狐阴道加德纳氏菌PCR诊断方法的建立与应用

【目的】建立快速检测狐阴道加德纳氏菌的PCR诊断方法。【方法】根据阴道加德纳氏菌16S rRNA基因序列设计1对特异性引物,以分离的狐阴道加德纳氏菌菌体DNA为模板进行PCR扩增,建立狐阴道加德纳氏菌的PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性及其可行性进行检验。【结果】特异性试验结果表明,狐阴道加德纳氏菌能扩增出437 bp的特异性核酸片段,而大肠杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为500 mL-1。利用建立的PCR检测方法,对9株从山东省不同地区分离的疑似狐阴道加德纳氏菌菌株进行检测,结果有4株为阳性。【结论】研究建立的狐阴道加德纳氏菌PCR快速诊断方法,敏感性高、特异性强,可1次检测多个样品。     

狐阴道加德纳氏菌病的防治

正狐狸阴道加德纳氏菌病是由狐狸阴道加德纳氏菌(Gardnerella vaginalis of fox,GVF)引起的一种人兽共患传染病,多是通过交配和人工授精传播,是目前狐狸流产和死胎等生殖系统疾病的主要病原之一。据报道,由狐阴道加德纳氏菌病引起的狐空怀、流产占狐空怀、流产总数的45%~70%。我国科研人员80年代在进口的种狐体内发现了狐狸阴道加德纳氏菌,并证实了该细菌对狐狸的     

狐狸阴道加德纳氏菌病虎红平板凝集试验诊断方法研究

利用研制的虎红平板凝集抗原对狐狸阴道加德纳氏菌病进行血清抗体检测，试验表明，该抗原检出率９２．２％，符合率为８５．１％，无交叉反应，重复性好，适用于狐狸阴道加德纳氏菌感染的确诊，流行病学调查，免疫水平监测，现场与口岸动检狐狸检疫。     

如何防治阴道加德纳氏菌病

阴道加德纳氏菌病是由阴道加德纳氏菌引起的一种人畜共患传染病，以妊娠狐的空怀、流产为主要特征。在我国毛皮动物饲养中广泛发生，流行呈上升趋势，给养狐业造成了极大的经济损失，应引起饲养者的注意．。主要症状为母狐流产、空怀，公狐性欲低下等，给狐场造成经济损失，并是危害人体健康的人兽共患传染病。阴道加德纳氏菌病是革兰氏阴性菌，形态为等球杆，近球或杆状多形态，大小0．6～0．8微米，0．7～2．0微米，排列呈单在，短链、八字型。     

狐阴道加德纳氏菌的分离鉴定

本研究对山东省日照地区送检的病死狐样品进行了细菌的分离,根据分离菌株的形态特征、培养特性、生化试验和PCR鉴定,确定为狐阴道加德纳氏菌.对鉴定出的狐阴道加德纳氏菌进行药敏试验,结果表明该分离菌对万古霉素、复合磺胺敏感,而对卡那霉素、氨苄青霉素、头孢他啶等药物有耐药性.该研究为狐阴道加德纳氏菌病的预防、控制和临床治疗提供了重要的参考依据.     

15种水产动物致病菌生长特性及形态特征研究

采用平板培养及革兰氏染色镜检,对15种水产动物致病菌生长特性及形态特征进行了研究。结果表明,鮰爱德华氏菌只在TSA培养基上能正常生长,而且生长非常缓慢;腐败希瓦杆菌B16在shieh培养基上能正常生长;其余细菌均能在LB培养基上生长。这些致病菌在形态上可分为3类:一类为球状菌,包括金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、表皮葡萄球菌和溶壁微球菌;第二类为杆状菌,包括枯草杆菌、嗜水气单胞菌B11、鮰爱德华氏菌、迟钝爱德华氏菌、肺炎克雷伯菌、腐败希瓦杆菌B16、变形假单胞菌、荧光假单胞菌和大肠杆菌;第三类为弧状菌,包括副溶血弧菌和河流弧菌。     

狐、貉、貂加德纳氏菌病问答

加德纳氏菌的主要危害是什么？ 答：加德纳氏菌是引起狐、貉、水貂繁殖障碍的重要细菌性传染病之一。它能导致母兽阴道炎、子宫颈炎、子宫内膜炎、公兽的睾丸炎、附睾炎及引起母兽流产和空怀、公兽性功能减退、死精、精子畸形等。该病于配种期间最易传播，尤其在感染群，配种后感染率明显升高，最高可达全群的50％以上。     

狐狸阴道加德纳氏菌病微量凝集试验血清学诊断方法研究

在虎红平板凝集抗原研制成功的基础上，又建立了微量凝集试验（ＭＡＴ）血清学诊断方法，对狐狸阴道加德纳氏菌（ＧＶＦ）病进行血清抗体检测，试验结果表明，该抗原复重性好，阳性检出率为９４．３％，敏感度比虎红平板凝集抗原高５．１倍，两方法符合率为９５％，在确定的试验标准中，微量凝集抗原无交叉反应，是诊断狐狸阴道加德纳氏菌感染的又一血清学特异方法。     

