利用SMART技术构建珙桐叶片全长cDNA文库

以珙桐叶片为研究材料,用Rneasy Plant Mini Kit提取珙桐叶片组织总RNA,反转录成单链cDNA,长距离PCR方法合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化、SfiI酶切后,采用CHROMA SPIN-400柱分级分离,回收0.5 kb以上的cDNA组分,以λTriplEx2载体连接并进行体外包装,构建了珙桐叶全长cDNA文库.结果表明:以XL1-Blue、BM25.8为受体菌测定的原始文库滴度为8.3×106pfu/mL,扩增后文库总滴度为4.16×108pfu/mL,重组率为97.3%;对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5~2.0 kb之间,文库质量较高.这为进一步开展珙桐EST测序分析、目的基因克隆及功能基因组学研究奠定了基础.     

PCR法克隆紫穗槐4-香豆酸:CoA连接酶全长cDNA

4 香豆酸 :CoA连接酶 (4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶 .该文利用简并寡核苷酸PCR法结合cDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐 4CLAcDNA全长序列 ,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程 .先用简并PCR得到了 4CLA1片段 ,又据此片段设计反向嵌套引物 ,用RACE方法获得未知的 5′和 3′端序列 .所获得的全长 4CLAcDNA ,编码 5 40个氨基酸 .氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的 4CL蛋白 ,含有预计的AMP binding位点、催化反应区和保守的Cys .     

高压法再生胶生产工艺

高压法再生胶生产工艺专利号：９４１００７８８．Ｘ本发明涉及到一种由旧胶回收生产再生胶的方法。目前，公开使用的再生胶生产方法主要为水油法和油法两种，此二法工艺过程基本相同，都需经过清胶分类、粉碎、筛选、拌油、脱硫、晒干、塑炼、精炼和最后检验存放九道工序...     

巨龙竹cDNA文库的构建

为了分离与鉴定巨龙竹速生巨大相关基因,以巨龙竹当年所发新叶为材料,用植物叶RNA抽提试剂盒提取了总RNA;采用C reatorTMSM ARTIMcDNA L ibrary construction k it所提供的方法,合成及纯化cDNA,并将cDNA连接到质粒载体上,通过C aC l2法将重组质粒转化到DH 5a中,成功构建了巨龙竹cDNA文库。文库容量为1.04×105,PCR检测表明大多数插入片段均大于1 000 bp,表明构建的巨龙竹cDNA文库质量较高,为进一步进行EST测序和全长基因克隆打下了基础。     

杨尺蠖核多角体病毒的研究——Ⅳ.病毒多角体的回收试验

本文就杨尺蠖核多角体病毒的几种回收方法进行了比较。回收试验表明,以丙酮—乳糖(7.4—8.4％)共沉法回收 AciNPV 的多角体(PIB)是可行的。制备物的最终含量为 4.96×10~(10)PIB/g,回收率平均达 80.5％。生物活性测定证明,回收的新鲜制备物,对3龄初幼虫的致病力是很好的。其 LC_(50) 及其95％的置信限分别为2.84×10~3PIB/ml和 1.70×10~3—4.96×10~3PIB/ml。 使用该程序,可省去昂贵的离心设备,在实验室一般设备的情况下,一次上样1500—3000 g病死虫,仅需 3小时即可获得最终产品。配制的病毒制剂,可用于防治杨尺蠖 30—65ha。大批量生产证明,该流程操作简便,省工省时,一次上样量较大,完全可以替代离心法,回收的成本也很便宜。     

YG 400 EPI胶黏剂的制备与性能分析

描述EPI胶黏剂YG 400的制备方法,并对其使用性能进行检测分析。结果表明,YG 400不但通过了欧洲DIN EN 204-D4级耐久性测试,而且通过了日本的JIS K 6806-2003测试和JAS BWS沸水浸渍剥离测试。还就YG 400、KR 134和PI-111三种EPI胶黏剂,对两种硬阔叶材的粘接耐久性进行了对比。     

应用DSC研究脲醛树脂胶和异氰酸酯胶混合液的固化过程

本文以差热扫描量热法（DSC）分别研究了脲醛（UF）胶、聚异氰酸酯（PMDI）胶以及它们的混合液的加热固化过程。结果表明，PMDI和UF在105－110℃发生放热固化反应。此外，PMDI与水在120－125℃发生剧烈的放热反应。MPMDI的反应活性受介质酸度影响较大，介质pH值越低，PMDI的反应性越小，或几乎被抑制。     

cDNA末端扩增技术的研究进展

cDNA末端扩增技术是一种以PCR反应为基础,快速获得已知cDNA序列3′端和5′端的方法,是克隆全长cDNA序列的主要手段之一。本文从RACE原理出发,对RACE技术3个关键步骤(反转录、TdT加尾、PCR扩增)的优化和改良措施进行了透彻分析,并详细阐述RACE的最新研究进展———“电子”cDNA克隆。     

