库尔勒香梨叶片不定芽再生诱导的研究

以库尔勒香梨幼叶为外植体,研究基本培养基种类、外源激素浓度、AgNO3浓度及接种叶片的放置方向对叶片不定芽再生的影响。结果表明:培养基的种类是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键,NN69培养基是香梨叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.3mg/L为最佳;附加0.5mg/L AgNO3有利于叶片再生;以叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基更利于不定芽的再生;结合21d暗培养香梨叶片再生频率最高可达到64.3%,再生芽数最高为2.59。     

红将军苹果离体叶片高频再生体系研究

以中熟红富士品种红将军组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间、取叶部位等因素对再生率的影响。结果表明,试管苗继代培养3～4代,当代培养25～30d,取顶部嫩叶3～4枚,剪除叶片边缘,将剪切的叶片中部以近轴面接触在最佳诱导分化培养基上:MS+TDZ1.0mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L,培养基pH值5.8,黑暗培养10d后,转入光照培养条件下,再生频率达100%,再生芽数平均4.6个。叶片再生不定芽分化后15～20d转接到苹果继代培养基MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+Ac0.5g/L+蔗糖2%的生根培养基上,光培养15d后,生根率可达86.0%。     

新疆野生樱桃李(Prunus cerasifera)茎段与叶片培养及其植株再生

以新疆野生樱桃李为材料,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类、浓度及配比、蔗糖浓度等多种因素对茎段腋芽萌发与生长、增殖以及叶片不定芽再生的影响,建立了其叶片再生体系。结果表明,1)植物生长调节剂组合IAA0.4mg/L+6-BA0.8mg/L较适合于樱桃李茎段腋芽的萌发与生长培养;2)正交试验筛选出不定芽的最佳增殖培养基为3/4MS+IAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L;3)ZT诱导不定芽再生的效果好于6-BA,ZT1.5mg/L+IBA0.05mg/L为诱导不定芽再生的最适植物生长调节剂组合;4)暗培养为叶片不定芽再生的必要条件,在最适不定芽再生的培养基上,暗培养14d的不定芽再生效果最好;5)樱桃李不定梢的最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L。     

草莓叶片再生体系的建立

以草莓‘红颜’和‘章姬’的叶片为外植体,研究暗培养时间、不同植物激素及浓度对不定芽诱导的影响,不同植物激素种类浓度及继代次数对不定芽增殖的影响,以及组培苗生根的最佳培养基。结果表明:草莓叶片不定芽诱导的最适宜培养基为MS+3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,暗培养天数15~20 d;不定芽增殖的最适宜培养基为2 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,‘红颜’组培苗适宜继代4代,‘章姬’组培苗适宜继代5次;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA生根效果最好。     

秋福红树莓叶片离体再生植株研究

以红树莓品种秋福(Rubus L.cv.Autumn Bliss)离体叶片为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。结果表明,叶片外植体接种于MS+TDZ2.00mg/L+IAA0.10mg/L的培养基,暗培养2～3周转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体不定芽数分别为100.00%、95.83%和(5.57±0.27)个。将再生芽接种于1/2MS+IBA0.10mg/L的培养基中,35d后生根率达100.00%。再生植株炼苗后移栽,30d时成活率达97.30%,成功地建立了红树莓叶片的离体再生体系。     

墨兰组织培养根状茎分化技术研究

将诱导出的墨兰根状茎接种到不同培养基中,探讨了不同基本培养基添加椰汁、活性炭、暗培养对墨兰根状茎分化的影响.根据墨兰根状茎分化率和生长势两项指标的观察,找到墨兰根状茎分化最适培养基为MS+ KT 0.1 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+ CM 100 ml/L+活性炭0.3 g/L,最适暗培养天数为5d.     

长筒石蒜叶片薄层培养诱导愈伤组织发生的研究

以切成2mm左右的长筒石蒜幼嫩叶片薄片作为外植体,研究了不同激素组合以及不同接种方式对其愈伤组织诱导的影响,以期获得长筒石蒜叶片愈伤诱导的最佳条件。结果表明:在1/2MS+NAA 0.5mg/L+TDZ 2.0mg/L+蔗糖30g/L+土豆粉3g/L培养基中,愈伤诱导率最高可达90.0%,TDZ诱导愈伤效果明显优于2,4-D;采用叶片垂直插入培养基的接种方式,培养30d后获得愈伤诱导率最高为83.3%。     

