新疆阿拉尔地区铁皮石斛组培快繁技术初探

通过试验研究,初步建立起以铁皮石斛种子做外植体的组培快繁体系。铁皮石斛种子萌发适宜的培养基配方为MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.05%+琼脂0.50%;原球茎增殖分化培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+香蕉泥8.00%+琼脂0.50%,生根培养基为1/MS+NAA 0.2 mg/L+香蕉泥8.00%+活性炭0.05%+琼脂0.5%,生根率达100.00%。     

铁皮石斛茎段组织培养技术研究

以铁皮石斛丛生芽作为外植体,通过研究影响铁皮石斛生长的主要因素,筛选铁皮石斛茎段组培快繁的适宜培养基,总结实用的快繁方法。结果表明,以MS培养基+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L糖+6.5g/L琼脂+0.5g/L活性炭,添加10%的香蕉泥作为天然附加物,pH值5.8,是铁皮石斛丛生芽增殖的最佳培养基;以MS+IBA1.5mg/L+NAA 1.5mg/L为铁皮石斛生根诱导的最佳培养基。通过实验总结出铁皮石斛茎段组培快繁技术,为铁皮石斛的资源保护和应用推广提供重要的科学依据。     

铁皮石斛组培苗快速繁殖的研究

[目的]研究铁皮石斛组织培养与快速繁殖方法.[方法]以铁皮石斛蒴果为材料,分别探究不同培养基及培养基添加物对铁皮石斛原球茎诱导、增殖及生根的影响.[结果]最适宜的铁皮石斛萌发的培养基为1/2 MS,加入0.2 mg/L NAA的培养基中原球茎增殖率达120％,在培养基中加入1.0mg/L 6-BA和20％香蕉提取液均对其茅的增殖有良好的促进作用,添加0.25mg/L NAA、2.0mg/L6-BA和20％马铃薯提取液的培养基中其再生率可高达220％,0.2 mg/L NAA和20％马铃薯提取液均可显著提高铁皮石斛苗生根生长.[结论]该研究为铁皮石斛快速繁殖技术的应用奠定了理论基础.     

铁皮石斛组培苗生根条件优化研究

【目的】培养生根优良的铁皮石斛组培苗,提高移栽成活率。【方法】在生根培养基中添加不同激素配比（1.0~3.0 mg/L NAA、0.5 mg/L 6-BA）进行铁皮石斛组培苗生根培养,并采取正交试验考察光照强度、pH和琼脂用量对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。【结果】随着MS培养基中NAA浓度的升高,试管苗的鲜重和生根率呈逐渐降低的趋势,以添加NAA 1. 0 mg/L（处理1）和NAA 2. 0 mg/L（处理3）的试管苗长势最好。极差分析和方差分析结果表明,在3个培养条件中,对试管苗生根的影响大小表现为光照强度>琼脂用量>pH值,生根培养基3因素最优水平组合为光照强度2000 lx,pH 5.5,琼脂用量8.0 g/L。【结论】铁皮石斛试管苗适宜的生根培养基为1/2MS + 10%香蕉泥 + NAA 1.0 mg/L + 2%蔗糖 + 0.05%活性炭,适宜的生根条件为光照强度2000 lx、琼脂用量8.0 g/L、pH 5.5。     

生长调节剂对铁皮石斛优化快繁体系的影响

以温室盆栽铁皮石斛茎切段为外植体,采用交叉分组设计试验方法,以MS+香蕉泥培养基,添加不同质量浓度NAA、IBA和6-BA诱导铁皮石斛丛生芽,观察对丛生芽增殖和生根的影响.结果表明:铁皮石斛丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;丛生芽增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L;生根壮苗培养基为1/2 MS+IBA 1.5 mg/L,移栽基质为珍珠岩+森林腐叶土+松针叶(1∶1∶1).     

