胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪蓝耳病抗体的比对试验

胶体金免疫层析试纸条检测猪蓝耳病抗体的结果中强阳性、中阳性、弱阳性、阴性分别为48.67%、18.58%、31.86%、0.88%,检测猪蓝耳病抗体合格率99.12%;ELISA检测猪蓝耳病抗体合格率95.58%,符合率为96.43%。胶体金免疫层析试纸条能够评价猪蓝耳病疫苗临床免疫状况,可进行猪蓝耳病抗体的定性检测。     

胶体金法与ELISA法检测猪瘟抗体结果对比分析

为了比较胶体金法与ELISA法检测猪瘟抗体的结果符合率,以了解胶体金法的特异性与敏感度,用胶体金法和ELISA法平行检测受检猪血清标本猪瘟抗体滴度。结果表明．胶体金法和ELISA法检测猪瘟抗体的结果符合率为86．6％．用胶体金法检测猪瘟抗体存在漏检及误诊（即假阴性、假阳性）。说明胶体金法较ELISA法敏感度、特异度低,用胶体金法检测猪瘟抗体滴度存在一定程度的漏检率及误诊率,胶体金法只能初步筛查猪瘟抗体．有一定技术力量的县级兽医实验室使用EUSA法检测猪血样的猪瘟抗体滴度更为合适,对于胶体金法筛查阴性的猪血样．建议用ELISA法复检以防漏检。     

胶体金法与酶联免疫吸附测定法检测猪瘟抗体的比较

为比较胶体金法与ELISA法检测猪瘟抗体的符合率,以了解胶体金法的特异性与敏感度,用胶体金法和ELISA法平行检测受检猪血清标本猪瘟抗体滴度.结果表明,胶体金法和ELISA法检测猪瘟抗体的结果符合率为86.6％,胶体金法较ELISA法敏感度、特异度低,用胶体金法检测猪瘟抗体滴度存在一定程度的漏检率及误诊率,只能初步筛查猪瘟抗体.具有一定技术力量的县级兽医实验室使用ELISA法检测猪血样的猪瘟抗体滴度更为合适,对于胶体金法筛查阴性的猪血样,建议用ELISA法复检以防漏检.     

青海省海北州藏系绵羊种羊几种疫病的血清学调查

为了保证外调藏系种羊不感染疫病及无疫病病原传播,对筛选出的准备调运的藏系种羊进行疫病的血清学调查,试验分别采用布鲁氏菌试管凝集试验、小反刍兽疫病毒抗体直接竞争ELISA方法、口蹄疫病毒非结构蛋白抗体单克隆抗体阻断ELISA方法和口蹄疫O型液相阻断ELISA方法对藏系绵羊30份血清样品进行了布鲁氏菌、小反刍兽疫、口蹄疫自然感染和疫苗免疫的血清学抗体检测。结果表明:所有被检血清中均未检出布鲁氏菌和自然感染口蹄疫病毒抗体阳性血清。小反刍兽疫和口蹄疫疫苗免疫抗体水平检测显示,小反刍兽疫免疫抗体阳性血清30份,阳性率为100%;口蹄疫免疫抗体阳性血清28份、可疑血清1份、阴性血清1份,阳性率为93.33%,阳性血清免疫抗体效价均大于1∶128(保护率大于99.00%),可疑血清免疫抗体效价1∶90(保护率大于50.00%),阴性血清免疫抗体效价小于1∶2(不保护)。说明此次海北州筛选的藏系绵羊种羊未感染上述疫病,且疫苗免疫抗体效价水平较好,适合作为外调种羊。     

兰州市城关区犬布鲁氏菌病血清学调查与分析

为了解甘肃省兰州市城关区犬布鲁氏菌病的流行情况，从兰州市城关区动物医疗机构和兰州市流浪动物救助站共采集犬血清343份，采用光滑型虎红平板凝集试验、粗糙型虎红平板凝集试验、通用型胶体金检测法和光滑型胶体金检测法进行检测，对4种方法检测出的阳性血清进行通用型快速PCR复检；对光滑型虎红平板和粗糙型虎红平板凝集试验检测出的阳性血清再分别进行光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检。结果表明，4种方法共检出34份阳性血清，其中抗体检测法虎红平板凝集试验、试管凝集试验及布鲁氏菌通用型抗体检测试纸条分别检测出阳性血清22份、18份和12份，抗体阳性率分别为6.4%、5.2%和3.5%;抗原检测法通用型快速PCR检出阳性血清25份，抗原阳性率为7.2%。22份虎红平板凝集阳性样本经光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检，共检出阳性血清18份，且均为粗糙型；布鲁氏菌光滑性抗体金标快速检测卡检测均为阴性。说明兰州市城关区犬感染的主要是粗糙型布鲁氏菌，快速通用型荧光PCR的阳性检出率最高。     

胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪瘟抗体的比对试验

胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟抗体阳性检出率94.69%,ELISA法检测猪瘟抗体合格率95.58%,两者符合率为99.07%;胶体金免疫层析试纸条强阳性率为86.73%,ELISA检测猪瘟抗体阻断率≥60%为89.38%,检测线显色强度与抗体水平呈正相关。     

ELISA和胶体金法在猪瘟病毒检测中的应用

为探讨胶体金检测技术和ELISA在猪瘟病毒检测中的应用,通过对西藏林芝地区某县采集的92个疑似猪瘟样品进行免疫胶体金免疫层析法与ELISA法检测猪瘟抗体和抗原,比较两法检测结果的符合率。结果表明,猪瘟胶体金法抗原和抗体检测阳性符合率为100%,ELISA法检测的阳性符合率为95%以上。猪瘟的胶体金法抗原和抗体检测阳性符合率较高,同时该结果与ELISA的抗原和抗体检测阳性符合率高,说明使用猪瘟疫苗进行免疫在西藏林芝地区某县可以取得95%以上的免疫效果。这两种方法操作方便、快速,适合于临床快速检测和疫病普查中高通量样品的筛查。     

猪圆环病毒2型抗体间接ELISA检测方法的建立

为了更加快速灵敏地检测血清中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体的水平,我们通过优化反应条件建立了快速检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果显示,本研究研制的试剂盒检测3份PCV2抗体阳性血清的阳性滴度为1∶12 800～1∶25 600,而韩国JBT PCV2试剂盒检测的阳性滴度为1∶3200～1∶6400;对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫病毒等10种其他病原体的20份阳性血清的检测结果均为阴性,表明本研究研制的试剂盒具有良好的特异性;批内重复性试验变异系数(C.V%)为2.26%～7.60%,批间重复试验的变异系数(C.V%)为1.67%～6.41%,变异系数均小于10%,呈现良好的可重复性。因此,我们成功建立了敏感性高、特异性强及重复性好的猪圆环病毒2型抗体间接ELISA检测方法。     

四种试剂盒检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体的对比试验

使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。     

两种方法检测高致病性猪蓝耳病免疫抗体的对比试验

采用猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)ELISA试剂盒和金标试纸检测高致病性猪蓝耳病免疫抗体,在首免后14d两试验组用金标试纸法检测血清样品均为阳性,并一直持续到首免后112d;用ELISA法检测同份血清,在首免后28～35d出现阳性,两试验组阳性率分别为20%、30%,首免后49d阳性率为80%,此后阳性率逐渐下降,至98d时两组分别为0和20%.结果表明:猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)疫苗免疫后抗体监测使用的方法不同,结果差异很大.     

猪伪狂犬病病毒间接ELISA检测方法的建立

以纯化的PRV抗原为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立了可检测PRV血清抗体的间接ELISA诊断方法。标定抗原的最佳包被量为0.802μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶100,最佳作用时间为60min,判定标准为OD 450nm值大于0.357为阳性,小于0.296为阴性,在0.296与0.357之间为可疑。该方法检测其他6种常见猪病病毒(CSFV、PCV-2、PRRSV、PPV、JEV、TGEV)的阳性血清均为阴性;与商品化ELISA试剂盒相比较,符合率、敏感性和特异性分别为90.0%、87.1%、92.3%。本研究建立的PRV间接ELISA抗体检测方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,为PRV免疫猪群抗体监测、快速诊断和PR流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法。     

不同蓝耳病疫苗对仔猪免疫效果试验

选取了100只猪蓝耳病抗体检测呈阴性的仔猪作为研究对象,给仔猪进行不同疫苗注射,28 d后采集免疫仔猪的血清进行免疫抗体检测。结果表明,仔猪首次免疫和加强免疫使用弱毒疫苗的抗体阳性率达75%以上,远远高于灭活疫苗的抗体保护率30%~40%。为临床猪蓝耳病的防治提供了有力的依据。     

贵州省江口县家养野猪血清学和病原学调查

2015年,采集贵州省江口县梵态特种野猪养殖场90头家养野猪活体扁桃体和全血,进行高致病性猪蓝耳病(HPRRS)、猪O型口蹄疫(O-FMD)、猪瘟(CSF)和猪伪狂犬病(PR)血清学和病原学调查,所用的实验方法为荧光RT-PCR和ELISA。结果 90份扁桃体和9份PRV-gE抗体阳性血清的PRV荧光RT-PCR结果全部为阴性,PRRS免疫抗体阳性率为84%(76/90),O-FMD免疫抗体阳性率为79%(71/90)、CSF免疫抗体阳性率为58%(52/90)、PRV免疫抗体阳性率为46%(41/90)、gE-PRV抗体阳性率为28%(9/32)、3ABC-FMD抗体阳性率为0(0/90)。     

IHA与ELISA检测猪瘟病毒抗体的比较

应用间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪瘟病毒抗体,IHA试验以1∶16为判定孔,抗体效价大于或等于1∶16为抗体阳性;ELISA试验以抗体阻断率40%为判定标准,阻断率大于或等于40%为抗体阳性,同步检测了122份规模化猪场不同阶段免疫猪血清.结果ELISA检测抗体阳性率比IHA检测抗体阳性率低,阴性、阳性相符的血清数为92份,相关性为 75.4%,不同抗体水平分布的血清数也不同,个别血清出现较大差异,卡方检验P值为0.13(＞0.05),两种检测方法统计上无差异,研究结果为选择猪瘟病毒抗体检测方法提供参考.     

