利用大孔树脂纯化荷叶黄酮动态吸附条件的研究

本试验从荷叶中提取黄酮类化合物,通过大孔树脂对黄酮的静态吸附效果的比较,研究X-5、HP-20、AB-8及HPD-100四种大孔吸附树脂的吸附效果,然后使用通过动态吸附与解吸试验就上样流速、上样液浓度、pH、解吸曲线以及洗脱剂的浓度对大孔吸附树脂(HP-20)的吸附效果进行研究,确定荷叶黄酮的分离纯化的最佳技术参数。结果表明,HP-20分离效果最好,静态饱和吸附量可达45.84 mg,解吸量为41.20 mg,解吸率为89.9%;在提取液总黄酮含量为0.50～0.70 mg/mL,pH为提取原液4.6左右,上样流速为1.5 mL/min的条件下,HP-20对荷叶总黄酮的吸附量可以达到5.20 mg/mL,体积分数越高的乙醇水溶液洗脱效果越好。     

大孔吸附树脂纯化黄芪茎总皂苷的工艺及其抗氧化性

以总皂苷吸附率、解吸率为考察指标,探索LSA-10型大孔吸附树脂纯化黄芪茎总皂苷的工艺条件及其体外抗氧化性。采用单因素和正交试验法对黄芪茎总皂苷的纯化工艺进行优化;采用分光光度法探索了黄芪茎总皂苷样品液对DPPH·、·OH的清除活性。试验结果表明,黄芪茎总皂苷的最佳纯化工艺条件为:以生药浓度为0.015 g/ml的黄芪茎样品液进行试验,吸附时间为4 h,样品液用量/树脂质量的比值为15 ml/g,解吸液乙醇体积分数为85%,解吸液用量/树脂质量的比值为15 ml/g,解吸时间为1 h。在上述试验条件下黄芪茎总皂苷样品液的平均吸附率和解吸率分别为90.68%和93.13%,纯化后的干浸膏总皂苷含量由5.94%提高到12.66%;黄芪茎总皂苷样品液对DPPH·、·OH具有较强的清除能力。因此,LSA-10型大孔吸附树脂对黄芪茎总皂苷具有富集作用,其优化的纯化工艺条件比较稳定;黄芪茎总皂苷提取液具有一定的抗氧化活性,而且其清除活性随着质量浓度的增加而逐渐增强。     

AB-8大孔树脂吸附、解吸中药复方多糖的研究

为了对中药复方免疫增强剂中的多糖进行纯化,试验采用苯酚硫酸法测定多糖含量,然后以AB-8大孔吸附树脂为分离材料,以乙醇为洗脱剂,系统研究上样液浓度、上样量、上样速率、洗脱剂乙醇浓度、洗脱速率、洗脱剂用量等参数对多糖吸附-解吸效果的影响。结果表明:上样液浓度为5.93 mg/mL,上样量为1倍量树脂体积(BV),上样液速率为每小时2倍树脂体积数;洗脱剂乙醇浓度为50%,洗脱速率为每小时3倍树脂体积数,洗脱剂用量为3倍量树脂体积;吸附率为74.3%,解吸率为93.6%。说明AB-8大孔树脂可用于纯化中药复方免疫增强剂中的多糖。     

大孔吸附树脂分离纯化山丹鳞茎中皂苷的工艺研究

为了研究大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷静态吸附和解吸性能,筛选出纯化效果较好的树脂,试验采用静态吸附筛选树脂和动态吸附确定工艺参数的方法来研究大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷的分离纯化工艺。结果表明:D101大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷的纯化效果较好,在上样原液浓度为6 mg/m L、pH值为8的条件下进行吸附,解吸条件为乙醇浓度70%、洗脱流速0.5 BV/h。在此条件下对山丹鳞茎中皂苷进行纯化,皂苷纯度提高了4.35倍。说明D101大孔吸附树脂对山丹鳞茎皂苷有较好的富集、纯化效果。     

