转基因植物的检测策略和检测技术

目前转基因植物的安全性在全球范围内引起激烈的争论与普遍关注。一些国家正在努力制定相应的法律和法规,对转基因产品实行标识制度,加强对转基因植物及其产品的管理。为了在世界贸易活动中保证本国经济利益不受侵害,加强转基因植物及其产品的检测技术研究是必不可少的。转基因植物的检测主要有两种方法:一种是DNA水平上的检测,另一种是蛋白质水平上的检测。     

熏蒸气体检测

正Inlantell~?智能时代的Techno领导者Leading to the ingenuity溴甲烷/Methyl bromide硫酰氟/Sulfuryl fluoride磷化氢/Phosphine产品应用场所业务范围:国门生物安全精确投药设备熏蒸气体检测仪熏蒸库/热库消毒设备/通道无害化处理设备媒介生物监测及防控监管软件     

病害检测新技术

1.在加拿大,用ＲＤＢＨ法(Ｒｅｖｅｒｓｅｄｏｔｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ反向点印迹杂交法)检测高尔夫球场草地根部的疫菌———Ｐｙｔｈｉｕｎｓｐｐ.,ＲＤＢＨ法为分子生物学技术,比传统方法准确、快,一般2天便完成一次检测,而传统法要14～21天,并且一次可检出多种疫菌,检测结果不易受菌生长速度和繁殖体变异的影响。2.用ＣＺＥ检兰花两种主要病毒———齿兰环斑(ＯＲＳＶ)和建兰花叶(ＣｙＭＶ)。方法的全名为Ｃａｐｉｌｌａｒｙｚｏｎｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ(毛细管区带电泳)。利用两病毒电泳迁移率不同。在毛细管…     

转基因检测数据库概述

转基因检测方法和标准物质是转基因生物安全管理的技术支撑,本文对国内外转基因作物信息数据库、转基因检测方法数据库、筛选检测在线分析工具和转基因标准物质库进行了整理;并分析了各数据库的特点,以期为转基因检测的信息获取提供指引,为我国转基因检测信息平台的建设提供思路。     

应用RT-PCR分子检测技术快速检测大蒜普通潜隐病毒

根据大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latent virus,GCLV)的外壳蛋白区域的保守序列设计合成一对寡核苷酸引物,以带毒植物的总RNA为模板,进行反转录和PCR扩增,通过反应体系和反应程序的建立与优化,扩增得到长300 bp的目的片段,并将目的片段转入大肠杆菌进行了克隆和序列测定。测序结果与GenBank中其他GCLV相应区域的序列同源性最高达98%。并对其检测的特异性和灵敏度进行了验证,从而建立了快速、灵敏、特异性强的GCLV分子生物学检测方法。     

谷斑皮蠹分子检测方法

根据Simon(1994)发表的COI基因的通用引物,扩增了谷斑皮蠹、黑斑皮蠹、条斑皮蠹和花斑皮蠹不同地理种群的COI基因片段.经序列比对后,依据多态位点,设计了检测谷斑皮蠹的特异引物.PCR结果表明:引物可成功扩增出谷斑皮蠹样品的基因片段.而其他斑皮蠹属种类基因片段不能被扩增.     

用单克隆抗体检测病毒

繁殖与推广植物检疫签准的无毒种子、无性繁殖材料是防止病毒传播、控制水果、蔬菜和观赏作物的许多严重病毒病害的根本方法。几十年来,植物病毒学家已经用免疫化学技术来探测和分类植物病毒。自从1977年引用酶联免疫吸附测试(ELISA)于物植病毒的检测以来,血清学测定方法在植物检定中已广为应用。高质量抗血清的需求大增。在许多检定程序中血清学测定显得日趋重要。为提高血清学方法的灵敏度,血清的质量必须改进,避免非专化性反应出现。在植物病毒提纯过程中,某些植物材料总是附随于病毒,也作为抗原而刺激产生其专化性抗体反应。血清学测试越有效,每次测试需要的抗体量越少,寄主抗体的低含量也就显得越重要。许多在凝胶双扩散测试中能用的血清,除非先用健康植物汁液交互吸收过,否则不适合于做ELISA反应;某些情况下,即使是吸附收过的抗血清在ELISA反应中仍不能用。三十多种植物病毒的单克隆抗体(MCAs)已能制备了,在植物病毒的基础研究和应用研究中MCAs都有许多大用途。现在许多MCAs已应用于病毒检测和病毒间相互关系的研究。MCAs在研究根本性问题上也是有用的:如病毒怎样装配?为何病毒感染某种植物而不感染其它种植物?病毒怎样克服那结合到农作物中的抗性?在植物体中病毒是怎样运动的?在阐述病毒感染过程中的复杂生化反应时MCAs也是有用的。本文将集中谈谈用MCAs检测病毒和未来几十年病毒检测中MCAs将在哪些方面进行改进。     

甘薯病毒病检测方法

甘薯病毒病检测方法邢继英，杨永嘉（江苏徐州农科所２２１１２１）目前国际上已报道的侵染甘薯的病毒有１０余种，研究较多的是发生较为普遍的甘薯羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）。我国早在１９５５年就有过关于甘薯病毒病的报道，但一直未能深入研究。１９８８～１９９１年...     

