柴达木本地山羊及杂种山羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对119只柴达木本地山羊和110只杂种山羊血清运铁蛋白的多态性进行研究。结果发现：被检两个群体山羊中有TFAA，TFAB，TFBB三种基因型，均以TFAA型为优势基因型。柴达木本地山羊和杂种山羊TF^A,TF^B的基因频率分别为0．8655、0．1345和0．8045、0．1955，基因杂合度分别为0．2328和0．3145。     

平武黄牛血红蛋白和血清运铁蛋白多态性研究

应用醋酸纤维薄膜和垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对四川平武黄牛地方牛种的血红蛋白（Hb)和血清运铁蛋白（Tf)座位多态性进行了分析。结果表明：平武黄牛Hb座位含有3种基因HbA,HbB和HbC,HbC为优势基因，组成5种表现型，同时发现了2头突变个体（基因型暂定为AX型）；Tf座位有4个等位基因，TfD1和TfE为优势基因，组成10种表现型；与秦川牛，宣汉牛比较，Hb和Tf座位的不同基因及基因型频率都有很大差异。     

乐都本地山羊血清运铁蛋白多态性

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对８０只乐都本地山羊血清运铁蛋白的多态性进行研究。结果：被检山羊中有ＴＦＡＡ和ＴＦＡＢ两种基因型，以ＴＦＡＡ型为优势基因型（８６．３％）；ＴＦＡ和ＴＦＢ等位基因频率分别为０．９３１和０．０６９；基因杂合度和有效等位基因数分别为０．１２８和１．１４７。聚类分析表明，乐都本地山羊与藏山羊、英国阿尔卑山羊有较紧密的遗传联系。     

共和本地山羊血清运铁蛋白多态性

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对７８只共和本地山羊血清运铁蛋白的多态性进行了研究，结果发现：被检山羊有ＴＦＡＡ、ＴＦＡＢ、ＴＦＢＢ三种基因型，以ＴＦＡＡ型为优势基因型（７０．５％）；ＴＦＡ和ＴＦＢ等位基因频率分别为０．８３３３和０．１６６７；基因杂合度和有效等位基因数分别为０．２７７９和１．３８５。经遗传距离计算和聚类分析表明，共和本地山羊和藏山羊、乐都本地山羊有较近的亲缘关系。     

平武黄牛血液蛋白质多态性研究

应用醋酸纤维薄膜和垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对四川平武黄牛地方牛种的血红蛋白（Hb)和血清运铁蛋白（Tf)座位多态性进行了分析。结果：平武黄牛Hb座位含有3种基因HbA,HbB和HbC,HbC为优势基因，组成5种表现型，Tf座位有4个等位基因，TfD1和TfE为优势基因，组成10种表现型；与秦川牛，宣汉牛比较，Hb和Tf座位的不同基因及其因型频率都有很大差异。     

西宁地区西门塔尔牛血液蛋白质多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对西宁地区西门塔尔牛的血红蛋白、运铁蛋白和后运铁蛋白的多态性特征进行了研究。结果表明:①血红蛋白位点存在HB AA和HB AB两种基因型,以HBAA为优蛰基因型,HB~A为优势等位基因;②运铁蛋白位点存在TF AA,TF AD,TF DD,TF DE和TF AE五种基因型,以TF DD为优势基因型,TF~D为优势等位基因;③后运铁蛋白位点存在PTFAA,PTF AB和PTF BB三种基因型,以PTF AA为优势基因型,PTF~A为优势等位基因;④三个血液蛋白质位点的平均基因杂合度为0.3396。     

