兰花致病真菌拮抗细菌的筛选与鉴定

[目的]为获得高效拮抗3种兰花病原真菌胶孢炭疽菌、尖孢镰孢菌和腐皮镰孢菌的菌株。[方法]使用平板对峙法筛选拮抗菌株,结合形态特征观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列分析的方法对目的菌株进行鉴定。[结果]筛选获得5株同时拮抗三种病原菌的菌株,其中菌株GT312拮抗效果明显。16S rRNA基因序列分析显示,该菌株与Bacillus amyloliquefaciens(模式菌株FZB42T)相似性最高,为99.93%。菌株形态特征观察、生理生化试验结果与B.amyloliquefaciens描述一致。[结论]菌株GT312可同时拮抗3种兰花病原真菌,鉴定为解淀粉芽孢杆菌,为兰花病害的生物防治提供了菌株资源。     

硬叶兜兰菌根真菌的形态学特征与鉴定

将采集获得的野生硬叶兜兰植株,采用新单菌丝团分离法,分离纯化后,获得6株菌根真菌。对6株内生菌的菌落形态、产孢结构和分生孢子形状、大小作了测量与观察及一些生物学特性初步鉴定,结果为5株菌根真菌分别属于瘤菌根菌属(Epulorhiza)、胶膜菌属(Tulasnella)和镰刀菌属(Fusariu),未鉴定1种。     

不同宿主的白僵菌菌株分离及特性研究

以9株白僵菌菌株为材料,对其进行分离鉴定并探讨菌株的生物学特性。结果表明:有1株为布氏白僵菌(Beauveria brongniartii),8株为球孢白僵菌(B.bassiana)。结合白僵菌菌落特征、营养生长情况和产孢量来看,2号和3号菌株比较适合应用于生产。     

漾濞核桃病害病原菌的分离及药物抑菌试验

从漾濞核桃染病的枝、叶上分离得到17个纯培养菌株,其中YB001和YB009被鉴定为拟盘多毛孢属(Pestalotiotiopsistey)的真菌,YB005为单端孢属(Trichthecium)的真菌,YB018为枝孢属(C ladosporium)的真菌。室内药剂抑菌实验的结果表明:甲基托布津对YB001和YB009菌的抑制效果很好,茂生对YB016和YB017菌的抑制效果很好。     

油桐根腐病病原菌的研究

油桐根腐病是油桐林的一种毁灭性病害。形态学和培养性状研究表明,致病菌为腐皮镰孢(Fusarium solani(Mart.)Sacc.)。将该菌与国内供试8个腐皮镰孢专化型菌株比较可看出,菌落生长较快,大型分生孢子短而粗,是一种短粗类型。其次,人工接种试验得知,此菌不侵染6科7属7种供试的专化型寄主植物;又经8个专化型菌株接种油桐试验,也不发生侵染关系。此菌仅侵害大戟科油桐属的油桐,是一种专化性病菌。再次,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,此菌与供试菌株的脂酶同工酶的谱带特征和相对迁移率均有明显的差异。由此,将油桐根腐病鉴定为腐皮镰孢一新的专化型,命名为油桐腐皮镰抱(Fusarium solani (Mart.) Sacc. f.sp.aleuritidis Chen et Xiao f.sp.nov.)     

油茶根际高效联合固氮菌的初步鉴定

从不同林分的油茶根系分离筛选出1株固氮效能最高的联合固氮菌N7-3,通过对该菌株的形态特征、生理生化特性以及Biolog微生物鉴定系统进行鉴定,结果表明:该菌株是革兰氏阴性菌,椭球菌,不产芽孢,能运动,菌落白色、圆形,凸起,边缘整齐,有光泽。经Biolog系统鉴定,该菌株是Azomonasspp.的可能性为95%,其主要生理生化特征也与Azomonas相符。     

23株白僵菌菌株生物学特性的研究

在PDA与虫粉-蛋白胨2种培养基以及1%葡萄糖+7%麦皮滤液中,对23株白僵菌菌株的菌落形态、菌丝生长、产孢量以及在不同温度、湿度下的孢子萌发率、抗紫外线能力等方面进行了试验。结果表明:菌落形态可分为3种类型;在2种培养基上,同一菌株及不同菌株在不同培养基上的产孢量也有差异,菌丝徒长的产孢量低;不同温度、湿度下,不同菌株分生孢子萌发率有明显差异。与其它菌株相比,Bpp、Be2、Bd5、Bbt1、Bpx2、Bpr3菌株萌发率高,表现出较好的耐高温和抗旱性以及抗紫外线能力。     

