3种移栽淫羊藿属植物的植株形态、叶绿素相对含量与气孔导度的比较研究

【目的】揭示不同淫羊藿属Epimediam物种之间及种内的生理生化特征差异,为人工规范化栽培种植及产量提高提供理论参考.【方法】测量了3种移栽淫羊藿属植物的植株高度、叶形态、叶绿素相对含量和气孔导度等生物指标,并运用非参数检验和邓肯氏单因素方差分析对数据进行了比较分析.【结果和结论】新叶植株高度:巫山淫羊藿E.wushanese柔毛淫羊藿E.pubescen粗毛淫羊藿E.acuminatum,其中,巫山淫羊藿与柔毛淫羊藿、粗毛淫羊藿植株高度均差异显著.老叶植株高度:巫山淫羊藿粗毛淫羊藿柔毛淫羊藿,其中,柔毛淫羊藿与巫山淫羊藿、粗毛淫羊藿植株高度均达显著差异.3个种间老叶植株的叶片形态差异显著,而新叶不显著;种间及种内的老叶和新叶的叶绿素相对含量均具有显著差异,且老叶植株的叶绿素相对含量均大于新叶植株.气孔导度的种内差异显著,新叶植株叶片的气孔导度大于老叶植株叶片的气孔导度.说明不同淫羊藿属植物对生长环境的适应能力不同.     

贵州淫羊藿属野生植物资源调查

为贵州淫羊藿属野生植物资源的合理开发和科学利用提供参考,采取踏查和资料考证等方法对贵州淫羊藿属野生植物资源进行了调查。结果表明：采集到的贵州淫羊藿属野生植物共有10种,分别是粗毛淫羊藿、黔岭淫羊藿、天平山淫羊藿、拟巫山淫羊藿、毡毛淫羊藿、单叶淫羊藿、保靖淫羊藿、黔北淫羊藿、德务淫羊藿和水城淫羊藿。主要分布在贵州海拔367～2178 m 喀斯特山地的阴坡和沟谷,常见于灌丛林下或林缘的半阴湿环境。其中,粗毛淫羊藿在贵州分布最广。     

贵州粗毛淫羊藿资源的利用状况及存在的问题

粗毛淫羊藿植物是贵州的地区性淫羊藿药材品种,对其利用完全依赖野生资源,由于大量采挖野生淫羊藿,其资源已消耗殆尽。对粗毛淫羊藿植物资源的分布、生长特性和利用状况进行了总结与分析,指出了存在的问题,提出了综合运用中药资源生态学和植物种群构件理论的技术和手段进行粗毛淫羊藿植物的基础研究,为具有贵州区域性分布特色的药材物种的保护性开发利用提供借鉴。     

粗毛淫羊藿幼叶愈伤组织诱导及其总黄酮含量

为了对粗毛淫羊藿野生资源的保护及淫羊藿黄酮离体生产体系提供技术参考,以粗毛淫羊藿幼叶为外植体,研究粗毛淫羊藿愈伤组织诱导的灭菌剂、消毒条件、培养基、激素配比和光照条件,并测定愈伤组织中总黄酮的含量。结果表明:利用粗毛淫羊藿幼叶进行愈伤组织培养,用2%的NaClO消毒14min,接种于培养基MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+NAA 1mg/L,在24℃光照强度为1 000lx条件下进行诱导效果最好,继代和保存应在适宜的黑暗条件下进行;诱导出的胚性愈伤组织总黄酮含量较高,达5.38%,与野生粗毛淫羊藿总黄酮含量想当,高于药典规定的标准。     

粗毛淫羊藿小孢子形成及雄配子体发育观察

采用光镜和扫描电镜对粗毛淫羊藿的小孢子形成及雄配子体发育过程进行观察。结果显示：花药四室,药壁的发育方式为双子叶型;发育后期的药室内壁具有纤维状加厚现象;腺质绒毡层,发育后期可见其内切向壁分布乌氏体;小孢子母细胞减数分裂时的胞质分裂为同时型;不同药室中雄配子体的发育过程具有典型的不同步性;四分孢子为四面体型;成熟花粉粒为2-细胞型,长球形,3个萌发沟,沟内具突起。     

粗毛淫羊藿内转录间隔区序列扩增条件的优化

用CTAB法提取粗毛淫羊藿叶片DNA,进行内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列PCR扩增试验,通过单因子试验研究了退火温度、Mg2+浓度、TapDNA聚合酶浓度、dNTP浓度对ITS-PCR反应的影响,并通过各因子的组合研究,建立了适宜于粗毛淫羊藿ITS分析的扩增体系:25μL体系中2.5μL10×buffer、1μL模板DNA、1.0mmol/LMgCl2、1.5mmol/L dNTP、1.25UTaq酶、0.4μmol/L ITS4、ITS5.PCR反应程序为95℃5min;94℃30 s,52℃45 s,72℃1min,共35个循环;72℃7min.粗毛淫羊藿ITS扩增条件的优化,可以为淫羊藿属遗传多样性的研究及分子鉴定奠定基础.     