木麻黄针叶中矿质元素的快速测定

用原子吸收分光光度计对１．５ｍｏｌ．Ｌ＾－１盐酸浸提木麻黄针叶中钠、钙、镁等矿质元素进行测定，具有快速简单、容易操作，减少污染等特点，实验结果表明：用该方法测定木麻黄针叶中钠、钙、镁等矿质元素，变异系数小，回收率高，具有较高的精密度和较好的重现性。与国家标准法：硫酸－高氯酸湿灰化法比较测定结果无显著差异，适合于大批量样品的分析。     

硝酸法处理废钨铜合金回收钨和铜新方法

对采用硝酸法从废钨铜合金中回收金属钨和铜，以及转化有害的氮氧化物的方法进行了探讨．并设计了数种较小规模的回收装置．经实验表明，本法具有操作简便、投资省、能耗低、污染小等特点，具有一定的实用价值．     

基于 Quick bird 的遥感影像融合方法评价研究

以Quickbird影像为例，分析和评价了 HIS （Intensity － Hue －Saturation）、Brovey、PCA （Principal Compnent Analysis）、WT（Wavelet Transformation）和WT －IHS等5种融合算法的特点和优劣。研究结果表明：Brovey方法存在一定的光谱失真，从空间细节上说，PCA影像的亮度值过高，造成图像对比度降低，WT －IHS方法在空间细节信息和光谱信息的保持方面与其他方法相比稍显优越；PCA和WT －IHS的均值最高，WT －IHS与WT的标准差最大，WT －IHS方法的信息熵最高。PCA变换和Brovey变换不论是在光谱信息丰富程度还是在空间分辨率的精度方面效果都不明显，在低分辨率多光谱信息与高分辨率空间信息之间权衡较好的一种方法是WT －IHS变换法。     

浅黄根须腹菌γ-actin基因的克隆及表达分析

以油松的优良外生菌根真菌即浅黄根须腹菌为对象,用简并 PCR 法和 RACE 技术分离其γ－肌动蛋白基因( Rl-act)的全长 cDNA序列。该全长序列为1339 bp,包含一个1128 bp 的开放阅读框( ORF),编码375个氨基酸,5'端非翻译区(5'UTR)95 bp,3'UTR长度116 bp。Port Param 软件在线分析结果表明,该cDNA所编码的蛋白质理论等电点为5.01,相对分子质量为94.929 kD,具有真菌γ-actin 基因3个保守特征序列。Blast同源性检索结果表明,Rl-act序列与12种担子菌 actin 序列同源性均在97%以上,与同为外生菌根真菌的双色蜡蘑actin的亲缘关系最近。Rl-act基因在不同碳源及磷水平培养条件下表达量基本一致,验证了该基因作为分子内标的可靠性。     

gutD基因的克隆及植物表达载体的构建

通过RT-PCR的方法从大肠杆菌K12中扩增出了gutD基因的全长cDNA片段,将其克隆到pMD18 T-vector中,序列分析表明克隆的片段长度为780bp,包含了完整的gutD基因的编码序列,除编码区第61位密码子由CTG变为CGT和第72位密码子CTT变为CCT其它序列与所报道的修正序列一致。以BamHⅠ和HindIII限制性内切酶从克隆载体上切取gutD基因,将其连接在相应酶切的中间载体KS上,再以KpnI和BamHI酶切重组子获得具粘性末端的目的片段(gutD)与植物表达载体pCAMBIA2300连接,重组质粒通过双酶切和PCR鉴定正确后,采用直接转化法将pCAMBIA2300-gutD质粒导入根癌农杆菌LBA4404,并用PCR方法进行了鉴定。     