三明市某规模化猪场几种疫病的检测情况与分析

通过对三明市某大型猪场进行猪瘟、普通蓝耳病、高致病性蓝耳病、伪狂犬病的病原学和血清学检测,以更好地了解这些疫病在猪场的流行情况,为猪场这几种疫病的防控和净化奠定基础。本次调查分别检测45份后备母猪血清、92份生产母猪血清、13份生产公猪血清,共计150份血清,150份扁桃体样品。通过ELISA方法分别检测了猪瘟、普通蓝耳病、伪狂犬病gE和伪狂犬病gB。荧光定量PCR方法检测了猪瘟、高致病性蓝耳病。结果猪瘟和高致病性蓝耳病病原学阳性率分别为8%和5.3%。一个月后对病原学检测阳性猪采样复查,结果猪瘟阳性率4.6%,高致病性蓝耳病阳性率2.6%。猪瘟免疫抗体合格率93.3%,普通蓝耳病免疫抗体合格率96%,伪狂犬病gB免疫抗体合格率100%,伪狂犬病gE感染抗体2%。生产母猪胎次越多,猪瘟和普通蓝耳病的免疫抗体水平越高。     

输入猪三种主要疾病的免疫抗体检测

用猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病抗体免疫金标试纸条,对途经运输环节进青的猪进行三种病免疫抗体检测。结果:猪瘟阳性率生猪为59%,仔猪为20.8%;猪蓝耳病生猪为1.2%,仔猪为0;猪伪狂犬病生猪为15.9%、仔猪为2%。说明生猪来源地抗体滴度总体不高,需加强免疫注射。     

重庆某地仔猪免疫蓝耳病活疫苗的最适剂量筛选

本试验采用1、2、4头份免疫剂量对重庆市荣昌县不同地区的仔猪进行PRRS免疫,然后在免疫后28 d和60 d分别采取血清用ELISA检测免疫抗体水平。结果显示:免疫4头份的抗体阳性率最高,为100%;其次为2头份免疫,抗体阳性率为91.67%;而1头份免疫的抗体阳性率仅为50%。进一步测定抗体滴度,发现2头份、4头份剂量在28 d和60 d的抗体效果差异性不显著。综合考虑,注射2头份高致病性猪蓝耳病活疫苗的免疫效果最佳。     

广西防城港市2021年猪场主要疫病抗体检测结果分析

为了解广西壮族自治区防城港市猪场主要疫病免疫和流行情况,2021年期间从13个猪场采集血清样本498 份,采用ELISA方法对血清抗体进行检测。结果显示,猪伪狂犬病gB、猪瘟免疫抗体阳性率相对较高,分别为89.6%、86.9%;仔猪、育肥猪O型口蹄疫免疫需要加强;猪伪狂犬病野毒感染抗体阳性率为12.7%,抗体阳性现象主要集中在个别猪场。经调查,提示猪场引种时要特别注意防控猪蓝耳病和猪伪狂犬病。     

猪细小病毒NS1非结构蛋白和VP2结构蛋白主要抗原区间接ELISA方法的建立与联合应用

为了建立猪细小病毒野毒抗体的NS1-i ELISA和猪群PPV免疫抗体水平的VP2-i ELISA方法,试验采用猪细小病毒NS1和VP2基因主要抗原区纯化后的原核表达重组蛋白作为包被抗原。结果表明:检测灵敏度为1∶12 800;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%,NS1-i ELISA方法与HI试验的符合率为100%;VP2-i ELISA方法与HI试验的符合率为94.7%,且比HI试验具有更高的敏感性。用这两种方法同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪O型口蹄疫病毒(FMDV)6种常见猪病病毒的阳性血清结果均为阴性。说明所建立的NS1-i ELISA和VP2-i ELISA诊断方法具有良好的重复性、敏感性和特异性。这两种方法可联合应于PPV野毒感染的快速诊断、流行病学调查、猪群免疫疫苗后PPV抗体水平的检测以及猪群PPV的净化。     

猪瘟间接血凝抗体与猪瘟病毒感染的相关性分析

运用猪瘟间接血凝方法和猪瘟抗原ELISA方法对广西6个规模猪场送检的1614份血清进行猪瘟免疫抗体滴度和猪瘟病毒的检测,观察不同间接血凝抗体与感染猪瘟病毒是否存在一定关系。结果发现在任何一个免疫抗体滴度,都有可能有感染猪瘟病毒,二者无明显相关性,当间接血凝抗体滴度过低(小于1:16)或过高(大于1:512)时猪感染猪瘟病毒的机会相对大一些。