枯草杆菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质的研究

[目的]探究枯草杆菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质。[方法]研究枯草杆菌诱导的家蝇幼虫提取物的抗菌活性及其对温度、酸碱、离子强度的稳定性。[结果]枯草杆菌诱导的家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑制作用更强,诱导组的抗菌活性优于未诱导组。枯草杆菌诱导家蝇产生抗菌物质的具有很好的温度稳定性,在pH值4~10范围内都有较高的活性,但随着离子强度的升高抗菌活性下降。[结论]该研究为抗菌物质应用于饲料提供理论依据。     

家蝇幼虫提取物的抗菌活性

利用抑菌圈测量法研究家蝇幼虫提取物的抗菌活性,并且利用蛋白酶K水解和毛细管电泳对提取物中抗菌成分进行初步鉴定.结果表明,家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑制作用更强,诱导组的抗菌活性优于未诱导组;毛细管电泳显示志贺氏菌诱导的家蝇幼虫有56个新的主峰.因此,诱导组的高抗菌活性主要是由于昆虫体内诱导产生的肽类,组成性的蛋白性质的酶类,如溶菌酶对其抗菌活性有一些次要的贡献.     

马尾松毛虫幼虫免疫系统对苏云金杆菌诱导的应答研究

报道苏云金杆菌注射处理马尾松毛虫５龄幼虫后对血淋巴抗菌物质的诱导效果,诱导动力学,抗菌物质的活性、抗菌的种类。结果表明,通过注射法可诱导马尾松毛虫幼虫产生抗菌物质,其活力高峰出现在诱导后４２ｈ。诱导后６０ｈ的血淋巴稀释１００倍,对苏金杆菌的溶菌活力仍达１．４２＊１０＾－９ｍｏｌ．ｓ＾－１。其抗菌物质苏云金杆菌,大肠杆菌,等均有抑菌作用。     

稻蝗抗菌肽的诱导和粗提物活性研究

近年来,昆虫抗菌肽的研究逐渐成为昆虫免疫学及分子生物学研究的热点之一,它可为抗菌和抗肿瘤新药的开发提供新的来源。本文对稻蝗(Oxyachinensis)幼虫进行了紫外照射、超声波、针刺、菌液注射的处理,发现E.coli注射诱导产生的抗菌物质活性明显;通过对不同指示菌做抑菌测定,结果显示稻蝗抗菌肽仅抗革兰氏阳性菌;经高温处理、酸性处理,表明此抗菌物质为一种热稳定的碱性抗菌多肽。     

链球菌诱导后家蝇幼虫提取物的抗菌活性研究

[目的]为枯草杆菌诱导后的家蝇幼虫提取物在饲料中的应用提供依据。[方法]采用抑菌圈测量法测定链球菌诱导后家蝇幼虫提取物的抗菌活性,分析其对温度、酸碱和离子强度稳定性的影响。[结果]链球菌诱导的家蝇幼虫提取物对细菌的抑菌圈直径为6.55~11.01 mm。诱导组中家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其对革兰氏阳性菌的抑制作用较强。而未诱导组提取物对细菌的抑菌圈直径为6.01~8.01 mm,诱导组的抗菌活性高于未诱导组。抗菌肽样品具有较好的温度稳定性。当pH值为4~10时,抗菌肽样品的抗菌活性均较高,以pH值为8时最高。抗菌肽样品的抗菌活性随离子强度的升高而下降。[结论]抗菌肽的抑菌活性受环境离子强度的影响,与其作用机理有关。     

丝光绿蝇幼虫血淋巴中抗菌物质的抑菌活性

观察丝光绿蝇(Lucilia sericata)三龄幼虫经针刺体壁诱导48 h后的血淋巴在不同pH琼脂平板上对溶壁微球菌(Micrococcus lysodeiktic us)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌效果,以及经不同pH缓冲液处理后对溶壁微球菌的抑菌效果.结果表明,丝光绿蝇幼虫经针刺诱导后48 h的血淋巴在pH 6.0、6.5的琼脂平板上对金黄色葡萄球菌的抑菌环较大较清晰,随pH增加抑菌环直径减小.在piH 6.0时,对溶壁微球菌的抑菌环直径最大,随pH增加抑菌环直径减小.用pH 6.0的缓冲液稀释处理血淋巴时,对溶壁微球菌的抑菌环最大,用pH 9.0缓冲液稀释后对溶壁微球菌的抑菌环最小.说明丝光绿蝇幼虫经针刺体壁诱导产生的抗菌物质在酸性条件下比在碱性条件下具有更强的抑菌活性.     