青海山羊血红蛋白多态性的研究

采用醋酸纤维素薄膜电泳法对青海省470只土种山羊的血样进行血红蛋白分型结果,全部为HbAA型;Hb~(A)基因频率为1.0。     

山羊MyoG基因内含子Ⅱ变异及其在体质量上的遗传效应分析

旨在研究M yoG基因内含子Ⅱ多态性与波尔山羊及其级进杂交后代部分生长性状的关系.以纯种波尔山羊及波尔山羊与唐山奶山羊级进杂交一代(F1)、二代(F2)和三代(F3)为研究对象,采用测序和PCR-RFLP方法对山羊MyoG基因遗传多态性进行分析,并研究基因型对初生体质量、1月龄体质量和断奶体质量的影响.结果在MyoG基因内含子Ⅱ的1 823 bp处(依据序列号:FJ607135)发现了1个SNP(C→T),且存在3种基因型(AA、AB和BB),这3种基因型在波尔山羊和波唐级进杂交后代4个群体中的分布基本一致,B等位基因为优势等位基因.通过对有效等位基因数(Ne)、群体杂合度(H)、Shannon's信息指数(Ⅰ)和多态信息含量(PIC)等群体遗传参数的计算,发现此SNP是1个中、低多态位点.最小二乘分析结果表明,AA基因型与其它2种基因型比较有较小的初生体质量且达到显著水平(P＜0.05),而对于1月龄体质量和断奶体质量,3种基因型间虽未达显著水平(P＞0.05),但具AA基因型个体的表型值明显低于具其它2种基因型个体的表型值,AA、AB和BB 3种基因型在这3个生长性状的大小排列顺序均为BB＞ AB＞ AA.推测MyoG基因对山羊生长性状存在一定影响,提示选择带有B等位基因的个体有望提高山羊体质量相关的生长性状.     

促黄体素β基因多态性及其与济宁青山羊产羔数的关系

为了解促黄体素β基因多态性与济宁青山羊产羔数的关系,采用PCR-SSCP技术检测促黄体素v亚基(Luteinizing hormone beta-subunit,LHβ)基因5'调控区和3个外显子在高繁殖力(济宁青山羊)、中等繁殖力(波尔山羊)和低繁殖力山羊品种(辽宁绒山羊和安哥拉山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响.结果表明:山羊与绵羊的LHB基因核苷酸序列相似性为98%.6对引物中,仅引物P1和P5扩增片段存在多态性.对于P1扩增片段,在4个山羊品种中均检测到AA、AB和BB 3种基因型;测序分析发现BB与AA基因型相比在5'调控区存在2处突变202C→A和210C→T;济宁青山羊3种基因型之间产羔数差异均不显著(P>0.05).对于P5扩增片段,在济宁青山羊中检测到CC、CD和DD 3种基因型,辽宁绒山羊中检测到CC和CD2种基因型,波尔山羊和安哥拉山羊中都只检测到CC基因型;测序分析发现DD与CC基因型相比在外显子2存在单碱基突变1124C→T;济宁青山羊CC、CD和DD基因型频率分别为0.38、0.44和0.18;DD和CD基因型济宁青山羊平均产羔数分别比CC基因型的多0.99(P<0.01)和0.87只(P<0.01).济宁青山羊在P1、P5两个座位上都处于哈迪-温伯格平衡状态(P1座位:X2=1.66,P=0.437;P5座位:X2=1.22,P=0.544).     

安哥拉×中卫山羊F1和F2代杂种群体血红蛋白多态性的变化

采用水平聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 ,对安哥拉与中卫山羊杂交 F1 和 F2 代群体中血红蛋白的基因型频率和基因频率作了分析。结果表明 ,繁育方式对这一基因座的多态性有显著影响。为此 ,作者建议在通过级进杂交培育毛用山羊新品种的方案中 ,应特别注意对种公羊的选择。     

福安水牛血液蛋白多态性研究

采用醋酸纤维薄膜、聚丙烯酰胺凝胶电脉及淀粉凝胶电脉对９１头福安水牛的血红蛋白、血清运铁蛋白和白蛋白多态性进行检测，并计算其基因型和基因频率，并发现５头血红蛋白３条带的变异体和１头ＢＸ型白蛋白稀有变异体。     

雷州山羊血液运铁蛋白多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对雷州山羊血液运铁蛋白多态性进行了研究。结果表明：雷州山羊TF位点上共有TF^A、TP^B、TF^C3个等位基因，其基因频率分别是：0．8789．0．0895．0．0316；共有TFAA、TFAB、TFAC、TFBB4种基因型。其基因型频率分别是：0．7789．0．1368、0．0632、0．0211，其中TFAA为优势表现型，基因杂合度是0．2185。经哈迪-温伯格平衡检验，雷州山羊群体基因型分布符合哈迪-温伯格平衡。     

