湖北地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳房炎的病原菌，鉴定细菌的耐药特征．为奶牛乳房炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份，经检测．其中3份为临床乳房炎样本，49份为隐性乳房炎。两地区隐性乳房炎的检出率分别为36．4％（20／55）与20％（29／145）。两地区乳房炎牛奶的细菌种类分布也各不同。其中武汉东西湖地区停乳链球菌的分离率最高，占33.3％（8／24）．而宜昌夷陵区以金黄色葡萄球菌分离率最高，占29％（9／31），其次为无乳链球菌，占25．8％（8／31）。从乳房炎牛奶中共分离到7种细菌共55株，其中金黄色葡萄球菌11株，表皮葡萄球菌10株，无乳链球菌10株，停乳链球菌14株，乳房链球菌2株，大肠埃希氏菌4株，克雷伯氏菌4株。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验，结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感．对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。     

奶牛隐性乳房炎致病菌的微生物学鉴定方法概述

引起奶牛乳房炎的病原微生物很多,包括细菌、病毒、真菌、支原体四大类,其中葡萄球菌、链球菌占病原菌的90%～95%.文章就金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、无乳链球菌(SAG)、犬链球菌(SC)、其他链球菌(OS)、大肠埃希菌(CO)、牛棒状杆菌(CB)、其他菌(OTH)的微生物学快速检测方法做一介绍.这些方法能够把葡萄球菌、链球菌和其他细菌鉴别开来,并能通过试验判定其具体类型,简便易行,费用较低,实用性强,适合牛场推广应用.     

关中奶山羊隐性乳房炎病原菌的分离鉴定

为摸清近年来陕西关中奶山羊隐性乳房炎病原菌种类,利用奶山羊隐性乳房炎诊断试剂盒对陕西富平关中奶山羊进行随机抽样检测,采集乳房炎阳性乳样进行细菌的分离与鉴定.结果显示,从364份阳性样品中共分离出337株细菌,其中凝固酶阴性葡萄球菌186株,占所分菌的55.2％;金黄色葡萄球菌50株,占所分菌的14.8％;乳房链球菌24株,占所分细菌的7.1％;猪链球菌9株,占所分细菌的2.7％;大肠埃希菌61株,占所分细菌的18.1％;其他细菌7株,占所分细菌的2.1％.表明凝固酶阴性葡萄球菌是引起奶山羊隐性乳房炎的主要病原菌,其次是大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌,链球菌.本研究结果为奶山羊乳房炎防治和鲜乳质量控制提供了重要的依据.     

新疆北部地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及其血细胞成分分析

对临床确诊为奶牛子宫内膜炎的75头荷斯坦奶牛进行子宫炎性分泌物采样,用常规方法进行细菌分离培养及鉴定,并对19头患子宫内膜炎奶牛和8头健康奶牛进行血细胞成分分析。结果共分离鉴定出细菌189株,其中金黄色葡萄球菌56株（29．62％）,大肠埃希氏菌52株（27．51％）,铜绿假单胞菌25株（13．23％）,蜡样芽孢杆菌22株（11．64％）,无乳链球菌17株（8．99％）,停乳链球菌10株（5．30％）,沙门氏菌3株（1．59％）,中间葡萄球菌2株（1．06％）,表皮葡萄球菌、普通变形杆菌各1株（0．53％）。血细胞成分分析结果表明,子宫内膜炎奶牛组与健康奶牛组相比,淋巴细胞（LYM）、粒细胞（GRAN）、平均血红蛋白含量（MCH）、血小板分布宽度（PDW）、血小板压积（PCT）等差异极显著（P〈0．01）,其余指标差异不显著（P〉0．05）。     

大熊猫阴道菌群调查

本试验首次对9只大熊猫阴道生物菌群进行分离鉴定。调查结果显示，大熊猫阴道主要细菌为乳杆菌（Lactobacillius）、消化链球菌（Peptostreptococcs）、大肠埃希氏菌（Escherichia coli）及表皮葡萄球菌（Stapholococcus epidermidis），其中优势菌为乳杆菌；并从其中4只大熊猫阴道分离出1株白地霉菌（Geotrichum candiolum）。     

