15味蒙药和3种蒙方抗大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌作用研究

为了进一步研究蒙药对奶牛乳房炎两种主要病原菌的体外抑菌和体内抗菌作用,用牛津杯法测定了15味蒙药对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈直径,用二倍稀释法测定了3种蒙方在体外的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC)。又以大肠埃希菌感染小鼠,经口灌服蒙方以判断其体内抗菌效果。有8味蒙药对两种菌有较好的抑菌作用,抑菌环直径均大于12 mm,最大达到22 mm。3种蒙方体外有较好的抑菌作用,其中方Ⅱ对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌抑制作用最强,MIC分别为0.125 g/mL和0.25 g/mL,MBC均为0.25 g/mL。口服不同剂量方Ⅰ的感染小鼠生存率明显高于阴性对照组。     

篦齿蒿提取物的抗菌试验

为了研究篦齿蒿(Neopallasia pectinata)水提取物及醇提取物的体外抑菌作用,采用牛津杯法测定篦齿蒿各种提取物对大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌,沙门菌和链球菌的抑菌圈直径。用试管2倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC),以金黄色葡萄球菌和链球菌感染小鼠,判断其体内抗菌效果。结果表明,篦齿蒿各种提取物都具有一定的抑菌作用,尤其是对金黄色葡萄球菌,其乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物是体外抗菌的主要活性部分。篦齿蒿提取物对链球菌感染小鼠体内抗菌效果较差,对金黄色葡萄球菌感染小鼠体内抗菌成分主要集中在乙酸乙酯提取物内,对小鼠死亡保护率明显高于阴性对照组,可达75%。     

杂种鹅掌楸叶提取物的抗菌作用

为了探讨杂种鹅掌楸叶不同极性部位提取物对大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌的体外抗菌效果,通过乙醇回流提取制得鹅掌楸醇提物,采用系统溶剂提取法萃取得到鹅掌楸叶醇提物的不同部位,并通过琼脂平板法和微量肉汤稀释法检测各部位的抗菌作用。结果显示:杂种鹅掌楸叶石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取物对沙门菌、金黄色葡萄球菌、链球菌有不同程度的抗菌作用,其中氯仿部位作用最强,抑菌圈分别为18.0、16.0及17.0 mm,最小抑菌浓度(MIC)分别为0.625、0.312 5及0.625 mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)分别为1.25、0.312 5及1.25 mg/mL。各部位提取物对大肠埃希菌无抗菌作用,正丁醇、水部位提取物对测试的4种菌均无抗菌作用。研究表明杂种鹅掌楸叶提取物对沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌有不同程度抗菌作用,其中氯仿部位提取物有较强抗菌作用。     

蒙药对奶牛乳房炎中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用

为了进一步研究蒙药对奶牛乳房炎两种主要致病菌的体外抑菌和体内抗菌作用,试验采用牛津杯法测定了23味蒙药对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径;2倍稀释法测定了5种蒙药复方在体外的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);又以两种致病菌的混合菌感染小鼠,灌服蒙药复方判断其在体内的抗菌效果.结果表明:有12味蒙药对两种致病菌均有较好的抑菌作用,抑菌环直径均大于9.20 mm,最大达到19.97 mm;5种蒙药复方在体外有较好的抑菌作用,其中方Ⅰ和Ⅳ对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度分别为0.125,0.031 25 g/mL,最低杀菌浓度分别为0.25,0.062 5 g/mL;各蒙药复方对小鼠的保护率明显高于阴性对照组,其中方Ⅰ、方Ⅱ和方Ⅴ对小鼠的保护率达到75%.     

不同种类中药废弃物和中药复方的体外抑菌试验

为了寻找更为安全高效的动物替抗药物，本试验以3种中药复方和7种中药废弃物为材料，采用K-B纸片法检测抑菌圈直径、二倍稀释法检测最低抑菌浓度(MIC)、平板涂布法检测最低杀菌浓度(MBC),综合评价所选药物对大肠埃希菌、肠炎沙门菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果。试验结果显示：9种药物(除清开灵药渣外)都对金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌和杀菌作用，其MIC和MBC值在3.91～125 mg/mL范围内，为金黄色葡萄球菌中度到高度敏感药物；中药复方1和中药复方3对大肠埃希菌的MIC值分别为125 mg/mL和62.5 mg/mL,表现为中度抑大肠埃希菌；忍冬藤和中药复方1对肠炎沙门菌的MIC值都是125 mg/mL,为肠炎沙门菌中度敏感药物。试验结果表明，3种中药复方和6种中药废弃物(除清开灵药渣外)可开发成防治金黄色葡萄球菌感染性疾病的药物，中药复方1和中药复方3可预防和治疗禽畜大肠埃希菌感染，而中药复方1和忍冬藤可防治畜禽因感染肠炎沙门菌引起的病症。     

