霍山石斛杂交种与亲本有效成分积累规律的研究

[目的]研究了霍山石斛杂交种与其亲本在3年的生长周期中多糖、生物碱及可溶性蛋白质含量变化的规律,以期为霍山石斛种质资源改良和合理采收提供理论依据。[方法]多糖含量、总生物碱含量及可溶性蛋白质含量分别采用浓硫酸-苯酚比色法、溴甲酚绿酸性染料比色法、考马斯亮蓝G-250染色法测定。[结果]杂交种2年茎与3年茎多糖和总生物碱含量均与霍山石斛接近;杂交种及其亲本多糖含量均为2年茎最高,3年茎下降较大;生物碱含量在3年中均为逐年增高。[结论]杂交种（F1代）药效成分含量积累表现为近霍山石斛的特性。若依照不同的用药目的,则可于第2年或第3年采收,比民间传统的＂存三去四＂法可提前1-2年。     

不同种植月龄铁皮石斛试管苗生长及活性成分含量比较

[目的]研究不同种植月龄铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimuraet Migo）试管苗生长及成分含量变化动态。[方法]通过测定不同种植月龄铁皮石斛试管苗的茎高、茎粗、平均鲜重和多糖、氨基酸的含量,分析其动态变化状况。[结果]随着栽培时间的延长,铁皮石斛试管苗茎高及生物产量逐渐增加,而茎粗反而变小,其多糖含量先升后降,在第12个月达到高峰,氨基酸总量及主要氨基酸含量都呈直线上升趋势,但各阶段升高幅度不同。[结论]该研究揭示了栽培铁皮石斛试管苗生长及含量变化规律,可为合理利用铁皮石斛试管苗提供参考。     

丹霞地貌铁皮石斛及其人工繁育苗性状比较分析

【目的】以丹霞地貌铁皮石斛和人工繁育苗的2年生和3年生茎作为材料,研究其性状显微特征和多糖含量变化,分析丹霞地貌铁皮石斛在人工繁育和栽培过程中有无品质变化,以期为丹霞地貌铁皮石斛资源的开发利用和人工繁育苗的质量标准制定提供科学依据。【方法】采用显微性状鉴别、组织化学定位和含量测定方法,对丹霞地貌铁皮石斛与人工繁育苗的性状特征、茎显微构造和多糖的组织化学定位及含量特征进行比较研究。【结果】丹霞地貌铁皮石斛的茎呈紫红色,叶为紫绿色,节间不明显;人工繁育苗的茎则呈深绿色,叶为浅绿色,节间明显,其株高、茎粗和节间长度均大于丹霞地貌铁皮石斛。两者的角质层厚度、表皮细胞直径、皮下层细胞直径和层数、鞘纤维直径和数目、维管束直径和数目、木质部和韧皮部厚度、草酸钙针晶长度、导管直径、木薄壁细胞直径、鞘细胞壁厚度等均存在显著性差异。丹霞地貌铁皮石斛和人工繁育苗茎的基本组织中分布着大量多糖颗粒,经染色后呈深紫红色,人工繁育苗的多糖颗粒呈现聚集状,被显色更深;多糖颗粒直径与含量间均存在显著差异,丹霞地貌铁皮石斛的总多糖含量高于人工繁育苗。【结论】丹霞地貌铁皮石斛与人工繁育苗在性状显微特征和代谢产物量上均存在显著差异。其性状特征、显微结构特征、多糖组织化学定位和含量特征均可作为鉴别丹霞地貌铁皮石斛和人工繁育苗的鉴别与评价指标。     