湖南省油茶炭疽病病原鉴定

【目的】研究湖南省油茶炭疽病病原,为该病害的防控提供依据。【方法】采集湖南省长沙、株洲、浏阳、永州、怀化、常德、常宁等油茶主产区9个样地的典型油茶炭疽病叶,分离纯化叶片病健交界处的真菌菌株,观察菌株在(PDA)培养基上的菌落、分生孢子及附着孢的形态特征,确定为炭疽属真菌。进一步对炭疽属菌株进行柯赫氏法则验证,确定油茶炭疽病病原菌菌株。对获得病原菌的r DNA-ITS、CAL和GAPDH 3个基因进行PCR扩增和测序,得到的基因序列与GenBank中已有模式炭疽属菌株序列按照3个基因一致的顺序拼接后采用PAUP和MrBayes软件构建系统发育树。【结果】从湖南省9个采样地共分离获得62株炭疽属菌株,致病性测试表明这62株菌均能对油茶嫩叶和果致病,但不同菌株的发病时间具有一定差异;根据形态特征及多基因系统发育分析,最终明确湖南省油茶炭疽病的病原种类。【结论】湖南省油茶炭疽病的病原菌包含果生炭疽菌、暹罗炭疽菌、胶孢炭疽菌、山茶炭疽菌和哈锐炭疽菌5种炭疽属真菌,其中果生炭疽菌分布范围最广,分离率最高,达到64.5%。     

牡丹红斑病病原菌的研究

从8批次,512个样品中分离得到的优势菌株,对其形态特征、及其着 生方式进行显微检测,同时,进行生物学特性和致病性测定。鉴定出牡丹红斑病病原为枝孢霉（Cladosporium Paeoniae Pass)。该菌在山东地区为首次报道。     

NL351杨树真菌的分离与鉴定

采用组织分离法,从3株健康杨树的树皮、韧皮部、边材、边材向内2cm处和心材5个部位分离到76个真菌菌株,其中部分菌株经形态观察、分类鉴定,隶属于1亚门1目2科5属5种,分别是大刀镰孢(Fusarium culmorum)、细级链格孢(Alternaria tenuissima)、稻黑孢(Nigrospora oryzae)、新月弯孢霉(Curvularia lunata)、卵圆形短蠕孢霉(Brachysporiumobovatum)。     

偃松枝栖真菌的种群结构研究

从冬、春两季偃松不同年龄的枝条上共分离培养、纯化、鉴定出枝栖真菌46属(种),其中接合菌2属(4种),子囊菌3属(5种),半知菌30属(种),待鉴定7种.其枝栖真菌的优势菌种为Tolura 、Verticillium ,两种真菌的平均检出率分别为29.4 %和21.0 %.研究表明偃松冬季枝栖真菌的种类比春季枝栖真菌的种类丰富,其优势菌种亦大不相同.     

杨树上一株链格孢菌的分离、鉴定及室内防治药剂筛选

2010年以来新疆塔城地区杨树发生大面积杨树枝干病害,给杨树生产带来巨大损失。在研究俄罗斯杨枝干病害时,以5年生新疆塔城地区俄罗斯杨枝干为材料,采用组织分离法分离获得了一株链格孢属真菌,根据其菌丝及孢子形态结合ITS序列进行了菌种鉴定,因链格孢属真菌可引起多种植物病害,采用5种常用的杀菌剂对其进行室内抑菌试验。结果表明,分离获得的链格孢属真菌鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata)。室内药剂筛选结果显示,10%多抗霉素对供试菌株毒力最强,EC50值为0. 035 1mg/m L,其他依次为80%代森锰锌、65%代森锌、50%多菌灵和70%甲基硫菌灵。     

杂交竹枯萎病原的rDNA ITS分子鉴定

对造成广西杂交竹3号枯萎病的病原菌进行分子鉴定,以期确定病原菌的属、种名,为防治该病害寻求理论依据.试验对分离纯化的病原菌核糖体DNA的ITS区进行测序,在Genbank中收索其同源性序列并构建它们的系统发育树,以此来确定该病原菌的属、种名.结果表明:分离的病原菌与其它3株尖孢镰刀菌聚为一枝,且自展支持率大于95%;引起杂交竹3号枯萎病的病原就是镰刀属中的尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum.     

刚竹毒蛾白僵菌优良菌株筛选及生产应用研究

本研究对天然刚竹毒蛾僵虫蛹分离纯化的 8个球孢白僵菌菌株 ,进行了菌落形态、菌落生长、产孢量和发芽率等培养性状测定 ,并与 4个马尾松毛虫球孢白僵菌菌株进行了室内外防治刚竹毒蛾试验比较 ,结果表明 :菌株间的培养性状和毒力有明显差异 ,各菌株存在较明显的寄主专化性 ,分离自刚竹毒蛾的菌株毒力较高。筛选出BP4和BP1 2个优良菌株 ,具有菌丝生长速度快 ,产孢时间短 ,产孢能力强 ,毒力高等优点 ,并将最优的BP4菌株应用于生产 ,菌粉平均含孢量达 2 3 8 7×1 0 8·g- 1 ,平均孢子发芽率达 96 2 % ,林间防治越冬代刚竹毒蛾平均效果达 92 3 % ,取得良好的防治效果。     

