甜玉米种子携带真菌与种子活力关系分析

【目的】明确甜玉米种子携带真菌种类，探讨真菌与种子活力的相关性。【方法】采用洗涤检测法和PDA平板法对市售7个甜玉米品种和2个普通玉米品种进行种子携带真菌检测，同时以滤纸卷法对种子活力进行测定。【结果】供试种子外部带菌量差异显著，主要菌群为镰刀菌属（Fusarium spp.）、青霉属 ( Penicillium spp.)、曲霉属(Aspergillus spp.)和枝孢属(Cladosporium sp.)；种子内部带菌率在品种间差异显著，以甜玉米442最高，达到99.3%，普通玉米农大108最低，仅为4.4%；甜玉米种子内部寄藏优势菌群为镰刀菌属、青霉属、曲霉属、链格孢属(Alternaria spp.)、平脐蠕孢属(Bipolaris spp.)和黑孢属(Nigrospora sp.)，其中甜玉米种子内部寄藏平脐蠕孢属真菌为首次报道。除甜单22外，其余6个品种的甜玉米种子内部总体带菌率和带镰刀菌率均显著高于普通玉米品种。甜玉米种子多项活力指标显著低于普通玉米种子。【结论】种子内部带镰刀菌率与种子活力相关性分析表明，种子内部寄藏镰刀菌是影响甜玉米种子活力的重要因素之一。     

大黄种子带菌检测及药剂消毒处理研究

采用平皿法对青海、甘肃、四川等地的大黄种子进行了带菌检测和分离鉴定, 并研究了3种杀菌剂对大黄种子带菌的消毒处理效果. 结果表明, 大黄种子携带的主要真菌类群为短梗梭孢霉属(Fusoma)、束丝菌属(Ozonium)和青霉属(Penicillium). 在外部携带的真菌中, 除重庆的4-YY和四川的8-LT种子携带的青霉属真菌占优势外, 其余种子都是短梗梭孢霉属真菌占优势. 在内部携带的真菌中, 除重庆的4-YY的优势菌群为短梗梭孢霉属外, 其余的种子都是束丝菌属真菌占优势. 白方甲托对不同批次大黄种子所携带的真菌均具有较好的消毒效果.     

大黄种子带菌检测及药剂消毒处理研究

采用平皿法对青海、甘肃、四川等地的大黄种子进行了带菌检测和分离鉴定,并研究了3种杀菌剂对大黄种子带菌的消毒处理效果．结果表明,大黄种子携带的主要真菌类群为短梗梭孢霉属（Fusoma）、束丝菌属（Ozonium）和青霉属（Penicillium）．在外部携带的真菌中,除重庆的4-YY和四川的8-LT种子携带的青霉属真菌占优势外,其余种子都是短梗梭孢霉属真菌占优势．在内部携带的真菌中,除重庆的4-YY的优势菌群为短梗梭孢霉属外,其余的种子都是束丝菌属真菌占优势．白方甲托对不同批次大黄种子所携带的真菌均具有较好的消毒效果．     

五味子种苗带菌初步检测

通过洗涤法对五味子种子进行表面带菌检测,发现种子表面带有大量的青霉菌;采用平皿培养的方法对种子内部真菌进行检测,发现种皮携带的真菌有青霉菌、曲霉菌;种胚所带真菌主要为青霉菌、镰刀菌、曲霉菌、链格孢、根足霉。对五味子幼苗茎基部携带的真菌分离培养,发现此部位多带镰刀菌、链格孢和其他真菌。     

三七种子带菌检测及致病菌鉴定研究

【目的】检测三七种子表面和内部寄藏的带菌量和真菌种类,明确三七通过种子携带传播的主要病原菌。【方法】采用PDA平板法对采自三七主产区云南省文山州和红河州的15份种子样品进行种子表面和内部寄藏真菌检测,并通过形态学和分子生物学鉴定以及致病力测定明确三七种子传带的病原菌情况。【结果】15份三七种子样品中,种子表面携带的主要真菌为菌核菌(Sclerotinia sclerotiorum)、镰刀菌属(Fusarium)、灰霉菌属(Botrytis)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)真菌;种子内部寄藏的主要真菌为菌核菌、镰刀菌属和拟盘多毛孢属真菌。致病力测定结果表明:三七种子主要携带的致病真菌有镰刀菌属、链格孢属(Alternaria)和丛赤壳属(Bionectria);其中,带菌率最高且致病性最强的是镰刀菌属的滕仓赤霉复合种(Gibberella intermedia)、三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)、串珠镰刀菌(Gibberella moniliformis)和木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)。【结论】本研究明确了三七种子传带的主要病原菌为镰刀菌和链格孢菌,为三七种子处理提供了理论支撑。     