不同培养基对铁皮石斛种子萌发和壮苗生根的影响

以铁皮石斛种子为材料,通过组织培养技术,不添加植物生长调节剂直接得到丛生芽,并比较天然有机物、活性炭等添加物对铁皮石斛丛生芽壮苗生根的影响,优化铁皮石斛组培快繁技术体系.结果显示,铁皮石斛种子分化最佳培养基为MS+6 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+80 g/L香蕉泥;芽苗的壮苗生根试验中,最佳培养基为1/2 MS+0.4 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂+80 g/L香蕉泥+0.5 g/L活性炭,有利于芽苗的壮苗和生根.该研究可以一次性直接得到优质铁皮石斛幼苗,减少了试验步骤,节省人工、降低成本,提高了试验效率,促进原球茎增殖、提高分化率,促进壮苗和生根,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供技术支持.     

铁皮石斛种子快繁培养体系的优化

以铁皮石斛种子为基础材料,建立铁皮石斛快速成苗的组培技术体系.通过调整组织培养过程中的激素种类及浓度配比,找出不同生长阶段最适的培养基配方.结果表明,诱导种子萌发、原球茎的最适培养基配方为1/2MS+0.1 mg/L NAA,9～10 d时种子开始萌发,30 d后种子萌发率达94.4％.原球茎增殖与分化的最适培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,15 d后原球茎增殖率为8.0％,55 d后分化率达73.6％.生根壮苗阶段的最适培养基为MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA,生根率达92.0％.研究结果为铁皮石斛快繁技术奠定了理论基础.     

铁皮石斛组培苗生根条件优化研究

以铁皮石斛无菌幼苗为材料,在不同生根培养基中添加不同配比的生长调节物质、香蕉汁、马铃薯汁以及活性炭,研究其对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。研究结果表明,生根培养基为:1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+10.0%香蕉汁+10.0%马铃薯汁+NAA 0.4 mg/L+2.0%蔗糖+0.04%活性炭,生根条件为光照强度2 000 lx、琼脂用量7.0 g/L、培养基p H为5.8是最适宜条件。     

黑节铁皮石斛组织培养技术研究

对黑节铁皮石斛茎尖原球茎诱导和茎尖增殖以及小苗生根进行了初步研究。采用黑节铁皮石斛无菌苗茎尖,经过75%乙醇消毒30 s后,去除表皮,黑节铁皮石斛带节茎尖原球茎诱导与茎尖增殖最佳培养基为1/2MS+5.5 g/L琼脂+0.55 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L土豆泥+20 g/L白砂糖+0.45 g/L活性炭。黑节铁皮石斛生根最佳培养基为1/2MS+5.5g/L琼脂+0.15 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L香蕉泥+20 g/L白砂糖+0.25 g/L活性炭。     

不同添加物对铁皮石斛组培幼苗生长的影响

以铁皮石斛试管小苗为材料,以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂为基础培养基,采用正交试验设计方法研究3种不同添加物(普通香蕉汁、食用马铃薯汁、活性炭)对铁皮石斛幼芽生长的影响。结果表明,香蕉汁对铁皮石斛的鲜质量、根数、茎高有促进作用,在促进茎的伸长方面效果较为显著;马铃薯汁对铁皮石斛的根长、茎粗影响不大,但在鲜质量和茎高等方面有显著性促进作用;添加一定量的活性炭可以促进铁皮石斛根的生长。在基础培养基里添加30%香蕉汁、10%马铃薯汁、0.6 g/L活性炭,有利于铁皮石斛的壮苗生根;添加10%马铃薯汁、0.2 g/L活性炭,有利于铁皮石斛原球茎的增殖和芽的分化。     

不同培养基对铁皮石斛组培快繁的影响

【目的】探讨铁皮石斛种子萌发、芽增殖和生根的适宜培养基,为铁皮石斛组织快繁技术提供依据。【方法】以铁皮石斛种子为外植体进行培养,研究6-BA (0-3.0 mg/L)、NAA(0.1-0.3 mg/L)、香蕉泥(15%～25%)和马铃薯泥(15%～25%)对铁皮石斛种子萌发、芽增殖和生根壮苗的影响。【结果】适宜种子萌发的较好培养基为MS+20%马铃薯泥,芽增殖最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA,增殖率达282.7%;最适生根培养基为MS+15%香蕉泥,生根率达100%。【结论】经马铃薯泥、香蕉泥培养的铁皮石斛组培苗,生长健壮,能为生产提供大量的种苗,因而此类培养基可用于大规模生产铁皮石斛组培苗。     

