玉米核DNA导入小麦获得矮秆优质和早熟二个新品系

用浸胚法将玉米核DNA导入小麦,从转化后的D2代和D3代10多种变异中筛选出矮秆(株高55cm)优质(籽粒蛋白质含量比对照提高2%、赖氨酸含量提高0.05%)和早熟〔比对照早熟5-8天)两个新品系,并能稳定遗传。经对供体、受体和转化后代进行RAPD和POD同工酶分析,证明供体DNA片段已进人受体并导致DNA重组,使后代基因组发生了变异。     

λDNA导入中国春小麦引起形态学及细胞学变化

本研究将λDNA导入中国春小麦，对其后代D1，D2代的花粉母细胞(PMC)减数分裂行为进行了细胞学观察，并对形态性状的变异进行了跟踪统计。D1、D2代的减数分裂过程中均出现了单价体、染色体落后、染色体桥、多极分裂等异常现象。D1代PMC减数分裂变异率为25．54％，但未发现明显的形态性状变异。D2代PMC减数分裂变异率为24．05％，与D1代相比，D2代的PMC减数分裂变异开始分化，观察的出现PMC减数分裂变异的30个单株中变异幅度为9．04％～57．14％。D2代群体形态性状发生了丰富的变异，在株高、茎秆硬度、穗长、穗粒数等方面出现了变异，并且出现了茎秆坚硬、穗长增长、穗粒数增多的优良个体。     

外源野生胡麻总DNA遗传转化栽培胡麻及RAPD分子验证

为了克服亚麻属不同种间存在的生殖隔离,从而利用亚麻野生种优异基因进行资源创制,采用花粉管通道法将亚麻野生种垂果亚麻的基因组DNA导入到栽培种坝选三号中,获得T0种子。T1播种后所获24个单株中有3株发生明显变异,转化后代的株高、工艺长度、分茎数、分枝数及单株蒴果数与受体坝选三号相比较,均发生明显增加。利用18条引物对供体、受体及24株T1导入材料的基因组DNA进行了RAPD扩增分析,从中筛选到6条多态性引物(OPH20、OPK14、S103、S118、OPJ4、OPT6)对8个样品的DNA扩增产物带型出现明显差异,占全部所用引物的33. 3%。RAPD分析表明,D14、D17、D22 3个植株的RAPD谱带中均有来自于供体的特异条带,结合考种数据,认为是供体DNA片段成功整合进了受体基因组中引起了表型上的变化。利用花粉管通道法向胡麻栽培种中导入野生种基因组DNA能够在当代引起多种变异,同时也可在分子水平上检测到基因组的差异,推测大片段外源DNA同源重组可能是变异的主要原因。     

水稻花粉管通道法导入高粱DNA的SSR分子验证

从60对SSR引物中筛选出17对,对供体高粱、受体水稻及其外源。DNA导入后代稳定材料进行了分子验证,结果表明供体高粱与受体水稻间存在多态性、受体水稻与后代稳定材料间出现多态性,供体高粱与部分后代稳定材料间出现相同的扩增带,部分供体与受体共有的特征带在后代中消失、而有些后代出现了供体和受体均没有的扩增带。这表明供体高粱的DNA不同片段已整合到水稻品种中,获得了不同的变异材料,这些。DNA片段能在后代中稳定遗传。     

草莓分子指纹图谱构建与应用

为了对草莓品种进行分子鉴定,以草莓品种红颊、章姬、宁馨(香莓)、阿尔比和梦香为试验材料,从112个RAPD引物中筛选出4个差异引物,扩增出5个差异位点进行指纹图谱构建和聚类分析。RAPD揭示供试草莓材料的多态性比例为3.6%。应用指纹图谱标记能够鉴定红颊、阿尔比和梦香等推广品种,构建宁玉和香蕉等新增草莓品种的指纹图谱,发现梦香的变异群体。最后讨论了草莓指纹图谱的适用性和品种聚类分析对制定推广计划的指导作用。     