金华市规模奶牛场隐性乳房炎主要病原菌的分离鉴定与药敏试验

对金华市规模奶牛场HMT强阳性的122个乳样进行主要细菌的分离鉴定，查出91个乳样有细菌，细菌检出率为74．59％。检出8种共104个分离菌株，其中主要为凝固酶阴性葡萄球菌53株，占51．0％；传染性细菌中，金黄色葡萄球菌23株，无乳链球菌14株，分别占22．1％和13．5％；环境性细菌感染9株占8．7％，其中链球菌属(除无乳之外)7株占6．7％，且以停乳链球菌为主(5．8％)；肠杆菌2株占1．9％，但未检出大肠杆菌；其他细菌5株占4．8％。由葡萄球菌、链球菌混合感染引起的乳房炎占12．09％。药敏试验结果表明，临床上较常使用的青霉素、链霉素、复方新诺明对该场隐性乳房炎的主要病原菌有很大的耐药性。     

多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用

参照GenBank发表的序列，在金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌16SrRNA与23SrRNA之间的区域设计了3对引物，参照念珠菌和隐球菌的18SrRNA的序列设计1对引物，建立了检测金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌4种乳腺炎主要致病菌的多重PCR方法。参照Skladny的方法制备模拟了细菌感染l临床标本。结果表明：本试验建立的多重PCR方法具有较好的特异性，多重PCR方法检测乳样中的金黄色葡萄球菌的细菌最小浓度为10^4CFU／mL，检测无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌的细菌最小浓度分别为10^4CFU／mL、10^3CFU／mL和10^3CFU／mL。通过对采自临床型乳腺炎（46个）和隐性乳腺炎（167个）动物共计213个乳样分别用传统细菌学培养法和多重PCR方法进行检测，多重PCR对金黄色葡萄球菌和酵母真菌的检测具有更高的检出率（P〈0．01），但该方法对无乳链球菌和停乳链球菌的检出率与培养法差异不显著（P〉0．05）。     

山西省奶牛乳腺炎病原菌调查研究

通过对山西省大同市南郊区、忻州市、太原小店区、朔州市、山阴县、怀仁县、清徐县等奶牛养殖场及养殖户的1 500头奶牛进行乳腺炎病原菌的流行病学调查,采集临床型乳房炎和隐性乳房炎病料共60份,经细菌分离培养鉴定,结果显示,共分离出9种159株细菌,其中葡萄球菌35株(22.0％),链球菌56株(35.2％),大肠杆菌34株(21 4％),洋葱伯克霍尔德菌等其他细菌共34株(21.4％).结果表明,葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌为奶牛乳腺炎的主要病原菌,占总菌数的78.6％.主要病原菌药敏试验结果表明,对常用药物氨苄青霉素、链霉素、阿米卡星低度敏感或不敏感,对强力霉素、林可霉素、头孢曲松钠、左氧氟沙星等药物中度或高度敏感.     

奶牛乳腺炎的细菌学研究

在对山东7个地区14个奶牛场临床型和隐性乳腺炎调查的基础上采集234头临床乳腺炎病牛乳样、241个隐性乳腺炎乳样并分别做了细菌学检查,结果表明：泌乳期临床型乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、酵母茼和棒状杆菌为主;干奶期临床型乳腺炎病原菌以大肠杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和酵母茼为主;隐性乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、酵母菌、假单胞菌和棒状杆菌为主;厌氧菌在隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎和干奶期乳腺炎乳样的检出率分别为5．82％,4．17％,10．16％;隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎细菌的共感染率较高,与泌乳期乳腺炎病原菌的差异极显著（P〈0．01）,隐性乳腺炎与干奶期乳腺炎病原菌共感染率差异不显著（P〉0．05）。     

链球菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌和大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用

