冻干红细胞检验鸡新城疫血清抗体的试验

冻干(醛化)红细胞和新鲜红细胞与同一份鸡血清分别做鸡新城疫(ND)的血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验,二者血凝抑制价基本符合率达98.72%,相关系数为0.9288.冻干红细胞完全可以代替新鲜红细胞做血凝抑制试验检测鸡新城疫抗体效价.     

醛化鸡红细胞在EDS-76病毒HA和HI试验中的应用

用醛化鸡红细胞进行 EDS-76病毒的血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验结果与用新鲜鸡红细胞检测的结果相同或低一个滴度,图象清晰、稳定、结果易于判定。醛化鸡红细胞具有保存期长、使用方便、无自凝性等优点.     

鸡醛化红细胞在血凝和血凝抑制试验中的应用

应用鸡醛化红细胞 (FoRBC)代替新鲜配制红细胞 (FrRBC) ,进行血凝试验 (HA)和血凝抑制试验 (HI) ,以检测病毒滴度及其对应抗体效价。结果 :0 75 %FoRBC与 1 %FrRBC所测病毒HA和相应抗体HI效价一致。表明 0 75 %FoRBC可以替代 1 %FrRBC ,且具有不易破裂 ,保存期长 ,使用方便 ,无自凝 ,图象清晰、稳定 ,结果易判定等优点     

冻干细胞检验鸡新城疫血清抗体的试验

冻干（醛化）红细胞和新鲜红细胞与同一份鸡血清分别做鸡新城疫（ND）的血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验，二者血凝抑制价基本符合率达98．72％，相关系数为0．9288，冻干红细胞完全可以代替新鲜红细胞做血凝抑制试验检测鸡新城疫抗体效价。     

不同醛化方法制备的鸡红细胞对新城疫病毒的血凝对比试验

在血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验中,由于新鲜红细胞容易破碎,保存时间短,每次试验需临时准备,使用很不方便。本文采用醛化红细胞进行新城疫的HA试验,并与新鲜红细胞进行对照。结果表明两种红细胞在新城疫的HA试验中的结果基本一致,效果良好。     

在鸡新城疫HA和HI试验中使用醛化红细胞的试验观察

长期以来,在鸡新城疫(ND)血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验中均使用新鲜鸡红细胞,由于这种新鲜红细胞保存时间短,使用之前临时采血洗涤,费时又不方便;同时因不同批次或不同鸡只个体红细胞的差异而影响检测结果。而醛化红细胞具有保存时间长(一年左右)、不溶血、不易破碎和使用方便等优点。笔者在鸡新城疫 HA 和 HI 试验中使用醛化红细胞替代新鲜红细胞进行了试验观察,获得满意的效果,现报告如下。     

应用反向间接血凝法(IHA)检测冻兔肉产品中兔出血症病毒的研究

兔出血症病毒的常规检测方法是血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验,此法所用新鲜人红细胞均需用前洗涤,较为不便,为此,我们选用双醛化绵羊红细胞做成抗体致敏红细胞以代替新鲜的人红细胞,以利测毒技术的推广应用。一、材料和方法(一)材料1.兔的肌肉及骨髓检测材料由邳县肉联厂提供。2.双醛化绵羊红细胞由南京农业大学兽医微生物教研组或江苏省农科院兽医所提     

应用微量HI试验检测鸡减蛋综合症卵黄抗体

用微量血凝抑制(HI)试验对曾发生过减蛋综合症(IDS-76)鸡群进行其卵黄抗体水平检测.结果证明,卵黄抗体效价与血清抗体效价基本相同,从而证实用卵黄HI 试验代替血清 HI 试验检测 EDS-76的抗体水平是可行的,且本法经济,省力,省时,有实用价值.     

