浅谈禽流感的防制

禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ简写ＡＩ）是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类和鸟类的感染和疾病的综合征。禽及鸟类感染后可表现亚临床症状,或表现呼吸系统疾病,产卵下降,下痢或急性致死性疾病。１　分布１８７８年意大利鸡群暴发一种严重疫病,称为鸡瘟,到１９５５年才证实由Ａ型禽流感病毒（简写ＡＩＶ）引起的。１９５９年美国分离到Ｈ５Ｎ１流感毒株;１９７６年澳大利亚分离出Ｈ７Ｎ１;１９７９年法国分离出Ｈ１１Ｎ６和Ｈ６Ｎ７、Ｈ５;前苏联１９６７年分离出Ｈ３、Ｈ６、Ｈ４、Ｈ７、Ｈ３Ｎ１;１９７８年香港分离出Ｈ３…     

中国禽流感流行株的分离鉴定

分别从广东、四川、新疆等地禽流感（ＡＩ）血检阳性、发病率高、产蛋率下降的鸡群中采集１８６份病料，先后分离到６株Ａ型流感病毒。这些分离株可在鸡胚中传代，可凝集鸡红细胞，血凝价达１６０～１２８０倍。不被新城疫、减蛋综合症、败血支原体阳性血清所抑制。用这些分离毒株制成琼脂扩散（ＡＧＰ）抗原与禽流感标准阳性血清可出现白色沉淀线。分别将分离毒株与ＡＩ标准分型血清Ｈ１～Ｈ１４、Ｎ１～Ｎ９进行ＨＩ、ＮＩ试验，结果川和川农株均为Ｈ４Ｎ６，西昌１和２株及Ｓｈ株均为Ｈ９Ｎ２，新疆石河子（石）株为Ｈ１４Ｎ５。分离株分别做脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）、静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）测定，结果所有分离株ＩＣＰＩ介于０２４～１４８之间，ＩＶＰＩ介于０１５～０５６之间．通过电镜观察，可见直径为８０～１２０ｎｍ球状或杆状典型的禽流感病毒．经联机检索，从新疆石河子ＡＩ阳性鸡场产蛋下降的鸡群中分离出的Ｈ１４Ｎ５株为国内外首次从鸡中分离出的Ｈ１４亚型禽流感病毒。将某单位送检的禽流感鹅体分离株（Ｇ１株和Ｇ２株）做了血清型和毒力测定，试验结果认定，Ｇ１和Ｇ２株均为Ａ型禽流感病毒Ｈ５Ｎ１亚型，Ｇ１、Ｇ２株对鸡均达到高致病力毒株标准。     

禽流感的药物防制

禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ简称ＡＩ）是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类和鸟类的感染和疾病的综合征。１８７８年该病在意大利鸡群暴发的一种严重疾病，直至１９５５年美国才分离到Ｈ５Ｎ１流感毒株。近年在美洲、欧洲、非洲、亚洲、澳洲等地时有暴发，已分离到上千株ＡＩＶ毒株，病毒可分为不同的亚型，我国在８０年代从鸭分离到亚型有Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ４Ｎ８、Ｈ４Ｎ６，香港在１９７５～１９８０年分离到６２种亚型Ｈ１～１１和Ｎ１～９的组合。禽流感对鸡可直接或间接感染，如鸡、火鸡、鹌鹑、水禽和海鸟等均可感染。水禽…     

禽流感的防制

禽流感（ＡＩ）是由Ａ型正粘病毒引起的主要侵害鸡和火鸡的１种烈性传染病，可引起轻度呼吸道感染或带来毁灭性损失（病死率高达９５％）。Ａ型正粘病毒粒子表面存在血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）两种糖蛋白，Ｈ５和Ｈ７两类禽流感病毒（ＡＩＶ）可引起严重的感染，...     