根据NCBI上已收录的链球菌ef-tu基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、沙门菌hut基因和大肠杆菌23SrRNA基因的序列,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立了能够同时检测4种细菌混合感染的多重PCR诊断方法。特异性分析结果表明,应用该方法可以从链球菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌和大肠杆菌以及4种细菌的混合物中扩增出4条大小分别为197、278、495和652bp的特异性条带,其他对照组的检测结果均为阴性;敏感性分析表明,该方法对4种病原菌基因组DNA的检出量分别为链球菌25.6pg、金黄色葡萄球菌33.2pg、沙门菌35.7pg、大肠杆菌52.1pg;人工模拟感染样本检测表明,该方法能从混合感染的病料中特异地检测出4种病原菌。本试验建立的多重PCR方法具有特异性强,敏感度高,稳定性好的特点,可以有效的检测链球菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌和大肠杆菌的混合感染。     

司帕沙星体外抗菌活性的试验

应用试管二倍稀释法测定司帕沙星对大肠埃希氏菌、沙门菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和禽败血霉形体等病原微生物的最小抑菌浓度（MIC)和最小杀菌浓度(MBC)，并与4种氟喹诺酮药物及3种其他抗菌药物相比较。结果表明，司帕沙星对大肠埃希氏菌、沙门菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和禽败血霉形体均有良好的体外抗菌活性，优于其他对照药物。     

奶牛子宫内膜炎致病菌的分离鉴定及耐药性分析

本试验通过对四个大型奶牛场的60头子宫内膜炎患牛进行调查、采样，并用常规的方法对细菌进行分离、培养、鉴定。共分离到细菌59株，其中分离率最高的是埃希氏大肠杆菌14株（23．7％）、葡萄球菌属12株（20.3％）、链球菌属7株（11．8％）（其中溶血性链球菌2株）、棒状杆菌属7株（11．8％）、双球菌5株（8．5%）、肠杆菌属6株（10．16％）、沙门氏菌3株（5．1％）、克雷伯氏杆菌属2株（3．4％），而且分离到了梭菌属3株（严格厌氧菌），药敏试验分析显示，大多数致病菌对喹诺酮类药物、阿莫西林及氨苄青霉素等药物耐药率较高．而对头孢菌素类药物和氨基糖苷类药物耐药率则较低。     

奶牛临床型和隐性型乳房炎的细菌学分析

对１０２例临床型和１８７例隐性型乳房炎病例的奶样进行了细菌学分析。临床型病例中，８５．３％的乳样检出了细菌，检出率高于隐性乳房炎病例（７２．２％）。传染性病原，包括无乳链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅ），金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）和牛棒状杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｏｖｉｓ），在临床型病例中的检出率是４１．２％，隐性型病例中的检出率是３９．５％，是检出率最高的一类致病菌。临床型乳房炎的另一类重要致病菌是环境性细菌。本研究检出的这类致病菌有乳房链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｕｂｅｒｉｓ），粪链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ），牛链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｂｏｖｉｓ），埃希氏大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）和变形杆菌（Ｐｒｏｔｅｕｓｓｐｐ．），检出率是２０．６％，而隐性乳房炎中的检出率只有２．２％。凝固酶阴性的葡萄球菌（Ｃｏａｇｕｌａｓｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ，ＣＮＳ）在两类乳房炎中的检出率分别是１４．７％和１３．４％。此外还检出了一些乳区有两种或两种以上的细菌混合感染。     

奶牛子宫内膜炎常见病原菌药物敏感试验

作者就兰州地区三个奶牛场的６８４头奶牛子宫内膜炎病例中分离出的５种主要病原菌，即化脓链球菌、乳链球菌、大肠艾希氏菌、绿脓杆菌、金黄我邓葡萄球菌等对青霉素、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、痢菌净、痢特灵、洗必泰以及中药制剂进行了药敏试验。试验结果表明，化脓性链球菌以上述６种药物敏感性均低（〈３１．５８％）；乳链球菌对痢特灵的高敏感菌株为４７．０６％；大肠艾希氏菌对庆大霉素和痢菌净的高敏感菌株为９０％，其     