醛化人“O”型红细胞的制备及其在兔出血症HA／HI试验中的应用

在兔出血症的检测和免疫监测中,血凝／血凝抑制试验（HA／HI）是常规有效的检测方法。针对人“O”型新鲜红细胞存在质脆易碎、保存期短的缺点,从醛化人的“O”型红细胞制备方法的优化、工作浓度、保存时间三个方面进行研究,并用于兔出血症的HA／HI试验,同时以新鲜的人“O”型红细胞作为对照。结果表明：经戊二醛-甲醛二次醛化的红细胞的醛化效果与只用戊二醛醛化的红细胞效果差异不显著,均优于甲醛醛化效果,且经戊二醛-甲醛二次醛化或戊二醛醛化后的红细胞不溶血,性质不变,易保存;在兔出血症HA/HI试验中,经戊二醛醛化人“O”型红细胞的试验效果与新鲜红细胞差异不大,结果稳定性好。     

间接ELISA检测禽流感抗体方法的建立

应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的禽流感病毒 (AIV) ,经 triton X-1 0 0处理并反复冻融制备禽流感 EL ISA抗原。应用抗鸡 Ig轻链单抗 1 B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测禽流感抗体水平的 EL ISA方法。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 EL ISA效价(ET)的回归方程 y=0 .77452 x 0 .8793 5(r=0 .9466) ,可用于定量测定。血凝抑制 (HI)抗体与 EL ISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比血凝抑制试验敏感 1 .5倍以上     

猪红细胞醛化及其在犬细小病毒血凝试验中的应用

为了克服犬细小病毒血凝检测因随时需要新鲜猪红细胞而不能在临床广泛应用的缺点,试验用戊二醛醛化猪红细胞进行犬细小病毒血凝试验(HA)。结果表明:醛化后的红细胞不变形,结构完整,细胞膜的硬度增加,细胞不易破碎。1%醛化猪红细胞比1%新鲜猪红细胞检测结果低1~2个效价,结果容易判读,且具有检测的特异性,准确性。说明醛化的猪红细胞可以代替新鲜猪红细胞进行血凝检测。     

血凝抑制试验中常见问题的分析

正血凝抑制试验(HI)是基层兽医实验室常用的检测禽流感及新城疫抗体效价的试验方法,步骤简单,但在操作中由于一些细节把控不到位,经常出现试验失败或结果判定不准确的问题。笔者就血凝抑制试验中常出现的问题总结如下。1基本操作步骤血凝抑制试验(HI)常分为三个阶段来完成,一是准备阶段,主要是准备PBS液、阿氏液及1%鸡红细胞悬液;二是血凝试验(HA)阶段,主要是配制4单位抗原;三是血凝抑制试验(HI)阶段,主要是测     

新城疫HA-HI试验中可用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞

在鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中,将豚鼠红细胞用戊二醛醛化处理后配制成2%细胞悬液,与2%新鲜豚鼠红细胞、1%新鲜鸡红细胞获得的检测结果基本一致.经醛化的豚鼠红细胞在4℃或室温条件下也能长时间保存而不溶血.结果表明,在新城疫HA-HI试验中可以用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞.     

新城疫诊断试剂盒的研制及初步应用

根据新城疫病毒(NDV)对鸡红细胞的凝集以及相应抗体对病毒血凝的抑制的原理设计出新城疫抗体监测试剂盒，主要用于鸡新城疫抗体水平的监测，为正确实施新城疫疫苗适时接种提供依据。试剂盒包括新城疫阳性血清、新城疫阴性血清、4单位新城疫抗原和10ml／L醛化红细胞。经对50多份血清检测结果表明，用于血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的醛化红细胞与新鲜红细胞无显著性差异(P＞0．05)，并能准确检测出鸡群新城疫抗体水平，具有操作简便、适用、易于保存等特点。     

间接ELISA法检测鸡新城疫抗体

应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的新城疫病毒(NDV),经triton X-100处理并反复冻融制备新城疫 ELISA抗原.应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测NDV抗体水平的ELISA方法.确立了将鸡血清100倍稀释检测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.941 28 x 0.206 77,r=0.981 63,可用于定量测定.血凝抑制(HI)方法与ELISA方法的比较试验表明,ELISA法的敏感性是HI方法的3倍以上.应用建立的ELISA方法比较了卵黄、气管及胆汁中局部抗体与血清抗体的差异.     