黄粉虫幼虫中抗菌肽的诱导及其抗菌活性的初步研究

本文前次以鞘翅目拟步甲科昆虫黄粉虫幼虫为实验材料，分别用超声波和饥饿后饲喂大肠杆菌的方式进行诱导，对诱导前后０￣４ｄ内获得的抗菌肽进行了平板测活。实验表明抗菌肽含量在诱导后第４ｄ最高，且在４ｄ内随时间的增加而增加。两种诱导方式诱导出的抗菌肽具有相似的抗菌活性，都能较好地抑制大肠杆菌０７９和沙门氏菌５０１５，且收集的抗菌物质经１００℃处理２０ｍｍ后抗菌活性基本不变。本文前次采用了饥饿后饲喂含菌食物的     

大肠杆菌诱导对肉鸡白细胞粗提物抗菌活性的影响

为研究异物刺激对肉鸡机体抗菌物质活性的影响。测定了大肠杆菌诱导后肉鸡白细胞粗提物活性变化,分别对大肠杆菌诱导前和诱导后的健康肉鸡进行采血,血液红细胞溶胀、离心后,各取含1×107个白细胞的溶液经超声波破碎,10%(V/V)乙酸浸提、旋转蒸发,获得白细胞粗提物,采用微量琼脂扩散法测定粗提物的抗菌活性。结果表明,所得到的白细胞粗提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现抑制作用,诱导后的粗提物比诱导前具有更强的抗菌活性。大肠杆菌诱导增强了肉鸡白细胞粗提物的抗菌活性。     

黄粉虫幼虫抗真菌物质的诱导及其抗真菌活性研究

[目的]研究用真菌诱导黄粉虫幼虫表达抗菌物质及其对真菌的影响。[方法]用黄粉虫幼虫从土壤中诱捕真菌,培养出2种病原真菌作为诱导源分别对黄粉虫幼虫做诱导试验,每种试验分别进行对照、菌刺和菌饲3种处理,并于处理后1、2、3、4和5 d分别提取抗菌物质,用平板琼脂打孔扩散法测定其抑菌圈直径而确定其抗真菌活性。[结果]结果表明,黄粉虫幼虫受真菌诱导后抗真菌活性比对照都有不同程度的增加,同时不同真菌诱导表达样品对于相应的诱导真菌均表现明显的抗真菌活性。说明不同真菌诱导产生的抗真菌物质与诱导源有关,抗真菌物质为黄粉虫幼虫体内固有成分,诱导增加了抗真菌物质的表达量,同时刺激新的抗真菌物质的产生。[结论]用真菌直接诱导黄粉虫幼虫可以产生抗真菌物质。     

大蜡螟抗菌物质的抑菌活性检测及其初步分离

以大蜡螟末龄幼虫为材料,诱导后获得免疫血淋巴为抗菌粗提物,并分为新鲜,冷冻,加热3种不同的处理,进行了对2种常见细菌和16种植物病原真菌的抑菌活性检测,并进行了Sephadex G-50凝胶过滤分离.结果表明,大蜡螟抗菌物质对大肠杆菌没有明显的抑制作用,而对金黄葡萄球菌抑制作用明显,抑菌活性单位在10左右;对10种植物病原真菌均有不同的抑菌活性,其中对苹果树皮腐烂病菌的抑制率达到65%以上;经过凝胶过滤分离,及对分离组分的抑菌活性测定,筛选出较合适的洗脱液为50 mM乙酸铵,各分离组分抑菌活性差异明显,粗提物被分成了两个差异显著的部分.     