禽流感病毒血凝素基因的克隆及其DNA疫苗的免疫原性

禽流感病毒（ＡＩＶ）的表面结构蛋白血凝素（ＨＡ）是其主要保护性抗原。本研究参考已发表的Ｈ７亚型ＡＩＶ的ＨＡ基因序列，设计合成了１对Ｈ７ＨＡ特异引物，以ＡＩＶＡ／Ａｆｒｉ．Ｓｔａｒ．／Ｅｎｇ－Ｑ／９８３／７９／（Ｈ７Ｎ１）（Ａ／Ａｆｒｉ．Ｓｔａｒ．／Ｅｎｇ）核酸为模板，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增出１条１．７ｋｂｃＤＮＡ片段。将这一片段定向克隆到ｐＵＣ１８中，对其５′端及３′端部分序列测定后，确证其为ＨＡｃＤＮＡ。将ＨＡ基因置于ＳＶ４０启动子和增强子下游，构建了这一基因的真核表达质粒ｐＳＶＨ７。以此质粒１００μｇ肌肉注射免疫３周龄ＳＰＦ鸡６只，４周后以１００倍鸡胚感染剂量（ＥＩＤ）的ＨＡ基因同源病毒对所有鸡进行攻毒，１周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离；免疫后１～６周每周对所有鸡翅静脉采血，分离血清，检测ＨＩ抗体。结果，１００μｇ免疫组鸡病毒分离数为０／６，对照组为６／６；攻毒后１周免疫组鸡ＨＩ效价为１∶３２～１∶６４，对照组为１∶４～１∶１６。表明所构建的ＨＡ基因表达质粒可作为基因疫苗诱导鸡产生免疫保护反应。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病,经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ＧＩＢ）,并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２株,ＨＡ效价为２＾１２,ＥＩＤ５０为１０＾－６．８１／０．２ｍＬ。病毒干扰试验中,ＩＢＶ ＪＢ９７０２＋ＮＤＶ ＬｓＡｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾４～６,ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾１０～１１;用ＩＢＶ ＪＢ９７０２病毒液１：１０稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ     

禽流感RT—PCR诊断法的建立

根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物,并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ,建立了逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法,应用此法对鸡胚培养ＡＩＶ尿囊液,ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩莠试验和电镜技术作了对比,特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）,传染性氏囊病病毒（ＩＢＤ     

禽流感RT-PCR诊断法的建立

根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物,并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ,建立了逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法。应用此法对鸡胚培养的ＡＩＶ尿囊液、ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）、传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合征病毒（ＥＤＳ－７６Ｖ）等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明,ＡＩＶ尿囊液ＲＴ－ＰＣＲ全部阳性,ＳＰＦ感染鸡粪便８７份,ＲＴ－ＰＣＲ检出６９份阳性,样品处理浓缩后琼脂扩散检出１１份,电镜检测了２３份样品,仅检出２份阳性。非特异性对照样品经ＲＴ－ＰＣＲ检测全部阴性。将ＡＩＶ感染鸡胚尿囊液作１０倍系列连续稀释,可检出稀释度为１０－２的病毒尿囊液。ＲＴ－ＰＣＲ最早检出时间为感染后第３天,而琼扩和电镜均是７天。该法具有高度的特异性和灵敏性,且节约时间（只需８小时左右）,可从分子水平上对ＡＩＶ进行早期快速诊断和流行病学调查     

禽流感二价抗原油乳剂灭活疫苗的研制

以禽流感病毒（ＡＩＶ）Ｈ５Ｎ４株、Ｈ７Ｎ３株为抗原研制了Ｈ５Ｎ４－Ｈ７Ｎ３二价油乳剂灭活疫苗,并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明,试验鸡疫苗在免疫后３周到９个月内对ＡＩＶ－Ｈ５Ｎ４的攻击均获全部保护。疫菌４℃保存１５个月,其免疫效力没有下降。     

鸵鸟流感病毒对鸡的致病性

鸵鸟流感病毒对鸡的致病性最近，美国Ｄ．Ｅ．Ｓｗａｙｎｅ等人通过试验测定了３个轻度致病性（ＭＰ）鸵鸟禽流感病毒（ＡＩＶ）的病理生理学特性。结果表明，鸵鸟ＡＩＶ可以引起美洲鸵鸟（ｒｈｅａ）发生呼吸道疾病，并且在接种后２～６天时从口咽和泄殖腔拭子中再分离出...     

禽流感病毒A／Afri.Star／Eng—Q／983／79／（H7N1）血凝素基因的全？…

对反转录－聚合酶链反应扩增克隆的Ｈ７亚型禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ａｆｒｉ．Ｓｔａｒ／Ｅｎｇ－Ｑ／９８３／７９／（Ｈ７Ｎ１）的血凝素（ＨＡ）基因进行了核苷酸序列分析。结果，克隆的ＨＡ基因共１７０７ｂｐ，包括完整的阅读框架；同源性分析表明该毒株起源于欧亚群系；ＨＡ裂解位点只有一个碱性氨基酸，显示典型的低致病力特征。Ｈ７亚型ＡＩＶ ＨＡ基因的克隆成功为分子诊断和基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

禽流感病毒重组核蛋白ELISA诊断技术的研究

用表达禽流感病毒（ＡＩＶ）核蛋白基因的杆状病毒感染Ｓｆ９昆虫细胞。以其表达产物制备抗原,建立了以杆状病毒系统表达的ＡＩＶ核蛋白为抗原的禽流感间接酶联免疫吸附试验诊断技术（ｒＮＰ－ＥＬＩＳＡ）。其抗原最适包被量为０．６μｇ／孔,等检血清最适稀释度为１：２００,酶标抗体使用浓度为１：１０００。根据对１４０份ＳＰＦ鸡血清检测结果的统计分析,确定其判定标准为ＯＤ均为阴性;检测Ａ型ＡＩＶ１５个不同亚型（Ｈ１￣Ｈ１５）毒株的特异性血清均为阳性;对人工接种ＡＩＶ的ＳＰＦ鸡第３天即能检出抗体,到第１６２天试验结束时检测仍为阳性。其批内和批间重复试验的变异系数分别在２．９％￣７．２％和３．４％￣９．８％之间。对３１３８份鸡血清进行监测,ｒＮＰ－ＥＬＩＳＡ与全病毒间接ＥＬＩＳＡ与全病毒间接ＥＬＩＳＡ（ＡＩＶ－ＥＬＩＳＡ）、琼脂扩散     

