九龙牦牛和麦洼牧牛染色体的比较研究

采用外周血淋巴细胞培养方法，结合Ｇ，Ｃ分带技术，比较研究了九龙牦牛和麦洼牦牛的染色体核型，Ｇ带，Ｃ带。结果发现：牦毛常染色体均具有小短臂，应为近端着丝粒染色体，Ｇ带带型两品种间无大的差异，Ｃ带大小和强弱在品种，个体及同源染色体对间有差异，存在多态性。这些新的发现为牦牛染色体的识别和进一步研究提供了科学依据。     

秦川牛的染色体研究

对秦川牛(12♂,3♀)染色体的核型、G带、C带及Ag-NOR_s的研究表明:秦川牛品种内Y染色体存在多态现象,Y染色体有中、亚中和近端着丝点染色体。中和亚中着丝点Y染色体G带和C带与普通牛(Bos taurus)相同,近端着丝点Y染色体G带和C带与瘤牛(Bos indicus)相同。根据Y染色体多态性,讨论了秦川牛起源的多元性。统计了2002个细胞的Ag-NOR_s数目,每细胞Ag-NOR_s数变化范围3～10个,平均5.473±0.316。     

牦牛与普通牛、水牛的X染色体基因编码区比较及密码子偏性分析

【目的】 从基因组比对及密码子偏性角度分析牦牛与其他牛亚科动物X染色体,有助于了解牦牛品种差异及系统进化地位,为其适应高原低压低氧环境和密码子优化提供参考。【方法】 以牦牛X染色体参考基因编码区序列为参考,与普通牛和江河型水牛X染色体参考基因编码区序列进行基因组比对和基因共线性分析,同时进行基因注释,对过滤后的编码区文件进行相对同义密码子使用频率（RSCU）、ENC-plot、PR2-plot和最优密码子确定等偏性分析。【结果】 在牦牛X染色体基因编码区发现了参与气管收缩、肺部呼吸及机体代谢等基因与普通牛和水牛存在差异,如KLHL13、CENPI和PGK1等基因;共线性显示长段由强选择压和突变压下表现出的交换线性区域;密码子分析中3种牛亚科动物密码子使用偏性相似,偏性均较弱,均偏向G/C结尾;强偏性密码子（RSCU≥1.5）均为CUG、GUG、AGA、AGG和UGA;牦牛、普通牛和水牛分别筛选出16、13和9个最优密码子,均以A/U结尾。【结论】 牦牛与普通牛、水牛相比面临了更大的选择压力,累计的变异程度更大,三者的密码子偏性受到自然选择作用均大于突变作用。研究结果为牦牛的遗传育种、密码子优化和遗传资源开发利用提供参考。     

一例异常犏牛染色体组型分析及乳酸脱氢酶测定

在青海省牦牛杂交改良中,首次发现一头外形异常,与一般犏牛截然不同的个体,用外周血白细胞培养对其染色体组型分析结果,具有25％的染色体单体缺失细胞,而且性染色体臂比异常,说明此牛为染色体变异的犏牛。同工酶分析表明,此犏牛的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶不同于正常犏牛,其LDH_4含量高于正常犏牛和牦牛,而LDH_含量也高于正常犏牛和黄牛,而与牦牛较接近。     

云岭牛染色体G带分析

通过对云岭牛外周血及耳组织成纤维细胞培养制作染色体G带标本,结果显示,云岭牛染色体数目为2n=60,公牛核型为60,XY;母牛核型为60,XX。其中1~29号染色体全部为端着丝粒染色体,X染色体为亚中着丝粒染色体,Y染色体为一较小的端着丝粒染色体,Y染色体为瘤牛型的Y染色体。云岭牛染色体G带明暗相间,与其他牛品种间的带纹特征差异还需进一步研究。     