司帕沙星体外抗菌活性的试验

应用试管二倍稀释法测定司帕沙星对大肠埃希氏菌、沙门菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和禽败血霉形体等病原微生物的最小抑菌浓度（MIC)和最小杀菌浓度(MBC)，并与4种氟喹诺酮药物及3种其他抗菌药物相比较。结果表明，司帕沙星对大肠埃希氏菌、沙门菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和禽败血霉形体均有良好的体外抗菌活性，优于其他对照药物。     

海南沿海羊栖菜和海带不同提取物的抑菌活性

本实验以金黄色葡萄球菌(St aphyl occoccus aureaus Rosenbach)、大肠埃希菌(Escheri-chi a col i)2种需氧型细菌作为供试细菌,用圆形纸片法对羊栖菜和海带的无菌水、乙醚和乙醇提取物进行抑菌试验。结果表明:采用水提法、95%乙醇浸提取法和乙醚索氏提取法均能从羊栖菜和海带中提取出活性物质,提取回收率依次为水提法>乙醇提法>乙醚提法;比较对羊栖菜和海带3种不同提取方法得出:乙醇提取物对两种菌体的抑菌活性相对水提物和乙醚提取物较好,且乙醇提取物乙酸乙酯相对水相抑菌活性较好;比较羊栖菜和海带乙醇提取物乙酸乙酯相的MIC得出:海带对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的MIC相对羊栖菜较低,抑菌效果较好。     

苦参碱和氧化苦参碱对奶牛子宫内膜炎致病菌体外抑制试验

为了确定苦参碱和氧化苦参碱对奶牛子宫内膜炎致病菌的体外抑菌活性,选取奶牛子宫内膜炎致病菌大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌为供试菌株,采用纸片扩散法、牛津杯法对2种生物碱进行了药敏试验,采用液体倍比稀释法测定了其最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,苦参碱和氧化苦参碱对奶牛子宫中分离的耐药性大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)均有一定的抑制作用。苦参碱对耐药性大肠埃希菌和MRSA的MIC分别为12.5 mg/mL和25 mg/mL,氧化苦参碱对耐药性大肠埃希菌和MRSA的MIC分别为25mg/mL和50mg/mL。     

复方恩诺沙星可溶性粉对畜禽主要致病菌的体外抑菌效果

采用纸片扩散法(K-B法)测定复方恩诺沙星可溶性粉对畜禽主要致病菌的敏感性,采用试管倍比稀释法测定复方恩诺沙星可溶性粉对畜禽主要致病菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,病原性大肠埃希菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡巴氏杆菌、猪巴氏杆菌和链球菌对复方恩诺沙星可溶性粉敏感,复方恩诺沙星可溶性粉对畜禽主要致病菌的MIC为0.0279μg/mL~3.575μg/mL,MBC为0.055μg/mL~7.11μg/mL。     

中草药对乳牛乳腺炎主要病原菌的体外抗菌活性试验

采用试管二倍稀释法，测定了金银花、连翘和蒲公英等12种中草药及其复方制剂对乳牛乳腺炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌)的体外抗菌活性(MIC和MBC)。试验结果表明，金银花、连翘和蒲公英及其复方制剂对这4种病原菌均具有较强的体外抗菌活性。     

20味中草药与抗生素联用对猪源链球菌体外抑菌作用的分析

为观察中草药与抗生素联用对猪源链球菌的体外抑菌效果,采用试管二倍稀释法测定20味中草药水提物、醇提物的最低抑菌浓度（ MIC）,用常量棋盘稀释法测定20味中草药水提物、醇提物与抗生素联用对猪源链球菌的部分抑菌浓度（ FIC）。结果显示,所选20味中草药的水提物、醇提物对猪源链球菌均具有一定的抑菌作用,瓜蒌醇提物等对猪源链球菌的体外抑菌作用较强;败酱草水提物等对猪源链球菌的体外抑菌作用较弱。瓜蒌醇提物、乌梅醇提物、乌梅水提物与环丙沙星联合用药的抑菌作用表现为相加作用,板蓝根醇提物等与环丙沙星联合用药的抑菌作用表现为无关作用。     