不同来源铁皮石斛不同部位生物碱的分布规律研究

[目的]分析铁皮石斛组培苗、野生植株和栽培植株中生物碱的含量及分布规律。[方法]通过绘制石斛碱标准曲线,对铁皮石斛不同部位、不同采收阶段以及不同干燥方法测定的生物碱含量进行了系统的分析比较。[结果]铁皮石斛的生物碱含量,茎上段〉叶≈根〉茎中段≈茎下段;石斛的生物碱含量,1年生≥2年生≥野生型;不同干燥方法处理的铁皮石斛中的总石斛碱含量几乎没有什么变化,但茎上段的石斛碱含量经过自然晒干处理后比杀青烘干处理的提高了23.18%～41.49%,根部的石斛碱含量也提高了8.82%～16.20%,而茎中下段和叶等其他部位的生物碱含量则下降。[结论]铁皮石斛的组培苗和栽培株均有一定的药用价值,且除茎之外,其叶和根也有一定的研究应用潜力。     

霍山石斛薄层鉴别研究

[目的]]研究霍山石斛薄层鉴别方法,为霍山石斛质量标准的制定提供依据。[方法]采用薄层色谱法对霍山石斛、铁皮石斛、细茎石斛、河南石斛进行定性鉴别。[结果]霍山石斛能明显地区别于铁皮石斛、细茎石斛及河南石斛。[结论]已确定的薄层鉴别方法操作简单、可靠、专属性强,可以用于霍山石斛的薄层鉴别。     

石斛多糖在饮料加工过程及货架期内的变化规律

[目的]研究石斛多糖在铁皮石斛饮料加工过程及成品货架期内的变化规律,为铁皮石斛功能产品的加工工艺优化提供科学参考.[方法]以铁皮石斛为原料、多糖提取率和多糖含量为指标,研究铁皮石斛饮料加工过程及成品存放对石斛多糖的影响.[结果]多糖提取率随粉碎粒度的增加而增加,铁皮石斛经超微粉碎(过300目)的多糖提取率最高(94.7%);铁皮石斛超微粉末水煮沸10~40 min均能获得90.0%以上多糖提取率,但煮沸时间延长至60 min会造成多糖损失;洗涤滤渣可增加多糖回收;泵送操作对多糖含量无影响;高压灭菌导致石斛多糖损失约6%;无论冷藏与否,在180 d货架期内铁皮石斛饮料的石斛多糖含量无明显变化.[结论]粉碎粒度和煮沸时间是影响石斛多糖提取效果的关键因素,应作为铁皮石斛多糖饮料生产工艺的首选参数.     

种植地域和采收时间对铁皮石斛品质影响

[目的]分析云南省不同产地和不同采收时间对铁皮石斛品质的影响.[方法]通过对云南省3个栽培基地所生产的铁皮石斛进行为期一年的跟踪调查,检测其多糖含量以及醇溶液浸出物含量,分析云南省不同产地生产的铁皮石斛之间品质差异,以及同一产地生产的铁皮石斛品质与采收时期之间的相关性.[结果]同一地点两年生铁皮石斛在全年各个采收期中采收时,其多糖和醇溶液浸出物的含量有所差异,3个地区的多糖含量和醇溶液浸出物含量在全年中都呈现出稳定的、相似的趋势.3个地区大棚产铁皮石斛的多糖含量在春季、冬季出现显著性差异,其醇溶液浸出物含量在春、秋、冬季都有显著性差异.[结论]该研究为铁皮石斛栽培选址的选择以及采收品质的控制提供参考.     

铁皮石斛组培苗多糖含量的变化规律

以组培生产的铁皮石斛原球茎、丛生芽和植株茎段为材料提取石斛,测定其多糖含量,计算多糖累积效率,以了解不同形态铁皮石斛组培苗的多糖含量及其变化规律。结果表明,不同形态的铁皮石斛组培苗多糖含量差异较大,植株茎段的多糖含量相对最高,可达26.20%,原球茎多糖含量次之,为25.26%,二者均可达到《中华药典》中对石斛中药材多糖含量要求的规定;原球茎和植株茎段的多糖含量与培养时间呈正相关;原球茎多糖的积累效率相对最高,可以成为生产石斛多糖的原料新来源。     