狐、貉、貂阴道加德纳氏菌病和布鲁氏菌病流行病学调查

阴道加德纳氏菌、布鲁氏菌是导致狐、貉、貂繁殖障碍的主要病原菌。为掌握狐、貉、貂阴道加德纳氏菌病、布鲁氏菌病流行状况 ,我们开展了这两种传染病的血清学调查 ,现将调查结果报告如下。1　样品来源被检样品取自山东、河北、辽宁、吉林、黑龙江、内蒙古、河南、天津等 8个省     

狐阴道加德纳氏菌病研究进展

狐阴道加德纳氏菌病是新发现的一种人畜共患病.近年来随着养狐业的发展,狐阴道加德纳氏菌病在各养狐场大范围流行,给养狐业造成巨大的经济损失.对该病病原学、流行病学、诊断方法、防治技术作了系统的阐述,指出了该病的严重危害以及预防和控制该病中存在的问题.     

蔽果金腰叶内寄生链格孢属真菌特性研究(英文)

[目的]了解虎耳草科植物蔽果金腰内生菌的生物学特性。[方法]利用 PDA 培养基分离蔽果金腰叶内的真菌,利用 PDA 培养基、察氏培养基、改良型 KB 培养基分别对分离得到的菌株进行培养。[结果]菌株在 PDA 培养基、KB 培养基和察氏培养基上均为菌落舒展,白色毡帽状,等径生长,边缘整齐,呈波状,菌落到后期变为青褐色;孢子黑色,在 PDA 培养基上生长在菌落表面,基质呈黑色;而在 KB 培养基和察氏培养基上生长在菌落边缘,基质呈黑色。孢子形态多样,多数为倒棒状,也有球形和椭圆形的,具有纵、横或斜的真隔膜,呈砖格状分隔,喙为短柱状假喙。[结论]分离得到的菌株属于半知菌亚门丝孢纲丝孢目暗色孢科链格胞属真菌的一种。     

蔽果金腰叶内寄生链格孢属真菌特性研究

[目的]了解虎耳草科植物蔽果金腰内生菌的生物学特性。[方法]利用PDA培养基分离蔽果金腰叶内的真菌,利用PDA培养基、察氏培养基、改良型KB培养基分别对分离得到的菌株进行培养。[结果]菌株在PDA培养基、KB培养基和察氏培养基上均为菌落舒展,白色毡帽状,等径生长,边缘整齐,呈波状,菌落到后期变为青褐色;孢子黑色,在PDA培养基上生长在菌落表面,基质呈黑色,而在KB培养基和察氏培养基上生长在菌落边缘,基质呈黑色。孢子形态多样,多数为倒棒状,也有球形和椭圆形的,具有纵、横或斜的真隔膜,呈砖格状分隔,喙为短柱状假喙。[结论]分离得到的菌株属于半知菌亚门丝孢纲丝孢目暗色孢科链格胞属真菌的一种。     

不同营养类型培养基番茄内生细菌群落结构研究

通过采用Biolog EcoPlate培养、16S r RNA基因高通量测序技术等方法研究不同培养基上植物内生细菌群落结构的组成差异，探究不同培养基等营养条件对番茄内生细菌群落结构的影响。结果表明：(1)4种培养基上生长的内生菌群在Biolog EcoPlate微平板培养96 h后，菌群生长达到稳定期，且在牛肉膏蛋白胨(NA)培养基下菌群代谢活性较高。R₂A培养基下菌群代谢活性较低。(2)番茄内生微生物组包括柠檬酸杆菌属(Citroebacteria)、芽孢杆菌属(Bacillus)、鞘脂单胞菌(Sphingbacterium)、布克氏菌属(Burkholderia)。(3)LB、TSA培养基分离到的内生菌多为芽孢杆菌属；在NA、R₂A培养基中番茄内生菌组成多为柠檬酸杆菌、芽孢杆菌、鞘脂单胞菌、布克氏菌，为优势菌种。(4)NA培养基中番茄内生微生物组香农指数高于其他处理(P<0.05)差异；PCoA分析显示4种培养基中番茄内生细菌群落结构具有差异(P<0.05)。(5)网络分析发现NA、R₂A培养基中番茄内生...     