健康奶牛产道内正常菌群的研究

本试验从山东省不同奶牛场筛选出60头健康状况良好的奶牛，按试验要求分三组，第一组为20头8～15月龄的未配种的青年奶牛，第二组为20头处于干奶期（围产期）的奶牛，第三组为20头产后一个月的奶牛。采用常规细菌培养、分离、鉴定的方法从产道分离到细菌150株，其中乳酸杆菌46（30．70／4）株、表皮葡萄球菌39（26％）株、无乳链球菌21（14％）株、大肠杆菌23（15．3％）株、芽孢杆菌8（5．3％）株、棒状杆菌5（3．3％）株、念珠菌8（5．3％）株。比较结果显示，乳酸杆菌为正常奶牛产道内的主要寄生菌，其次是表皮葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌。但是未配青年奶牛的阴道内，乳酸杆菌的分离率并不高。试验发现，奶牛阴道内的寄生菌一般为2～3种。     

奶牛隐性乳房炎的病原检测与小白鼠致病性研究

本研究以新疆乌鲁木齐地区的2个奶牛场隐性乳房炎患牛为试验对象,共分离鉴定出21种91株引起奶牛乳房炎的主要病原菌,其中葡萄球菌28株（30.78%）,链球菌21株（23.07%）,杆菌25株（27.48%）,其他细菌17株（18.67%）。对主要病原菌通过动物试验确定致病力较强的菌为金黄色葡萄球菌、克雷伯氏菌和大肠杆菌。同时对17大类主要病原菌共30种药物的药敏试验结果表明,在奶牛隐性乳房炎中应用较多的青霉素、四环素等抗生素对常见致病菌几乎无效,而左氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻肟、阿米卡星则显示出较好的抑菌作用。     

奶牛隐性乳房炎致病菌的微生物学鉴定

引起奶牛乳房炎的病原微生物很多,包括细菌、病毒、真菌、霉菌体四大类。葡萄球菌、链球菌占了病原菌的90%～95%。本文就金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、无乳链球菌(SAG)、犬链球菌(SC)、其它链球菌(OS)、大肠杆菌(CO)、牛棒状杆菌(CB)、其它菌(OTH)的微生物学快速检测方法做了介绍。该方法能够把葡萄球菌、链球菌和其它细菌鉴别开来,并能通过试验判定其具体类型。该方法简便易行,费用较低,实用性强,适合奶牛场推广应用。     

牛乳房炎的生物学防治研究简介

1细菌素 细菌素是通过分子生物学技术生产出来的天然细菌蛋白质，能杀死一些细菌，国外已用于治疗葡萄球菌病和乳头药浴，其中溶葡萄球菌素、链球菌素也已用分子生物学技术获得，不久可能用于临床。由乳酸菌产生的广谱细菌素为代替抗生素治疗乳房炎提供了一种新的选择。这种天然物质有非常独特的抑菌作用，并且能够加在饲料中做预防用药。其中乳酸链球菌肽（nisin）由乳酸链球菌产生，具有广泛的抗革兰氏阳性菌的作用，包括乳房炎病原体。     

华北东北部分地区奶牛乳房炎病原学调查

本研究对华北、东北部分地区奶牛乳房炎的主要病原菌进行了病原学调查，将采集的乳样进行了细菌的分离、纯化和生理生化鉴定，试验结果表明，华北、东北地区导致奶牛乳房炎的病原菌主要有链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌四种菌，四种菌的检出率分别为87．5％，85％，62．5％和15％。     

黑龙江省鸡西地区奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定及耐药性研究

从黑龙江省鸡西地区部分奶牛场选取25头临床诊断为子宫内膜炎的患牛,并从这25头患牛体内分离得到39株细菌,其中大肠杆菌17株、葡萄球菌13株、链球菌5株、其他菌4株。耐药性试验表明,大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌都对头孢曲松钠和头孢噻呋钠敏感,对庆大霉素比较敏感,对其他几种常用抗生素存在不同程度耐药性。