松球壳孢菌菌落及孢子形态学对比研究

通过79个辽宁松球壳孢菌菌株与4个A型和B型标准菌株、5个美国菌株在菌落和分生孢子形态方面的对比研究，发现辽宁的菌株在形态上基本一致。辽宁菌株与美国的类型A相近，主要表现在孢子表面平滑，通常无隔或有1个隔，在成品PDA培养基上产生绒毛状、白色至灰色菌落。不同之处在于，辽宁菌株在自制PDA培养基上形成贴在培养基表面的菌落——与类型B相似，分生孢子长度介于A型和B型之间或与后者相近。5个美国菌株与类型A一致。同时发现，培养基的来源对菌落形态研究非常重要；光照使菌落气生菌丝有所减少且出现绿色；培养基和寄主种类对孢子大小有影响。     

撑绿杂交竹根腐病的病原鉴定

根腐病是撑绿杂交竹Bambusa pervariabilis×Dendrocalamopsis daii上一种主要病害,通过致病性测定以及菌落形态、菌落生长速率、菌落颜色、分生孢子大小及分生孢子梗等形态学观察,初步鉴定病原为尖孢镰孢菌Fusarium oxysporum Schlecht.;进一步对其DNA进行PCR扩增、测序,得到1条476 bp的单一条带,经过同源性分析,结果与形态学观察一致,最终证明引起撑绿竹根腐病的致病菌是尖孢镰孢菌。此结果为国内首次报道。     

淡紫拟青霉T-DNA插入突变体的表型分析

研究淡紫拟青霉T-DNA插入突变体,鉴定突变体的表型特征,为淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关的基因克隆奠定基础。PCR检测筛选的14株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态,菌落生长速率,产孢量,孢子萌发率和菌丝干质量等生物学性状,并比较突变体致病力。结果表明突变体均含有beta-tubulin基因序列,T-DNA已整合进入野生型菌株20-7的基因组中。通过与野生型菌株对比,发现突变体菌落形态发生了不同程度的改变。菌落生长速率明显增大的菌株占全部菌株的85.71%,只有BN-11菌株的菌落生长速率降低。产孢量显著变大的菌株有BN-11和BN-12,为菌株总数的14.29%。孢子萌发率发生改变的菌株占78.57%。菌丝干质量发生明显增大和减少的菌株都占全部突变体的21.43%。筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力显著降低的突变体。     

核桃内生真菌对几种致病菌的拮抗试验研究

用25种核桃内生真菌,分别与玉米小斑、小麦赤霉、番茄灰霉病原菌进行两点对峙培养拮抗实验,结果表明：23种核桃内生菌抑菌活性对玉米小斑病病原菌极强者5属,对小麦赤霉病病原菌极强者i属,对番茄灰霉病病原菌没有极强者。小卵孢霉对玉米小斑病、小麦赤霉病和蕃茄灰霉病病原菌的抑菌活性都极强,可以初步作为防治这3种作物病害的生物源农药首选菌种;单孢枝霉对该3种病原菌的抑菌活性强。壳大卵孢霉对小麦赤霉病和蕃茄灰霉病病病原菌,粘盘孢属对玉米小斑病和蕃茄灰霉病病原菌抑菌活性强,单孢枝霉、壳大卵孢霉和粘盘孢属也可以作为防治这3种作物病原菌的优选菌株。     

井冈山毛竹菱斑病病原菌的分离与鉴定

采用致病性测定、形态学观察和ITS-rDNA序列分析方法对井冈山毛竹菱斑病病原菌进行了研究.从108块毛竹病斑组织中分离获得30株真菌,选择分离频率高的菌株为研究对象,结合ITS-rDNA序列分析将其鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、链格孢菌(Alternaria alternate)、节菱孢属菌(Arthrinium sp.)、赤霉菌属(Gibberella zeae)和炭角菌属(Xylaria sp.)5个属.经过室内和田间有伤接种致病性测试证实,尖孢镰刀菌、链格孢菌、节菱孢属菌、赤霉病菌和炭角菌属皆具有致病性,其中尖孢镰刀菌的致病性最强,分离相对频率最高,初步推断其为井冈山毛竹主要致病菌类群.     

农杆菌介导的异角状拟盘多毛孢菌T-DNA转化子生物学特性分析

从根癌农杆菌介导的异角状拟盘多毛孢菌菌株的转化子库中筛选出15株形态特征变化显著且遗传稳定的转化子,并从中挑选3株转化子进行Southern blot检测,证实了转化子基因组DNA中含有T-DNA插入片段.分别对15株转化子的菌落形态、菌落生长速度、产孢量、致病性等进行分析,结果表明,部分转化子的生物学特性发生了显著变化,为探讨异角状拟盘多毛孢菌的致病机制和致病基因克隆等提供了理论依据.