动物胚胎玻璃化冷冻的试验

胚胎的玻璃化冷冻技术是胚胎生物工程技术在生产中进行生产化应用的技术关键,本研究通过对该方法的研究和探讨,试图取得该技术在牛胚胎生产中应用的技术关键,为牛胚胎的玻璃化冷冻提供科学依据和技术支持。我们利用小白鼠和牛超排胚胎开展了本项试验,并在小白鼠和牛胚胎的玻璃化冷冻和解冻方面,选出了一组比较理想的玻璃化冷冻剂、解冻剂和操作程序,在实验中获得了良好的冷冻和解冻效果。     

哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的研究进展

自1985年胚胎玻璃化冷冻(v itrification)保存技术发明以来,玻璃化法先后在小鼠、兔、绵羊、牛、猪、山羊等动物胚胎上获得成功,近年来有关哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的研究主要集中在冷冻和解冻方法上,相继发明了一些新的玻璃化冷冻方法:冷环玻璃化法(cryo loop)和开放式细管法(open pu lled straw,OPS),并且对解冻后细管内直接脱除防冻剂进行了广泛深入的研究,使得冷冻胚胎移植更易于在生产上推广应用。现将胚胎玻璃化冷冻的原理、冷冻保护剂、冷冻方法、解冻后保护剂脱除方法的最新研究进展作一综述。     

家畜卵和胚胎冷冻的现行方法及有待研究的问题

近17年来,采用建立起来的牛非手术采卵及冷冻方法,已能将牛桑葚胚和囊胚冷冻,并获得较高的存活率。现在试验中和商业上牛胚胎冷冻大多数是采取控制降温和解冻的程序。解冻后存活率按形态评定可达90％～100％,非手术移植的妊娠率为60％。绵羊、山羊和马的桑葚胚和囊胚用控制降温和解冻程序也能有效的冷冻。简化的控制降温和解冻程序的一步法用于牛胚胎,妊娠率可达50％。此法免去了解冻后较繁琐的脱除冷冻保护剂和胚胎评定过程。玻璃化法和快速冷冻法是较先进的方法,可大大缩短胚胎冷冻时间,而且无需复杂的冷冻设备。不过,迄今家畜胚胎冷冻的结果还是有待提高的,尽管牛、绵羊、山羊桑葚胚和囊胚用玻璃化法冷冻已经成功,移植后产了仔。另外,卵母细胞、早期胚胎、显微手术(切割、克隆、活组织检查)后的胚胎、猪胚胎冷冻成功率还很低。因此,为使胚胎移植技术能在生产中应用和开展胚胎显微操作、体外受精、克隆和基因转移之类生物技术的试验及应用,很有必要加强研究建立起更为有效的胚胎冷冻解冻方法。     

ε-聚赖氨酸在牛胚胎玻璃化冷冻中的保护作用

通过研究ε-聚赖氨酸(ε-PL)对牛胚胎玻璃化冷冻的影响,探讨ε-PL在牛胚胎玻璃化冷冻中的保护作用,为优化牛胚胎玻璃化冷冻技术提供依据。单独以ε-PL作为冷冻保护剂,其质量浓度为20、35、50g/L,分别进行胚胎冷冻,结果均不能取得成活胚胎,说明ε-PL不能单独作为冷冻保护剂使用。在传统玻璃化冷冻剂中分别添加质量浓度为10、20、30g/L的ε-PL进行胚胎冷冻,结果发现添加ε-PL之后的冷冻保护液具有更好的保护效果,且ε-PL质量浓度为20g/L时效果最好,囊胚解冻孵化率可达42.37%。进一步探索了用该冷冻保护剂,缓冲时间分别为5、7.5、10min进行胚胎冷冻的效果,结果发现缓冲时间为7.5 min取得最高孵化率,孵化率为46.58%。结果表明,ε-PL对牛胚胎玻璃化冷冻具有一定的保护作用,且适当延长缓冲时间可取得更好的冷冻效果。     

牛胚胎冷冻技术的实用化研究

采用不同的冷冻程序，不同的植冰温度，不同的冷冻保护剂，不同的解冻液及不同的解冻方式对牛胚胎冷冻及解冻技术的各个环节进行研究，目的是选择简便，高效的牛胚胎冷冻方法，综合冷冻过程，减少冷冻，解冻中对胚胎的损伤，提高胚胎解冻成活率和移植妊娠率。     