共和本地山羊血红蛋白多态性的研究：发现一种新的山羊血红蛋白变异体

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对７８只共和县的青海本地山羊血红蛋白多态性进行了研究。结果发现，除存在ＨＢＡ变异体外，共和本地山羊中还有一种新的山羊血红蛋白变异体。它以ＨＢＺＡ杂合子形式存在，泳动速度与绵羊的ＨＢＡ变异体相似，暂命名为ＨＢＺ。ＨＢＺＡ基因型频率为３．８５％，ＨＢｚ等位基因频率为０．０１９２。     

山羊抑制素-α第1外显子的PCR-SSCP分析

采用PCR-SSCP技术检测了抑制素α(inhibin-α,INHA)基因第1外显子在高繁殖力山羊品种(黄淮山羊和长江三角洲白山羊)以及低繁殖力品种(波尔山羊)中的单核苷酸多态性,并研究了该基因对黄淮山羊产羔数的影响.设计4对引物扩增山羊INHA基因外显子1序列,只有引物1在3个山羊品种中检测到多态性,出现了3种基因型(AA、AB、BB),测序结果表明,BB型和AA型相比在INHA基因第1外显子1 006 bp处都发生了碱基突变(C→A),导致脯氨酸改变为苏氨酸.黄淮山羊突变纯合型(BB)平均产羔数比野生型(AA)少0.65只(P＜0.05).研究结果初步表明:INHA基因可能是影响黄淮山羊繁殖力的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个分子标记.     

欧拉型藏绵羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对欧拉型藏绵羊的74份血样进行了血清运铁蛋白(serum transferrin,TF)多态性的研究。结果发现,被检欧拉型藏绵羊的血清TF位点上检测出TF^A、TF^B、TFC、TF^D和TF^M 5个复等位基因,其中TF^B、TF^C和TF^D为优势等位基因,其基因频率分别为0.4122、0.2973和0.2162;发现TFAB、TFAC、TFAD、TFBB、TFBC、TFBD、TFBM、TFCC和TFDD等9种基因型,其中TFBC、TFBB、TFBD、TFCC和TFDD为优势基因型,其基因型频率分别为0.2703、0.1622、0.1622、0.1351和0.1216;TF位点的基因杂合度为0.6921。     

不同海拔高度西藏高原山羊若干血液生理特性的对比分析

本试验对海拔4500米的藏北高原那曲山羊和海拔3000米的藏南山地林芝山羊进行了部分血液生理特性的对比研究。测定了红细胞总数、红细胞压积、血液总量、血红蛋白含量与电泳分析、血清蛋白含量与电泳分析等。结果表明：世居高海拔的藏北高原那曲山羊，其红细胞总数、红细胞压积、血红蛋白、血液总量均极明显高于世居较低海拔的藏南山地林芝山羊（P＜0．001），而其红细胞容积的立方微米数值较小，红细胞内血红蛋白的平均重量较轻。两个不同海拔高度藏山羊血红蛋白（Hb)均含有HbA,HbB和HbC三种变异体，显现出HbAA,HbAB,HbBB和HbAC四种基因型；并发现高海拔藏山羊HbAA,HbAC基因型频率和Hb^A,Hb^C基因频率均极显著高于较低海拔藏山羊HbBB基因型频率和Hb^B基因频率，HbAB型频率则随海拔高度的升高而下降。     

大通牦牛血清运铁蛋白多态性的进一步研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对青海省大通牛场牦牛的血清运铁蛋白多态性做了进一步研究。结果发现:①被检牦牛的血清运铁蛋白位点有TF AD和TF DD两种电泳表型,以TF DD为优势基因型;②TF~A和TF~D基因频率分别为0.0044和0.9956;③基因杂合度为0.0088。     