用涤纶废料生产对苯二胺

我国有很多的绦纶厂，每年有大量的涤纶废料，目前只对其做回收乙二醇处理，这造成了原材料的极大浪费，同时也造成了比较大的环境污染。为了解决这个问题，我们研究了以涤纶废料生产对苯二胺的新方法。采用这种方法，成本低廉、技术先进而且解决了由对硝基苯胺还原制对苯二胺的铁泥污染问题。 对苯二胺作为一种化工原料，在合成染料、合成树脂、橡胶防老化剂、环氧树脂固化剂、石油产品添加剂、阻燃剂、染发剂；炭墨处理剂等方面有着极广泛的用途。目前对苯二胶的主要生产工艺有以下几种：对硝基苯胺的还原、对二氯苯的氨解、对硝基氯苯的…     

木麻黄针叶中矿质元素的快速测定

用原子吸收分光光度计对１．５ｍｏｌ．Ｌ－１盐酸浸提木麻黄针叶中钠、钙、镁等矿质元素进行测定，具有快速简单、容易操作、减少污染等特点。实验结果表明：用该方法测定木麻黄针叶中钠、钙、镁等矿质元素，变异系数小、回收率高，具有较高的精密度和较好的重现性。与国家标准法：硫酸—高氯酸湿灰化法比较，测定结果无显著差异，适合于大批量样品的分析     

植物组织培养培养基凝固剂替代物的研究

通过对卡拉胶、魔芋胶、黄原胶和相关胶的复合试验以及对转接苗的分化试验，寻找可代替琼脂的新型培养基，新型培养基无论从弹性、透明度、杂质方面来说还是从对组培苗的生长来说都是可观的。最后通过成本计算，新型培养基的成本要比使用琼脂粉每升低0．261元，如果进行大批量的工厂化生产，结合成本看效益是相当可观的。     

发展分散松香胶产业有前途

分散松香胶是发达国家70年就研成功的一种以松香为主要原料、用于造纸工业的林产化工品。它的主要优点是：降低造纸成本，提高纸张质量。我国造纸施胶一直是使用皂化松香胶，如果使用分散松香胶，每吨纸可降低成本IO－SO元，而且纸张的耐水性、防油墨渗色及外观等都比皂化松香胶好。因此，分散松香胶很快被各国造纸行业广泛使用。我国虽然是松香生产大国，但长期以来不能生产分散松香胶，依靠从日本等国进D。进入1988年后我国才开始分散松香胶的研制工作，目前仍然是小规模生产，年产量不足2万吨，而年需量达Ic万吨，需大量进日。日本以…     

水生植物氧化沟治理橡胶废水试验小结

橡胶制胶废水是一种高浓度的有机废水，其中含有橡胶粒子、酸、氨、蛋白质、糖类等多种成分。由于橡胶废水中含有大量的胶粒，在其他废水处理中一些应用较好的方法和技术用于橡胶废水处理上却不成功。近年来橡胶废水处理工艺技术有了较大发展，处理方法有稳定塘法、厌氧一机械曝气法、生物接触氧化法等。景洪农场四胶厂由于所处环境的限制，上述的方法都难于应用。为了减少污染并达标排放，胶厂的领导和技术人员因地制宜，大胆探索，于1994年初设计建成了一套以水生植物氧化沟为主的简易橡胶废水处理设施，经过几年运行，生化沟对橡胶废水的…     

木材加工企业胶粘剂输送方法浅析

我国的木材加工企业，大多配套有自己的制胶车间，以生产木材加工用胶粘剂。在制胶车间内，胶粘剂由反应荣生产制造，然后运输到用胶地点。如何将胶粘剂方便、可靠地运输到目的地，输送方法很关键。本文作者在考察了国内生产情况后，结合自己多年从事胶粘剂生产车间设计的实践，认为目前国内企业中胶粘剂的输送方法，可以归纳为以下几种方法：①容器输送法；②机械泵输送法；③压缩空气输送法；④泵-气结合输送法。本文将采用对比的方法分别阐述上述几种输胶方法的特点，供采用者参考。1容器输送法一般常用的容器是200L的油桶，通过它将胶…     

紫胶加工技术的改进——第一报 用原胶直接生产片胶

用通常方法从原胶经粒胶生产片胶时,约有25%的紫胶树脂损失而成为副产品。为避免损失、降低成本,印度紫胶研究所研制了一种以酒精(在20℃)或丙酮(40℃)为溶剂,从原胶直接生产片胶的方法。此法不仅能生产普通的含蜡和脱蜡片胶,还能生产脱色片胶,从残渣中还可制得紫胶蜡、水溶紫胶色素和含氮肥料;溶剂能够回收再用;且不产生那种讨厌的污水。方法简单、设备一般、产品得率高、质量好、成本低,适于小厂采用。