蓝莓叶斑病病原菌鉴定及生物学特性

为明确贵州省黔东南苗族侗族自治州麻江县蓝莓叶斑病病原菌种类及其生物学特性，采用组织分离法获得了代表性病原菌株Y2,科赫氏法则证明Y2是引起蓝莓叶斑病的病原菌。形态学和分子生物学综合鉴定菌株Y2为链格孢菌(Alternaria alternate)。生物学特性研究结果表明，病原菌Y2在PDA培养条件下，气生菌丝较发达，菌丝呈白色、密集，基质背面呈淡黄色，分生孢子单生，褐色，卵圆形、倒棒形，有纵横隔膜。该菌菌丝生长的最佳培养基为察氏培养基，产孢最适培养基为WA培养基；菌丝生长的最适温度为25℃,产孢最适温度为5℃;菌丝对碳源葡萄糖利用效果最好，但麦芽糖能更好地促进Y2产孢；菌丝生长最适氮源为蛋白胨，产孢最适氮源为硫酸铵；全光照适宜菌丝生长，但全黑暗促进Y2产孢；菌丝生长和产孢最适pH值为7。通过Y2菌株生物学特性研究，能够为蓝莓叶斑病防治提供理论依据。     

狐病实用技术防治问答(3)

问 :配种前给狐口服药物 ,能避免狐阴道加德纳氏菌重复感染吗 ?答 :目前 ,加德纳氏菌疫苗在夏季很少有人应用 ,按正常免疫程序 ,种兽在 7月份应注射 1次疫苗 ,然而此时种兽一般都没最后定群 ,以及很多用户又考虑节省资金问题 ,因而往往都不注射疫苗 ,结果出现免疫空档 ,此期间     

鸡伤寒-白痢沙门氏菌生长动力学

为了测定鸡伤寒—白痢沙门氏菌的生长动力学,用该菌的标准菌株C79—13接种5种液体培养基,于接种后0,4,8,12,16,20,24,36和48小时取材,按标准琼脂平板计数法计算了每ml培养基内的活菌数。结果表明,营养成分和培养时间对本菌的生长繁殖具有明显而强烈的影响。每ml培养基内活菌平均数以接种后4小时最少;以接种后16或20小时最多。本菌的世代时间不是常数,以2号培养基接种后12～16小时最短(18′16″),以4号培养基接种后4～8小时最长(83′20″)。本试验还试图建立本菌生长动力学的数学模型,包括3个直线方程和1个确定性模型。     

大丽轮枝菌和拮抗细菌消耗营养物质的动态研究

在察氏培养基的基础上,通过配制不同碳氮源,设计了3种培养基,比较大丽轮枝菌VD-11和拮抗细菌C-0消耗碳源和氮源的动态过程。结果表明,拮抗细菌C-0在3种培养基中,消耗葡萄糖速度较大丽轮枝菌VD-11均有明显优势,在2号培养基中,优势集中在48 h之内,在1、3号培养基中,72 h之内均有明显优势,3号培养基中更为明显。拮抗细菌C-0在3种培养基中,72 h之内消耗不同氮源速度较大丽轮枝菌VD-11均没有优势,但不同形态的氮源对两种菌消耗碳源速度均存在影响,VD-11和C-0最适宜氮源分别为硝酸钠和蛋白胨。     

狐阴道加德纳氏菌菌种保存方法的研究

采用不同保存方法对狐阴道和加德纳氏菌的保存期进行了测定，结果表明，该菌冷冻真空干燥后－２０℃至少可保存７年，液体培养菌种２－８℃可保存６０ｄ，斜面培养菌加保护剂２－８℃可保存５年；一－２０℃湿冻可保存９０ｄ。     

部分环境因子对肺炎克雷伯氏菌和温和气单胞菌生长的影响

[目的]探索肺炎克雷伯氏菌、温和气单胞菌的最适生长环境。[方法]以分离自鱼类的肺炎克雷伯氏菌、温和气单胞菌为材料,研究高温、pH值、重金属对其生长特性的影响。[结果]肺炎克雷伯氏菌、温和气单胞菌的最适生长温度分别为37、28℃,且肺炎克雷伯氏菌对高温的抵抗力较强,温和气单胞菌对高温的抵抗力较弱。肺炎克雷伯氏菌、温和气单胞菌均在pH值为7的培养基中生长最旺盛。肺炎克雷伯氏菌、温和气单胞菌对Cr6+、Cu2+、Zn2+、Mn2+均产生较强的抗性,且温和气单胞菌对重金属离子的抗性较强,随着重金属离子浓度的增加,2种菌的生长量减少。[结论]该研究为进一步研究肺炎克雷伯氏菌和温和气单胞菌对动物的致病机制提供了依据。     

鲜猪肉小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离鉴定

对重庆市２１５份鲜猪肉污染小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定和增菌、分离培养基选择结果表明，猪肉中小肠结肠炎耶氏菌污染率为２．７９％，６株分离菌均为生物３型。其中，５株属０∶３血清型，１株为０∶６．３０血清型。在２５℃时，用１．５％去氧胆酸钠增菌效果显著。分离培养基以ＳＳ，ＭＴ，ＳＳ－Ｄ和ＳＳ－Ｍ琼脂培养基较好。