红枫湖樱桃花粉超低温保存探究

探讨了红枫湖樱桃花粉的长期保存条件。结果显示,室温下干燥3 h的花粉-196℃保存萌芽率最高(85.71%),随后急剧下降,12 h时仅54.65%。而-196、-80、-20℃下保存时,4℃下干燥时间延长并未导致萌发率急剧下降,均在85%左右。-80℃及-20℃保存过程中将花粉取出进行干燥会引起萌发率急剧下降,-20℃下每周干燥6 h,4周后萌发率仅52.06%。活力检测采用离体萌发法和授粉法,-80℃及-20℃保存1年后的花粉授粉坐果率与新鲜花粉无显著差异。     

菠萝花粉保存研究初报(简报)

对菠萝花粉在不同温度处理下的保存时间进行了试验,结果表明,新鲜花粉在28V下干燥4～8h后,投入液氮中保存的时间最长,且花粉生活力最高,花粉平均萌发率在80%左右。从液氮中取出花粉后,直接在0℃放置2h的解冻效果好。而在25℃、4℃、-29℃下花粉保存的时间不超过10d。     

保存温度对茵芋花粉活力的影响

采用正交试验研究了保存温度、保存时间对茵芋花粉活力的影响.结果表明:-20、-12、0、4、6℃及室温的6种保存温度对茵芋花粉活力的影响明显.保存30 d时,20、-12、0、4、6℃及室温下保存的花粉活力分别为64.9%、63.7%、69.8%、70.9%、46.9%、19.5%,4℃下保存的花粉活力是室温的3.64倍.-20、-12℃下保存的花粉活力随着保存时间的延长呈直线下降,0、4、6℃及室温下保存的花粉活力随着保存时间的延长呈抛物线型下降.-20、-12℃适宜花粉90 d的较长时间保存,90 d时的花粉活力分别为63.8%、62.4%;0、4、6℃适宜30 d的短期保存,30 d时的花粉活力分别为69.8%、70.9%、46.9%;室温仅适宜12 d的临时保存,12 d时的花粉活力为57.9%.     

甘蓝自交不亲和系花粉的离体保存

盛花期甘蓝花粉低温和超低温保存前脱水至花粉含水量为9.93%～14.18%时,保存效果最好;不脱水或过度脱水的效果均差.花粉于4℃下保存,活力仅维持1个月左右;而在-20℃,-70℃下保存,保存时间虽可适当延长,但萌发率逐渐降低.-196℃(液氮)下保存6个月后,甘蓝花粉仍有很高的萌发率.预冻处理可提高花粉保存效果,-20℃中预冻的效果最佳,萌发率达38.17%.此外,在室温化冻、水浴化冻和缓慢复苏3种解融方式中,水浴化冻的花粉萌发率最高(36.37%).     

贮藏温度对向日葵花粉生活力的影响

为了解决向日葵杂交育种中花期不遇或远距离杂交等问题,探寻适合向日葵花粉长期贮藏的条件,以3个向日葵品种的花粉为试材,均在室温(20℃)、低温(4℃)、冷冻(液氮处理后-80℃保存)、超低温(-196℃的液氮中保存)4种温度条件下保存360 d,采用离体培养的方法,定期测定了不同贮藏时间后的花粉活力,以探索适宜向日葵花粉贮藏的温度条件。结果表明:20℃室温贮藏,花粉活力下降很快,贮藏1 d后花粉活力降至50%以下,第7 d时已基本失活,不适宜花粉贮藏;4℃低温贮藏,第10 d时花粉活力维持在50%以上,超过10 d后花粉活力快速下降,适宜花粉10 d内的短期贮藏;-80℃冷冻和-196℃超低温贮藏,至360 d时花粉活力与贮藏前相比均变化不大,适宜向日葵花粉的长期贮藏。     

甘蓝自交不亲和系花粉的离体保存

盛花期甘蓝花粉低温和超低温保存前脱水至花粉含水量为9．93％-14．18％时,保存效果最好;不脱水或过度脱水的效果均差。花粉于4℃下保存,活力仅维持1个月左右;而在-20℃,-70℃下保存,保存时间虽可适当延长,但萌发率逐渐降低。-196℃(液氮)下保存6个月后,甘蓝花粉仍有很高的萌发率。预冻处理可提高花粉保存效果。-20℃中预冻的效果最佳,萌发率达38．17％。此外,在室温化冻、水浴化冻和缓慢复苏3种解融方式中,水浴化冻的花粉萌发率最高(36．37％)。     