铁皮石斛组织培养快速繁殖技术

以铁皮石斛的未成熟种子作为外植体,成功建立了无菌材料,研究了不同用量的椰子水（CW）、马铃薯泥和NAA等影响因子对铁皮石斛增殖培养的影响.结果表明：在1/2 MS ＋φ（CW） =10％＋NAA 0.1 mg·L^-1的培养基上,原球茎增殖效果良好,增殖系数高达145.28;铁皮石斛组培苗在壮苗培养阶段对外源IBA,NAA和IAA的质量浓度变化均不敏感,在0～2.50 mg·L^-1范围内,植株的长势长相差异不明显,其中,IBA质量浓度为0.75 mg·L^-1和NAA质量浓度为0.5 mg·L^-1时,植株的长势相对要好一些,而且个体间相对较均匀;1/2 MS＋w（香蕉泥）=10％＋NAA 1.0 mg·L^-1的培养基生根壮苗效果较好.     

兜唇石斛种子无菌播种与快速繁殖

以兜唇石斛八成熟蒴果为外植体,通过对其种子无菌萌发培养、无机盐浓度筛选、活性炭浓度筛选、有机物种类及浓度筛选、丛生芽继代增殖及生长素种类及浓度筛选,确定适合兜唇石斛增殖和生根壮苗的培养基,建立兜唇石斛组培快繁技术体系。结果表明,兜唇石斛种子萌发培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+土豆粉30 g/L+活性炭0.2 mg/L,80 d左右获得实生小苗;不同基础培养基对兜唇石斛的增殖系数、生根数、根长及株高均显著影响,最适基础培养基为3/4 MS;添加活性炭显著影响兜唇石斛小苗的生长,最适活性炭浓度为0.1 g/L,当浓度大于0.2 g/L时,开始抑制兜唇石斛小苗生长;香蕉粉及土豆粉能明显促进兜唇石斛生长,增殖可添加30 g/L香蕉粉,30 g/L土豆粉,生根壮苗可添加40 g/L香蕉粉;KT对兜唇石斛丛生芽增殖无显著影响,0.5 mg/L的6-BA增殖系数最大(4.84);NAA及IBA对兜唇石斛的生根壮苗效果影响显著,最适浓度为NAA 1.0 mg/L,IBA 0.5 mg/L,培养45 d增殖系数为5.92,平均每株生根数为27.0,平均根长1.88 cm,株高1.92 cm。通过生产实践最终确认生根壮苗培养基为3/4 MS+蔗糖25 g/L+卡拉胶8 g/L+香蕉粉40 g/L+活性炭0.1g/L+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;炼苗移栽30 d成活率100%,60 d成活率85%。该文初步建立了兜唇石斛种子无菌播种与快速繁殖技术体系,为兜唇石斛的快速繁殖和种质资源保存提供理论和技术支持。     

铁皮石斛离体快繁技术

以铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为研究对象,通过对不同无机盐浓度、不同培养温度以及不同激素浓度配比等影响因子进行研究,确立以种子无菌萌发为途径的铁皮石斛组培快繁体系。结果表明:25℃时,1/2MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基配方最有利于铁皮石斛原球茎的诱导和幼苗分化;1/2MS+0.5 mg/L NAA培养基配方最适合铁皮石斛幼苗生根,生根率达100%。     

宋梅×韩国桃花杂交兰组培苗壮苗和生根培养基研究

以宋梅×韩国桃花杂交种子无菌萌发幼苗为材料,改良N6培养基为基本培养基,运用正交试验设计研究适宜的植物生长调节剂及其浓度、有机质和活性炭浓度对其壮苗和生根的影响。结果发现:(1)植物生长调节剂种类和浓度影响宋梅×韩国桃花杂交幼苗生长和生根,壮苗适宜培养基为:改良N6+0.2 mg/L BA+0~0.5 mg/L IBA+0.5~1 mg/L NAA;生根适宜培养基为:改良N6+0.2 mg/L BA+1.0 mg/L IBA或改良N6+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA。(2)有机质和活性炭的添加有利于杂交幼苗生长和生根,在确定了植物生长调节剂种类及浓度的基础上发现适宜于宋梅×韩国桃花杂交幼苗壮苗的培养基为:改良N6+0.2 mg/L BA+0.5 mg/L IBA+0.5 g/L活性炭+150 g/L香蕉泥+20 g/L糖+9 g/L琼脂粉,生根的培养基为:改良N6+0.2 mg/L BA+0.5 mg/L IBA+1.0 g/L活性炭+150 g/L香蕉泥+100 mg/L水解乳蛋白+20 g/L糖+9 g/L琼脂粉。     