粗毛淫羊藿的光合特性分析

以粗毛淫羊藿为材料,利用LF6400型便捷式光合作用测定系统,研究其光合速率的变化及其环境影响因素.结果表明,淫羊藿净光合速率为2.1～2.55/μmol CO2/(m2·s),净光合速率、气孔导度和蒸腾速率的日变化均呈单峰曲线,净光合速率的峰值出现在10:00时,整体上淫羊藿上午的光合速率高于下午的光合速率.蒸腾速率的峰值出现在12:00.相关性分析表明,粗毛淫羊藿叶片净光合速率与气孔导度、相对湿度呈显著正相关,与温度呈极显著负相关,与胞间CO2浓度呈负相关,但不显著.     

人工栽培粗毛淫羊藿苷的含量变化

为了寻找淫羊藿苷在人工种植的粗毛淫羊藿地上、地下各部位及夏、秋、冬三季的动态分布规律,以指导栽培、收获,分别在6、9、12月中旬取样测定苷在叶片、地上茎、地下根状茎及须根中的含量。结果表明,淫羊藿苷在叶片中含量最高,地上茎最低。栽培上要注意提高叶片及须根产量。     

短命植物蝎尾菊的胚胎学研究Ⅰ、大孢子发生、雌配子体发育及多糖动态

蝎尾菊（ＫｏｅｌｐｉｎｉａｌｉｎｅａｒｉｓＰａｌ．）的胚珠为倒生型，单珠被，薄珠心，孢原细胞１个，直接起大孢子母细胞的功能；大孢子母细胞减数分裂形成一直线排列的大孢子四分体，珠孔端３个大孢子退化，合点端大孢子发育成功能大孢子，其核经过３次有丝分裂形成蓼型胚囊；珠被绒毡层在大孢子二分体时开始分化，在大孢子四分体时形成，为单层细胞，其发育状况直接影响胚囊的发育，它的异常发育与退化直接导致胚囊的败育；在少数胚珠胚囊的合点端，常有不定胚存在；此外，本文还对胚珠发育过程中的多糖动态进行了观察     

柠条锦鸡儿的大孢子发生和雌配子体发育

利用常规石蜡切片技术对柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii Kom.)大孢子发生和雌配子体发育的过程进行了观察.结果表明:柠条锦鸡儿子房1室,1心皮,含多枚倒生胚珠;双珠被,薄珠心:珠心表皮下细胞分化为孢原,并直接发育成大孢子母细胞;大孢子母细胞减数分裂形成直列四分体,合点端的一个发育形成单核胚囊,胚囊发育属寥型;成熟胚囊的结构为:珠孔端为2个助细胞和1个卵细胞,中央为1个二核中央细胞,合点端为3个反足细胞.扫描电镜观察柱头乳突细胞为棒状,胚珠倒生.     

荧光实时定量PCR研究GA负调控因子基因在棉花纤维不同发育时期的表达模式

棉花纤维发育经历起始期、延伸期、次级细胞壁加厚期、脱水期共4个发育时期。为了了解GA负调控因子基因在整个纤维发育时期的调节作用,采用敏感的实时定量PCR对GA负调控因子基因Gh RGL在棉花纤维不同发育时期中的转录水平进行了定量研究,通过提取来源于不同纤维发育阶段[包括-3~0 DPA(开花后)胚珠,3 DPA胚珠,5 DPA胚珠,10 DPA胚珠,15 DPA纤维,25 DPA纤维]的样品总RNA,探讨不同发育时期Gh RGL基因的表达模式。结果显示,Gh RGL基因在所有被选的样品中都有表达,其中在5 DPA胚珠和10 DPA胚珠中转录水平较高,在10 DPA胚珠中表达水平最高,在-3~0 DPA胚珠、3 DPA胚珠、15 DPA纤维、25 DPA纤维中的表达水平较低,表明Gh RGL基因在纤维伸长期表达水平较高,暗示Gh RGL可能对纤维伸长起着重要作用。     