禽流感病毒A/Afri.Star/Eng-Q/983/79/(H7N1)血凝素基因的全序列分析

对反转录－聚合酶链反应扩增克隆的Ｈ７亚型禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ａｆｒｉ．Ｓｔａｒ／Ｅｎｇ－Ｑ／９８３／７９／（Ｈ７Ｎ１）的血凝素（ＨＡ）基因进行了核苷酸序列分析。结果,克隆的ＨＡ基因共１７０７ｂｐ,包括完整的阅读框架;同源性分析表明该毒株起源于欧亚群系;ＨＡ裂解位点只有一个碱性氨基酸,显示典型的低致病力特征。Ｈ７亚型ＡＩＶＨＡ基因的克隆成功为分子诊断和基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅰ．细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）．     

禽流感的预防与控制预防与控制

禽流感是由Ａ型流感病毒引起的一种急性高度接触性传染病，一年四季均可发生，但以冬季和春季较为严重；各种龄期的鸡只均易感，但以４０天龄左右的肉鸡、产蛋高峰期的种鸡和商品蛋鸡较常发生。一流行特点１．血清型多：禽流感病毒属于Ａ型正粘病毒科的流感病毒属，该病毒表面抗原分为血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ），容易变异，是特异性抗原。现已知道ＨＡ抗原有１４种（Ｈ１～Ｈ１４），ＮＡ抗原有９种（Ｎ１～Ｎ９），两者之间可以构成若干血清亚型，各型之间无交叉保护，因此消灭此病难度较大。２．毒株间毒力的差异和变异：禽流感…     

禽流感的诊断及防制(上)

禽流感（俗称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟）是由Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）引起的一种禽类的感染和／或疾病综合征,该病毒隶属正粘病毒科流感病毒属。鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染,而对家养的鸡和火鸡引起的危害最为严重。１８７８年Ｐｅｒｒｏｎｃｉｔｏ首次报道了意大利鸡群爆发了当时称为“鸡瘟”的疾病,到１９５５年被证实“鸡瘟”病毒实际上就是Ａ型禽流感病毒。根据核蛋白（ＮＰ）和基质蛋白（ＭＳ）抗原性的不同,将流感病毒分为Ａ、Ｂ、Ｃ三个血清型（也称甲、乙、丙型）;根据病毒血凝素（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ…     

单抗免疫过氧化物酶技术检测鸡传染性支气管炎病毒

以抗鸡传染性支气管病毒（ＩＢＶ）核衣壳蛋白（Ｎ）的单抗株６ＤＨ８作为一抗,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠ＩｇＧ作为二抗,建立了检测石蜡切片中ＩＢＶ抗原的单抗免疫过氧化物酶技术（Ｍｃ－ＩＰ）,并对人工攻毒鸡及临床ＩＢＶ感染疑似鸡进行了检测。在ＩＢＶＭ４１株人工攻毒鸡,用该技术于１～１２ｄ从气管、２～７ｄ从肾脏可以检测到ＩＢＶ抗原,阳性染色集中于气管粘膜上皮细胞及肾小管上皮细胞胞浆;临床疑为ＩＢＶ感染的病鸡,以Ｍｃ－ＩＰ技术和单抗免疫荧光试验（Ｍｃ－ＩＦＡ）同时进行检测,结果阳性率分别为９０．３％及８３．９％。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理：Ⅰ.细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７，１４，２８免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活发性明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。     

禽流感的防制

禽流感 (ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ简称ＡＩ)是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类和鸟类的感染和疾病的综合征。 1878年该病在意大利鸡群暴发的一种严重疾病 ,直至 195 5年美国才分离到Ｈ5Ｎ1流感毒株。近年在美洲、欧洲、非洲、亚洲、澳洲等地有暴发 ,已分离到上千株ＡＩＶ毒株 ,可将病毒分为不同的亚型 ,我国在 80年代从鸭分离到病毒亚型有Ｈ4、Ｈ5、Ｈ6等 ,香港在 1975～ 1980年分离到 6 2种亚型 ,有Ｈ1-11和Ｎ1-9的组合。禽流感对鸡可直接或间接感染 ,如鸡、火鸡、鹌鹑、野鸟、水禽和海鸟等均可感染。水禽一般不显症状 ,其他禽类可表现…