加州软籽甜石榴茎段和叶片组织培养研究初探

建立加州软籽甜石榴稳定的快繁体系,为加速新品种推广和无病毒植株的使用提供参考。以加州软籽甜石榴的茎段和叶片为试材,研究初代培养,遏制褐变,愈伤组织增殖培养过程中各环节影响因子和生长调节剂种类配比。茎段初代培养最适宜的培养基为MS培养基;叶片初代培养最适宜的培养基为WPM培养基。遏制茎段褐变最佳措施为接种后连续转接3次;遏制叶片褐变最佳措施为接种后先暗处理1周再连续转接2次。愈伤组织最佳增殖培养基为WPM+6-BA2.0mg/L+2,4-D 0.3mg/L,2,4-D增殖效果优于NAA。初步建立了加州软籽甜石榴的快繁体系,为以后的繁殖和生产提供材料。     

秋子梨叶片植株再生研究

以秋子梨的春梢茎段和无菌叶片为试材,探讨不同激素配方对叶片再生的影响。结果表明,适宜诱导外植体不定芽的初代培养基为MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L+GA30.6mg/L;增殖培养基为MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+6-BA1.0mg/L+IAA0.6mg/L+GA30.6mg/L;诱导叶片产生愈伤组织培养基为MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+6-BA6.0mg/L+NAA1.5mg/L+TDZ1.0mg/L,诱导不定梢培养基为MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+6-BA5.0mg/L+NAA1.5mg/L+TDZ1.5mg/L;生根培养基为1/2MS培养基+IBA1.0mg/L。     

新红星苹果离体高效再生体系的建立

为了建立新红星苹果离体高效再生体系,以苹果品种新红星为试材,研究了不同基本培养基、激素质量浓度、外植体类型以及暗处理时间对其再生频率的影响。结果表明3种外植体的最适基本培养基均为MS培养基;叶片的再生效果最好,其次为黄化茎段,茎段最差,最高再生频率分别为74.1%,51.9%,42.6%;叶片和茎段的最佳暗处理时间为3周,黄化茎段的最佳暗处理时间为2周。新红星苹果再生的最佳外植体为叶片,最佳培养基为MS+TDZ1.0mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L,最佳暗处理时间为3周。     

沙棘品种“实优1号”的组织培养技术

以沙棘品种"实优1号"的1～2a生带休眠芽茎段(腋芽未萌发)为外植体,采用不同培养方式、不同类型基本培养基和不同激素浓度组合对沙棘组织培养过程中的影响进行系统的研究。结果表明:茎段分化培养采用1/3MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.3mg/L,诱导率可达85%以上;最佳增殖和诱导愈伤培养基为1/3MS+6-BA 0.75mg/L+IAA 0.5mg/L,愈伤诱导率在90%以上,增殖系数达到4～6;最佳生根培养基均为1/4MS+NAA 0.3mg/L+IBA 0.5mg/L,平均生根率85%以上。接种后进行暗培养7d,向培养基中添加6.5g/L琼脂,1.5g/L活性碳,可有效防治褐化。     

云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

蝴蝶兰组培快繁技术研究

将蝴蝶兰花梗腋芽作为外植体,接种于不同培养基上进行培养.结果表明:1/2MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+CM 15%培养基诱导丛生芽最合适,诱导率可达100%,丛生芽增殖阶段1/2 MS+6-BA 7 mg/L+NAA 0.5 mg/L+CM 15%培养基效果最好,增殖倍数达7.13.无菌苗叶片诱导丛生芽以1/2MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+香蕉泥10%+AC 0.2%为最好,诱导率达54.3%,丛生芽增殖阶段1/2 MS+6-BA 7 mg/L+NAA 0.5mg/L+香蕉泥10%+AC 0.2%培养基效果最好,增殖倍数达6.17.茎尖诱导原球茎状体以MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+CM 10%+0.2%,其诱导率达77.1%,原球茎状体进行增殖培养的适宜培养基1/3MS+6-BA 50 mg/L+NAA 0.5 mg/L+CM 15%+AC 0.3%,增殖倍数达8.3,随后转入1/2MS+6-BA 7 mg/L+CM 15%中,很快分化成芽.生根培养基以1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L+AC 1.0%较好,将生根蝴蝶兰移栽至水苔中,1个月后成活率为99.9%.     

夏堇悬浮细胞培养与植株再生研究

以夏堇品种“小丑”的组培苗幼嫩叶片为试材,进行愈伤组织诱导、细胞悬浮培养及植株再生诱导的研究.结果表明:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D的培养基能够使叶片诱导为生长迅速、质地疏松的愈伤组织.愈伤组织最适宜的悬浮培养条件为:MS+ 1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L 2,4-D液体培养基,20 g/L的起始接种量以及100 r/min的震荡培养.将继代3～4次的细胞悬浮颗粒转到1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的固体再生培养基上培养,3周后可以诱导分化出芽,进而获得完整植株.悬浮培养有利于夏堇愈伤组织的再生,悬浮培养对提高以夏堇作为模式植物进行的相关研究具有重要的应用价值.     

