一些新型免疫佐剂的研究进展

免疫佐剂可以理解为能加强抗原的免疫原性和免疫保护效果的物质。这种加强的免疫功能,可表现为增强与其同时使用的特异性抗原的体液免疫反应,也可以表现为增强特异性抗原的细胞免疫反应。近20年来,由于免疫学的进展,亚单位疫苗的开发,特别是肿瘤免疫和疫苗的研究迅速发展,促进了新佐剂研究。传统佐剂虽然副反应低,但对某些抗原没有或仅有很低的免疫增强作用,因而对新型佐剂的研制和开发已成为当今新疫苗研究中的一个非常重要的领域。1细胞因子佐剂细胞因子(cytokine,ck)是由细胞分泌的、能够影响其他细胞功能的多肽,它产生于天然免疫和特异…     

细胞因子佐剂研究进展

佐剂可通过增强巨噬细胞活性促进机体T细胞或B细胞的反应,参与半抗原或抗原免疫应答。随着人们对疫苗免疫效果的研究,细胞因子作为新型分子佐剂能增强疫苗的特异性免疫反应而被广泛研究。细胞因子在调节先天免疫和适应性免疫中发挥着关键作用,能增强疫苗的特异性免疫反应。最近几年,白细胞介素、干扰素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、肿瘤坏死因子、趋化因子的研究已取得了很大进展,现对细胞因子佐剂的应用进展进行阐述,以期为其在将来的应用中提供参考。     

不同类型免疫佐剂的作用比较

“免疫剂”(Immunoadjuvant)是一种能与特异性抗原结合 ,能比疫苗单独使用时产生更强的免疫应答的物质。免疫佐剂通常是指与抗原物质同时注射或预先注射后 ,能非特异地增强或改善动物机体对抗原物质免疫应答的物质。1　抗原传递系统佐剂1.1　弗氏佐剂　弗氏佐剂 (Freund′s Adju-vant,FA)分为弗氏完全佐剂 (FCA)和弗氏不完全佐剂 (FIA)。FCA是标准的诱生体液和细胞免疫佐剂 ,可诱导 Th1型细胞因子 ;FIA则是典型的只诱导 Th2型细胞因子 ,诱生抗体的佐剂。除少数兽用疫苗使用 FIA(如口蹄疫疫苗 )外 ,很少用于动物免疫。FCA的副作用 …     

靶向DNA感受器佐剂研究进展

DNA疫苗进入机体在肌肉细胞、吞噬细胞中表达,直接或间接呈递给T细胞。研究发现,DNA疫苗自身作为一种病原相关分子模式被细胞质内DNA感受器识别、结合,通过激发Ⅰ型干扰素、前炎性细胞因子等启动固有免疫应答从而激活适应性免疫应答,达到了解DNA疫苗的免疫机制改善DNA疫苗的免疫原性的目的。论文通过对国内外关于某些DNA感受器及DNA代谢产物作为分子佐剂机制的最新研究进行归纳,以及将其作为佐剂的试验研究做一总结,为研制活性强、高效低毒、有治疗作用的新型佐剂作为改善DNA疫苗免疫性的靶点提供了参考。     

新型兽用疫苗佐剂的研发

现代疫苗大部分是由化学合成多肽或基因工程重组抗原组成的,其免疫原性相对较弱,需要借助免疫佐剂来提高疫苗的免疫效果,具体来讲,免疫佐剂能够提高机体对抗原的适应性免疫应答。现从纳米粒子佐剂、天然佐剂、脂质体、细胞因子分析新型兽用疫苗佐剂的研发和应用。     