大孔树脂富集纯化藏药五脉绿绒蒿总黄酮的工艺研究

优选大孔吸附树脂富集纯化藏药五脉绿绒蒿中总黄酮的工艺条件。方法:以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量;以比吸附量、吸附率、比解吸量、解吸率等为指标,采用静态吸附-解吸试验,考察AB-8、NKA-9、D-101、HPD-100、DM-301等5种型号的树脂;采用单因素试验,考察静态吸附-解吸附动力学曲线,确定吸附、解吸时间,筛选解吸剂浓度、上样液浓度、流速等参数。结果:D-101型大孔树脂对五脉绿绒蒿总黄酮吸附-解吸性能较好,比吸附量492.8μg/g、吸附率68.21%,解吸率83.26%。工艺条件为:室温下,以2.0 mL/min流速循环上样动态吸附2次,后静态吸附,动态吸附和静态吸附的累计时间不小于8 h。以70%乙醇解吸,静态解吸2 h以上,后以1.0 mL/min流速进行动态解吸,静态解吸和动态解吸累计时间不小于8 h。上样液粗总黄酮质量浓度为140～150μg/mL,每100 mL上样液需装柱树脂为30～40 g。结论:经D-101大孔树脂纯化后,所得干浸膏中总黄酮纯度提高2.96倍,回收率62.23%,纯化物粘度和吸湿性降低,工艺稳定可行,五脉绿绒蒿总黄酮得到有效的富集,为后期的新药开发研究提供参考。     

基于响应面法的华金6号金银花叶总黄酮有效部位的制备及其体外抗氧化活性研究

为利用响应面法优化金银花叶总黄酮有效部位的制备工艺,并考察其体外抗氧化能力,试验对4种型号大孔树脂的吸附-解吸能力进行比较,并筛选最优的大孔树脂型号;采用单因素试验和Box-Behnken响应面法优化大孔树脂纯化金银花叶总黄酮有效部位的制备工艺,分别考察洗脱溶剂浓度、洗脱溶剂体积、上样流速、洗脱流速等因素水平,并进行三次验证试验;以抗坏血酸为阳性对照,测定金银花叶黄酮有效部位的DPPH自由基清除能力和ABTS+自由基的清除能力。结果表明:优选D101大孔树脂最佳纯化工艺为:上样流速2.5 m L/min,洗脱溶剂为60%乙醇,洗脱溶剂体积为4倍柱体积,洗脱流速2 m L/min;制备的有效部位提取物中总黄酮的含量超过50%;60%乙醇部位体外抗氧化能力试验证明金银花叶总黄酮有效部位具有良好的体外抗氧化能力。采用Box-Behnken响应面法优化的大孔树脂纯化金银花叶总黄酮有效部位的工艺可行,且稳定性好;金银花叶总黄酮有效部位的体外抗氧化效果显著,值得进一步研究开发。     

大孔吸附树脂纯化蜂胶总黄酮的工艺研究

[目的]研究大孔树脂纯化蜂胶总黄酮的最佳工艺。[方法]以比吸附量、解析率及总黄酮回收率为指标,通过考察静态吸附及解吸附试验,筛选最佳大孔吸附树脂。并考察该最佳大孔吸附树脂的动态吸附及解吸附条件,包括原液质量浓度、吸附流量、吸附时间、洗脱剂及洗脱剂流量,从而筛选出该大孔吸附树脂分离纯化蜂胶总黄酮的最佳工艺条件。[结果]FL—1大孔树脂为四种树脂中吸附及解吸附性能最佳,因此选择FL-1为分离纯化蜂胶总黄酮的最佳树脂,其最佳工艺参数为:动态吸附质量浓度0.25～0.38mg/mL,吸附速度1mL/min;树脂柱吸附时间1h,洗脱剂为90%乙醇,洗脱流量为1mL/min。蜂胶总黄酮质量分数从13.07%提高到85.25%,总黄酮回收率达79.37%。[结论]FL-1型大孔树脂对蜂胶总黄酮具有良好的纯化效果,优选工艺合理、稳定、可行。     

