金针菇多糖组成的探讨与分析

为探讨金针菇多糖的组成,以金针菇子实体中分离纯化得到的多糖为研究对象,采用DEAE Cellulose-52、高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)、PMP柱前衍生高效液相色谱法,分析了金针菇多糖的组成、分子量及单糖组分。结果表明,金针菇多糖由3种多糖组分组成,重均分子质量分布分别为4 191 338、372 779、19 002,其中重均分子质量最大的多糖组分为中性多糖,其余2种重均分子质量较小的多糖组分为酸性多糖,且2种酸性多糖所占比例明显大于中性多糖,分别占44.31%和37.76%,中性多糖仅占17.93%;金针菇多糖由葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、岩藻糖(Fuc)5种单糖组成,其中Glc含量比最高,其次是Gal和Man,Xyl和Fuc含量相对较低,5种单糖组成的摩尔比为13.05∶2.75∶3.16∶1.48∶1.00。由此可推断,金针菇多糖可能是以葡聚糖为主,同时含有半乳糖聚糖、甘露聚糖、木糖聚糖或者岩藻聚糖等多个多糖组分构成的混合多糖。     

鸡油菌及其伴生真菌LBJ016营养成分对比分析

在分离野生鸡油菌(Canchare llus cibarius)的过程中获得一株伴生真菌LBJ016,对比研究了鸡油菌子实体及其伴生真菌菌丝体的营养成分.对鸡油菌子实体及LBJ016菌丝体中的微量元素、氪基酸、多糖含量及其单糖组成分析表明:LBJ016菌丝体中微量元素含量与鸡油菌子实体基本一致,氨基酸含量大约是鸡油菌子实体的2倍;LBJ016菌丝体多糖含量为8.28%,鸡油菌子实体多糖含量为12.59%,LBJ016菌丝体和鸡油菌子实体粗多糖各由3种单糖组成,其中LBJ016菌丝体多糖的单糖组分是葡萄糖、半乳糖和甘露糖,鸡油菌子实体的单糖组分是葡萄糖、半乳糖和核糖.     

金针菇子实体多糖成分的初步研究

初步探讨了金针菇子实体多糖成分的分离与纯化。采用热水抽提、三氯乙酸法脱蛋白、乙醇沉淀获得金针菇子实体粗多糖，然后经DEAE—Cellulose阴离子交换柱(B2O7^4-型)进行分离纯化。结果表明，金针菇粗多糖是一个以葡聚糖为主、由数个多糖组分构成的混合多糖。     

异型葡枝霉感染不同金针菇后防御酶系的活性变化

绵腐病是金针菇栽培中常见的真菌性病害之一,致病菌为异型葡枝霉(Cladobotryum varium)。为了探究其抗性机制,以L3002、L3003、L3005为材料,通过测定同一时期不同品种金针菇子实体接种与未接种病原菌子实体内的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)等4种防御酶活性变化,为研究金针菇品种对绵腐病的抗病性差异及筛选优良菌株提供科学依据。结果表明,接种病原菌处理后,各品种金针菇子实体内PAL、PPO、POD和SOD活性变化不同。金针菇L3005品种4种酶活峰值最高,其次是L3002和L3003,说明4种防御酶对金针菇抗绵腐病有一定的关联性。     

不同纤维废弃物对金针菇生长发育的影响

以金针菇为试材,将工农业生产中产生的纤维废弃物添加到金针菇栽培培养料中,研究纤维废弃物对金针菇生长发育的影响,以期优化现有栽培配方。结果表明:啤酒糟有利于金针菇菌丝健壮生长,甘蔗渣和甜菜渣可以提高金针菇菌丝生长速度,桔皮渣促进金针菇子实体的生长发育,甘蔗渣、甜菜渣、桔皮渣与啤酒糟搭配均有助于提高金针菇的产量和品质。最终得到的最优配方为30%玉米芯、39%米糠、15%麸皮、5%棉籽壳、5%啤酒糟、5%桔皮渣、1%碳酸钙。     