铁皮石斛高效设施栽培技术研究

[目的]实现铁皮石斛的高效设施栽培。[方法]以铁皮石斛无菌试管苗为试材,当苗高5cm左右时,分别移栽到3种不同的栽培基质中,筛选出铁皮石斛的最适生长基质;以其最适生长基质为栽培基质,设置清水(CK)和营养液浇灌2个处理,研究营养液浇灌对铁皮石斛生长的影响。[结果]所设置的3种栽培基质都适合铁皮石斛生长,其中,以石灰岩碎石滤水层5 cm+锯末(杂木粗糙的锯末)8cm+活苔藓2 cm为基质时,铁皮石斛长势最好、产量最高;适当浓度的营养液浇灌可较大幅度地提高铁皮石斛的产量。[结论]该研究为铁皮石斛的高效设施栽培提供了参考。     

霍山石斛花茶加工方法研究

[目的]研究霍山石斛花茶的最佳加工方法。[方法]以霍山石斛花茶的感官等级、含水量、石斛多糖含量和总挥发油含量为评价指标,比较传统炒制法、真空干燥法、微波干燥法和冷冻干燥法等4种加工方法制备的霍山石斛花茶的品质。[结果]冷冻干燥法制备的霍山石斛花茶的感官综合评级为特级;水分含量为5.9%,完全符合产品标准;石斛多糖含量为6%,明显高于其他生产工艺产品;总挥发油的含量为0.79%,是传统炒制法的20倍。[结论]冷冻干燥法是加工霍山石斛花茶的最佳方法,为霍山石斛花茶的大规模生产提供了依据。     

响应面法优化霍山石斛多糖超声提取工艺

[目的]优化霍山石斛多糖的超声提取工艺条件。[方法]采用响应面法,研究料液比、提取时间和超声功率对多糖得率的影响。[结果]最佳提取条件为:料液比1∶10(g/ml)、提取时间30 min、超声功率250 W;在此条件下,霍山石斛多糖的提取得率达到28.02%。[结论]该方法优化了霍山石斛多糖的超声提取工艺条件,为霍山石斛多糖的开发利用提供了依据。     

铁皮石斛组培苗移栽基质理化性质及栽培效果研究

[目的]研究铁皮石斛组培苗移栽基质的理化性质对栽培效果的影响。[方法]通过试验比较不同原料、不同配比的移栽基质的理化性质、营养成分对铁皮石斛移栽成活率、病害发病率、多糖含量的影响。[结果]以48%废弃食用菌糠、5%中草药废渣、11%桑秆+玉米芯、11%食物废弃壳、8.5%黏土+草皮土、6%木屑混和而成的栽培基质具有较适宜的理化性质和合理的营养成分,能有效减少铁皮石斛病害的发生,对植株的成活率、植株生长、多糖含量及产量均有明显影响。[结论]移栽基质的理化性质是影响铁皮石斛组培苗移栽时生根成活的关键因素。     

霍山石斛与铜皮石斛多糖体外抗氧化作用的初步研究（摘要）

[目的]初步探讨霍山石斛与铜皮石斛多糖体外抗自由基和抗脂质过氧化作用。[方法]·OH的清除作用采用Fenton反应方法测定,O2的抑制作用采用邻苯三酚自氧化体系测定,脂质过氧化产物MDA采用TBA法测定。[结果]霍山石斛、铜皮石斛多糖对·OH的半数清除浓度分别为6.79、6.75 mg/ml,对O2-的半数抑制浓度分别为3.04、3.44 mg/ml。两种石斛多糖对体外温育和Vc-Fe^2＋诱导的肝匀浆的脂质过氧化均有一定的抑制作用,并可减轻Vc-Fe~（2＋）系统诱导所致小鼠肝线粒体氧化损伤程度。[结论]霍山石斛与铜皮石斛多糖均显示了较强的体外抗氧化活性。     