茄子花粉的离体萌发和生活力保存研究（英文）

茄子是广泛栽培的蔬菜,花粉的离体萌发和生活力保存技术对杂交育种有重要意义。以2个茄子杂交一代组合的父母本为材料,开展了茄子花粉离体萌发培养基成分筛选,不同保存温度对花粉活力和授粉结实效果影响的研究。结果表明,在5%、10%和15%3个蔗糖浓度中,茄子花粉在5%的培养基上萌发最好,赤霉素对干燥保存花粉的萌发有促进作用,适宜的培养基成分是:0.5%琼脂+5%蔗糖+0.01%H3BO3+0.01%GA3;适宜培养时间为:新鲜花粉2 h,干燥低温保存的花粉4 h。低温(4℃)干燥有利于保持花粉活力,但时间长,适宜的干燥方式是室温(25～30℃)干燥花药4 h。茄子新鲜花粉活力随着分枝的增多有下降趋势,第2和第3次分枝上的花粉活力最强,第5次分枝上的花粉活力显著下降,第2和第3次分枝上的开花前1天的蕾期花粉平均萌发率在65%以上。以萌发率10%作为茄子花粉有效活力的下限,如取萌发率较高的第2、3次分枝上的花粉干燥保存,室温保存1 d,4℃保存5～10 d,-80℃保存368 d,花粉仍有活力,平均授粉坐果率在70%以上;以保存0～20 d的数据统计,不同保存温度之间和不同保存时间之间的平均单果结实率差异不显著,平均单果种子实粒数,-80℃的与新鲜花粉的差异不大,但比4℃的增加87.3%,差异极显著。     

不同温度条件番茄花粉储藏时间研究

以番茄小果型材料10876、中果型材料10869、大果型材料11559为试验材料,在室温(25℃)、4℃、-20℃条件下,采用红墨水染色法研究了不同温度条件下不同储藏时间对番茄花粉活力的影响。结果表明,中果型材料花粉活力下降最快,以花粉活力50%为下限,小果型和大果型材料在室温下可以保存8 h,中果型可以保存4 h;4℃条件下,小果型和大果型材料可以保存10 d,中果型可以保存8 d;在-20℃环境中,小果型和大果型材料可以保存28 d,中果型可以保存20 d。     

小黑麦花粉干燥法超低温保存技术研究

为了满足种质资源保存、交换及杂交育种工作的需求,对小黑麦花粉活力及影响小黑麦花粉超低温保存效果的因素进行了研究。结果表明,采用TTC染色法测定小黑麦花粉的活力,结果相对准确,且其适合的浓度为0.1%;采用硅胶干燥处理3 h后,小黑麦花药相对含水量为34.5%,比较适合超低温保存,且保存前后花粉活力保持稳定,其活力相对保持率为92.3%;超低温冷冻保存5 d后,采用不同的化冻方式进行化冻,结果发现自来水冲洗化冻后小黑麦花粉活力相对较高,说明自来水冲洗化冻是简便适合的化冻方式。     

6个铁线莲品种花粉保存方法

为了探究铁线莲花粉保存的最佳条件,研究比较了花粉采集时间(开花第1、2、3天)、干燥时间(12、24、48h)和保存温度(4、-20、-196℃)对花粉萌发率的影响。结果表明,花粉粒的平均直径均随着开花时间的延长而上升,且差异显著,其中‘蓝龙’花粉粒直径上升幅度最大为4.53μm,‘如梦’的上升幅度最小,为1.13μm。开花第2天采集的‘爱莎’、‘第一夫人’、‘冰美人’、‘亨利’和‘如梦’花粉萌发率最高,而开花第3天采集的‘蓝龙’花粉萌发率最高;‘第一夫人’、‘爱莎’和‘蓝龙’分别经过12~48h干燥后4℃保存的花粉相对存活率最高,分别为新鲜花粉的87.86%、71.27%和67.24%;‘亨利’、‘冰美人’和‘如梦’花粉干燥24h后-196℃保存的相对存活率最高,分别为新鲜花粉的59.65%、78.74%和69.33%。-20℃保存的铁线莲花粉相对存活率仅为0~56.85%。利用4和-196℃保存的花粉进行杂交验证试验,平均坐果率为70.7%~100%,初步明确了‘第一夫人’、‘爱莎’和‘蓝龙’花粉适合4℃保存,而‘亨利’、‘冰美人’和‘如梦’则适合液氮超低温保存,这为解决铁线莲品种间杂交的花期不遇问题奠定了基础。     

低温超低温对棉花花粉活力的影响

通过使用联苯胺-甲萘酚染色法测定4、-20和-80℃下棉花花粉活力,研究低温对花粉活力的影响,结果表明:离体花粉在4和-20℃的条件下1～3 d内花粉活力变化没显著差异.在-80℃下,花粉活力受到低温预处理和蔗糖溶液浓度(用作冷冻保护剂)的交互作用影响.并且低温预处理后的花粉活力维持在较高水平.同时,没有添加冷冻保护剂的花粉活力与使用30;和20;浓度的冷冻保护剂之间并没有显著差异.在化冻方式上,37℃的水浴中化冻效果最好.     

