苦参碱类生物碱提取工艺优化及纯化方法

苦参碱类生物碱具有多种生物活性和兽医临床应用前景,广泛存在于豆科槐属药用植物中,主要包括氧化苦参碱、苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和槐定碱等成分。常见的提取方法包括水提、醇提、酸水提、浸渍、渗漉等,常见的工艺优化方法包括正交设计、响应面设计等,常见的纯化方法包括大孔吸附树脂纯化、模板分子印迹固相萃取-高效液相色谱-串联质谱方法等。为寻找更加便捷、快速、高效的方法来获取高含量、高纯度的苦参碱类生物碱成分,论文对苦参碱类生物碱的提取方法、提取工艺优化及纯化方法的国内外研究进行综述。     

薄层扫描法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱含量研究

采用薄层扫描法对新鲜苦参和商品苦参的水提液和醇提液中的苦参碱和氧化苦参碱进行了含量测定并比较。结果显示,新鲜苦参水提液中苦参碱含量为0.198%,氧化苦参碱含量为0.373%,其醇提液中苦参碱含量为0.095%,氧化苦参碱含量为0.508%;而商品苦参水提液中苦参碱含量为0.034%,氧化苦参碱含量为0.355%,其醇提液中苦参碱含量为0.020%,氧化苦参碱含量为0.577%。结果表明,新鲜苦参中苦参碱含量约是商品苦参的5倍,且水提法明显优于醇提法;而两者的氧化苦参碱含量则相近,且醇提法显著优于水提法,这为苦参碱和氧化苦参碱的提取生产工艺优化提供了实验依据。     

正交试验优选石榴皮总多酚提取工艺的研究

为了研究石榴皮总多酚渗漉提取工艺,试验采用四因素三水平的正交试验,考察最佳提取工艺的稳定性,用4种方法比较6种不同产地石榴皮中总多酚的含量。结果表明:石榴皮粉碎度为中粉、乙醇用量为10倍、渗漉速度为1 m L/min、浸泡时间为24 h的提取效果最好,且稳定可靠;在此条件下提取,安徽产石榴皮中总多酚的含量最高,新疆产石榴皮最低;与超声法、微波法、回流法比较,渗漉法能显著提高石榴皮总多酚的提取率(P0.05)。说明通过此最佳工艺能提高石榴皮的利用率,为制药工业降低生产成本提供一定的理论依据。     

氧化苦参碱和苦参碱含量在苦参生长发育过程中的动态变化

苦参Sophora flavescens为多年生草本或灌木,其根入药.为了揭示氧化苦参碱(Oxmatrine,OMT)和苦参碱(Matrine,MT)在苦参体内代谢转化规律及两者之间的关系,为人工栽培苦参提供理论依据,运用高效液相色谱(HPLC)技术对苦参根、茎、叶、种子生长发育过程中氧化苦参碱和苦参碱含量动态变化进行了全面的研究.结果表明.根和成熟种子中氧化苦参碱和苦参碱含量最高,苦参碱主要分布在幼嫩的叶和茎中,而在成熟和衰老的叶和茎中苦参碱则转化为较为稳定的氧化苦参碱.在根和种子等贮藏器官中则主要以氧化苦参碱的形式贮存,并且根和种子中氧化苦参碱和苦参碱含量以及相同器官2种生物碱含量变化呈现互补的特点,由此推断,叶中形成的氧化苦参碱和苦参碱在向根和种子运输分配时受其生长竞争的影响,它们之间可以相互转化.     

苦参碱类生物碱的现代药理研究

苦参碱类生物碱是广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子和广豆根中的一类喹诺里西啶生物碱的总称。现代研究发现,苦参主要含生物碱和黄酮类化合物,生物碱以苦参碱类生物碱为主,属于喹诺里西啶类生物碱,包括苦参碱、氧化苦参碱、槐花醇、异苦参碱、别苦参碱、14-羟基苦参碱、槐果碱、槐定碱、槐胺碱等。现代药理学研究发现苦参碱类生物碱具有镇痛,强心、抗心律失常,抗病毒,抗炎,抗肿瘤,消肿利尿,免疫抑制,抗菌杀虫等作用。本文就其药理作用的研究现状作构。     

苦参碱类生物碱的现代药理研究

苦参碱类生物碱是广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子和广豆根中的一类喹诺里西啶生物碱的总称。现代研究发现,苦参主要含生物碱和黄酮类化合物,生物碱以苦参碱类生物碱为主,属于喹诺里西啶类生物碱,包括苦参碱、氧化苦参碱、槐花醇、异苦参碱、别苦参碱、14-羟基苦参碱、槐果碱、槐定碱、槐胺碱等。现代药理学研究发现苦参碱类生物碱具有镇痛,强心、抗心律失常,抗病毒,抗炎,抗肿瘤,消肿利尿,免疫抑制,抗菌杀虫等作用。本文就其药理作用的研究现状作构。     