铁皮石斛壮苗生根与移栽种植研究

[目的]筛选出较适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基和移栽基质及移栽管理方式.[方法]以已分化出真叶的丛生苗为试材,通过研究不同植物激素配比和有机添加剂对铁皮石斛壮苗生根的影响,筛选出促进铁皮石斛试管苗快速生根和壮苗的培养基,同时对铁皮石斛试管苗的移栽进行全面研究,设置不同的移栽基质及移栽管理方式,以提高试管苗的脱瓶移栽成活率.[结果]适宜铁皮石斛生根的培养基为1/2MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+ IBA 2.0 mg/L;适宜铁皮石斛壮苗的培养基为1/2MS+ NAA 0.1 mg/L +6-BA0.5 mg/L;适宜铁皮石斛生根壮苗的有机添加剂为20％香蕉汁;适宜铁皮石斛移栽种植的管理方式为单栽,其中运用单栽管理方式适合铁皮石斛移栽种植的基质为1/3泥炭+1/3松树皮+1/3兰石,60d后成活率达80.0％.[结论]建立一套适合铁皮石斛壮苗生根与移栽种植的方法,为铁皮石斛的产业化大规模种植奠定基础.     

铁皮石斛组培快繁关键技术研究

以铁皮石斛种子和茎段为材料,研究铁皮石斛快繁从原球茎诱导、增殖、分化,及壮苗生根的过程中不同时期的基本培养基及激素浓度和有机物等。结果表明,3/4MS为种子及茎段诱导、增殖、分化、壮苗生根阶段较合适的基本培养基,且种子作为外植体诱导增殖效果较茎段好;原球茎诱导培养基3/4MS+1.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA,增殖激素浓度为1.0~2.0 mg·L-16-BA+0.1~0.2 mg·L-1NAA时效果最好,原球茎的分化激素配比为1.0 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-16-BA,壮苗和生根培养基为3/4MS+1.0 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-16-BA+10%马铃薯汁;有机添加物为10%的马铃薯汁,效果较好。     

高山石斛再生体系的建立

以高山石斛(Dendrobium infundibulum Lindl.)成熟种子为外植体,MS为基本培养基,研究植物生长调节素对高山石斛组织培养过程中继代增殖和生根的影响。结果表明,高山石斛最佳的启动培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 1.0 mg/L;继代增殖中,6-BA、NAA、KT等激素的配合使用具有较好的效果,利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+活性炭1.0 g/L;最佳的生根壮苗培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L+香蕉汁10%,此时苗的根系长而粗壮,芽苗叶色翠绿,平均根长2.79 cm,生根率达到92%。     

不同培养基对铁皮石斛壮苗生根的影响及移栽条件优化

以铁皮石斛的无菌组培苗为材料,探讨不同培养基、激素对组培苗壮苗生根的影响,同时筛选出最适合移栽组培苗的基质。结果表明:最适合铁皮石斛壮苗生根的培养基为MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+1 g/L活性炭;移栽基质以泥炭土+树皮+碎砖+活苔藓组合效果最佳。     

铁皮石斛生根壮苗培养基优化及移栽基质选择

以铁皮石斛无菌幼苗为材料,研究不同基本培养基、不同激素对铁皮石斛生根壮苗的影响.同时以优良的试管苗为试材,搭配不同比例的基质,研究其对铁皮石斛试管苗移栽成活率和生长状况的影响.结果显示,以培养基N6+NAA 0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+AC 5 g/L+香蕉汁100 mL/L生根壮苗效果最佳,试管苗根粗叶绿,可达到出瓶效果;移栽基质火山岩+松树皮+活苔藓效果最佳,石斛试管苗成活率可达90％且长势优良,30 d后有新芽萌发.