5种塞内卡病毒灭活疫苗佐剂的比较研究

为研究比较5种塞内卡病毒疫苗佐剂,分别用4种自主研发佐剂和进口ISA206佐剂配制塞内卡病毒灭活疫苗,检测疫苗的理化性质、安全性及免疫效力,并对检测结果进行对比分析。结果显示,进口ISA206佐剂疫苗黏度为43.02 cP,自主研发佐剂疫苗黏度均在27.88 cP以下,其他理化性质无差异;5批疫苗安全性试验均未见明显异常;5批疫苗免疫动物后均可诱导机体产生中和抗体,二免后14 d抗体滴度在2¹¹以上,4批自主研发佐剂疫苗免疫组抗体滴度水平高于进口ISA206佐剂疫苗约1个滴度,攻毒保护结果均在4/5以上,2批自主研发佐剂疫苗免疫组保护率可达5/5。结果表明,用4种自主研发佐剂制备的塞内卡病毒灭活疫苗质量不低于用进口ISA206佐剂制备的塞内卡病毒灭活疫苗。     

细胞因子类佐剂在黏膜免疫中的作用

黏膜免疫和黏膜疫苗佐剂的研究是近年来免疫学研究的一个重要方面.由于细胞因子在免疫应答的产生和调节中具有重要作用,可作为免疫佐剂增强疫苗的免疫效果,所以,细胞因子在黏膜佐剂研究中引起了人们广泛的兴趣与关注.文章主要简述黏膜免疫应答的调节及细胞因子类佐剂在黏膜免疫的研究与应用.     

猪链球菌三价灭活疫苗免疫佐剂的筛选

为筛选适用于新型猪源链球菌(SS)灭活疫苗的佐剂,本研究以SS1 Z1株、SS2 Z2株和SS7 Z7株为抗原,分别配制ISA201 VG双相油乳佐剂疫苗(简称ISA201疫苗)、GEL 02 PR水溶性聚合物佐剂疫苗(简称GEL疫苗)、IMS1313N VG水溶性纳米佐剂疫苗(简称IMS1313疫苗)、矿物油佐剂疫苗(简称油疫苗)、氢氧化铝胶佐剂疫苗(简称铝胶疫苗)共5种佐剂的三价灭活疫苗。豚鼠和仔猪安全性试验结果表明:油佐剂疫苗的副反应较大,其余疫苗的副反应较小。仔猪免疫保护试验结果显示:二免14 d后利用约为1 LD_(100)的SS2 Z2株对仔猪经耳缘静脉攻毒,ISA201疫苗、GEL疫苗对仔猪的保护率均为100%,油疫苗和铝胶疫苗保护率分别为60%、40%,IMS1313疫苗组的保护率为0;利用1 LD_(100) SS1 Z1株攻毒后,ISA201疫苗、GEL疫苗、油疫苗、铝胶疫苗和IMS1313疫苗对仔猪的保护率分别为100%、80%、80%、60%和0。综上结果表明,ISA201疫苗免疫仔猪能产生最高的抗体水平,同时提供了最高的保护效力,且副反应较小,确定ISA201为开发链球菌灭活苗的首选佐剂。本研究为SS三价灭活疫苗的研发奠定了基础。     

细胞因子类佐剂在黏膜免疫中的作用

黏膜免疫和黏膜疫苗佐剂的研究是近年来免疫学研究的一个重要方面。由于细胞因子在免疫应答的产生和调节中具有重要作用，可作为免疫佐剂增强疫苗的免疫效果，所以，细胞因子在黏膜佐剂研究中引起了人们广泛的兴趣与关注。文章主要简述黏膜免疫应答的调节及细胞因子类佐剂在黏膜免疫的研究与应用。     