不同添加物对金针菇几种胞外酶活性的影响

以棉子壳培养基为对照,向棉子壳培养基中分别添加淀粉、尿素、石膏,研究在金针菇整个生长发育过程中培养基中胞外纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、过氧化物酶、漆酶活性的变化规律、呼吸消耗及绝对生物学效率。结果表明:(1)添加尿素能明显提高金针菇的绝对生物学效率;而添加淀粉、石膏不能提高金针菇的绝对生物学效率;(2)纤维素酶、半纤维素酶和β-葡萄糖苷酶在金针菇菌丝生长阶段活性较低,子实体发育期活性较高。淀粉酶、果胶酶、过氧化物酶在菌丝生长阶段活性较高,子实体发育期活性较低,漆酶活性变化趋势不明显;(3)金针菇具有完整的胞外纤维素酶系;(4)不同添加物只影响酶活性的相对大小,而对胞外酶的活性变化趋势影响较小。     

金针菇菇根膳食纤维蒸汽爆破改性工艺优化研究

由于缺乏适宜的综合利用途径和技术,金针菇菇根除少部分作为饲料外,绝大部分被直接丢弃,不仅造成了资源的极大浪费,而且污染了环境。目前对金针菇菇根的利用研究主要以提取多糖为主,多糖提取后的残渣主要是不溶性粗纤维,可溶性膳食纤维含量较低,品质较差,需对其进行改性处理,提高可溶性膳食纤维含量,提升其品质及附加值。本研究以金针菇菇根水提残渣为原料,采用蒸汽爆破技术对金针菇菇根多糖进行改性,通过单因素试验和正交优化试验优化了金针菇菇根膳食纤维的蒸汽爆破改性工艺参数。结果表明,蒸汽爆破对金针菇菇根膳食纤维改性的最佳工艺为料腔比5:8(L/L,下同),保压时间105 s,蒸汽爆破压强1 MPa,在此条件下,可溶性膳食纤维(Soluble dietary fiber,SDF)含量为7.08%,较改性前提高了31.35%。     

棉子壳料无粮栽培金针菇试验

栽培金针菇,在生产上一般要添加麸皮或米糠等辅料来补充营养成分,此方法虽然能够提高金针菇的产量,但增加了成本,且和畜牧业争原料。为此我们进行了添加肥料栽培金针菇的试验。现将试验情况总结如下:(一)供试材料菌种为杂交19金针菇。培养基配方为(%):A.棉子壳100,另加石膏1(对照);B.配方A+白糖1;C.配方 B+过磷酸钙1;D.配方 C+尿素     

灵芝多糖的抗肿瘤活性及免疫效应

从灵芝子实体用热水提取分离的灵芝多糖（GLP）对Lewis肺癌和结肠癌具有相当高的抑制生长活性,并能增强正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用和荷瘤小鼠NK细胞活性,从而提高机体免疫功能.灵芝多糖口服给药剂量每天每公斤C57BL/6小鼠2000mg.足趾接种和腑皮下接种对Lewis肺癌的抑制率分别为53.54％～59.13 ％和36.43％～42.76％;对结肠癌的抑制率分别为42.47％～49.14％和29.43％～32.09％.     

拮抗化疗药物体外免疫抑制模型的建立及活性成分筛选

以小鼠脾淋巴细胞为试验材料,将有丝分裂原刀豆蛋白A(ConA)或细菌脂多糖(LPS)与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合使用建立了体外免疫抑制模型,并比较了多糖样品对5-Fu抑制淋巴细胞增殖的拮抗作用。结果表明,在供试样品中,F1-1[龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)中分离多糖]和BW[沪农灵芝1号(Ganoderma lucidum)子实体中分离]对5-Fu产生的轻度抑制有完全拮抗作用,19号[沪农灵芝1号(G.lucidum)子实体中分离]样品刺激淋巴细胞增殖活性最好,但对5-Fu产生的抑制基本无拮抗作用,表明样品刺激淋巴细胞增殖的活性与拮抗化疗药物抑制淋巴细胞增殖的活性无正相关性。     

贝壳粉添加量对金针菇生长及产量的影响

在金针菇(Flammulina velutipes)常规栽培料中分别添加0.5%、1%、1.5%,2%、3%贝壳粉,测定金针菇的栽培料pH值变化、菌丝生长速度、菌丝长势和子实体产量。结果表明,栽培料pH值随贝壳粉含量的增加而增加,在栽培料中添加贝壳粉,能显著缩短菌丝满袋时间,提高子实体产量,其中添加1.5%贝壳粉的处理菌丝满袋时间最短,子实体产量最高。     