复合酶辅助高压法提取金针菇黄酮的纯化及活性测定

为测定复合酶辅助高压法所提取的金针菇中黄酮类化合物的活性以及X-5型大孔吸附树脂纯化金针菇黄酮的最优条件,本文采用复合酶辅助高压法从金针菇中提取黄酮,并用X-5型大孔树脂对其进行纯化,然后通过体外抗菌活性试验测定金针菇黄酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和沙门氏菌4种常见菌株的抗菌活性;又以维生素C(Vc)为对照,通过测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、羟基自由基(OH·)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的能力来检测其抗氧化性。结果表明:X-5型大孔树脂纯化金针菇黄酮的最佳条件为:采用浓度为1.4 mg/mL、pH为5的上样液,在上样流速为0.2 m L/min的条件下进行吸附;吸附饱和后用70%的乙醇60 mL以1 m L/min洗脱。在此条件下得到的黄酮纯度是纯化前的1.83倍。金针菇黄酮对四种细菌的生长繁殖有明显的抑制效果,抑菌强度顺序为:大肠杆菌沙门氏菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌;金针菇黄酮对DPPH·、O_2~-·、OH·和ABTS·均具有一定的清除能力,但都弱于Vc。可知复合酶辅助高压法所提取的金针菇黄酮具有抑菌及抗氧化活性,X-5型大孔吸附树脂纯化金针菇黄酮效果较好。     

大孔树脂纯化猫爪草多糖的工艺研究

为探索出适宜分离和纯化猫爪草多糖的大孔树脂,并确定最佳纯化工艺参数,试验对10种不同型号大孔树脂(HPD-722、H103、DA-201、AB-8、HPD300、NKA-9、X-5、HP20、DM301、 D-101)的吸附量、吸附率及解析率进行考察,优选出最佳纯化树脂,并通过考察pH值、上样速度、上样浓度、洗脱剂浓度、洗脱剂用量、流速等指标确定最佳纯化工艺。结果表明:HPD-722型大孔树脂为最优树脂,最佳上样条件如下:pH值为3.5、上样速度为2.0 BV/h、上样浓度为4.0 mg/mL;最佳洗脱条件为80%乙醇,洗脱剂用量为3.5 BV、流速为1.0 BV/h。经过该工艺纯化后,猫爪草多糖的纯度由13.25%提高到了71.46%。说明HPD-722型大孔树脂能够很好地富集、纯化猫爪草中的多糖。     

从黄芩毛状根中提取、纯化黄芩苷的研究

本试验以黄芩苷质量浓度为指标,考察了影响大孔吸附树脂对黄芩毛状根中黄芩苷富集效果的相关因素,并利用硅胶柱层析对其进行纯化。结果显示,LX-68型大孔吸附树脂的富集效果最好,较优工艺条件为:上样浓度为8.69 g/L,吸附流速为6 BV/h,上样体积为16 BV,树脂床径高比为1:14;洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速为6 BV/h,用量为10 BV;硅胶柱层析洗脱剂条件为氯仿:乙酸乙酯:甲醇:甲酸(7:3:1.5:0.5)。在所确定的工艺条件下,该树脂可有效地提取黄芩毛状根中的黄芩苷,黄芩苷吸附量达131.2 mg/g,黄芩苷的回收率超过69.1%,经纯化后黄芩苷纯度为98.45%。     

板栗花粉总黄酮的分离纯化工艺研究

AB-8大孔吸附树脂柱层析分离纯化板栗花粉总黄酮,理想的分离纯化工艺参数为：有效柱体积20mL,黄酮液上样量6mL,水洗液10BV,洗脱液乙醇浓度为75%,洗脱速度1mL/min,洗脱液用量为树脂床6BV时,黄酮物质基本被洗脱下来,HPLC表征板栗花粉黄酮得到分离纯化。     

大孔吸附树脂纯化九节总黄酮工艺的研究

试验旨在利用大孔树脂纯化九节中的粗黄酮,优选纯化总黄酮的最佳工艺。试验比较3种不同大孔吸附树脂AB-8、HP-20、D-101的吸附-解吸附特性,选择最优吸附纯化树脂考察其上样工艺及洗脱工艺,采用Box-Behnken响应面分析法建立数学模型,优选最佳纯化条件。结果显示,HP-20型大孔树脂吸附性强、解吸容易,最佳富集纯化工艺为上样浓度5 g/L、上样pH值4、层析柱高径比7∶1、洗脱液为60%乙醇。使用该工艺对九节总黄酮进行纯化,精制后的总黄酮含量由纯化前17.6%提升至87.8%,约是纯化前的5倍。研究表明,试验获得了HP-20型大孔树脂吸附九节总黄酮的最佳纯化条件,为九节总黄酮作为饲料添加剂的开发利用提供参考。     