高粱DNA导入水稻后代主要性状分析

本研究利用花粉管通道法,将高粱无融合生殖系SSA-1 (Shanxi sorghum apomict-1)的全基因组DNA导入水稻‘辽盐28号’、‘辽盐6号’两个品种,子代的遗传性状发生了明显变化,经过连续自交选择和鉴定,获得了27个表型稳定的D_4代株系。通过田间种植,对导入株系的抽穗期、分蘖数、株高、千粒重等农艺性状的表型进行了统计分析。结果表明:D_4代株系的农艺性状存在广泛变异,部分D_4代株系茎秆、穗粒颜色更偏向供体高粱,表明高粱全基因组DNA成功导入受体细胞,并对受体基因的表达产生了影响,与受体亲本相比,导入株系在抽穗期、分蘖数、株高、每穗粒数、每穗粒重、穗长、千粒重等主要性状上都表现出明显变异。进一步对变异株系分析筛选有助于挖掘新种质材料,为选育水稻新品种提供丰富的种质资源。     

外源DNA导入水稻后代变异性的SSR分析

采用花粉管通道法,将高粱DNA导入水稻,获得了34个稳定的变异品系,从60对SSR引物中筛选出17对,对供体高粱、受体水稻及其外源DNA导入后代稳定材料进行了SSR分析,结果表明,高粱DNA导入水稻可以引起广泛的变异,在分子水平上产生了遗传多样性,聚类分析可将其分为五类,各类有其特有的遗传变异性。接受外源DNA三个片断,两个片断及一个片断的株系分别被聚成一类,与其他类的遗传差异分别为0.467,0.389及0.347,变异程度依次递减;未接受外源DNA两个片断的株系被聚成另一类。因此,接受外源DNA片断的多寡是水稻后代稳定品系变异程度的基础,也是它们分类的标准。     

高梁空间诱变效应研究

1996年利用中国第17颗返回式卫星对高粱唐恢28恢复系种子进行搭载处理后,对其变异后代进行了田间鉴定和同工酶及RAPD分析.主要结果如下(1)SP1代获得一个特大穗型突变体(MTR28),其后代性状分离广泛,变异类型丰富,从中获得了遗传性状稳定且具有不同特点的高产、抗病优良变异选系;(2)优良变异选系组配的杂交种产量明显高于对照,可应用于生产上组配高产、抗病杂交种;(3)空间诱变后代性状稳定时间比常规杂交后代稳定快2～4个世代,可缩短育种进程;(4)变异选系在酯酶同工酶和细胞色素氧化酶同工酶酶带种类及酶活性上存在着较大的遗传差异;(5)RAPD分析结果显示,空间诱变选系在基因组水平上发生了明显的变化.     

高粱空间诱变效应研究

1996年利用我国第17颗返回式卫星对高粱唐恢28恢复系种子进行搭载处理后，对其变异后代进行了田间鉴定和同工酶及RAPD分析。主要结果如下：（1）SP1代获得一个特大穗型突变体（MTR28），其后代性状分离广泛，变异类型丰富，从中获得了遗传性状稳定且具有不同特点的高产、抗病优良变异选系；（2）优良变异选系组配的杂交种产量明显高于对照，可应用于生产上组配高产、抗病杂交种；（3）空间诱变后代性状稳定时间比常规杂交后代稳定快2—4个世代，可缩短育种进程；（4）变异选系在酯酶同工酶和细胞色素氧化酶同工酶酶带种类及酶活性上存在着较大的遗传差异；（5）RAPD分析结果显示，空间诱变选系在基因组水平上发生了明显的变化。     

外源DNA导入高粱及其后代的RAPD分子验证

研究发现高梁自花授粉后，利用其形成的花粉管通道，将热带高梁的DNA导入寒带高梁后，导入后代在许多方面表现出了明显变异，同时对导入后代进行了随机扩增多态性DNA（简称RAPD）分子验证，表明供体DNA片段已进入受体。从而说是了利用花粉管通道进行外源DNA直接导入高梁，进行种质创新和品质改良是可行的。     