黄粉虫抗菌肽的生物学性质及初步分离纯化

［目的］探索黄粉虫抗菌肽的生物学性质。［方法］通过菌液注射对黄粉虫幼虫进行抗菌肽的诱导,对其热敏感性、反复冻融的稳定性、抑菌活性的适宜pH值及部分抑菌谱进行测定,并对黄粉虫血淋巴抗菌肽进行了初步的分离纯化。［结果］黄粉虫抗菌肽热稳定性好,反复冻融对其活性影响不大,显示出一定的抗酸碱性能,在pH为5时抑菌效果最佳,对测试的6种动物病原细菌均有不同程度的抑制作用,特别是对猪致病性大肠杆菌和猪链球菌,具有较强的抑菌活性。经SephadexG-25凝胶过滤柱层析分离得到3个活性峰,表明黄粉幼虫血淋巴中有多个抗菌活性组分。［结论］该研究为黄粉虫抗菌肽的利用奠定了理论基础。     

黄粉虫幼虫中抗菌肽的诱导及其抗菌活性的初步研究

本文首次以鞘翅目拟步甲科昆虫黄粉虫（Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ）幼虫为实验材料,分别用超声波和饥饿后饲喂大肠杆菌的方式进行诱导,对诱导前后０～４ｄ内获得的抗菌肽进行了平板测活。实验表明抗菌肽含量在诱导后第４ｄ最高,且在４ｄ内随时间的增加而增加。两种诱导方式诱导出的抗菌肽具有相似的抗菌活性,都能较好地抑制大肠杆菌０７９和沙门氏菌５０１１５,且收集的抗菌物质经１００℃处理２０ｍｉｎ后抗菌活性基本不变。本文首次采用了饥饿后饲喂含菌食物的诱导方式,简便易行,适合大量昆虫抗菌肽的诱导、分离及应用。     

诱导源及其诱导剂量对黄粉虫幼虫血淋巴抗菌活性的影响

采用紫外线、超声波、菌液饲喂、菌液注射等方法对黄粉虫(Tenebrio molitor)进行抗菌肽的诱导,每种诱导方法分别采用不同诱导剂量,以确定最佳的诱导方法和最适的诱导剂量。结果表明:不同诱导方法的黄粉虫幼虫血淋巴抑菌活性大小为菌液注射紫外线菌液饲喂超声波。菌液注射法适宜的注射剂量为104cfu/头,诱导后培养48 h抑菌效果最好。采用琼脂糖孔穴扩散法进行测定,其对猪致病性大肠杆菌等6种动物病原细菌均有不同程度的抑制作用,特别是对猪致病性大肠杆菌和猪链球菌具有较强的抑菌活性。     

黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导特性及电泳组分研究初报

对黄粉虫幼虫分别进行空白对照、菌刺、菌饲、热激和超声波四种处理,并于处理后1d、2d、3d、4d、5d分别提取黄粉虫幼虫体内的抗菌肽,做抗大肠杆菌（革兰氏阴性菌）和抗金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）试验及交叉抑菌试验,测定其抑菌圈大小,确定其抗菌活性和诱导特异性,同时还进行抗菌肽热稳定性及电泳试验。结果表明：水浴后提取的抗菌液抑菌效果明显,四种处理的黄粉虫幼虫均能产生抗大肠杆菌／金黄色葡萄球菌物质。其中抗金黄色葡萄球菌效果要略好于抗大肠杆菌效果,其抗菌效果显著性依次为：菌饲、对照、热激和超声波、菌刺,而抗大肠杆菌效果显著性则依次为：菌饲、菌刺、热激和超声波、对照。交叉抑菌试验表明黄粉虫幼虫体内抗菌肽的产生不具有诱导特异性。电泳图谱显示黄粉虫抗菌肽含有5种肽组分。     

柞蚕滞育蛹抗菌物质产生及其抑菌活性研究

以虫草菌对柞蚕滞育蛹进行诱导,收集不同发育时期的血淋巴,用多种病原真菌、细菌对其进行抑菌活性检测,研究其抗菌谱,并以大肠杆菌、柞蚕链球菌诱导柞蚕蛹作比较. 结果表明:3种诱导源均能诱导产生抗菌物质,且三者所产生的抗菌物质对金黄色葡萄球菌等几种细菌的抗菌活性差别不明显;虫草菌诱导产物对细菌、真菌的抑菌谱广.蛋白质酸性电泳结果表明,虫草菌诱导后的柞蚕蛹血淋巴中有新的小分子蛋白产生,推测可能是具有抗菌活性的物质.     