羊口疮疫苗对兔体液免疫和细胞免疫的影响

为深入研究羊口疮疫苗诱导机体产生免疫效应的分子机理,用羊口疮疫苗免疫兔,并对其血清中的特异性抗体水平和外周血免疫相关细胞因子的表达水平进行研究。将500 m L灭活的羊口疮病毒感染细胞毒液和经超声波破碎的灭活羊口疮病毒感染细胞毒液分别浓缩至100 m L,按照佐剂说明书比例,分别与弗氏佐剂、201VG、1313VG、GEL01、11R VG混匀。另外,取灭活的羊口疮痂皮毒液10 m L与201 VG混匀,制备成疫苗。用所制备的不同佐剂疫苗各免疫2只兔子。在免疫后不同时间采集外周血,应用琼脂免疫扩散方法检测血清中特异性抗体效价,同时应用实时荧光定量PCR方法检测外周血中细胞因子表达水平。结果显示:在兔子接种羊口疮疫苗后期,血清中抗体效价除了"1313VG+未破碎病毒"组为1:8之外,其他组别的抗体效价均达到1:16或1:32;各组别外周血中Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ、TNF-α)的表达量与对照组相比总体上升,而Th2型细胞因子(IL-4、IL-6)的表达量总体呈下降趋势。结果表明,羊口疮疫苗可以同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,但对该两种免疫应答的诱导水平不同。     

蜂胶———一种优质的动物疫苗佐剂

疫苗佐剂是一种免疫增强剂,自身并不能引起机体产生免疫应答,但能提高抗原的免疫原性和免疫反应的可持续性,诱发机体针对特定抗原产生更加长期、高效的免疫应答反应,增强疫苗对机体的免疫保护作用。随着人们对动物食品卫生安全的关注,绿色、环保、健康的理念已逐渐深入人心,普遍将“使用要安全、免疫要高效、抗体产生快、免疫保护强”这几点作为动物疫苗佐剂研究的方向。蜂胶是由蜜蜂的工蜂采集杨树、柳树、松树等植物的幼芽等同自身的消化腺和蜡腺等分泌物进行混合之后形成的一种具有芳香气味的胶状固体物,含有黄酮类、萜烯类、有机酸、芳香醛、醇类、酯类及多种氨基酸、酶、维生素、矿物质等,其主要的成分为黄酮类化合物,具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、消炎、增强机体免疫功能和促进组织再生等广泛的生物学作用,是良好的动物疫苗佐剂。早在20世纪90年代,我国沈志强等研究人员以蜂胶为免疫佐剂,开创了疫苗佐剂研究的新领域,使我国蜂胶佐剂疫苗的研究与应用处于世界领先地位。20年来,蜂胶在动物疫苗佐剂中得到迅速发展和广泛应用,论文着重介绍了蜂胶在猪疫苗佐剂、禽疫苗佐剂、兔疫苗佐剂、犬疫苗佐剂中的应用研究进展及应用概况,旨在为蜂胶在动物疫苗佐剂中的开发利用与推广应用积累资料。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

旨在筛选适宜于猪丹毒丝菌灭活疫苗的佐剂。以分离鉴定出的猪丹毒丝菌1a型HG-1株灭活菌体为抗原分别配制矿物油佐剂疫苗(简称矿物油疫苗)、氢氧化铝胶佐剂疫苗(简称铝胶疫苗)、ISA201双相油乳佐剂疫苗(简称ISA201疫苗)、GEL02水溶性聚合物佐剂疫苗(简称GEL疫苗)、IMS1313水溶性纳米佐剂疫苗(简称IMS1313疫苗)共5种佐剂的灭活疫苗。小鼠免疫保护试验结果表明,二免14 d后使用约为4 LD_(50)的HG-1株对小鼠进行腹腔攻毒,矿物油疫苗和GEL疫苗的保护率分别为100%(7/7)和71%(5/7),其他三种佐剂疫苗的保护率均为14%(1/7)。本研究进一步选择铝胶疫苗和GEL疫苗进行猪体对比试验;仔猪安全性试验结果表明,两种佐剂疫苗的副反应均较小;免疫保护试验结果表明,两次免疫后使用约为16 LD_(100)的HG-1株对免疫仔猪进行耳缘静脉攻毒,两种佐剂疫苗的保护率分别为60%(3/5)和100%(5/5)。本研究最终选择GEL佐剂作为开发猪丹毒灭活疫苗的最适佐剂。     