糯玉米不同品种的果穗增重与籽粒灌浆特性

以15个糯玉米杂交种为材料,研究不同品种果穗增重、籽粒灌浆动态。结果表明,鲜穗产量与籽粒产量品种间差异极显著,同时两者相关极显著。果穗增重与籽粒灌浆不同品种间表现一致,均随花后天数的增加呈“S”型曲线增长,符合Richards方程。方程参数分析表明,果穗最大增重速率高、快速增重阶段的速率大和持续时间长有利于提高品种的鲜穗产量;籽粒灌浆活跃生长期长、灌浆最大增长速率高、快增期的灌浆速率大和持续时间长有利于提高籽粒产量。果穗含水率与籽粒含水率随花后天数的增加均呈直线下降趋势,下降速率因品种而异,各品种鲜穗重达峰值时果穗含水率为61.96%~72.98%。     

红叶李与安哥诺李及其杂交子代的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA分子标记（RAPD）技术对红叶李与安哥诺李及其杂交子代中的10株植株进行遗传多样性分析。从100个随机引物中筛选出15个引物,然后对所有子代进行分析。利用PopGene3.2软件分析所得图谱的多态位点数、多态位点百分率、Shannon信息指数(I)、Nei's基因多样性指数(H)、遗传距离和遗传一致度。用DPSv2.0软件依据所得到的遗传距离,按照非加权平均距离法（UPGMA）构建树状图。结果表明：15个随机引物共扩增出多态条带89个,总的多态位点百分率为93.54%,平均Shannon信息指数为0.4298,平均Nei's基因多样性指数为0.3574,说明杂交后代具有较丰富的遗传多样性。从树状图可以看出杂交子代的遗传变异较丰富,其中1号植株与母本亲缘关系最近,最有可能稳定遗传母本的红叶性状。     

利用分子标记辅助选择优质蛋白玉米近等基因系

为了扩增优质蛋白玉米育种新种质,用普通玉米种质转育创制优质蛋白玉米(QPM)近等基因系;利用SSR标记phi057进行辅助选择,以优质蛋白玉米种质为o2基因供体,转导、构建来自不同遗传背景普通玉米种质为受体的QPM近等基因系。结果表明：利用共显性SSR标记引物phi057在o2基因供体自交系与普通玉米受体自交系间表现多态性,能区分O2O2、O2o2和o2o2等3种基因型,来自不同遗传背景种质所构建获得的QPM近等基因系赖氨酸含量有不同程度提高,赖氨酸含量达到0.36%~0.42%,不同遗传背景受体自交系赖氨酸增加幅度9.1%~64.0%。普通玉米种质导入供体o2基因后能够提高种质赖氨酸含量。     

Identification of wheat–Thinopyrum intermedium 2Ai-2 ditelosomic addition and substitution lines with resistance to barley yellow dwarf virus

Among the regenerated plants derived from immature hybrid embryos of wheat–Thinopyrum intermedium disomic addition line Z6 × common wheat variety ‘Zhong8601’, a plant with a telocentric chromosome and barley yellow dwarf virus (BYDV) resistance was obtained. The telocentric chromosome paired with an entire Thinopyrum chromosome to form a heteromorphic bivalent at meiotic metaphase I. Genomic in situ hybridization showed that the telosome originated from Th. intermedium. Two ditelosomic additions and one disomic substitution were identified among the offspring of the plant. Two random amplified polymorphic DNA molecular markers were identified among 150 random primers used to detect the different arms of the alien chromosome. These might be useful for developing translocation lines with BYDV resistance.     