苦木超微粉与粗粉中生物总碱提取率的比较

实验采用渗漉法提取苦木超微粉和普通粗粉中的苦木生物总碱,并通过对两者的提取率对比,探讨苦木有效成分生物碱的最佳提取工艺。试验结果表明,在相同条件下,苦木超微粉中生物碱的提取率比普通粗粉中的生物碱提取率提高了173·34%,效果显著。     

苦豆子赖氨酸脱羧酶基因克隆与表达分析

赖氨酸脱羧酶(lysine decarboxylase,LDC)基因是苦豆子中氧化苦参碱(oxymatrine,OMA)生物合成的第一个关键酶基因。根据近缘物种苦参的赖氨酸脱羧酶基因设计特异引物,同源克隆法克隆了苦豆子赖氨酸脱羧酶基因的蛋白质编码区序列,全长1368 bp,命名为Sa-LDC,GenBank登录号为KM249871。生物信息学分析表明Sa-LDC编码区序列无内含子,与苦参和狗苦参的LDC序列一致性均达到97%;属于Ⅲ型5-磷酸吡哆醛依赖酶[type Ⅲ pyridoxal 5-phosphate (PLP)-dependent enzymes,PLPDE-Ⅲ]超基因家族,功能活跃。Sa-LDC编码455个氨基酸残基,其编码的肽链相对分子质量49.14 kD,理论等电点5.63,无信号肽和跨膜结构;在其氨基酸序列中具有产喹诺里西啶生物碱的特征性保守位点Phe³⁴⁰;系统进化树将苦豆子与其他产喹诺里西啶类生物碱的植物聚为一类。qPCR和HPLC检测显示,苦豆子赖氨酸脱羧酶基因的表达和氧化苦参碱的积累均受干旱胁迫的影响,且基因的表达量与氧化苦参碱的积累呈正相关关系。     

苦参碱与氧化苦参碱的常压与减压提取工艺对比研究

以水作为溶剂,在常压与减压下提取苦参碱与氧化苦参碱,对比其提取效果.以乙腈-无水乙醇-3％磷酸(体积比80:10:10)作为流动相,检测波长220 nm的条件下,采用高效液相色谱法,测定提取液中苦参碱与氧化苦参碱的含量.结果显示,常压法最佳提取条件为水料比8:1,提取次数3次,每次提取时间1h.在该工艺条件下,测得苦参...     

苦参生物碱的提取分离及抗寄生虫作用的研究

采用化学方法,以冷浸、浓缩回收、萃取、分离等工艺从苦参中分离生物碱。经薄层层析法定性,其主要成分为苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱等。运用药理学方法分别研究了氧化苦参碱、槐定碱、苦参煎剂对小鼠体内外寄生虫的抗虫作用。结果显示,氧化苦参碱、槐定碱、苦参煎剂对小白鼠肠道体内寄生的线虫有显著的驱除作用,而对体外寄生的螨虫则无显著作用。     

苦豆子药材提取过程中成分的量变规律研究

实验研究苦豆子药材提取过程中多种生物碱成分的量变规律。采用高效液相色谱法,以水作为提取溶媒,研究苦豆子药材在不同浸泡时间、不同提取时间和提取次数下提取液中7种生物碱成分量变规律。随着浸泡时间增加,氧化槐果碱、氧化苦参碱、槐定碱含量增加明显,在浸泡3 h达到最高,3 h后开始下降,浸泡时间不能超过3 h;随着提取时间的增加,除金雀花碱外其余6种生物碱在提取3 h的含量最高,提取时间不宜超过3 h;随着提取次数的增加,7种生物碱的量也在逐步增加,并逐步趋于稳定。表明苦豆子中生物碱类成分的含量,对提取工艺的各个因素比较敏感,7种生物碱成分的提取率与浸泡时间、提取时间呈先上升后下降的趋势,和提取次数呈正相关并随着提取次数的增加逐步趋于稳定,研究结果对苦豆子进一步研究提供参考。     

苦参生物碱的提取分离及抗寄生虫作用的研究

采用化学方法，以冷浸、浓缩回收、萃取、分离等工艺从苦参中分离生物碱。经薄层层析法定性，其主要成分为苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱等。运用药理学方法分别研究了氧化苦参碱、槐定碱、苦参煎剂对小鼠体内外寄生虫的抗虫作用。结果显示，氧化苦参碱、槐定碱、苦参煎剂对小白鼠肠道体内寄生的线虫有显著的驱除作用，而对体外寄生的螨虫则无显著作用。     

正交试验法优选穿心莲口服液提取工艺研究

目的:优化穿心莲口服液的渗漉工艺。方法:采用正交试验L_9(3~4),对穿心莲口服液渗漉工艺程序进行优化,考察了不同渗漉工艺对穿心莲口服液中穿心莲内酯(AND)、脱水穿心莲内酯(DDAND)含量的影响,随机抽取10批不同批次样品进行含量测定。结果:正交试验优选出穿心莲口服液渗漉最佳的提取工艺为5倍75%的乙醇、25℃提取12 h,最低含量标准为5.00 mg/mL。结论:优化工艺所得AND、DDAND含量较高,工艺较简易,质量稳定,有利于生产应用。     

苦参在禽病防治中的应用

苦参,为豆科槐属植物苦参,人药用其根,主要成份为生物碱,有苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、槐果碱、槐胺碱等22种,又含有黄酮类化合物等.有清热燥湿、祛风杀虫、利水之功效.在兽医中有着广泛的用途.笔者以苦参为主,用于禽病防治中,现将临床案例介绍如下.     