“兔瘟”疫苗中不同佐剂对免疫效果的影响

利用“兔瘟”病毒枣(?)毒株(RVZ85)制备的不含佐剂疫苗,甘油佐剂疫苗、氢氧化铝佐剂疫苗和矿物油佐剂疫苗免疫接种易感家兔,定期测 HI 抗体效价并进行人工攻毒试验.结果证明,不含佐剂的疫苗产生的保护力最早,免疫后三天即4/4保护.用四种疫苗免疫接种后一年内,对攻毒的保护率均为100%.四种疫苗中,以矿物油佐剂疫苗免疫兔的HI抗体效价最高,氢氧化铝佐剂疫苗次之,甘油佐剂疫苗及不含佐剂疫苗的HI效价较低。氢氧化铝佐剂疫苗在室温保存8.5个月,免疫兔4/4保护;室温保存14个月.免疫兔2/3保护:4℃保存14个月,免疫兔4/4保护.     

鱼精蛋白增强抗原诱导早期体液免疫反应的研究

为探究鱼精蛋白(PP)对抗原诱导早期体液免疫反应的增强作用,本研究采用PP与鸡卵清白蛋白(OVA)联合免疫小鼠,利用ELISA方法检测了免疫后10d内小鼠血清特异性抗体、细胞因子表达变化水平,采用流式细胞术检测了PP对外周血CD4~+和CD8~+T细胞亚群的影响,并进行了免疫小鼠的攻毒保护试验。结果显示,PP能快速激活OVA诱导的特异性抗体(IgM、IgG)应答,促进Th2偏向的免疫反应(IgG1、IL-5、IL-10),而对Th1型免疫应答(IgG2a、IFN-γ)无显著影响。免疫后10d的外周血淋巴细胞流式细胞术检测结果显示,PP显著提高外周血CD4~+/CD8~+值。此外,PP作为佐剂显著提高了大肠杆菌疫苗免疫小鼠3d后的攻毒存活率,增强了大肠杆菌疫苗的早期免疫保护。本研究为PP作为候选疫苗佐剂及其临床应用潜力提供了实验依据。     

新型疫苗佐剂研究进展

佐剂是增强和调节疫苗抗原免疫反应的免疫刺激物,与抗原一起使用能产生更强的免疫反应。佐剂能激活机体的天然免疫系统,当佐剂和抗原同时或预先注射到机体内,可改变抗原的形态并延长抗原在体内的滞留时间,促进单核吞噬细胞对抗原的递呈能力及刺激淋巴细胞增殖分化,从而增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂的发展史长达一百多年,目前使用最广泛的疫苗佐剂是铝佐剂,传统的灭活疫苗在很大程度上依靠以铝盐为主的复合物作为主要佐剂。但近年来,随着基因工程技术和生物技术的飞速发展,重组疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗等新型疫苗逐步被开发出来,这些新型疫苗与传统疫苗相比往往存在免疫应答能力差等问题,早期的抗原不纯导致传统的铝盐佐剂已无法满足需要。为解决新型疫苗免疫原性差的问题,科研人员致力于开发广谱且高效的新型疫苗佐剂用来增强新型疫苗的作用。新型疫苗佐剂种类繁多,功能各不相同且机制较为复杂,可分为新型油乳佐剂、脂质体佐剂、CpG寡核苷酸佐剂、细胞因子佐剂、纳米佐剂、多糖佐剂及复合系统类佐剂等。笔者对疫苗佐剂的发展史、作用机制及新型疫苗佐剂的分类进行分析和评述,以期为新型疫苗佐剂的研制及开发提供参考。     

佐剂在牛病疫苗中的应用进展

佐剂在使用疫苗防治疾病的过程中发挥重要作用。但因佐剂可导致动物机体组织炎性变化,这使得传统佐剂的应用受到一定影响。近年来,由于细胞通路相关领域的卓越进展,细胞因子以及诸多相关的新型佐剂开始被开发和应用,为许多传染性疾病疫苗的研发提供了新方案。本文就佐剂种类、进展和主要牛病疫苗佐剂进展进行了综述。     