茶树纯露化学成分和抑菌活性研究

试验旨在研究茶树纯露化学成分和抑菌活性。采用D101大孔吸附树脂和AB-8大孔吸附树脂对茶树纯露中的化学成分进行富集，选用50%和95%两个不同浓度的乙醇-水溶液作为洗脱剂，先用50%乙醇溶液分别对D101和AB-8大孔吸附树脂柱进行洗脱，再用95%乙醇溶液对两根树脂柱进行洗脱。使用气相色谱质谱联用仪（GC-MS）对茶树纯露粗提物进行化学成分分析，并测定粗提物的抑菌活性。结果显示：经过D101大孔吸附树脂富集的M1-95%粗提物主要化学成分为松油-1-醇、γ-松油烯、1,8-桉叶素和α-松油烯，经过D101大孔吸附树脂富集后又再次经过AB-8大孔吸附树脂富集的M2-95%粗提物主要化学成分为松油-1-醇、γ-松油烯、1,8-桉叶素和α-松油烯。M1-95%对白色念珠菌、枯草芽孢杆菌和藤黄微球菌具有较强的抑制活性；M1-50%对白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌和肺炎克雷伯菌具有中等强度的抑制活性。研究表明，D101大孔吸附树脂对茶树纯露中的化学成分具有较强的富集能力，而AB-8大孔吸附树脂并未富集出其他化学成分，生产车间无须将流出液再次经过AB-8大孔吸附树脂富集。     

DM-2型大孔树脂分离纯化沙枣多糖的工艺研究

为了确定DM-2型大孔树脂分离、纯化沙枣多糖的最佳工艺条件,试验以吸附率和解吸率为评价指标,通过动态试验研究各因素对分离、纯化效果的影响。结果表明:在沙枣多糖样品溶液浓度为0.7 mg/mL、pH值为10、上样速率为2.5 BV/h、上样量为3 BV、洗脱剂浓度为55%、洗脱速率为1 BV/h、洗脱剂用量为3 BV时,吸附率和解吸率分别达到84.05%和97.3%。说明在同时满足上述条件的情况下,DM-2型大孔树脂分离、纯化沙枣多糖的效率较高。     

大孔树脂纯化蓝刺头中总黄酮生产工艺探讨

本试验旨在研究大孔树脂纯化蓝刺头中总黄酮的最佳生产工艺条件。利用紫外-可见分光光度法，建立总黄酮含量的检测方法|采用静态吸附试验对5种类型的大孔树脂进行了筛选|采用动态吸附试验，探讨了蓝刺头上样液浓度、上样速度、树脂径高比等因素对蓝刺头总黄酮吸附率的影响，并通过响应面优化试验确定最佳工艺条件。结果表明：最佳大孔树脂类型为AB-8，湿法加入装柱，径高比为1：8，上样液为总黄酮含量6 mg/mL的蓝刺头溶液，以1 BV/h流速对其进行动态吸附，再用80%乙醇进行洗脱，纯化后总黄酮的含量达65%以上。综上，该工艺条件适于蓝刺头总黄酮的纯化。 [关键词] 大孔树脂|蓝刺头|总黄酮     

蜂胶黄酮提取纯化的工艺研究

为确定蜂胶黄酮提取纯化的最佳工艺条件.以蜂胶黄酮的得率和绝对提取率为指标,采用正交法优化乙醇提取蜂胶黄酮的工艺条件,考察乙醇浓度、液固比、水浴温度和水浴时间对蜂胶黄酮得率和绝对提取率的影响,再通过大孔吸附树脂对蜂胶黄酮进行纯化.结果表明,最佳提取纯化工艺条件为:乙醇浓度为60%,液固比为18ml/g,水浴温度为55℃,水浴时间为5h,上述工艺条件下,黄酮纯度为72.2%.最优树脂为D101,吸附速度为1.0ml/min,洗脱剂先采用40%乙醇2BV体积洗脱洗去杂质,再用80%乙醇5BV体积洗脱获得黄酮成分,此条件下层析得到的蜂胶黄酮纯度90.2%.     