云南烟草种子内部真菌带菌检测

采用平板培养测定的方法分别对云南省的8个烟草种子生产基地的烟草种子内部进行带菌检测和分离鉴定。结果表明,8个样品中,样品带菌检出率高达87.5%;除楚雄烟草种子生产基地外其他基地的烟草种子都存在不同程度的带菌,带菌率在0%-16.25%。鉴定引起种子内部携带的真菌发现烟草种子内部携带的真菌有链格孢菌（Alternaria alternaaata)、镰刀菌（Fusairium spp)、腐霉（Pythium spp)、芽枝孢菌（Cladosporium spp),优势菌群主要为链格孢菌,样品检出率为87.5%,在检测培养的真菌物中出现的频率为56.25%-100%。     

玉米种子内部带菌检测的初步研究

本研究采用PDA培养基法和滤纸培养基法对龙源3号、豫玉22号、酒单3号、沈单16号、金穗3号、金穗10号、Lima28号共7个玉米品种进行了种内带菌检测。结果表明:供试种子内部携带的真菌主要为青霉属(Penicillium spp.)、根霉菌属(Rhizopus spp.)、镰刀菌属(Fusarium spp.)和链格孢菌属(Alternaria spp.);携带的细菌为一种G+。种子内部带菌率在品种间差异不是很显著,豫玉22号最高为93.33%,沈单16号和酒单3号最低为66.67%。     

生菜种传真菌的初步研究

采用洗涤检验法和PDA培养基法对来自北京地区的16个生菜品种进行了种传真菌检测和优势菌群的初步鉴定。结果表明:干燥种子平均带菌率高达95.2%,携带的优势菌群依次分别为链格孢属(Alternaria spp.)真菌82.8%、曲霉属(Aspergillus spp.)真菌13.7%、青霉属(Penicillium spp.)真菌4.4%和镰刀属(Fusarium spp.)真菌1.8%;无菌水洗涤后种子平均带菌率为89.1%,所携带的优势菌群依次分别为链格孢属真菌73.2%、曲霉属真菌17.1%、青霉属真菌7.2%和镰刀属真菌2.5%;1% NaClO处理后的种子带菌率平均高达72.2%,优势菌群依次分别为链格孢属真菌75.6%、青霉属真菌10.8%和镰刀属真菌5.2%。     