构树叶提取物对金黄色葡萄球菌的抑制作用及机理研究

为了研究构树叶提取物的抑菌作用及其机理,以金黄色葡萄球菌为供试菌,采用牛津杯法测定构树叶提取物的抑菌效果,通过测定供试菌生长曲线、细胞膜渗透性和蛋白质合成来研究构树叶提取物的抑菌机理。结果表明,构树叶水提取物和75%乙醇提取物抑菌圈直径分别为17.5和18.0 mm,最小抑菌浓度均为6.8 mg/mL,最小杀菌浓度均为12.50 mg/mL。构树提取物能显著抑制金黄色葡萄球菌蛋白质合成,从而抑制其生长,但对其细胞膜的通透性影响不大。因此,构树叶提取物通过抑制金黄色葡萄球菌蛋白质合成发挥其抑菌效果。     

基于中草药提取方法差异对鸡源变形杆菌的体外抑菌作用比较

为探究中草药提取液对临床分离鸡源变形杆菌抑菌效果,本试验对野菊花、穿心莲等9种中草药,采取水提法和醇提法提取中草药的有效成分,并采用试管二倍稀释法测定中草药提取液对鸡源变形杆菌的最小抑菌浓度(MIC),采用微量肉汤稀释棋盘法对抑菌效果较佳的黄芩等5种水提液与虎杖等3种醇提液分别进行体外联合药敏试验,测定其FIC指数。结果表明:水提液中,黄芩抑菌效果最佳,MIC为62.5 mg/mL,穿心莲、虎杖、黄连、香薷次之,MIC均为125 mg/mL;醇提液中,虎杖、穿心莲、香薷抑菌效果较好,MIC均为125 mg/mL;体外联合药敏试验中,本试验各组合均无协同作用;说明黄芩水提液对鸡源变形杆菌抑菌效果最佳,其余药物水提液抑菌效果一般或较差;醇提取液抑菌效果为一般或较差;本试验各联合用药的效果不佳。     

河北省奶牛源大肠杆菌的分离鉴定、致病性及中草药体外抑菌效果研究

【目的】 分析河北省奶牛源大肠杆菌的致病性及中草药体外抑菌效果。【方法】 于河北省收集30份具有典型临床症状的奶牛粪便样品,对样品进行细菌培养观察、生化鉴定、血清型鉴定、透射电镜观察、PCR扩增及致病性研究。采用传统煎煮法与醇提法提取9种中草药,通过96孔板-二倍稀释平板法测定最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）及最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）,筛选出抑菌效果较强的中草药;将中草药进行两两联合,采用牛津杯法测定抑菌圈直径（inhibition zone diameter,IZD）,并通过96孔板-二倍稀释平板法测定MIC和MBC,评价药物的抑菌效果。【结果】 分离获得12株奶牛源大肠杆菌,检出率为40%,均具有致病性,其优势血清型为O55,检出率为58.3%。在中草药水提取液中,五倍子、五味子抑菌效果最强,MIC和MBC均为7.80 mg/mL,其次为乌梅、夏枯草、石榴皮,具有较好的抑菌效果,MIC和MBC均为15.63 mg/mL;在中草药醇提取液中,五倍子抑菌效果最强,MIC和MBC均为3.97 mg/mL,其次为五味子抑菌效果较好,MIC和MBC均为7.80 mg/mL。在中草药两两联合中,五味子与乌梅联合用药表现出协同作用,抑菌效果最强,IZD为26.00 mm,MIC和MBC均为3.97 mg/mL,其次为五倍子与乌梅,IZD为23.66 mm,MIC和MBC均为7.80 mg/mL。【结论】 本研究成功分离到具有致病性的大肠杆菌,优势血清型为O55型,筛选出抑菌效果较好的单味及复方中草药,为大肠杆菌引起的奶牛腹泻临床应用中药防治提供科学依据。     

中药复方及拆方组合的抗炎、镇痛、抑菌活性评价

目的：为了研究中药复方及其主要药味拆方组合的抗炎、镇痛、抑菌活性。方法：以二甲苯致小鼠耳肿胀模型及冰醋酸致小鼠毛细血管渗透试验观察其对炎症的影响;通过醋酸致小鼠扭体试验及热板法试验观察其对疼痛的影响;采用二倍稀释法测定其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的最小抑菌浓度( MIC) 和最小杀菌浓度（MBC）。结果：中药复方组及拆方组合不能减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度和降低小鼠腹腔毛细血管通透性 (P>0.05);中药复方组、拆方组合都能极显著的减少小鼠扭体次数(P＜0.01),但对热刺激引发的小鼠痛反应时间无明显的延长 (P>0.05);中药复方在0.63 mg/mL浓度以上时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌表现出很好的抑菌效果,对沙门氏菌呈中度敏感,其MIC为9.375 mg/mL。然而,拆方组合抑菌效果不明显。结论：中药复方及其拆方组合具有一定的镇痛及抗菌活性。     