西藏牛Y染色体USP9Y基因与mtDNA D-loop区遗传多态性研究

本研究旨在探究西藏牛的Y染色体与mtDNA D-loop区的遗传多态性和起源。采用PCR扩增和限制性内切酶酶切的方法测定30头西藏牛Y染色体USP9Y基因的多态性;采用PCR扩增和测序技术测定30头西藏牛的mtDNAD-loop区序列,利用生物信息学的方法对西藏牛44条D-loop序列(其中14条从Gen Bank下载)进行遗传多态性分析。对30头西藏牛USP9Y基因的PCR产物进行电泳,共检测到471 bp和552 bp 2个片段,且552 bp片段不能被限制性内切酶Ssp I切开,说明西藏牛具有普通牛Y1和Y2 2种单倍型组,其频率分别为0.067和0.933。通过对44条西藏牛mtDNA D-loop全序列进行比对,发现本研究测定的30条西藏牛mtDNA D-loop全序列中,有8条为牦牛序列,说明西藏牛群体中有牦牛的基因渗入。对36条西藏牛mtDNA D-loop全序列进行分析,共检测到62个变异位点,界定了21个mtDNA单倍型,单倍型多样度为0.956 0,核苷酸多样度为0.006 4,表明西藏牛具有丰富的母系遗传多态性。系统发育树显示,西藏牛具有普通牛和瘤牛混合母系起源,且普通牛的单倍型在西藏牛群体中占绝对优势(95.24%)。西藏牛具有丰富的母系遗传多态性,由2个普通牛父系单倍型组构成,应归于普通牛一类,且群体中存在牦牛和瘤牛的基因渗入现象。     

四川黄牛的分类地位与染色体G带核型研究

为了进一步研究四川黄牛的遗传特性及分类地位,本文以瘤牛(印度辛地红牛,我国海南牛)和普通牛(西门塔尔牛、成都黑白花牛)为对照,采用GTG技术进行四川黄牛G带核型研究。结果表明,四川黄牛G带核型与瘤牛相似,与普通牛不同。主要表现在Y染色体的形态和结构顺序上,四川黄牛和瘤牛Y=AG带带型:近端区至少2条暗带,远端为较宽明带,末端为狭窄暗带。普通牛Y=SM,长臂至少2条暗带、短臂为较宽明带,末端狭窄暗带,短臂G带分布与前两种牛长臂远端一致,可能是臂间倒位的结果。G带研究支持前文认为四川黄牛分类应属Bos indicus的研究结果。     

九龙牦牛高分辨G带带型的研究

采用氨甲喋呤阻断法使细胞分裂同步化，并结合胰酶Ｇ显带技术，研究了九龙牦牛的高分辨Ｇ带核型，将九龙牦牛显带染色体划分为１０８个区。     

家牦牛与不同野血牦牛染色体组型的比较分析

本文用外周血淋巴细胞培养法制备染色体标本,比较分析了家牦牛、１／２野血牦牛及３／４野血牦牛的染色体组型。结果表明：家牦牛、１／２野血牦牛和３／４野血牦牛的二倍体细胞染色体数目均为２ｎ＝６０,常染色体为近端着丝粒,性染色体为亚中着丝粒;家牦牛和野牦牛的染色体组型无明显差异。     

广西本地水牛与么拉水牛染色体组型的差异

应用常规形态分析和G、C带技术,研究广西本地水牛和么拉水牛的染色体组型。两种水牛染色体的差异:1.么拉水牛比广西水牛多1对端部着丝粒染色体,在么拉水牛组型中列为9号。2.么拉水牛的1号染色体是较小的亚中部着丝粒染色体,广西水牛则是较大的中部着丝粒染色体。3.两种水牛的Y染色体均不显C带,但是,么拉水牛Y染色体臂的末端具一着色带,广西水牛则无显示。么拉水牛Y染色体与X染色体长度的比值是0.4103,广西本地水牛是0.3658。     