黄淮海夏玉米区玉米籽粒带菌检测分析

【目的】明确黄淮海夏玉米区玉米籽粒带菌量,为玉米安全生产、储藏加工以及检疫提供参考依据。【方法】分别于玉米乳熟期及完熟期,采集黄淮海夏玉米区4个省(河北、河南、山东、安徽)90个市/县的玉米果穗,每个市/县采集表面未发生病症且果穗饱满的玉米穗4个,共采集720个样本。对所有样本进行籽粒外部及内部带菌量及带菌种类的检测,外部检测采用洗涤检测法,通过统计菌落总数与稀释倍数,计算籽粒表面的孢子负荷量及分离到的各菌属的分离比例;内部检测采用PDA平板法,对籽粒外部检测过的10个籽粒消毒后置于PDA平板上进行培养,统计每个籽粒带菌情况,计算籽粒带菌率及各菌属的分离频率。并且对籽粒内部分离频率较大的菌群进行形态学和分子鉴定。【结果】供试样本带菌量较大,乳熟期籽粒孢子负荷量在0—1 886个/粒,均值为439个/粒,籽粒带菌率在0—65.0%,均值为23.6%;完熟期籽粒孢子负荷量在18—2 658个/粒,均值为942个/粒,籽粒带菌率在10.0%—100.0%,均值为59.6%。完熟期带菌量大于乳熟期,但部分地区乳熟期带菌量仍较大。不同地区玉米籽粒带菌量存在差异,河南省的玉米籽粒带菌量较大,安徽省带菌量最少,河北省与山东省居中且差异不明显。玉米籽粒内部以及外部均携带的真菌类群有镰孢菌(Fusarium spp.)、青霉菌(Penicillium spp.)、曲霉菌(Aspergillus spp.)、链格孢菌(Alternaria spp.)、木霉菌(Trichoderma spp.)、根霉菌(Rhizopus spp.)、蠕孢菌(Hel-minthosporium spp.)、毛霉菌(Mucor spp.)。乳熟期籽粒外部和内部镰孢菌的分离比例分别为59.1%和36.1%,说明玉米在乳熟期时即有大量镰孢菌侵入;籽粒外部青霉菌和曲霉菌的分离比例分别为8.9%与0.7%,籽粒内部的分离频率分别为6.0%与1.9%,说明乳熟期青霉菌与曲霉菌也已经开始侵染玉米果穗。完熟期籽粒外部与内部镰孢菌的分离比例分别为71.9%和58.5%,籽粒外部青霉菌和曲霉菌的分离比例分别为17.0%和0.9%,籽粒内部分离频率分别为9.3%和2.6%,说明镰孢菌、青霉菌、曲霉菌为本研究黄淮海夏玉米区玉米籽粒携带的主要真菌。形态与分子鉴定结果显示,镰孢菌属中轮枝镰孢(F.verticillioides)的分离频率为29.7%,层出镰孢(F.proliferatum)的分离频率为25.9%,禾谷镰孢(F.graminearum)的分离频率为1.3%,表明轮枝镰孢为优势菌;青霉菌主要分离到绳状青霉(P.funiculosum)和草酸青霉(P.oxalicum),分离频率分别为5.0%和3.6%;曲霉菌主要为黄曲霉(A.flavus)和黑曲霉(A.niger),分离频率分别为1.4%和1.2%。【结论】表面无症状的玉米籽粒在乳熟期及完熟期均携带大量病原菌,且完熟期带菌量大于乳熟期;镰孢菌在黄淮海夏玉米区的分离频率最大,轮枝镰孢为当地玉米籽粒携带的优势真菌。     

胡杨和灰叶胡杨不同器官寄藏的可培养微生物种类研究

采用洗涤法和平皿检测等方法,研究了胡杨和灰叶胡杨不同器官寄藏的可培养微生物种类。结果显示,胡杨种子内部和外部带菌量显著高于灰叶胡杨;灰叶胡杨的芽、叶柄及枝条带菌量均高于胡杨,其中叶柄、枝条上部和中部带菌量显著高于胡杨;胡杨和灰叶胡杨枝条带菌率由低到高依次为:上部中部下部,且两个物种枝条下部带菌率均达100%。从胡杨及灰叶胡杨种子、芽、叶柄及枝条各器官分离到可培养的真菌7株、细菌2株;经形态学及分子生物学方法鉴定,分别为Alternaripp.(链格孢属,3种)、Aspergillus spp.(曲霉属,2种)、Nigrospora sp.(黑孢霉属)、Epicoccum sp.(附球菌属)、Stenotrophomonas spp.(嗜麦芽窄食单胞菌属,2种),其中黑孢霉属和附球菌属真菌系胡杨和灰叶胡杨内生菌首次报道;链格孢属、曲霉属真菌及嗜麦芽窄食单胞菌属细菌为胡杨和灰叶胡杨种子外部携带可培养微生物首次报道。     

万寿菊种子带菌检测及种子消毒处理研究

采用PDA平板分离培养检验法对5个品种的万寿菊种子表面进行带菌检测,并测定5种杀菌剂和2种温汤浸种方法对种子的消毒处理效果.结果表明,万寿菊种子表面带菌率在6.0%~85.0%之间,携带真菌的优势菌群主要是链格孢属真菌(Alternariaspp.),其分离频率最高达60.16%;其次为镰刀菌属(Fusariumspp.),分离频率为20.76%;青霉属(Penicilliumspp.)分离频率为8.76%,黑根霉属(Rhizopusspp.)分离频率为3.08%、曲霉属(Aspergillusspp.)分离频率为2.08%,毛霉属(Mucorspp.)分离频率为1.40%,同时还分离到细菌,分离频率为6.92%,同一品种各菌群分离频率差异显著;用0.1%AgNO3和55℃温汤浸种可以杀死种子表面所有真菌,50℃温汤浸种和50%扑海因WP750倍液的消毒效果也明显高于其它处理,是较理想的种子消毒方法.     