中药野菊花提取物与抗菌药联合对产ESBLs大肠杆菌抑制效果研究

试验旨在探讨野菊花提取物与抗菌药联合作用对产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases, ESBLs）大肠杆菌的体外抑制效果,为野菊花的进一步开发利用提供理论依据。采用2倍微量稀释法和中西药联合诱导传代法测定野菊花提取物、抗菌药及联合作用后的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）。结果显示,野菊花水提物对该耐药大肠杆菌的MIC值为250 mg/mL,且在野菊花水提物亚抑菌浓度（1/2 MIC）作用下进行中西药联合传代,其与头孢曲松钠、头孢噻呋钠、头孢噻肟钠、氟苯尼考、痢菌净、阿米卡星、林可霉素7种抗菌药联合作用后,抗菌药的MIC值明显降低。表明野菊花水提物能够显著降低产ESBLs大肠杆菌对部分抗菌药的敏感性。     

Antibacterial Effect of Aqueous Extract of Chrysanthemum indicum L.Combined with Antibiotics on Extended Spectrum β-lactamases-producing Escherichia coli

The experiment was done to investigate the antibacterial effect of aqueous extract from Chrysanthemum indicum L. combined with antibiotics on extended spectrum β-lactamases (ESBLs)-producing E. coli,and aimed to offer theoretical basis for its further development.The ESBLs-producing E.coli was induced to passage by combining Chinese herbal medicine with antibacterial drugs.Then the minimal inhibitory concentration (MIC) of medicines were determined with double microdilution method.The results showed that the MIC of Chrysanthemum indicum L.aqueous extract was 250 mg/mL.And the MIC of ceftriaxone,ceftiofur sodium,cefotaxime,florfenicol,mequindox,amikacin and lincomycin decreased significantly after combining with 1/2 MIC of Chrysanthemum indicum L.aqueous extract.This research showed that aqueous extract Chrysanthemum indicum L.could increase the antibiotic sensitivity of the ESBLs-producing E.coli.     

20种中草药复配物对犬源葡萄球菌体外抑制作用的研究

为探究复方中草药对犬源葡萄球菌的体外抑制作用效果,将30种单味中草药配伍后得到20种复配物并制成水提物,采用二倍稀释法测定中草药复配物对犬源葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),利用琼脂扩散法测定中草药复配物对犬源葡萄球菌的抑菌圈直径。结果表明,编号为15和16的中草药复配物对犬源葡萄球菌体外抑菌效果最好,最低抑菌浓度均为31.25mg/mL,抑菌圈直径分别为31.0mm和38.0mm,犬源葡萄球菌对这2个复方均表现为极敏;其他复方中草药对犬源葡萄球菌也呈现出不同程度的抑菌活性。研究结果为兽医临床筛选高效低毒的复方中草药制剂提供了科学依据。     

16味蒙药对3种仇清型牛源致病性大肠杆菌体外抑菌及联合抑菌效果的研究

为研究蒙药对3种血清型牛源致病性大肠杆菌（Escherichia coli，E. coli）的体外抑菌效果，采用牛津杯法测定16味蒙药对受试菌株的抑菌圈直径，利用微量稀释法结合平板法测定最小抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC），采用棋盘法测定敏感蒙药的协同指数（FICI）。结果表明，乌里史古—达兰—哈力苏、协日—洪连、乌拉勒吉嘎纳对3种血清型大肠杆菌的抑菌圈直径为16.10-29.64 mm，MIC为7.81-31.25 mg/mL，MBC为15.63-125 mg/mL。联合抑菌试验结果表明，乌拉勒吉嘎纳与协日—洪连，舒布格日—希木勒德格与呼仍—图如对E. coli O26的FICI为0.50，乌拉勒吉嘎纳与乌里史古—达兰—哈力苏对E. coli O83的FICI为0.50。结果提示，乌里史古—达兰—哈力苏、协日—洪连、呼仍—图如、乌拉勒吉嘎纳、阿纳尔对3种血清型大肠杆菌的综合抑菌效果较好；舒布格日—希木勒德格与呼仍—图如在抑制E. coli O26时表现为协同作用，组方时可优先考虑；乌拉勒吉嘎纳与乌里史古—达兰—哈力苏在抑制E. coli O83时表现为协同作用，组方中可优先考虑。