菊粉对铜绿假单胞菌flgE基因DNA疫苗的免疫增强作用

为研究菊粉对铜绿假单胞菌flgE基因DNA疫苗的免疫增强作用,本研究将铜绿假单胞菌的flgE基因克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)中制备DNA疫苗,分别以该DNA疫苗(100μg/只)和菊粉佐剂+DNA疫苗免疫BALB/c小鼠(质粒100μg/只,终浓度20%菊粉),同时设置菊粉灌胃对照组(600 mg/kg)以及灭活疫苗(100μL/只)、鞭毛蛋白(100μL/只)、pcDNA3.1(+)空载体(100μg/只)和PBS对照组(100μL/只)。每两周免疫一次,共免疫3次。利用间接ELISA检测免疫后血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖水平,双抗夹心ELISA检测IFN-γ分泌情况,计算强毒攻击后各组小鼠的存活数及保护率。结果显示,菊粉佐剂组和菊粉灌胃组小鼠产生的抗体水平与DNA疫苗组相比无明显差异(p0.05),且显著低于灭活疫苗组和鞭毛蛋白组(p0.05);菊粉佐剂组对小鼠脾淋巴细胞的刺激值(SI值)和IFN-γ水平与鞭毛蛋白组相当,明显高于菊粉灌胃组和DNA疫苗组(p0.05);菊粉佐剂组和菊粉灌胃组对小鼠的保护率均高于DNA疫苗组,但低于灭活疫苗组,表明以菊粉预先灌胃和以菊粉为佐剂均可在一定程度上提高flgE基因DNA疫苗对小鼠的保护效率,但仍不及传统的灭活疫苗。本实验为铜绿假单胞菌DNA疫苗的研究及菊粉在DNA疫苗中的应用奠定基础。     

免疫佐剂的研究进展

佐剂通过调节、增强机体的免疫应答而提高预防和治疗性疫苗的免疫效力。研究开发低毒、高效的免疫佐剂，对疫苗特别是新型疫苗的研发具有重要意义。文中对近年来一些常规佐剂和新型佐剂进行简要综述，为免疫佐剂研制提供有益参考。     

PEG对嗜水气单胞菌疫苗制备与免疫效果影响的研究

为评价聚乙二醇(PEG)作为超声介质及疫苗佐剂对嗜水气单胞菌疫苗免疫效果的影响,本研究将该疫苗与常规疫苗分别经腹腔注射免疫接种锦鲤成鱼,检测血细胞吞噬百分率、吞噬指数、抗菌活力、抗体效价及免疫保护力等指标,评价疫苗效果.结果表明PEG6000作为佐剂制备的疫苗,其各指标均高于对照组及其他试验组.PEG6000疫苗免疫保护力达到77.8％,高于常规灭活疫苗22.2％,表明PEG6000作为佐剂制备的疫苗效果最好.     

多糖作为兽用疫苗佐剂作用机制的研究进展

多糖可促进免疫调节,具有多靶点、多功能和多因子效应,因此可广泛用作兽用疫苗免疫佐剂。多糖作为疫苗佐剂可提高免疫动物脾脏、胸腺和法氏囊等免疫器官指数,增强巨噬细胞吞噬活性及抗原递呈能力,增强NK细胞杀伤能力,促进树突细胞的成熟和分化,增强机体对抗原的摄取能力,影响T细胞亚群的种类和数量,改变Th1、Th2型免疫应答反应的类型,促进B淋巴细胞增殖,刺激细胞因子及抗体的产生等。而多糖作为配体通过与Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)、C型凝集素受体(C-type lectins receptor,CLR)、清道夫受体(scavenger receptor,SR)等受体分子结合,激活下游信号通路,进而发挥上述免疫活性。文章主要从上述几方面对多糖作为兽用疫苗佐剂的作用机制进行阐述,以期为多糖的进一步开发和应用提供参考。