响应面分析法优化紫象草花青素提取工艺

为了优化紫象草花青素提取工艺,在单因素试验基础上,选取乙醇浓度、提取温度、提取时间及料液比为自变量,花青素提取量为响应值,利用响应面分析法Box-Benhnken设计原理对紫象草花青素的提取工艺进行分析。结果表明:提取紫象草花青素工艺最佳条件为乙醇浓度50%(V∶V),提取温度35℃,提取时间60 min,料液比1∶20;在此条件下,紫象草花青素提取效果最好,提取量达到1.96 mg/g。说明利用响应面法优化紫象草花青素提取工艺是可行的。     

大孔吸附树脂分离纯化锁阳总黄酮效果初探

摘要：为分离纯化锁阳(Cynomorium songaricum)中总黄酮提取物,选择AB 8型大孔吸附树脂对锁阳总黄酮提取物进行分离纯化。结果显示,分离纯度达97.278%,比吸附量和比洗脱量分别达到81.933和53.164 mg/g。研究表明,AB 8型大孔吸附树脂对锁阳总黄酮吸附性能和解吸性能均好,具有较高的比吸附量、吸附速度和比洗脱量,且纯化能力极强,说明弱极性的树脂适合用于锁阳总黄酮的分离纯化。     

Plackett-Burman结合Box-Behnken响应面法优化赪桐中类叶升麻苷纯化工艺及其稳定性分析

为优化赪桐中类叶升麻苷的纯化工艺，并分析其稳定性，试验对8种不同型号的大孔树脂进行吸附-解吸能力比较，筛选出最优的大孔树脂型号；采用Plackett-Burman结合Box-Behnken响应面法，考察上样液浓度、上样液流速、洗脱液浓度等因素水平，优化赪桐中类叶升麻苷的纯化工艺。通过高效液相测定纯化物在不同温度、光照、pH、抗氧化剂等环境条件下类叶升麻苷的含量。结果表明：赪桐中类叶升麻苷最佳纯化工艺条件为ADS-7型号大孔吸附树脂、上样液浓度9.0 mg/mL、上样液流速3.0 m L/min、洗脱液浓度58%，验证试验中的类叶升麻苷回收率可达到76.04%，与所建模型预测接近；稳定性试验表明，温度越高、光照时间越久、pH越高、类叶升麻苷的稳定性越差。同时，添加抗氧化剂可以明显增强其稳定性。故纯化后的类叶升麻苷应在低温、避光、酸性环境中贮藏和使用，且可通过添加不同种抗氧化剂延长其使用期限。采用Plackett-Burman结合Box-Behnken响应面法优化赪桐中类叶升麻苷纯化工艺稳定可行，可为后续抗奶牛乳房炎中草药型饲料添加剂产品的研发及产品稳定性使用提供理论依据。     

大孔树脂纯化苜蓿总黄酮及纯化前后抗氧化能力比较

为了探讨苜蓿(Medicago sativa L.)总黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化特性,本研究以苜蓿干粉为试验材料,采用静态和动态试验,考察树脂种类、上样液pH值和体积、上样液总黄酮质量浓度对苜蓿总黄酮吸附和解吸附性能的影响,确定最佳纯化工艺条件,比较纯化后苜蓿总黄酮的抗氧化能力。结果表明,D101大孔树脂纯化苜蓿总黄酮效果较好,上样液pH值为3、体积为2 BV、质量浓度为0.8mg·mL^-1纯化参数条件下,吸附率和解析率分别为92.72%和75.99%,此条件下苜蓿总黄酮纯度为31.46%。纯化后的苜蓿总黄酮质量浓度为0.8mg·mL^-1时,对二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸、羟自由基和超氧自由基的清除率分别为92.46%,92.23%,87.79%和86.73%,羟自由基的清除能力高于Vc,其它3种自由基清除能力较Vc有所降低,纯化后苜蓿总黄酮抗氧化能力明显增强。