国家库保存小麦种质种传真菌检测

【目的】了解国家种质库存小麦的主要寄藏真菌，评价不同地域来源的小麦种质健康状况。【方法】运用吸水纸法、平皿测定法和洗涤法检测了共1465份库存小麦种质。【结果】在来自陕西、河北和青海的712份小麦种质中，通过吸水纸法共检测到17属近40种真菌，其中陕西小麦种质上的优势菌群主要是交链孢（Alternaria）、根霉属（Rhizopus）、青霉属（Penicillium）、曲霉属（Xspergillus）、离蠕孢属（Bipolaris）、芽枝霉属（Cladosporium）、膝葡孢属（Gonatobotrys）和毛壳霉属（Chaetomium）等，河北区小麦的优势菌群为交链孢、根霉属、青霉属、曲霉属、离蠕孢属、芽枝霉属和镰刀菌等，青海区小麦种子携带的真菌主要是交链孢、根霉属、离蠕孢属、芽枝霉属和聚端孢属（Trichothecium）等；在供试材料中检测到对种子存活力具有严重破坏作用的病原菌有串珠镰刀菌（Fusarium mortiliforme）、节状离蠕孢（Bipolaris nodulosa）、草本芽枝霉（Cladosporium herbarum）等。通过平皿测定法在353份陕西小麦材料中检测到16属25种真菌，较为常见的几类真菌是交链孢属、曲霉属、离蠕孢属、膝葡孢属（Gonatobotrys）、青霉属、镰刀菌等。运用洗涤法在400份小麦种质中检出6份带有小麦条黑粉菌（Ustjlago tritici）的材料，在陕西小麦材料中占1．3％，河北材料中占2．0％。【结论】在小麦种质中共检测到19个属真菌，大部分为腐生菌，少数属弱寄生菌，对种子存活力具有不同程度的影响。     

草莓根腐病病原真菌的分离纯化及ITS分子鉴定

为探索草莓根腐病病株及根际土壤的微生物种类,本文采用稀释涂布平板法和平板划线法对患病草莓根际土壤以及根茎进行真菌分离,并利用ITS基因序列进行分子鉴定。结果表明,从根腐病草莓病株中共分离得到12种不同的真菌,分别属于孢球拖霉属(Gongronella sp.)、棒孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis clavispora)、织球壳菌属(Plectosphaerella sp.)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)、青霉属(Penicillium sp.)和梭孢壳属(Thielavia sp.),其中孢球拖霉属(Gongronella sp.)、盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)和梭孢壳属(Thielavia sp.)为首次在草莓根腐病植株中发现。本文的研究结果可为草莓土传病害的研究及防治提供参考。     

谷子种衣剂包衣方案的探讨

通过检测张杂谷3号谷种表面携带的真菌情况,设计了几种种衣剂包衣方案,并对其效果进行了比较。结果表明,谷种表面主要携带的真菌种类为茎点霉属(Phoma sp.)、青霉属(Penicillium sp.)、平脐蠕孢属(Bipolaris sp.)、镰孢霉属(Fusarium sp.)和木霉属(Trichoderma sp.);根据谷种表面带菌情况设计的种衣剂包衣方案中,35%精甲霜灵+2.5%咯菌腈+3%苯醚甲环唑处理后的种子可以有效降低谷种表面带菌率,尤其可以有效降低各种致病菌的比例,且对谷种萌发和幼苗生长的影响不显著,是效果最好的种衣剂处理。     

种子带菌作为玉米弯孢菌叶斑病初侵染源的研究

[目的]对种子带菌作为玉米弯孢菌叶斑病的初侵染源进行研究,为生产上防治该病提供理论依据。[方法]采用玻片萌发法和组织分离法测定种子外部带菌、内部带菌的存活力;采用沙培法在室内检测种子带菌对幼苗的侵染;应用田间培养法测定种子带菌对玉米的侵染。[结果]玉米种子所带弯孢菌孢子和菌丝可以越冬成活,种子内部带菌影响种子萌发,种子外部带菌不影响种子萌发;种子内外带菌均能侵染玉米幼苗的胚根和胚芽。[结论]玉米种子带弯孢菌孢子和菌丝可以越冬并侵染幼苗,使幼苗长势衰弱。     

郁金香种球腐烂的真菌病原鉴定

经柯赫氏法则对引起郁金香种球腐烂的主要真菌病原物进行鉴定得出,在天津地区引起郁金香种球腐烂的主要真菌性病原物有;腐霉属(Pythium)、根霉属(Rhizopus)、木霉属(Trichoderma)、丛梗孢属(Momilia)、葡萄孢属(Botrytis)、镰孢霉属(Fusarium)、座坚壳属(Rosellinia)、链格孢属(Siodesnium)和青霉属(Penicillium)等9个属.其中腐霉属分离率为30.95%,根毒属分离率为7.14%,木霉属分离率为4.76%,丛梗孢属分离率为14.28%,葡萄孢属分离率为4.76%,镰孢霉属分离率为11.90%,座坚壳属分离率为7.14%,链格孢属分离率为7.14%,青霉属分离率为11.90%.     

