异源三倍体百合为母本的杂交后代GISH分析

百合异源三倍体是渐渗育种的常用亲本。为了评价异源三倍体‘Royal Lace’的育种价值,采用基因组原位杂交技术分析了‘Royal Lace’及其与亚洲百合‘Pollyanna’的6个杂种后代的基因组组成。研究结果显示：‘Royal Lace’含有24条亚洲百合染色体和12条麝香百合染色体,为异源三倍体,包括1条亚洲百合重组染色体和1条麝香百合重组染色体。6个杂种后代均为非整倍体,染色体数27 ~ 32,不同杂种后代的重组染色体及重组位点存在差异,杂种后代基因组组成的不同是后代表型变异的遗传基础,因此,‘Royal Lace’是百合渐渗育种及非整倍性育种的良好亲本。     

东方百合“Siberia”基因组DNA提取方法比较研究

以东方百合"Siberia"为试材,研究比较了十二烷基硫酸钠(SDS)法、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)法及改良的SDS法、CTAB法对提取百合不同部位基因组DNA的效果。结果表明:利用改良的CTAB法提取百合不同部位的DNA效果最好,点样孔无杂质,且没有拖尾现象;通过增加抽提次数以及改用3MNaAc进行沉淀可以提高百合鳞茎和根部DNA的提取率,降低提取DNA的污染程度。     

百合斑驳病毒靖宇分离物全基因组序列测定与进化分析

以采自吉林省白山市靖宇县的野生百合感病叶片为试材，采用小RNA深度测序法检测到1株百合斑驳病毒(Lily mottle virus,LMoV),采用分段克隆方法，对LMoV靖宇分离物(LMoV-JY)的全基因组进行测定并分析，以期对吉林省百合病毒病的检测和防控提供参考依据。结果表明：LMoV-JY基因组大小为9 648个核苷酸(nt)序列(GenBank登录号MT795719),该核苷酸序列在第154～9 444位存在1个大的开放阅读框(ORF),编码1个多聚蛋白(分子量351.46 kD)。LMoV-JY与GenBank中登录的其他LMoV分离物的全基因组核苷酸序列比较，其一致性为82.82%～97.85%,在氨基酸水平上的一致性为92.96%～98.64%,其中与百合斑驳病毒大连分离物LMoV-DL(HM222521)的一致性在该2种水平上均为最高。对比LMoV-JY外壳蛋白与其他54个分离物的氨基酸序列，发现可将LMoV分离物分为2个类群。     

适于ISSR-PCR扩增的百合基因组DNA的提取

为了方便稳定地获得适合于ISSR-PCR扩增的高质量百合基因组DNA,以卷丹百合为试材,在传统的CTAB法基础上进行了改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法.结果表明:用改良CTAB法提取的百合基因组DNA电泳条带清晰,无降解现象,OD260/OD280值在1.7～2.0之间,用于ISSR-PCR扩增时其稳定性和可重复性都很好,说明DNA纯度和产率完全满足百合ISSR-PCR扩增分析的要求,为百合属植物遗传多样性分析和品种分子鉴别等研究奠定了基础.     

45S rDNA在4种百合属植物染色体上的物理定位

 利用荧光原位杂交的技术将45S rDNA在麝香百合(Lilium longiflorum),柠檬色百合(L. leichtlinii), 天香百合(L. auratum)和豹纹百合(L. pardalinum)的染色体上进行了定位。结果表明：45S rDNA在这4种植物中都分布于染色体的着丝点附近,但其位点数量、所在的染色体和信号的强弱有很大的变化。其中,麝香百合和豹纹百合中各有3对染色体在着丝点附近有45S rDNA的信号,柠檬色百合和天香百合中各有4对染色体在着丝点附近有45S rDNA的信号。但是天香百合的两对中部染色体的着丝点附近都有45S rDNA的信号,柠檬色百合的两对中部染色体中只有一条有45S rDNA的信号,而麝香百合和豹纹百合中没有任何一条有45S rDNA的信号。由于这4种百合在百合属中分别属于不同组,其45S rDNA的位点数量、所在染色体和信号强弱的变化为这种分组的合理性提供了一些分子生物学的证据。     

植物染色体分子核型技术研究进展

近年来,荧光原位杂交及荧光分带等细胞遗传学技术的发展,提供了更多的染色体信息,使科研工作者能从更精细水平上对植物进行核型分析,更好地分辨基因组内各条非同源染色体,以及进行分化程度小的基因组间的比较。这种核型分析技术为研究染色体行为和变异,单个基因及转基因在基因组内的定位等开辟了新的途径。现在阐述以多色荧光原位杂交(mFISH)、基因组原位杂交(GISH)、染色体绘染(chromosome painting,CP)等荧光原位杂交为基础的染色体分子核型基础上,分析了荧光分带技术(fluorochrome banding)在分子核型中的应用,并对染色体分子核型技术在植物基因组功能研究领域的应用进行了展望。     