牛胚胎冷冻技术的研究

本文采用不同的冷冻程序，不同的植冰温度，不同的冷冻保护剂，不同的解冻液及不同的解冻方式对牛胚胎 冷冻及解冻技术的各个环节进行了研究，目的是选择简便，高效的牛胚胎 冷冻方法，缩短冷冻过程，减少岭冻，解冻中对胚胎的损伤，提高胚胎解冻成活率和移植妊娠率。     

我国研制成功牛胚胎玻璃化冷冻技术

牛胚胎玻璃化冷冻保在技术的面世,填补了中国胚胎生物技术的一项空白,而且达到国际先进水平。据介绍,这项研究用乙二醇与高分子物质和糖相结台,配制成功高效、低毒的玻璃化溶液来冷冻保存牛胚胎。采用这种技术实施冷冻保存牛胚胎仅用几分钟即可完成。有关专家认为,这项技术简便易行、成功率高,对推动中国牛胚胎移植技术在生产中推广应用和加速养牛业的品种改良具有重要意义。我国研制成功牛胚胎玻璃化冷冻技术     

牛胚胎玻璃化冷冻技术的发展和应用概况

胚胎冷冻保存是动物胚胎工程的重要组成部分，它是胚胎移植技术在生产中推广应用的重要基础。和现在通用的常规冷冻法相比，玻璃化冷冻具有用时短，所需设备少和操作简单等优点，成为目前国内外胚胎冷冻保存领域发展新方向。本文就牛胚胎玻璃化冷冻的概念、方法和国内外发展状况做一简要综述。     

哺乳动物受精卵的冷冻保存

哺乳动物受精卵冷冻保存的研究是从实验动物开始的。五十年代Ferdow等初次成功地使冷冻家兔受精卵发育成胎儿,whittingham(1972)用小白鼠冷冻胚胎育仔成功。同一时期Wlmut也成功地进行了小白鼠冷冻胚胎育仔,在1973年又成功地进行了牛冷冻胚胎的移植。于是提出了超低温长期保存受精卵的可能性,在畜牧领域里,1978年英国设想了牛冷冻胚胎移植的企业化。本文介绍与受精卵冷冻—解冻有关的因素同受精卵存活力之间的关系,以及耐冻性的机理。     

哺乳动物胚胎冷冻原理及研究进展

哺乳动物胚胎冷冻研究始于 5 0年代 ,先后在小鼠、大鼠、兔、马、牛、绵羊、山羊等动物胚胎上获得成功。目前该方面的研究进展很快 ,部分家畜的冷冻胚胎已逐步走向商品化应用。本文比较全面的综述了哺乳动物胚胎冷冻的原理、方法过程和冷冻胚胎的解冻及解冻后保护剂脱除。     

牛胚胎玻化冷冻技术面世

牛胚胎玻璃化冷冻保存技术的面世 ,填补了中国胚胎生物技术的一项空白 ,而且达到国际先进水平。据介绍 ,这项研究经反复实验 ,用乙二醇与高分子物质和糖相结合 ,配制成功高效、低毒的玻璃化溶液来冷冻保存牛胚胎 ,进而取消使用价格昂贵的胚胎冷冻仪。采用这种技术实施冷冻保存牛胚胎仅用几分钟即可完成。有关专家认为 ,这项技术简便易行、成功率高 ,对推动中国牛胚胎仅用几分钟即可完成。有关专家认为 ,这项技术简便易行、成功率高 ,对推动中国牛胚胎移植技术在生产中推广应用和加速养牛业的品种改良具有重要意义。牛胚胎玻化冷冻技术面世…     

牛胚胎玻化冷冻技术面世

牛胚胎玻璃化冷冻保存技术的面世,填补了中国胚胎生物技术的一项空白,而且达到国际先进水平。据介绍,这项研究用乙二醇与高分子物质和糖相结合,配制成功高效、低毒的玻璃化溶液来冷冻保存牛胚胎。采用这种技术实施冷冻保存牛胚胎仅用几分钟即可完成。有关专家认为,这项技术简便易行、成功率高,对推动中国牛胚胎移植技术在生产中推广应用和加速养牛业的品种改良具有重要意义牛胚胎玻化冷冻技术面世@杨允祥     