早梨18号叶片不定芽诱导及植株再生的研究

体外建立并扩繁了早梨18号的无性系,以试管苗叶片为外植体.研究了基本培养基、植物生长调节剂组合、暗培养时间对叶片不定芽诱导与植株再生的影响.结果表明:早梨18号叶片在适宜的条件下可发生大量不定芽;暗培养预处理有利于提高叶片的再生频率,以暗培养15 d为宜;叶片在NN 69 6-BA 5.0mg/L NAA 0.5mg/L和NN 69 TDZ 1.0 mg/L IBA0.5 mg/L的培养基上分别获得了56%和54%的叶片再生频率.     

怀地黄愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

研究了植物生长调节剂和接种方式对怀地黄叶片愈伤组织诱导的影响和细胞悬浮培养体系的建立。结果表明:将叶片正接在MS+2,4-D 1mg/L+6-BA 0.4mg/L培养基上,愈伤组织生长良好,诱导率达100%;在该培养基上多次继代,可形成3种类型的愈伤组织,其中Ⅰ型愈伤组织淡黄色、颗粒透亮、分散性好且疏松易脆,适合进行细胞悬浮培养;在MS+2,4-D 3mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基中,悬浮培养细胞生长曲线呈"S"型,培养15d时细胞干重达最大值,为4.94g/L。     

'砀山酥'梨叶片再生体系的建立

以‘砀山酥’梨(Pyrus bretschneidericv.Dangshansu)叶片为材料,研究基本培养基种类、植物生长调节物质浓度、抗氧化剂、碳源对再生的影响,以及不同浓度生长激素对再生芽生根的影响。结果表明:NN69培养基是叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+6-BA 3.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+琼脂6 g/L为佳;AgNO3比活性炭和PVP更利于叶片的诱导;与蔗糖相比山梨醇更适宜作为叶片再生的碳源,最佳浓度是10 mg/L,叶片再生频率最高为74.03%,平均再生芽数1.01。生根培养基以ASH+IBA 10 mg/L+间苯三酚80 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L为佳,生根率高且根粗壮。     

嘎拉苹果单芽系组培苗的获得

以皇家嘎拉苹果芽为外植体,研究不同消毒方法、消毒时间、不同防褐化措施和不同激素配比对组培苗获得的影响。结果表明:嘎拉芽消毒选择0.1%HgCl2消毒7 min为宜;接种前使用4 g/L PVP、接种后暗培养10 d左右可以较有效地减轻褐变;诱导、增殖培养基是MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,继代、扩繁培养基是MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;继代周期以28~30 d为宜。     

红金银花不同外植体组织培养直接成苗培养基筛选

以红金银花顶芽、当年生幼茎、叶片为试验材料,利用仿自然气候的培养条件,通过对培养苗形态指标的综合分析,对3种红金银花外植体组织培养一次性成苗的培养基进行筛选。结果表明:顶芽为最佳外植体,其次是叶片和幼茎。最适合顶芽的培养基为MS+1.0 mg/LKT+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L-αNAA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂粉+0.3%活性碳,pH 6.0;最适合幼茎的培养基为MS+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L-αNAA+30 g/L蔗糖+8g/L琼脂粉+0.3%活性碳,pH 6.0;最适合叶片的培养基为MS+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L-αNAA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂粉+0.3%活性碳,pH 6.0。     

苹果体细胞悬浮培养及植株再生研究

以苹果试管苗叶片的再生不定芽嫩叶为试材,对苹果体细胞悬浮系的建立及植株再生的影响因素进行了研究.结果表明:在MS+NAA 0.5 mg/L+BA 2.0 mg/L培养基上可诱导获得高活力的愈伤组织.将该愈伤组织转入MS+2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.0 mg/L液体培养基中培养,采用无菌筛网分离获得含单个细胞和少于8～10个细胞的小细胞团进行继代培养,建立体悬浮细胞培养系.将悬浮细胞转到MS+2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.0 mg/L的固体增殖培养基上暗培养25 d后,可形成微型愈伤组织,将该愈伤组织转到MS+BA 5.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的植株再生培养基上暗培养30 d后转入光下,光照培养30 d后53％的愈伤组织可再生植株.该研究建立的苹果体细胞悬浮培养技术,不仅可用于细胞融合及遗传转化过程中杂种细胞和转化细胞的分离及植株再生研究,而且对于利用组织培养技术筛选变异株系也具有重要意义.