鸡醛化红细胞在鸽Ⅰ型副粘病毒HA和HI试验中的应用

在血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中，传统的方法采用新鲜红细胞。由于新鲜红细胞容易破碎，保存时间短，每次试验需临时准备，使用很不方便。本文采用醛化红细胞进行鸽1型副粘病毒的HA和HI试验，并与新鲜红细胞进行对照，结果表明，两种红细胞在鸽1型副粘病毒的HA和HI试验中的结果基本一致，而使用醛化红细胞更为便利。现将结果报道如下。1材料与方法l．l鸽1型副粘病毒（鸽A／PMV－1）；鸽A”MV－IZH株由本室鉴定保存，在9－11日龄鸡胚培养后收获尿囊液无菌检查后置4C保存备用。用于HI试验的病毒经0．2％甲醛37C灭活24小时后置…     

不同免疫增效剂对鸡减蛋综合征免疫效果的影响

为了验证不同免疫增效剂对鸡减蛋综合征(EDS76)免疫效果的影响,试验以鸡减蛋综合征抗体效价为指示,比较不同免疫增效剂的免疫效果。每只鸡皮下注射EDS76灭活油乳剂疫苗,再将试验鸡随机分成4个试验组和1个对照组,试验组分别给予鸡转移因子、黄芪、左旋咪唑、灵芝粉4种药品,对照组给予等量的生理盐水。在免疫后的1,4,6,8,10,12,14,16,18,20,22,24天分别采血,采用血凝抑制试验(HI)测定EDS76抗体效价。结果表明:鸡转移因子组在第14天时抗体效价出现极显著差异,且一直保持增长趋势;黄芪组在第18天时抗体效价出现极显著差异,且一直保持高水平状态;左旋咪唑组只在第20天时抗体效价出现显著变化;灵芝粉组在第12天时抗体效价出现显著变化,并一直保持高水平状态。说明鸡转移因子的增效作用最强可优先使用,黄芪和灵芝粉次之,左旋咪唑酌情使用。     

影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)]，在非免疫鸡胚上增殖后，用蔗糖透析法浓缩10倍，再分别采用三种方法处理，制备IBV-HA抗原：1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R．W．F．C4)处理IBV；2)用2．5U／mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV；3)用1％胰酶处理IBV。结果显示，除T株仍不具有血凝性外，其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达2^8，Fu、Gray、W、H株的HA效价也达2^7—2^9。但是，用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为1％胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用，非特异性HA价高达8log2。而采用R．W.F．C4和2．5U／ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV—HA抗原，除T株外，均能凝集鸡红细胞，且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制，而不能被ND、EDS—76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制，说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R．W．F．C4和用2．5U／ml PLC1处理IBV制备HA抗原血凝价，结果显示二者的血凝价是一致的，所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。本试验还采用IBV—M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV—HA双价抗原，结果表明，用上述IBV—HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV—HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著，说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛，可用于IB的免疫监测和诊断。本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC—SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较，结果经统计学分析表明：HI效价与CEKC—SN效价呈正相关，相关系数为0．6585，且HI法比ECKC—SN法省时、省力。     

马动脉炎病毒血凝抑制试验研究及其应用

用马动脉炎病毒（EAV）免疫SPF豚鼠，4周后采血做血凝抑制试验（HI），其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应，抗原和抗血清在4℃感作24h后可以检测到最高的HI抗体效价，同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关。对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验（NT）进行EAV抗体检测，HI和NT阳性符合率为94．7％，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关。     

对血凝试验用鸡红细胞保存条件的探讨

对血凝试验所用的鸡红细胞的保存条件进行了比较。在新鲜红细胞液中加入甘油或尿素可以延缓细胞破裂溶血。鸡红细胞经戊二醛处理后，于4℃保存9个月，其凝集特性未发生变化，同时在醛化红细胞中加入甘油更能稳定血凝活性。在4℃、室温和37℃条件下将制备的新鲜红细胞和醛化红细胞用作血凝试验的指示剂，不影响新城疫病毒抗原血凝滴度。结果表明，所制备的醛化鸡红细胞的甘油悬液可以替代新鲜红细胞用于临床实践中新城疫的血凝和血凝抑制试验测定。