哈氏弧菌诱导布氏石斑鱼头肾提取物的抗菌活性研究

以致病性哈氏弧菌（Vibrio harveyi）腹腔注射布氏石斑鱼（Epinephelus bleekeri）18h后,取布氏石斑鱼头肾制备头肾粗提物,并对该粗提物的抗菌活性进行研究,结果表明：布氏石斑鱼经哈氏弧菌诱导后,其头肾粗提物不仅对金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）等革兰氏阳性菌有良好抑制作用,而且对大肠杆菌D31（Escherichio coli D31）、哈氏弧菌和溶藻弧菌（V.alginolyticus）等革兰氏阴性菌也有良好抑制效果;利用电泳凝胶琼脂糖弥散法检测发现,头肾粗提物中具有多种对大肠杆菌D31有较强作用效果的蛋白类抗菌物质;切胶回收AU—PAGE凝胶上的抗菌组分,利用SDS—PAGE凝胶检测各抗菌活性组分的分子质量大小依次约为：10．9KD,10．0KD,8．1KD,7．2KD,6．3KD,由于这些抗菌活性成分可被蛋白酶破坏,且分子质量均接近或低于10KD,可初步将其认定为抗菌肽。     

家蝇幼虫抗菌物质的热稳定性研究

为探讨家蝇(Musca domestica)幼虫抗菌物质的热稳定性,于针刺家蝇3龄幼虫48 h后提取血淋巴,经不同时间不同温度加热处理,测定其对溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制效果.结果表明,家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质对高温具有一定耐受性,处理温度为80～100℃时抑菌活力随处理时间延长而减弱,60℃处理30s至10 min对其抑菌活力无明显影响.     

美洲大蠊血淋巴抗菌活性诱导差异比较

报道了不同诱导源处理美洲大蠊（Periplaneta americana L.）后对抗菌物质的诱导结果。结果表明，不同诱导源均可诱导抗菌物质的产生，但抗菌活性有差异。在供试诱导源中，大肠杆菌（Escherichia coli K88）所诱导产生的抗菌活性最强，其次为溴氰菊酯。日龄10d以内的成虫诱导后的24h即表现抗菌活性，其中，10日龄以内的雄成虫抗菌活性比例以及诱导后的存活率最高。     

大肠杆菌诱导中华蜜蜂血淋巴产生抗菌物质的分离分析

利用大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ诱导中华蜜蜂血淋巴产生抗菌物质（中蜂抗菌物质）研究表明,中蜂抗菌物质对热稳定,对胰蛋白酶和蛋白酶Ｋ都很敏感,对氯仿部分敏感,且其作用的活性ＰＨ范围较宽广、把大肠杆菌诱导后的中蜂免疫血淋巴沸水浴国热后离心,上清液经ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析后出现一个活性峰,活性峰收集液经Ｕｌｔｒａｆｒｅｅ－Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａ ＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＤｅｖｉｃｅ离心过滤器和ＳＤＳ－Ｐ     

大肠杆菌诱导中华蜜蜂血淋巴产生抗菌物质的分离分析

利用大肠杆菌Ｅ, ｃｏｌｉ诱导中华蜜蜂血淋巴产生抗菌物质（中蜂抗菌物质）研究表明,中蜂抗菌物质对热稳定,对胰蛋白酶和蛋白酶Ｋ都很敏感,对氯仿部分敏感,且其作用的活性ｐＨ范围较宽广。把大肠杆菌诱导后的中蜂免疫血淋巴沸水浴加热后离心,上清液经ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析后出现一个活性峰。活性峰收集液经Ｕｌｔｒａｆｒｅｅ－Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＤｅｖｉｃｅ离心过滤器过滤和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析,发现中蜂免疫血淋巴中至少含有两种抗菌活性蛋白类物质,其中一种的分子量约为１１． ３ ｋＤ,另一种的分子量在５ｋＤ以下。