棉花开花前不同天数胚珠的采集标准检测

[目的]检测棉花开花前不同天数胚珠的采集标准,以期更清楚地研究棉花开花前后胚珠中基因的表达变化。[方法]采用花苞长、花苞宽、萼片长和萼片宽4种不同的参数来标准化陆地棉新陆早13号开花前不同天数棉花胚珠的特征。[结果]只有花苞长随花期的临近逐渐增长,而其他参数均没有明显变化。因此,选择花苞长为检测开花前不同天数胚珠的标准。统计分析表明,确定以1.0～1.2cm长的花苞为标准采集开花前5d的胚珠,以1.3～1.5cm长的花苞为标准采集开花前3d的胚珠,以1.7cm以上的花苞为标准采集开花前1d的胚珠。[结论]该研究结果为后期试验中开花前胚珠样品的采集提供参考数据,也为更精确检测开花前后胚珠中基因表达的变化奠定基础。     

杉木胚珠的解剖学观察

为深入研究杉木胚珠在败育过程中的形态和结构变化,以Epon 812为包埋剂,采用半薄切片法对败育过程中的杉木胚珠形态和结构进行观察比较。结果表明,与可育的胚珠一样,败育胚珠内的花粉仍能形成花粉管继续向胚珠合点方向延伸,为受精活动做准备;可育胚珠中央的珠心组织内部会形成健全的雌配子体进而完成受精过程,而败育胚珠的珠心组织较瘦弱,其内不能发育形成健全的雌配子体,不能进行受精活动;涩粒物质最先出现在胚珠的珠孔端,然后逐渐向胚珠下部延伸;可育胚珠的雌配子体在发育过程中会把其外层的珠心组织分解吸收,而败育胚珠内部,因为雌配子体发育不健全,珠心组织会得以保留。     

Anatomical Study on the Multi-Ovule Development and Abortion of Hanfu Apple

The terminal flower buds of 6-yr-old Hanfu apple were used to study the ovule development, ovular characteristics, cell death of abortive ovules, and dynamic change of starch grain quantity in the embryo sac with paraffin slices and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated fluorescein deoxyuridine triphosphate nick-end labeling （TUNEL） system. Four anatropous ovules in each ventricle could be observed before flowering. With the developing of floral organ, the bulk of normal ovules enlarged in each ventricle, the mature embryo sac differentiated into nucellus, and the egg cell developed into zygote by double fertilization. A large number of starch grains were observed during pollen tube growth and double fertilization, which guaranteed basic nutrient supply in the normal development of ovules. Moreover, abortion phenomenon of runtish ovules emerged at the stages of mature embryo sac, double fertilization and zygote development. The abortion characteristics included deformity of ovule development, degradation of nucellus tissue, separation between funiculus and ovule, abnormality of four-nucleate embryo sac, as well as development interruption of mature embryo sac. TUNEL analysis proved that ovule abortion was programmed cell death.     

白木纳格葡萄败育型胚珠培养研究

[目的]研究白木纳格葡萄败育型胚珠离体培养的最优方案,为木纳格葡萄胚挽救育种技术的研究奠定基础.[方法]以花后不同天数的白木纳格葡萄败育型胚珠为试材,进行离体培养,研究接种时间、基本培养基种类、IBA浓度以及活性炭对胚珠发育率的影响.[结果]白木纳格葡萄败育型胚珠取样适宜期为DAF35至DAF40,离体培养后,胚珠发育率均可达到50;以上,其中DAF40d为最佳取样时间,胚珠发育率可达到61.07;.在IBA 1.5 mg/L,GA3 0.5 mg/L,蔗糖60 g/L,琼脂5 g/L,活性炭1g/L的Nitsch培养基中,白木纳格葡萄败育型胚珠发育率最高.[结论]建立了适合白木纳格葡萄败育型胚珠培养体系.     

不同授粉方法对克服百合杂交受精前障碍的作用

为克服由受精前障碍造成的百合杂交不亲和,以3个杂种系的品种和2个野生种为试材,探讨了切割花柱授粉对百合品种自交、近缘杂交和切割花柱授粉、柱头涂抹1 g/L BA或1 g/L NAA或柱头涂抹花粉培养液4种授粉方法对百合远缘杂交,以及花柱长度对百合近缘杂交结实的影响。结果表明:切割花柱授粉法促进百合‘Sor-bonne’的自交结实,获得30个自交胚,与对照比差异极显著(P<0.01)。11个近缘杂交组合中,切割花柱授粉法使本来亲和的6个近缘杂交组合所形成的杂种胚数从30个以上减少至10个以下,有的组合甚至1个杂种胚都没有得到。应用在远缘杂交组合上的授粉方法,只有柱头涂抹花粉培养液得到了8个果,比作为对照的柱头授粉法多6个果,但最终均未得到杂种胚。正反交的4个组合,以花柱较长的亲本为母本时成胚数较多;母本相同的2个近缘杂交组合,父本花柱较短的组合成胚数较多。可见,切割花柱授粉法能克服‘Sorbonne’的自交不亲和性,但对本试验的近缘杂交组合没有促进作用。对于东方百合品种‘Casa Blanca’与‘Sorbonne’正反交,以及‘Casa Blanca’与‘Siberia’正反交这2个近缘杂交组合,母本花柱比父本花柱长,并不阻碍杂交结实。     