富硒黄白侧耳子实体蛋白质和多糖的研究

以棉籽壳为主料,以硒代蛋氨酸(Se-Met)为硒源,采用传统栽培方式获得了富硒黄白侧耳(Pleurotus geesteranus)子实体,测定了Se-Met对其子实体产量、硒含量、可溶性蛋白含量和粗多糖含量的影响,结果表明,高添加量的Se-Met不利于子实体产量的提高;子实体中的硒含量与培养料中的Se-Met添加量呈显著正相关性(P0.01),当培养料中Se-Met的添加量为0.8 g·kg~(-1)时,子实体中硒含量最高,达到11.43μg·g~(-1);低添加量的Se-Met有利于子实体中可溶性蛋白的合成;子实体中的粗多糖含量与培养料中的Se-Met添加量呈显著正相关性(P0.01)。对富硒黄白侧耳子实体可溶性蛋白和粗多糖中的硒含量进行了测定与分析,结果表明,富硒黄白侧耳子实体中的硒主要以硒蛋白的形式存在,占总硒含量的53.02%~57.39%,硒多糖中的硒占总硒含量的23.26%~24.98%。     

粉碎细度对灵芝子实体水提物中多糖组成和体外免疫活性的影响

采用普通机械粉碎和超微粉碎法获得子实体碎块(1.0cm×0.5cm)和不同细度(10~200目)的灵芝(Ganoderma lucidum)子实体粉,对其提取物得率、多糖含量、相对分子质量分布特征、单糖组成及体外免疫活性等进行了系统比较分析。结果表明,实验范围内,随子实体粉细度增加,提取物的得率和多糖含量也提高,相对分子质量为2×10~6~3.5×10~6的多糖组分在提取物中所占比例增加。与子实体碎块相比,当粉体达到100目时,水提物总得率从6.41%提高到7.89%,增加了23.1%;而30%乙醇沉淀部分得率由原来的0.67%升高到2%以上,提高了2倍。单糖组成分析结果显示,30%乙醇沉淀的大分子多糖(30E)主要为葡聚糖,70%乙醇沉淀多糖(70E)主要含有半乳糖和葡萄糖,另外还含有少量的岩藻糖、甘露糖和葡萄糖醛酸,增加粉碎细度对70E部分的单糖组成没有显著影响。与70E部分相比,30E部分均表现出较好的刺激巨噬细胞释放NO的活性。     

营养和培养参数对深层培养灵芝生产多糖的影响

研究了各种营养成分和培养参数(pH,温度,氮源可利用性,C∶N,搅拌速度,接种量)对在生物反应器可控条件下利用合成培养基深层培养灵芝生产多糖的影响.所生产的多糖大部分(通常80%以上)为胞外多糖(EPS),分泌到培养液中,菌丝多糖(MAP)只占不到20%.在pH5.0条件下,总多糖(EPS和MAP)生产量和菌丝生长量最高.在28～34℃范围内,多糖产量在34℃培养条件下最高,并随着温度降低而下降.低氮条件下,菌丝生长较弱,多糖产量较低.多糖生产量(主要是胞外多糖)随着接种量的增加而提高,菌丝多糖的生产则相反.利用高效液相色谱(HPLC)凝胶层析法分离出两个胞外多糖组分,其洗脱时间为26.5和36.5 min,分子量分别为137和4.7 kDa;菌丝多糖有一个大的峰(40 min)和一个很小的峰(28 min),其分子量分别为1.57和76.6 kDa.菌丝多糖的HPLC凝胶层析色谱和从灵芝子实体中提取的多糖相似.本研究所采用的各种培养条件下生产的多糖(EPS和MAP)具有可重复性的HPLC色谱.     

袋栽金针菇产量的三个效应

在金针菇袋栽实践中,发现各袋之间产量悬殊较大,究其原因受三种效应影响,现分述如下:(一)所接菌种种级的效应种级指母种一级、原种二级、生产种三级.我校曾用二级种繁殖栽培袋共1140袋(A);另用三级种繁殖栽培袋共1500袋(B).接种7天后检查发现A菌丝吃料深为2.5cm,而B为2.1cm,相差O.49cm.接种30天后检查,A的接种块菌丝健壮,而B的接种块菌丝已消失,显得有些干瘪.接     

姬松茸子实体多糖高速剪切提取及其抗氧化活性

姬松茸多糖具有显著的抗肿瘤、抗疲劳、抗突变、抗氧化等功能。为提高姬松茸多糖得率、缩短提取时间,而采用高速剪切提取技术从姬松茸子实体中提取多糖。在单因素试验的基础上,根据中心组合试验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法优化提取工艺。最终确定最佳提取条件为液料比27 mL/g,转速22 000 r/min,剪切时间6.60 min,此时多糖实际得率为(12.33±0.020)%,与预测值12.48%相近。并通过乙醇梯度沉淀获得ABM40、ABM60、ABM80 3个姬松茸多糖组分,进而对其进行体外抗氧化活性测定。结果表明,3个多糖组分均表现出良好的ABTS自由基和DPPH自由基的清除能力,且具有一定的还原力。     