促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因多态性及其与山羊产羔数的相关性分析

本研究采用候选基因法对与繁殖性能有关的遗传标记进行筛选,旨在为山羊高产仔数的标记辅助选择提供确切的遗传依据。参考牛的促性腺激素释放激素受体(Gonadotropin releasing hormone receptor,GnRHR)基因序列设计4对引物,采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测GnRHR基因在波尔山羊以及我国西南地区9个地方山羊品种中的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP),同时在川东白山羊、古蔺马羊和贵州白山羊3个群体中研究该基因多态性与山羊产仔数之间的相关性。结果显示,4对引物中只有引物P1扩增片段检测出多态性。对于P1的扩增片段,在不同的山羊品种中检测到AA、GG和AG 3种基因型,测序分析表明GG与AA型相比有一处单碱基突变(154G→A)。AA基因型个体在3个群体中产羔数最小二乘均值都显著高于GG和AG基因型个体(P<0.05),GA基因型个体在古蔺马羊中的产羔数显著高于GG型个体(P<0.05),而在其它2个品种中差异不显著(P>0.05)。本研究结果初步表明山羊GnRHR基因的突变与其繁殖性能有关,可能是影响山羊繁殖率的一个因素。     

崇明岛山羊群体H-FABP基因多态性的研究

以崇明岛53只崇明白山羊、30只徐淮山羊、37只杂山羊为实验材料,利用直接测序寻找心脏型脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP)部分exon2及intron2序列上的SNPs,PCR-RFLP分析其多态性。结果表明:存在3个SNP位点(A1017G、C1115T、G999-)。A1017G通过HaeⅡ-RFLP得到BB、Bb、bb 3种基因型,除徐淮山羊外,崇明白山羊和杂山羊处于Hardy-Weinberg非平衡状态,3个群体均为低度多态(PIC<0.25)。C1115T未引起酶切位点改变。G999-通过SauⅠ-RFLP得到DD、Dd、dd 3种基因型,崇明白山羊处于Hardy-Weinberg非平衡状态,为低度多态(PIC<0.25);徐淮山羊和杂山羊只有DD基因型,呈严重的偏态,没有多态性。本研究表明H-FABP在不同山羊品种中具有单核苷酸多态性,可进一步作为候选基因分析其与肌内脂肪含量性状的关联性。     

山羊DCT基因启动子区甲基化水平、SNP与毛色特征关系研究

旨在探究DCT基因启动子区甲基化水平和SNP突变对山羊毛色的影响,为探索DCT基因调控山羊毛色变化的机理提供理论依据。本研究以山羊为试验动物,对DCT基因启动子区进行CpG岛预测,设计引物对预测的2个CpG岛富集区域进行亚硫酸氢盐甲基化测序,使用甲基化水平分析软件BISMA统计甲基化位点,比较唐山奶山羊(白色)和南江黄羊(黑色品系)两种不同毛色山羊群体DCT基因启动子区甲基化水平差异。克隆DCT基因核心启动子区,筛选不同毛色山羊群体的SNPs,使用JASPAR和Nsite预测SNPs位点突变前后转录因子的改变,并检测比较突变前后DCT基因启动子活性变化。结果,成功克隆了山羊DCT基因启动子区甲基化序列及核心启动子区(g.-1045～-318)。在g.-348～-150区域和g.+222～+502区域分别发现6个和23个甲基化位点,其中g.+312、g.+352和g.+400位点与g.+389和g.+404位点白色山羊甲基化水平分别显著和极显著高于黑色山羊(P<0.05和P<0.01),并且g.+222～+502区域白色山羊甲基化平均水平极显著高于黑色山羊(P<0.01)。在DCT基因核心启动子区的g.-804T> G、g.-705C> T和g.-679G> A,3个SNPs位点的基因型构成在白色山羊和3个有色山羊群体中存在差异,g.-804T> G突变导致该区域的SOX10转录因子结合位点缺失,DCT基因启动子活性显著下降(P<0.05)。结果显示,白色山羊DCT基因g.+222～+502区域的高甲基化水平,g.-804、g.-714和g.-679 3个位点的突变,尤其是g.-804T> G造成SOX10转录因子结合位点的缺失,突变的G型DCT基因启动子活性显著降低。因此,DCT基因启动子区SNP突变和高甲基化水平可能抑制了基因的表达从而形成山羊白色被毛。