口蹄疫检测技术研究进展

本文综述了发展到目前为止的口蹄疫检测技术，包括了病毒分离、抗原抗体检测、亚型鉴定，单克隆抗体技术，疫苗检测技术和分子生物学技术等内容，并展望了未来的发展方向。     

类病毒的银染色检测

 类病毒是一种不含蛋白质的致病的小分子RNA。对于它的检测,目前采用的方法,其检测的灵敏度不高,一般只能达到0.5微克(0.5ug),往往会使含有极微量的病毒样品漏检。     

蔬菜农药残毒检测势在必行

农药在农作物病虫害防治过程中起了很大作用,但也给人类带来不少困扰,特别是蔬菜农药残留已成为近年来上海市民关心的热点。为让市民吃到“放心菜”,上海市菜办、上海市蔬菜科学技术推广站在安全用药问题上做了许多工作,加大宣传和检查力度,堵住剧毒农药“源头”,生产洁净蔬菜,收到了一定的成效。然而上海市场上供应的蔬菜,其中有相当一部分是来自江苏、浙江、安徽、山东等地,由于市场上缺乏必要的检测手段,消费者无法仅靠目测来区别洁净蔬菜与农药残留超标蔬菜。一方面使洁净蔬菜的声誉和效益均受到损害,没有在市场竞争中体现洁…     

菊花矮化类病毒双向电泳检测

菊花矮化类病毒(CSV),是菊花的一个重要病害,引起植株严重矮化,花序变小而降低或失去其观赏价值。在1945～1947年,菊花矮化病在美国大流行,使30%～60%植株失去商品价值。此病在美国、加拿大、英国、荷兰有分布,在我国也有报道。但它在菊花生产中的重要性,它的分布及流行情况不清楚。在1987～1989年,我们在这方面做了一些工作。     

豆科植物萎蔫病及其检测

豆科植物萎蔫病最初是由Ｆ．Ｈｅｄｇｅｓ（１９２２）报道的。当时发现美国南达科他州食用干白豆上有萎蔫病的发生,属维管束病害,同时伴随失绿、矮化等现象和产量的下降。其病原物最初定名为萎蔫细菌（Ｂａｃ－ｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ）。到１９４２年...     

农药残留检测技术进展

本文介绍了近年来国内外农药残留检测技术的进展情况,包括农药残留检测常规方法及快速检测方法等,指出农残检测发展的方向是更快速、更准确、更环保。     

浙江省马铃薯病毒病检测分析

马铃薯病毒病是影响马铃薯产量和品质的主要因素之一,其症状表现为花叶、黄化和卷曲等。2019年4月-5月,在浙江省湖州、杭州、绍兴、宁波、金华、台州和丽水等7个地市的主要马铃薯产区采集了具有典型病毒病症状的马铃薯样品,采用转录组测序和RT-PCR验证的方法进行病毒检测,共筛查并验证出6种马铃薯病毒,包括马铃薯X病毒Potato virus X(PVX)、马铃薯Y病毒Potato virus Y(PVY)、马铃薯S病毒Potato virus S(PVS)、马铃薯H病毒Potato virus H(PVH)、马铃薯M病毒Potato virus M(PVM)以及马铃薯奥古巴花叶病毒Potato aucuba mosaic virus(PAMV)。检测结果表明,在调查的这7个地市中每个地市都具有2种以上的病毒发生,其中PVH作为一种新鉴定的麝香石竹潜隐病毒属成员在除宁波以外的各地区都有发生;此外杭州市、湖州市以及绍兴市均检测出了PAMV。对检测到的PVS、PVH、PVM和PAMV外壳蛋白(coat protein,CP)序列进行系统发育分析表明,这些病毒均存在地域差异性。本研究为浙江省马铃薯病毒的防控奠定了重要基础。     

RT-PCR检测番茄不孕病毒

根据番茄不孕病毒 (TAV)RNA3上外壳蛋白基因序列设计、合成引物 ,以感病组织和健康组织总RNA为模板 ,进行cDNA合成和PCR扩增 ,结果从感病组织中扩增出与预期的6 42bp大小一致的目标片段 ,而健康组织无此扩增产物 ;将PCR产物插入 pGEM T载体克隆并测序 ,序列分析表明与TAV不同株系的序列同源性达到 96 2 %以上 ;将感病组织总RNA以 1 0倍梯度稀释成不同浓度 ,测出RT PCR检测TAV的灵敏度为 1 0 -5 ;PCR产物克隆作为RT -PCR反应的阳性对照 ,解决了毒源保存和传播的问题 ,从而建立了TAV快速、灵敏、准确的RT -PCR鉴定和检测技术     

马铃薯青枯病的PCR检测

以我国11个省(市、区)和6种不同寄主植物的43个青枯菌Ralstonia solanacearum代表性菌株和4个国外青枯菌菌株为试材,采用15条随机引物进行了RAPD分析,筛选到了1条青枯菌所特有的DNA片段,根据其碱基序列,设计了特异PCR引物,对不同青枯菌DNA进行扩增,并以马铃薯的其它病原细菌为对照,只有青枯菌可获得773bp的DNA扩增产物.经过对PCR反应模板制备程序的简化和优化,利用本研究设计的特异引物,直接对马铃薯病块茎的DNA粗提液进行扩增,获得了773bp片段.此技术可望用于马铃薯种薯青枯病菌的检测,大大缩短检测时间,提高检测效率.     

应用单克隆抗体检测香蕉束顶病

应用香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了检测香蕉束顶病的间接ＥＬＩＳＡ方法，其检测香蕉病组织汁液的最大稀释度为１：１２８０，健康香蕉组织汁液无非特异性反应。用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了采自广东、广西９个市（县）的香蕉产区的８０个大田香蕉束顶病样本和２５个荫棚香蕉试管苗样本，其中大田样本ＢＢＴＶ的带毒率为７６．５％，试管苗样本的带毒率为８．０％。香蕉束顶病株不同部位ＢＢＴＶ含量检测表