响应面法优化霍山石斛多糖提取工艺

[目的]优化霍山石斛多糖的提取工艺。[方法]通过单因素试验,研究了浸提时间、料液比和乙醇浓度对霍山石斛多糖提取的影响;通过3因素3水平的响应面分析法,分析了各工艺参数与响应值之间的关系,并由此预测并验证最佳的工艺条件。[结果]霍山石斛多糖提取的最佳工艺条件为:料液比为1∶340(g/ml),提取时间为3.25 h,沉淀多糖的乙醇浓度为86%;该条件下霍山石斛多糖的理论提取率为39.10%,实测值为38.78%,与预测值接近。[结论]采用响应面法优化得到的提取条件准确可靠,并且提取率较高,为制剂生产提供了参考。     

霍山石斛多糖单克隆抗体的制备及多糖组织分布研究

[目的]探讨霍山石斛多糖口腔注射后多糖在小鼠体内的分布状况。[方法]以霍山石斛原球茎中提取的一种多糖与牛血清白蛋白偶联后作为抗原,免疫小鼠获得单克隆抗体,以获得的单克隆抗体为一级抗体对小鼠进行免疫组织化学试验。[结果]证实了CDAP活化法可有效偶联多糖与蛋白质,且以制备的偶联物能引起小鼠免疫反应从而制备出所需的单克隆抗体,利用获得的活性较高、特异性较好的单克隆抗体得到多糖在小鼠组织的分布图。[结论]该方法可为霍山石斛多糖进入机体后分布情况提供科学依据。     

两种石斛多糖的抑菌作用研究

[目的]探讨铁皮石斛多糖和金耳石斛多糖在体外对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用。[方法]采用滤纸片抑菌圈法研究2种石斛多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用。[结果]铁皮石斛多糖对大肠杆菌抑制作用最强,最小抑菌浓度（MIC）为0.5%,抑菌圈直径为15.8 mm;金耳石斛多糖对枯草芽孢杆菌抑制作用最强,MIC为0.5%,抑菌圈直径为12.8 mm。[结论]体外条件下,铁皮石斛多糖对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有抑制作用,但对金黄色葡萄球菌无抑制作用;金耳石斛多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌均有抑制作用。     

安徽霍山三种石斛中游离氨基酸分析

本文测定了霍山石斛、铜皮石斛和铁皮石斛根、叶及不同生长期的茎中１７种游离氨基酸含量。发现大多数氨基酸分布有如下关系：一年茎＞叶＞三年茎＞二年茎≈四年茎＞根。相关分析表明，不同品种的各种氨基酸在不同生长部位中的分布相关关系是ｒ霍，铜＞ｒ霍，铁＞ｒ铜．铁，铜皮石斛与霍山石斛最为相似。     

霍山石斛野生植株·组培植株与河南石斛叶表皮微形态特征研究

[目的]比较霍山石斛野生植株、组培植株与河南石斛的叶表皮微形态结构特征,为霍山石斛的真伪鉴定提供依据。[方法]在光学显微镜下,观察霍山石斛野生植株、组培植株与河南石斛的叶表皮微形态结构,并测定气孔器密度、分布及气孔指数等。[结果]3种石斛叶的上表皮细胞多为规则的六边形,霍山石斛野生植株、组培植株下表皮细胞为不规则形和近多边形,河南石斛的下表皮细胞为多边形,3种植物垂周壁式样相似;3种石斛叶的上表皮均无气孔,下表皮气孔无规则分布,霍山石斛野生植株、组培植株与河南石斛气孔长宽比分别为1.12、1.55、1.31,气孔器密度分别为109、156、94个/mm2,气孔指数分别为8.9%、12.5%、8.2%。[结论]霍山石斛野生植株、组培植株与河南石斛叶表皮细胞形状、气孔分布、垂周壁式样均比较相似,难以作为分类的依据。气孔器形状、密度、大小表现出比较稳定的差异,可以作为这3种石斛之间区分的依据。