3种基质对百合鳞片扦插繁殖的影响

以东方百合甜梦、粉色天使、粉色印迹和亚洲百合进口种球迷恋为试材,研究基质对百合鳞片扦插繁殖的影响.结果表明：3种基质均能显著提高百合鳞片扦插繁殖的生长势、提高繁殖系数.其中以亚洲百合迷恋表现最好,用泥炭作扦插基质效果好.     

菜薹与萝卜附加系回交后代外源萝卜染色体的FISH 检测

采用荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH），以萝卜基因组特异序列pURsN 作探针，分别与19 份菜薹与萝卜附加系回交后代BC4A3d 进行杂交，检测回交后代中外源萝卜染色体的存在情况。结果显示：只有1 份材料BC4A3d-45 没有杂交信号，其他18 份材料均得到1 个杂交信号，表明除了BC4A3d-45 没有附加外源萝卜染色体之外，其余18 份材料均含有1 条外源萝卜染色体；该结果与分子标记鉴定结果一致。     

亚洲百合与青岛百合杂交及其 FISH 快速鉴定

 利用切柱头授粉和胚抢救技术获得亚洲百合‘Petit Brigitte’× 青岛百合的14 个杂交后代,以45S rDNA 为探针对亲本和其中4 个后代进行了荧光原位杂交（FISH）分析,结果表明,亲本和后代都为二倍体（2n = 2x = 24）;‘Petit Brigitte’有10 个45S rDNA 位点,分别位于1、2、4、5 和7 号染色体上;青岛百合有8 个45S rDNA 位点,分别位于3、4、5 和10 号染色体上;4 个杂种后代有9 个45S rDNA位点,分别源于‘Petit Brigitte’和青岛百合。     

施肥对三种切花百合钾素吸收动态的影响

通过盆栽土培试验方法,研究了施肥与不施肥(对照)条件下东方百合、麝香百合和亚洲百合3个切花百合品种的钾素吸收规律.结果表明:随着生育期进展,各品种的切花百合地上部各器官含钾量均逐渐降低,地下部器官根和鳞茎则依品种和施肥的不同而表现出差异.鳞茎中的钾素支撑切花百合的前期地上部生长的钾素需求,经历的时间3个品种基本一致,均为47 d.钾素快速吸收期品种之间存在差异,东方百合由花芽分化至切花,历时81 d;麝香百合由花芽分化至切花,历时50 d;由亚洲百合10月6日至切花,历时25 d.施肥均提高了3个品种后期整株的钾积累量,但出现时期因品种而不同,东方百合最早、麝香百合次之、亚洲百合最迟.     

不同施肥品种对百合生长发育的影响

采用田间试验的方法,研究了不同肥料对百合生长性状的影响。结果表明:含硫肥料能够促进百合的生长发育,提高品质,具有一定的抗病能力;含氯化肥不适合百合生长发育;含硫肥料分次施用与一次施肥效果基本一致。     

长白山百合的离体快繁技术研究

为明确长白山百合离体组织培养及植株的再生能力,对长白山百合不同部位的组织进行了离体培养,并进行了不同培养激素的对比试验.结果表明:长白山百合外中部鳞片小鳞茎形成率明显高于内部,再生小鳞茎的出现部位主要位于鳞片基部;在附加不同激素水平及其配比的MS培养基上培养,长白山百合以MS(植物组织培养基本培养基)+0.5mg/L BA(细胞分裂素)+0.1 mg/L NAA(萘乙酸)+3%蔗糖和MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖等2个培养基生长最好.     

九个百合品种在陕西关中地区的引种试验

以从智利引进的Siberia等7个东方百合品种和Manissa等2个OT杂交系品种为试材,研究9个百合品种在陕西关中地区的生长习性,观察其在陕西关中地区物候期、生长发育规律、切花性状及再繁品质。结果表明：百合各品种的物候期、生长发育规律、切花质量、种球性状均有显著差异,东方系中Siberia、Sorbonne和OT杂交系Manissa、Conca Dor适应性较好,花大、色艳、味香,植株生长健壮,观赏价值高,经济效益好,可推广种植。     