薄壳山核桃‘马汉’雄蕊发育特性及花粉储藏活力

为解决薄壳山核桃Carya illinoensis花期花粉的采集和有效保存等问题,系统观测雄蕊开花习性,采用荧光染色反应（FCR）法研究了不同散粉期花粉生活力差异,以及不同储藏条件（室温密封、室温密封干燥;4℃密封、4℃密封干燥;-70℃密封、-70℃密封干燥）和储藏时间对花粉活力的影响.结果表明：①4月26日薄壳山核桃雄蕊花萼开裂,5月6日花药由绿变黄,5月7-9日雄蕊进入散粉期,5月8日散粉量最大,占花粉总量的75％,至5月10日花粉基本散尽,花药变黑、小花开始脱落;②散粉期花粉生活力大小依次为即将散粉期（花药由绿变黄）＞散粉初期＞散粉盛期＞散粉末期,花粉耐储藏性亦是即将散粉期最优,即将散粉期＞散粉初期＞散粉盛期＞散粉末期.③储藏条件对花粉活力的保持有显著影响,利于花粉生活力保持的储藏条件依次为-70℃密封干燥＞-70℃密封＞4℃密封干燥＞4℃密封＞室温密封干燥＞室温密封;在任一储藏条件下,花粉活力均随储藏时间而下降,干燥与不干燥差异不显著.室温下花粉活力下降最快,50 d后花粉已经完全丧失活力;4℃下花粉活力次之,120d后花粉已经完全丧失活力;-70℃超低温条件下保存效果最好,与常温、低温储藏差异极显著,储藏360 d花粉还保持43.55％的活力.     

薄壳山核桃‘马汉’雄蕊发育特性及花粉储藏活力

为解决薄壳山核桃Carya illinoensis花期花粉的采集和有效保存等问题,系统观测雄蕊开花习性,采用荧光染色反应(FCR)法研究了不同散粉期花粉生活力差异,以及不同储藏条件(室温密封、室温密封干燥;4℃密封、4℃密封干燥;-70℃密封、-70℃密封干燥)和储藏时间对花粉活力的影响。结果表明:①4月26日薄壳山核桃雄蕊花萼开裂,5月6日花药由绿变黄,5月7-9日雄蕊进入散粉期,5月8日散粉量最大,占花粉总量的75%,至5月10日花粉基本散尽,花药变黑、小花开始脱落;②散粉期花粉生活力大小依次为即将散粉期(花药由绿变黄)>散粉初期>散粉盛期>散粉末期,花粉耐储藏性亦是即将散粉期最优,即将散粉期>散粉初期>散粉盛期>散粉末期。③储藏条件对花粉活力的保持有显著影响,利于花粉生活力保持的储藏条件依次为-70℃密封干燥>-70℃密封>4℃密封干燥>4℃密封>室温密封干燥>室温密封;在任一储藏条件下,花粉活力均随储藏时间而下降,干燥与不干燥差异不显著。室温下花粉活力下降最快,50 d后花粉已经完全丧失活力;4℃下花粉活力次之,120d后花粉已经完全丧失活力;-70℃超低温条件下保存效果最好,与常温、低温储藏差异极显著,储藏360 d花粉还保持43.55%的活力。     

杏花粉活力测定培养基筛选及耐贮性研究

[目的]以固体琼脂培养基离体培养‘大黄杏’品种花粉,比较不同浓度蔗糖、硼酸对花粉离体萌发的影响.[方法]用筛选出的最适培养基测定三种贮藏温度条件下花粉活力变化.[结果]‘大黄杏’品种最适萌发培养基为:l5;蔗糖+0.01;硼酸+1;琼脂;干燥密闭条件下,为期1年贮藏于三种温度条件下花粉活力大小依次均为:-18℃＞4～5℃＞室温,活力下降幅度由大到小则依次均为:室温＞4 ～5℃＞- 18℃.[结论]花粉于-18℃贮藏后1年活力仍达30.00;,4～5℃在贮后第11个月丧失活力,而在室温下贮藏3个月花粉即失去活力.     