灰树花多糖GFP75-2-2B的分离及其对刺激巨噬细胞释放NO的影响

利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析和Sephacryl凝胶柱层析对灰树花(Grifola frondosa)子实体水提醇沉粗多糖进行分离纯化,对分离纯化到的一种多糖GFP75-2-2B进行了分析.紫外光谱鉴定结果表明,GFP75-2-2B不含蛋白质、核酸和酚类成分;离子色谱分析表明其单糖组成为岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,摩尔比为1.0∶1.3∶3.6∶4.0∶4.5.GFP75-2-2B对巨噬细胞株RAW264.7进行体外免疫活性的研究结果表明,GFP75-2-2B有明显刺激巨噬细胞分泌NO的活性.     

紫芝子实体多糖的特征分析及其体外免疫活性

通过乙醇分步沉淀法从紫芝(Ganoderma sinensis)子实体水提取物中分离多糖,得到分步醇沉的粗多糖样品30E、50E和70E,比较了3个粗多糖样品的得率、多糖含量、单糖组成、重均分子量分布特征、刺激RAW 264.7细胞释放NO和促进小鼠脾淋巴细胞增殖的活性.结果表明:30E、50E和70E的多糖得率均较低,分别为0.04％、0.17％和0.49％;水解后的单糖种类基本相同,均有岩藻糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,但是单糖比例差异较大,70E中还含有3.4％的木糖;紫芝多糖的重均分子量分布范围较广,从1.450×104到1.276×107,30E中有2个大分子量组分(重均分子量分别为8.867×106和1.276×107),50E和70E的重均分子量较小(＜2×104);分步醇沉的各粗多糖样品均具有体外刺激巨噬细胞释放NO和促进小鼠脾淋巴细胞增殖的活性,其中30E的活性最好.     

金针菇子实体化学成分的研究

对金针菇(Flammulina velutipes)子实体进行乙醇提取,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,经柱层析分离得到12个化合物。经核磁共振及质谱鉴定,这12个化合物分别为:阿糖醇(1)、麦角甾醇(2)、顺式-9-二十三烯(3)、尿嘧啶(4)、烟酰胺(5)、黄嘌呤(6)、甘油(7)、腺苷(8)、海藻糖(9)、甘露醇(10)和酪氨酸(11),其中化合物3、5、6、7和11为首次从金针菇子实体中分离得到。     

广叶绣球菌子实体细胞壁多糖特征及其体外激活Dectin-1受体活性

广叶绣球菌(Sparassis latifolia)子实体水提残渣经超微粉碎、热水提取、20%～90%乙醇逐级沉淀获得8个细胞壁多糖组分(20E、30E、40E、50E、60E、70E、80E和90E),对其得率、多糖含量、β-葡聚糖含量、分子量分布特征、单糖组成、体外免疫活性进行测定。结果表明:广叶绣球菌水提残渣超微粉水提物得率为20.80%,其多糖含量为78.16%;水提物经乙醇逐级沉淀所得组分中,20E的得率最高,占提取物总量的27.16%,其多糖和β-葡聚糖含量分别为82.58%和35.54%;其余各组分得率和β-葡聚糖含量均较低,其中30E、40E、50E、60E这4个组分的多糖含量较高,均达到80%以上,而70E、80E、90E的多糖含量为26.36%～52.55%。利用高效凝胶尺寸排阻色谱-多角度激光散射-示差折光检测仪联用法(HPSEC-MALLS-RI)对20E、30E、40E、50E、60E的分析结果显示,20E主要含有2个峰,其重均分子量分别为1.47×10~7和5.06×10~6;30E、40E、50E和60E组分均主要含有1个均一对称峰,且随着醇沉浓度的增加,其重均分子量逐级减小。单糖组成分析结果显示:20E、30E、40E、50E、60E中的多糖均主要由葡萄糖组成,另外还含有少量半乳糖、岩藻糖和甘露糖,葡萄糖的摩尔百分比均超过80%。20E、30E、40E、50E、60E都具有体外激活Dectin-1受体的活性,其中20E的活性最高。