百合品种染色体倍性观察

 利用染色体常规制片技术分析了45个从荷兰引进的百合品种的染色体倍性,包括21个亚洲百合、3个麝香百合、7个东方百合、8个LA杂交品种、2个LO杂交品种、4个OT杂交品种。在21个亚洲百合中,12个品种（‘Eleganza’、‘Monte Negro’、‘Renoir’、‘Black Bird’、‘Butter Pixie’、‘Orange Matrix’、‘Petit Brigitte’、‘Pink Pixie’、‘Lollypop’、‘Red Latin’、‘Marrakech’和‘Pollyanna’）为二倍体（2n = 2x = 24）,5个品种（‘Navona’、‘Orange Pixie’、‘Elodie’、‘Vermeer’和‘Lyon’）为三倍体（2n = 3x = 36）,4个品种（‘Brunello’、‘Tresor’、‘Val di Sole’和‘Detroit’）为四倍体（2n = 4x = 48）;3个麝香百合品种（‘White Heaven’、‘Gelria’和‘White Fox’）为二倍体（2n = 2x = 24）;7个东方百合品种（‘Siberia’、‘Sorbonne’、‘Maru’、‘Dynamite’、‘Dordogne’、‘Montezuma’和‘Miss Lucy’）为二倍体（2n = 2x = 24）;8个LA杂交品种（‘Brindis’、‘Courier’、‘Pavia’、‘Advantage’、‘Mestre’、‘Mombasa’、‘Pirandello’和‘Serrada’）为三倍体（2n = 3x = 36）;两个LO杂交品种（‘Triumphator’和‘White Triumph’）为三倍体（2n = 3x = 36）;4个OT杂交品种中‘Yelloween’和‘Red Dutch’为二倍体（2n = 2x = 24）,‘Conca D’Or’和‘Golden City’为三倍体（2n = 3x = 36）。该结果表明,组内杂交品种（亚洲百合、东方百合和麝香百合）中,除亚洲百合中有5个三倍体和4个四倍体品种外,其余22个为二倍体品种,因而多数组内杂交品种为二倍体品种;而组间杂交品种（LA、OT和LO）,只有OT中2个品种为二倍体,其余12个皆为三倍体。     

百合栽培品种群的种质特征和品质调查

该研究对3个主要百合栽培品种群的特征和品质进行了调查。结果表明:亚洲百合具有生长周期较短、茎强度和花朵品质维持好的优点,且花色丰富,但对缺光的敏感性较强;东方百合的花朵大,花型美丽,具芳香气息,对缺光的敏感性不强,然而花色比较单调,生长周期较长,茎强度和花朵品质维持不如亚洲百合和麝香百合好;就生长周期而言,麝香百合介于亚洲百合与东方百合之间,且茎强度和花朵品质维持较好,多数情况下对缺光不敏感,但花色、花型单一。     

硫酸钾镁肥在百合上的应用效果及其施用方法研究

等钾条件下,在百合花上施用硫酸钾镁肥等3种不同类型钾肥,研究硫酸钾镁肥对百合生长的影响及其施用方法。结果表明,施用不同类型钾肥都能不同程度地促进百合生长及提高经济效益,特别是施用硫酸钾镁肥使百合株高增加6.5%、茎粗增加3.1%,并且能提高百合产花朵数、花朵大小及经济效益;硫酸钾镁肥采用基肥撒施、追肥喷施对百合生长的效果好于采用全部撒施。     

荷兰百合新品种索尔邦的快繁技术研究

选用荷兰百合品种索尔邦鳞茎、顶芽、茎段、叶等不同部位进行离体,以鳞茎为最佳外植体,以MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 1.0 mg/L的培养基诱导丛生芽效果最好,其诱导率为96.7%,而且鳞片诱导中鳞茎中部表现出较大的器官发生潜力.百合继代增殖培养以MS BA1.0 mg/L IAA0.4 mg/L培养基为宜,组培苗在MS IAA0.5 mg/L的培养基中较易生根,生根时间为25 d左右.     

测定百合花粉生命力的液体培养基研究

 以东方百合品种‘索蚌’的新鲜花粉为试材, 利用单因子试验比较了液体培养基中蔗糖浓度及硼、钙、镁、钾对其萌发的影响。在此基础上进行正交试验, 比较蔗糖、H₃BO₃ 、CaCl₂ 对百合花粉萌发的影响。试验结果表明: 蔗糖和H3BO3 对百合花粉萌发有极显著影响。适宜的花粉培养液为: 蔗糖100 g·L ^{- 1} +H₃BO₃ 20 mg·L ^{- 1} +CaCl₂ 20～30 mg·L ^{- 1}。纯水培养液会造成花粉原生质体破裂, 内含物外流;高浓度的蔗糖和盐会造成原生质体失水萎缩, 质壁分离, 这两种情况都抑制花粉萌发。