杉球壳孢生长适应性分化研究

对来自我国 13个省份的松杉球壳孢 (S .sapinea) 4 9～ 5 5个菌株进行生长适应性研究。在 6种培养基质、系列温度梯度和系列pH值梯度条件下 ,各菌株的生长适应性存在较大的差异。在Czapek培养基上 ,有些菌株存在明显的营养适性分化。运用高次多项式数学模型拟合方法构建出各供试菌株 0～ 72h的生长量随系列温度、系列pH值的变化曲线 ,从而确定了各菌株的平均最适生长温度为 2 6 .8℃ ,其中最低值为 2 3.1℃(ZJ2 ) ,最高值为 2 9 6℃ (F1) ;平均最适生长pH值为pH5 .6 ,其中最低值为pH4 .4 (F7) ,最高值为pH6 .7(F5 )。地理来源及其生境对松枯梢病菌菌株间的适温性变化似有一定影响 ,但与该菌对基质pH值变化的适应性似乎无明显关系