甘南牦牛不同杂交组合生产性能分析

为提高牦牛生产的社会、经济和生态效益,满足人们对无污染的牦牛奶、肉等绿色食品日益增长的需要,本研究利用娟姗牛、安格斯牛和野牦牛的冻精杂交改良甘南牦牛,筛选最佳杂交组合。结果发现,与当地牦牛相比,娟姗牛、安格斯牛和野牦牛与本地牦牛杂交的F1代公母犊牛的初生重、3月龄体重和6月龄体重均显著高于本地牦牛犊(P<0.05),其中娟姗牛、安格斯、野牦牛的杂交F1代的公犊牛初生重分别提高了30.12%、18.21%和13.21%;3月龄体重分别提高了7.89%、3.70%和1.94%;6月龄体重分别达到了81.26±1.23kg、79.26±1.04kg和78.42±1.13kg,而母犊牛6月龄体重分别为77.78±2.26kg、78.07±1.97kg和75.85±1.32kg。因此,利用娟姗牛、安格斯牛与牦牛种间杂交育种可显著改善犏牛生产性能,这将为提高甘南牦牛生产性能、生产优质牛肉提供依据。     

牦牛FSHR基因5’端部分序列克隆及生物信息学分析

利用PCR和T—A克隆技术,测定了麦洼牦牛和杂种犏牛的FsHR基因5’端侧翼区和第1外显子的核苷酸序列,并运用BLAST、DNAMAN、Clustal等生物信息学软件与其他物种的相应序列进行了同源性比对分析,为牦牛FSHR基因结构、犏牛雄性不育、牦牛遗传多样性,以及FSHR基因与牦牛的繁殖、产肉、产奶性状相关分析提供了理论基础。结果表明：牦牛和犏牛FSHR基因5’端侧翼区长度为970bp,普通牛、羊和猪的该序列长度分别为970、973和981bp,序列长度差异较小;序列突变以碱基替换为主,牦牛与犏牛、普通牛、羊及猪的核苷酸序列一致性分别为99．4％、99．3％、98．2％、96．9％,一致性较高,为同源基因。聚类分析中牦牛与犏牛首先相聚,再依次与普通牛、羊、猪聚在一起。根据核苷酸序列推测,氨基酸组成分析显示,牦牛和犏牛的该蛋白疏水性,蛋白的亲水性和稳定性较差,为不稳定的脂溶性蛋白;二级结构主要以α螺旋和随机卷曲为主。     

安格斯肉牛与牦牛杂交及其效果研究

［目的］为了进一步优化牦牛肉品质,有效缩短牦牛养殖周期,提高其受胎率和犊牛成活率。［方法］本研究进行了安格斯肉牛与牦牛杂交试验,,利用安格斯肉牛冷冻精液,对251头经产母牦牛进行了人工授精。［结果］人工授精后,分别于2013年产犊42头,成活率66.67%;2014年产犊51头,成活率95.7%;2015年产犊67头,成活率91.04%。［结论］牦牛膘情较好时期,受胎率可达83.33%,接近于奶牛人工授精的受胎率,达到了青海省牦牛人工授精的较高水平。     

吉林黄牛引入牦牛血液杂交改良效果

采用含有1／2野牦牛血液的冻精为吉林当地10头黄牛输配。结果，受配牛妊娠率为100％，产犊成活率为100％，杂种后代牛在采食性能、抗寒暑能力及生长速度方面都优于本地黄牛。初步表明利用含1／2野牦牛血液的冻精改良本地黄牛有较强的种间杂种优势，可为生产利用。     

牦牛远缘杂交后代及其亲本血红蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对牦牛，荷斯坦牛，F1（犏牛），F2（尕利巴牛）代杂种牛的血红蛋白多态性进行了研究。结果发现：1、青海荷斯坦牛的Hb电泳型呈多态性，而青海牦牛的Hb只呈现出单态；2、犏牛的Hb电泳型为多态，除表现双亲的Hb特征外，还出现了犏牛所特有的带型；3、尕利巴牛的Hb电泳型比较复杂，表现出了四种类型，除了表现亲本的Hb特征外，也出现了具新型Hb类型的个体；4、随着级进代数的增高，牦牛远缘杂种后代的Hb电泳型变化愈来愈复杂，有待进一步深入研究。     

Use of molecular markers for the identification of River Buffalo chromosomes: chromosome one

A standard karyotype for the River Buffalo has recently been established. The largest five chromosomes are biarmed and, based on the banding homology between cattle and buffalo chromosomes, were suggested to originate from the fusion of cattle acrocentric chromosomes. The origin of buffalo chromosome 1 is controversial due to the difficulty in differentiating between the small acrocentric cattle chromosomes. Using molecular markers assigned to cattle chromosomes, synteny between CD18, a marker for BTA1, and markers for small acrocentric cattle chromosomes BTA 24 to BTA 29 was investigated in buffalo/hamster somatic cell hybrids. The investigation revealed that CD18 is syntenic with ANT1, a marker for cattle chromosome 27. The present results confirm that buffalo BBU1 results from fusion of cattle BTA 1 and BTA 27. They also underline the importance of biarmed buffalo chromosomes for the identification of small cattle acrocentrics.     