几个紫花苜蓿亚（变）种花粉和胚珠遗传变异分析

 【目的】紫花苜蓿的育性特征与种子产量紧密相关,研究紫花苜蓿不同亚（变）种的育性遗传变异可为紫花苜蓿育性基因定位和种子生产提供基础数据。【方法】2007-2008年,利用TTC染色法和生物统计学方法对3个紫花苜蓿亚种,包括黄花苜蓿（Medicago sativa subsp. falcata）、紫花苜蓿（M. sativa subsp. sativa）和蓝花苜蓿（M. sativa subsp. caerulea）,以及1个紫花苜蓿变种杂花苜蓿（M. sativa var. media）共计9个品种的花粉活力、胚珠数和结实率进行了观察,并研究分析了不同品种花粉活力与胚珠数的遗传变异以及与结实率之间的相关性。【结果】（1）花粉活力和胚珠数的变异分析结果表明,不同紫花苜蓿品种花粉活力和胚珠数存在显著差异,其中紫花苜蓿（匈牙利）花粉活力和胚珠数最高,达85.48%和13个/小花;（2）自交结荚率与花粉活力呈极显著线性正相关（P＜0.01）,而人工授粉结荚率与胚珠数呈显著线性正相关（P＜0.05）;（3）在自交与人工授粉条件下,苜蓿品种结实率呈现种间变异大于种内变异趋势,而自然授粉条件下则呈现种内变异大于种间变异,表明苜蓿属植物授粉方式与结实率紧密相关,且自交结实率＜人工授粉结实率＜自然授粉结实率。【结论】紫花苜蓿亚（变）种花粉活力和胚珠数具有丰富的遗传多样性,且分别在自交和人工授粉方式下与苜蓿的结实率显著正相关。     

高山红景天花器的解剖结构研究

以栽培高山红景天花为材料,采用石蜡切片技术观察了不同性别高山红景天花器的解剖结构,结果表明:不同性别高山红景天花器的解剖结构有所不同,且雌花和两性花的子房内均有数目不等的胚珠发育,而雄花子房内无胚珠发育.     

无核葡萄胚珠培养技术研究

对以无核葡萄为母本的9个杂交组合的杂交后代及无核品种的实生后代进行了胚珠培养。结果表明,母本对胚萌发率起着关键作用;大果的胚珠萌发率高;金星无核的最佳胚珠培养基为N itsch+水解酪蛋白100mg/L+活性炭2.0g/L+IAA 1.8mg/L+GA 0.4mg/L+糖20g;喙切可以大大提高金星无核胚珠的萌发率。研究了异常苗、畸形苗、白化苗的成苗情况,确定了相应的成苗培养基;并建立了各杂交组合后代和不同品种的实生后代适宜的快繁培养基。     

蕉柑幼果内源激素和多胺的消长与种子败育的关系

从幼果生理活性物质消长方面对蕉柑少籽原因进行分析．结果表明：（１）内源生长调节物相对含量、多胺总量和精胺（Ｓｐｍ）水平与胚珠败育有关，内源吲哚乙酸（ＩＡＡ）、脱落酸（ＡＢＡ）含量，ＡＢＡ／ＩＡＡ比值，腐胺（Ｐｕｔ）、亚精胺（Ｓｐｄ）水平均与胚珠败育及珠心胚的发生发育有一定联系，它们的曲线都在胚珠败育或珠心胚发生的关键时刻出现折点，尤其是ＡＢＡ／ＩＡＡ比值变化最为突出，说明激素间的平衡对调控胚珠发育起了重要作用；（２）内源生长调节物除ＩＡＡ、ＡＢＡ外，还要注意酚类物质和ＧＡ的作用；（３）ＩＡＡ含量受过氧化物酶（ＰＯＤ）和吲哚乙酸氧化酶活性影响少，而基本上和总酚含量呈负相关．