木豆种质资源遗传多样性的分析

为探讨木豆的遗传多样性,应用RAPD技术对15个木豆（Pigeonpea）种质资源进行了分析。从大量的引物中筛选出了27个多态性较高的随机引物,共扩增出176条带,其中多态带为104条（占56.24%）。对这些引物的扩增带谱进行数据转化后,通过SPSS13.0软件对15个木豆种质资源进行聚类分析,根据聚类结果可将15个木豆种质资源分为6大类。同时,对田间种植的15个木豆种质资源进行生物学性状的观察记载。经过比较分析可以看出,从DNA水平上对木豆种质资源的聚类结果与其生态类型以及生物学性状之间具有较高的吻合度。本试验结果为开发利用木豆种质中的有利遗传资源提供了参考资料。     

新麦草种质遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR标记对15份新麦草(Psathyrostachys juncea)种质资源进行遗传多样性检测.为获得稳定的新麦草ISSR反应体系,对反应条件中的dNTP、Taq酶浓度、引物浓度、Mg_(2+)浓度等因子进行了优化,建立起的最佳反应体系为:25 μL的反应体系中含有dNTP 2.5 μL、Taq酶0.2 μL、Primers 1 μL、Mg~(2+)1.5 μL、2.5 μL 10×Buffer、2 μL模板DNA和ddH2O 15.3 μL.ISSR标记结果显示,筛选出的重复性好、谱带清晰的ISSR引物8条,共获得84个扩增位点,其中多态性位点72个,多态性比率(PPB)为85.7%.通过遗传相似系数(GS)的计算,供试种质材料间的GS值在0.440 5～0.904 8之间,表现出丰富的遗传多样性.通过聚类分析,将15份新麦草种质材料划分为四大类,且呈现出一定的地域性分布规律.     

人工栽培石斛的ISSR标记分析

为了给石斛品种的人工选育和杂交育种提供参考,利用ISSR分子标记技术对9种药用栽培石斛的遗传多样性进行了研究。从备选的引物中筛选出14条多态性引物,共检测到179个多态性位点,多态性比率为94.71%。Jaccard相似性指数显示：15个铁皮石斛样本的相似度介于0.264~0.536之间,6个齿瓣石斛样本的相似度介于0.351~0.561之间,不同种间的相似度介于0.115~0.371之间。虽然种内与种间的相似度值存在一些交叉情况,但UPGMA聚类分析表明,不同种的石斛之间并不存在明显的杂交情况。ISSR标记检测结果显示,源于不同栽培地区栽培的的石斛属植物的遗传多样性非常丰富。     

鸭亲本间遗传距离与杂交后代杂种优势关系的研究

运用随机扩增多态DNA方法,对樱桃谷鸭、麻鸭及其杂交一代和用F1作为母本再与父本番鸭属间杂交培育的三元杂交半番鸭(F2)基因组DNA进行了遗传分析。结果表明,RAPD可用于有效标记鸭品种之间遗传亲缘关系和杂种优势预测;在所使用的20种随机引物中,5个鸭种共产生760条带,其中多态性带568条,占总条带数的 74．7％,说明鸭群体具有较为丰富的遗传多样性;杂交一代多态性位点比例为67．9％,遗传相似度为0．822 7,三元杂交二代多态性位点比例为83．1％,遗传相似度为0．826 4。说明三元杂交子二代的杂种优势可以用杂种优势理论中的显形假说来解释。     

Genetic variation and cultivar identification of Jamaican yam germplasm by random amplified polymorphic DNA analysis

Summary We have used random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis to characterize eleven cultivars of the five economically most important yam species grown in Jamaica (Dioscorea alata, D. cayenensis, D. rotundata, D. trifida and D. esculenta). Amplification of genomic DNA samples with nine different arbitrary 10mer primers revealed a total of 338 different band positions, ranging in size from 0.3 to 2.5 kb. RAPD patterns proved to be highly reproducible and somatically stable. While no variation was observed among plants belonging to the same cultivar, a large number of intervarietal and interspecific polymorphisms enabled us to reliably discriminate between all Jamaican cultivars investigated.