22份菜豆(Phaseolus vulgaris L.)种质健康研究

通过使用干检和吸水纸培养 2种方法 ,对种皮为无色素组和有色素组的 2 2份菜豆种质进行了健康检测研究。结果表明 ,肉眼可检测菜豆种子外观病害症状为虫蛀、皱缩、畸形和种皮变色。吸水纸培养检测发现在 2 2份材料中共携带可知真菌 11种 ,互隔交链孢霉 (Alternariaalternata) ,镰刀菌属 (Fusariumspp .) ,青霉属 (Penicilliumspp .) ,根霉属 (Rhizopusspp .)存在于绝大多数的供试材料中。种皮有色的种子真菌携带种类和感染百分率均低于白色种皮的种子。种子畸形和皱缩严重影响种子的发芽成苗能力。肉眼检测菜豆种子外观健康结果可作为有效指标来判定种质的健康状况。     

香蕉吸芽苗内生真菌及其根际土壤真菌的鉴定

从香蕉吸芽苗的根、叶等组织内分离到11个属的真菌:曲霉属(Aspergillus)、炭疽菌属(Colletotrichum)、镰孢属(Fu-sarium)、胶帚霉属(Gliocladium)、木霉属(Trichoderma)、球二孢属(Botryodiplodia)、丝核菌属(Rhizoctonia)、单格孢属(Ulo-cladium)、散子囊菌属(Eurotium)、直双孢属(D idymaria)和丝葚霉属(Papuladpora)。炭疽菌属为优势菌,占内生真菌分离物总数的50%。从香蕉吸芽苗根际土壤中分离到10个属的真菌:曲霉属、镰孢属、木霉属、丝核菌属、毛霉属(Mucor)、青霉属(Penicillium)、拟青霉属(Paecilomyces)、帚霉属(Scopulariopsis)、球壳孢属(Sphaeropsis)和盾壳霉属(Coniothyrium)。拟青霉属、青霉属和毛霉属为优势菌,分别占根际土壤真菌分离物总数的39.7%、23.8%和17.5%。     

多菌灵对食用菌生产中常见污染菌影响

在木屑和PDA两种平板培养基中以木霉、青霉1、青霉2、黑曲霉、链孢霉为试验材料,研究了不同浓度的多菌灵(蓝丰)对以上食用菌生产中常见污染菌的影响。结果表明:木屑培养基上多菌灵抑制木霉、链孢霉的有效浓度为0.05%,抑制黑曲霉的有效浓度为0.2%,对青霉无抑制作用;PDA培养基上多菌灵对木霉、黑曲霉、链孢霉抑制作用较强,对青霉1、青霉2均有一定抑制作用。表明不同浓度的多菌灵对食用菌污染菌的抑制作用不同,多菌灵对木霉、黑曲霉、链孢霉有较好的防治效果,对青霉防治无效,对于同种污染菌在不同培养基上抑制效果有差异性。     

根腐病草莓及根系土壤真菌的分离纯化及ITS分子鉴定

为探索根腐病草莓及根系土壤的微生物种类,本文采用稀释涂布平板法和平板划线法对患病草莓根系土壤以及草莓根茎进行真菌分离,并利用ITS基因序列进行分子鉴定。结果表明,从根腐病草莓病株中共分离得到12种不同的真菌,经ITS序列同源性分析,这12种真菌分别属于孢球拖霉属(Gongronella sp.)、黄瓜萎蔫病菌(Plectosphaerella sp.)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis clavispora)、织球壳菌属(Plectosphaerella sp.)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)、青霉属(Penicillium sp.)和梭孢壳属/草根霉属(Thielavia sp.)八个真菌种属。其中孢球拖霉属(Gongronella sp.)、盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)和梭孢壳属/草根霉属(Thielavia sp.)为首次在草莓根腐病植株中发现。本文的研究结果为草莓土传疾病根腐病的研究及防治提供了参考资料。