多年生黑麦草花粉活力和柱头可授性

以多年生黑麦草(Lolium perenne)品种‘Pinnacle’为材料,用TTC染色法和花粉管体外萌发法测定花粉在4种贮藏条件下(4℃常态、4℃干燥、-20℃常态和-20℃干燥)的活力变化;采用联苯胺—过氧化氢法测定开花前和开花后不同时段的柱头可授性。结果表明:多年生黑麦草花粉不耐贮藏,相比较而言,4℃干燥有利于其保存,7 d后花粉活力可维持在5%左右;而柱头可授性在开花前1 d至开花后5 h较强,该时间内授粉有利于受精作用,可提高结实率。     

梵净山野生黄连花粉活力研究

采用TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)法测定花粉活力,研究了温度、相对湿度、蔗糖含量、硼酸含量等因子对野生黄连花粉活力的影响,以期为探索梵净山野生黄连的生殖机制提供理论依据。结果表明,当温度为26℃、相对湿度为60%时,梵净山野生黄连花粉活力达最大值(45.9%),比温度20℃、相对湿度70%时的花粉活力(10.5%)增加35.4个百分点。随着温度和相对湿度的增加或降低,梵净山野生黄连花粉活力均呈下降的趋势。当蔗糖含量20%、硼酸含量0.006%时,花粉活力为93.4%,当蔗糖含量大于或小于20%,硼酸含量大于或小于0.006%时,梵净山野生黄连的花粉活力均表现为下降。因此,在梵净山野生黄连开花时,控制温度26℃、相对湿度60%,同时喷施20%蔗糖、0.006%硼酸,可以大大提高黄连的花粉活力。     

地锦和五叶地锦花粉生活力及其贮藏性研究

笔者对地锦(Parthenocissus tricuspidata)和五叶地锦(Parthenocissus quinque folia Planch)花粉生活力和贮藏性进行了研究。结果表明温度是影响地锦和五叶地锦花粉生活力的主要因素,地锦和五叶地锦花粉生活力随着贮藏天数的增加而明显的下降,贮藏的花粉短期内出现被迫休眠现象。以花粉生活力达40％为标准, 地锦和五叶地锦的新鲜花粉生活力均较高达97％以上。在室温条件下,地锦花粉保存10 d,五叶地锦花粉可保存17 d;在0-5℃条件下干燥贮藏,地锦可保存18 d,五叶地锦花粉可保存21 d。     

采粉期及贮藏条件对猕猴桃花粉生活力的影响

【目的】研究不同采粉期及贮藏条件对猕猴桃花粉生活力的影响,为猕猴桃生产中人工辅助授粉和杂交育种提供依据。【方法】以猕猴桃品种“中华系401”为试材,分别于开花前3,2,1 d及大蕾期和开花后6,12,24 h采集花粉,比较不同采粉期对猕猴桃花粉生活力的影响;以“软枣猕猴桃”、“秦雄201”、“中华系401”和“毛花猕猴桃”雄株为试材,采集大蕾期花粉,分别进行常温贮藏（18～26 ℃）、低温(4和-15 ℃)贮藏,比较不同贮藏条件下猕猴桃的花粉生活力。【结果】开花前3 d,猕猴桃花粉生活力仅为1.92%;开花前2和1 d,猕猴桃花粉生活力分别达到48.07%和69.11%;大蕾期猕猴桃花粉生活力最高,达82.31%;开花后6,12和24 h的花粉生活力分别为66.89%,46.03%和31.40%,均不及大蕾期高。4种猕猴桃新鲜花粉的生活力均较高,达70%以上。常温条件下,猕猴桃花粉仅可贮藏6～9 d;4 ℃冷藏条件下,花粉生活力可维持60～150 d,平均达90 d;而-15 ℃冷冻条件下花粉生活力更长,可达360 d。【结论】以采用大蕾期花粉进行人工授粉为宜;贮藏温度是影响猕猴桃花粉生活力的重要因素之一,温度越低,花粉的贮藏效果越好。     

低温冷藏对雪花梨花粉生活力影响

以盛果期雪花梨花粉为试材,通过对冷藏0～8年花粉发芽率的测定,研究了低温冷藏不同年份对雪花梨花粉生活力的影响。结果表明:冷藏1～3年的花粉发芽率与新采花粉无显著性差异,而冷藏4～5年的花粉,其发芽率降低程度与新采花粉有明显差异。冷藏6～8年的花粉在发芽率上,与新采花粉的发芽率有显著降低。通过冷藏后常温下不同保存时间对花粉生活力研究表明,其发芽率随着冷藏时间的延长而下降。干燥的雪花梨花粉可以在-20℃低温条件下冷藏8年,常温下使用的时间最好在24h之内。