HPLC测定参黄安泰注射液中麻黄碱的含量

参黄安泰注射液由苦参、麻黄二昧药经水醇法制成,具清热燥湿,宣肺利水的功效,临床研究证明对仔猪白痢有明显疗效,麻黄主要含麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱、去甲基伪麻黄碱,苦参主要含苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱,传统主要用滴定法检测麻黄和苦参总生物碱控制质量,因方法专属性差且操作复杂,不能有效控制产品质量。笔者等采用高效液相色谱法测定制剂中麻黄碱的含量,该方法操作简便,快速,准确可靠,可用于参黄安泰注射液的质量控制。     

砂生槐子生物碱超声辅助醇提工艺优化

优化砂生槐子生物碱的提取工艺,为兽药开发利用提供依据。建立砂生槐子中4种生物碱(氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱)含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,以4种生物碱的提取率及干粉得率的总评"归一值"(OD)为评价指标,分别考察乙醇浓度、料液比、超声温度、超声时间、超声功率因素对OD值的影响,并结合Box-Behnken中心组合设计的三因素三水平响应面试验方法来优化砂生槐子生物碱的提取工艺。结果显示,最佳的提取工艺为:乙醇750 mL/L,提取温度55℃,料液比为1 g/mL∶30 g/mL,超声时间为50 min,超声功率为150 W,在此条件下,OD值为0.5586,干粉得率为20.37%,4种生物碱总含量为388.48 mg/g。此工艺优化显著提升了砂生槐子生物碱作为兽用药物的开发价值。     

珠蓼散的最佳提取工艺研究

探索珠蓼散的最佳提取工艺。分别采用加热法、渗漉法和煮沸法制备珠蓼散提取液,以芦丁为标准品,采用紫外分光光度计测定提取液中的总黄酮含量,并用真空干燥法处理提取液获得干浸膏,计算浸膏得率;依据所得的总黄酮含量和浸膏得评价断珠蓼散不同提取工艺的效果。结果显示,煮沸法所得提取液测的总黄酮含量为4.12 mg/mL,浸膏得率为15.12%,均优于加热法和渗漉法。提示煮沸法为珠蓼散的最佳提取工艺。     

商陆口服液的提取工艺研究

为了确定商陆口服液的最佳提取工艺,本试验首先对商陆中商陆皂苷甲(Es A)的含量测定方法进行了研究,然后采用水煎法、水提醇沉法(乙醇终浓度分别为60%、70%、80%和90%)、减压干燥法、渗漉法(乙醇浓度分别为30%、50%、70%、80%和90%)4种提取方法,比较了各提取物中Es A的含量。结果表明:采用C18柱,蒸发光散射检测器进行检测;流动相为甲醇-0.4%冰醋酸溶液(70∶30);流速为1.0 m L/min;柱温为30℃;衰减值(Attenuation)为7;雾化温度(Neb)为45℃;蒸发温度(Eva)为60℃;进样量为10μL;Es A的线性范围在1.03~5.02μg,平均回收率为99.20%,用90%的乙醇渗漉提取效果好。说明Es A含量测定方法稳定可靠,可作为质量控制的指标,提取方法简单易行,提取率高。     

施氮对苦豆子生物量及生物碱积累的影响

研究了不同氮肥水平对苦豆子生物性状、生物量积累、生物碱含量和积累的影响,旨在为人工栽培苦豆子和提高其生物碱产量提供理论依据。结果表明,施氮100和150 kg/hm2的处理对苦豆子主茎长度、单株茎数、根和茎干重的增加幅度显著高于其他处理;不同施氮量均有提高苦豆子叶、茎、根中苦参碱含量的效应,低施氮量(50kg/hm2)对叶中苦参碱含量提高最大,中等施氮量(150 kg/hm2)对根中苦参碱含量提高最大;不同施氮量均能提高苦豆子叶中氧化苦参碱含量,但对茎和根中氧化苦参碱含量均有降低效应;中等施氮量(100和150 kg/hm2)对提高叶和根中氧化苦参碱积累量和苦参碱积累量有显著效果。     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h。采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为1．0g生药／mL时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9～11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、可行,可用于苦参碱的工业化提取。