首例“玻璃化冷冻分割牛胚胎”牛繁育成功

这项科研成果是由河北农业大学桑润滋教授领导的课题组与中国农业大学朱士恩副教授和中国科学院遗传研究所的吴德国副研究员共同合作研究完成的。１９９９年１２月１２日 ,该项研究在由河北省科委组织的肉牛高效快繁综合配套技术鉴定会上得到确认 ,该牛犊为世界首例经“玻璃化冷冻分割牛胚胎”移植的牛犊。１９９８年３月 ,他们用非手术法从超数排卵供体牛的子宫内采集胚胎 ,采用自制高效、低毒的玻璃化冷冻液（ＥＦＳ４０）对胚胎进行冷冻。１９９８年１０月 ,将在液氮中保存１９５天的冷冻胚胎解冻后 ,用带微玻璃针的分割仪对胚胎进行分割…     

牛体外受精胚胎的玻璃化冷冻及一步脱防冻剂的研究

在过去的１０年中,体外受精技术进展很快,目前已可以利用该技术在实验室内大批量生产牛胚胎。研究简单、有效的冷冻方法无疑会加速体外受精胚胎在生产中的推广应用。玻璃化冷冻法由于操作简便,可以快速冷冻胚胎而日益受到重视。过去的研究已证实,用２５％乙二醇＋２５...     

在生产条件下牛冷冻胚胎直接移植的效果

牛冷冻胚胎解冻后能直接移植给受体牛的胚胎冷冻保存方法,对在商业条件下应用胚胎移植技术最有价值。传统冷冻法通常在胚胎解冻后用蔗糖溶液分步稀释抗冻保护剂,在显微镜下检查胚胎品质,合格者方能移植。与此相比,直接移植法简化了移植前胚胎的处理,可消除由于稀释抗...     

牛胚胎冷冻保存的研究进展

目前,牛的胚胎冷冻保存巳成为一种较成熟的常规技术,广泛应用于牛的繁殖科研与生产。本文回顾了牛胚冷冻保存技术的发展概况,对牛胚胎的常规冷冻技术、直接冷冻法及玻璃化冷冻技术的进展作了简要论述。     

猪胚胎冷冻技术的研究历程与未来展望

本文论述了近年来国内外猪胚胎冷冻技术的研究历程,分析了玻璃化冷冻技术在猪胚胎冷冻实际应用中存在的问题。结合发现的问题和最新的研究进展,从玻璃化冷冻剂的改良、玻璃化冷冻流程的优化、玻璃化冷冻与多组学研究等3个方面对猪胚胎冷冻技术的研究进行展望,以期为猪胚胎冷冻技术的创新提供理论依据。     

简单而有效的哺乳动物胚胎玻璃化冷冻方法

简单而有效的哺乳动物胚胎玻璃化冷冻方法王海彦朱士恩译１前言如果胚胎可以有效地进行冷冻保存，那么这项技术将可应用在多种哺乳动物如家畜、实验动物、野生动物以及人。然而，在胚胎冷冻和解冻过程中都存在好多会使胚胎受到损伤的因素。如：抗冻保护剂的毒性；冷冻损伤...     

牛胚胎玻璃化冷冻技术研究进展

胚胎冷冻保存是保存和繁殖遗传优势动物的主要工具,是胚胎移植产业的重要组成部分。目前广泛使用的冷冻方法主要有慢速冷冻和玻璃化冷冻2种。由于玻璃化冷冻具有成本低、效率高、操作简单等优点,玻璃化冷冻法越来越受到人们的重视。经过多年研究,研究人员已经在玻璃化冷冻方法、冷冻液等方面取得了大量进展,玻璃化冷冻法已经开始进入商业化应用。本文综述了牛胚胎冷冻保存技术的研究进展,旨在为相关从业人员提供一定借鉴和参考。     

我国肉牛胚胎“工厂化生产”技术获得成功

2000年10月11日科技日报讯：我国科学家利用体外受精再长期冷冻后的牛胚胎，规模化植入母牛腹，经“借腹怀胎”降生试管牛的高新技术，日前通过专家技术鉴定。这标志着我国肉牛胚胎“工厂化生产”技术获得成功。这项牛胚胎生物技术由河北农业大学与中国农业大学等单位联合完成，是国家“九五”科技攻关课题“肉牛规模化养殖及产业化技术研究与开发”中的子课题。这个项目今年年初在河北邯郸市两家养牛厂相继诞生了5头玻璃化冷冻“试管牛”，这也是我国首例玻璃化冷冻试管牛犊。在实验中，专家们还在西门塔尔、夏洛来纯种牛上接种，突破性地…