C- AND G- BANDING PATTERNS AND CHROMOSOMAL MORPHOLOGY OF SOME BREEDS OF AUSTRALIAN CATTLE

A cytogenetical study using metaphase chromosomes from cultured lymphocytes, was made of 2 Banteng (Bibos banteng) steers and 218 bulls representing 13 purebreeds (Bos taurus type, Bos indicus type and Sanga) and 7 cross-breeds. Studies were made of photographic karyotypes of Giemsa stained and C-banded chromosomes of bulls of each breed and of B-banded chromosomes from 3 breeds of Bos indicus and one cross-breed Australian Friesian Sahiwal) cattle. The relative lengths of chromosomes of Bos taurus and Bos indicus bulls were compared and significant difference in relative lengths of the X chromosomes were noted between these two species. There was a differences in morphology of the Y chromosomes; Sanga, Banteng and Bos taurus type breeds had a small submetacentric Y chromosome, except for the Jersey which had a metacentric Y chromosome. All Bos indicus type bulls had an acrocentric Y chromosome but the Droughtmaster breed had two forms of the Y chromosome (submetacentric and acrocentric). The C-banding patterns of the autosomes and X chromosomes were similar for all breeds while those of the Y chromosomes of Bos indicus type cattle allowed their accurate identification. G-banding patterns of Bos indicus resembled those of Bos taurus and enabled pairing of homologous chromosomes. Centromeres of the autosomes were unstained but those of the sex chromosomes were darkly stained.     

蒙古牛MSTN基因序列分析及多态性研究

以PCR扩增及测序的方法,检测了新疆巴音布鲁克自治区的18头蒙古牛样本的MSTN基因。结果显示：蒙古牛MSTN基因编码区含1128个碱基对,在所检蒙古牛样本中,存在1个核苷酸多态位点,含有两种核苷酸类型（55．6％C和44．4％T）;在该位点上,欧洲牛（T）、瘤牛（C）和牦牛（C）均为单型。说明了蒙古牛与欧洲牛、瘤牛和牦牛起源相似,存在一定的基因分化,但未达属层次的分化水平。     

牦牛与黑白花牛的氮平衡比较研究

接近初情期的牦牛和黑白花公牛各3头，于代谢厩中进行精料型（精粗比为4：1）和粗料型（精粗比为1：4）日粮条件下的氮平均对比试验。结果表明，不论牦牛还是黑白花牛，干物质采食量（DMI）、粪氮（FN）、尿氮（UN）和干物质消化率（DMD）均随精料含量上升而升高（P＜0．01），而进食氮（NI）的利用效率则随NI的升高而下降（P＜0．01）。在粗料型的日粮条件下，牦牛对NI的利用效率（58．2％）高于（P＜0．05）黑白花牛（49．0％），二者的DMD（45％）无差异；而在精料型的日粮条件下，NI的利用效率（22％）和DMD（64％）均不随牛种而变化（P＞0．05）。从这些结果得出结论：牦牛与黑白花牛消化道的吸收效率是一样的，在精料型日粮条件下，牦牛机体组织存留氮的能力低于黑白花牛；在粗料型日粮条件下，牦牛比黑白花牛更能有效地利用蛋白资源。     

九龙牦牛高分辨G带带型的研究

采用氨甲喋呤阻断法使细胞分裂同步化，并结合胰酶Ｇ显带技术，研究了九龙牦牛的高分辨Ｇ带核型。将牦牛显带染色体划分为１０８个区，并绘制了Ｇ带模式图。