不同培养液及血清浓度对绵羊孤雌生殖胚胎发育的影响

体外成熟的绵羊卵母细胞，经5 μmol/L A23187 5 min和2 mmol/L 6-DMAP 4 h激活后，分别在SOFaa、M-199两种培养液中进行培养，试验比较了SOFaa、M-199液分别添加BSA和不同浓度（10%、20%）胎牛血清对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。M-199+FCS组的卵裂率显著低于SOFaa+BSA和SOFaa+FCS组（P<0.05），SOFaa+BSA组的囊胚率显著低于M-199+BSA、SOFaa+FCS、M-199+FCS三组（P<0.05）；SOFaa+10% FCS与SOFaa+20% FCS组的卵裂率及囊胚率均无显著差异，M-199+10% FCS和M-199+20% FCS组的卵裂率及囊胚率间均无显著差异。结果表明：SOFaa比M-199更适合绵羊孤雌生殖胚体外发育，此外添加10%的FCS即可达到较好的培养效果。     

胎牛血清对猪孤雌胚早期体外发育的影响

探讨了在猪孤雌胚体外发育的第3、4、5、6天分别添加胎牛血清(FCS)对孤雌胚发育能力的影响.结果,在体外培养的第5,6天添加10%FCS组得到的囊胚率和囊胚孵化率最高,第5天添加FCS组的囊胚细胞数最多.结果表明,FCS可以促进猪孤雌胚胎的早期体外发育.     

3H-TdR掺入法检测鸡不同组织淋巴细胞增殖反应的条件优化

为了检测感染免疫抑制病毒后鸡群的细胞免疫变化,以建立的3H-TdR掺入法观察了外周血、脾脏、胸腺、法氏囊中淋巴细胞的增殖反应,对影响该方法的细胞密度、丝裂原浓度(ConA或LPS)、犊牛血清(FCS)浓度等条件进行优化.结果表明,外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件细胞105～106/mL,ConA 5 mg/L,FCS 10%;脾脏中淋巴细胞最佳条件细胞5×106/mL,ConA 10 mg/L,FCS 10%;胸腺中淋巴细胞最佳条件细胞106/mL,ConA 40 mg/L,FCS 10%;法氏囊中淋巴细胞最佳条件细胞5×106/mL,LPS 40 mg/L,FCS 10%.     

猪卵母细胞的体外成熟影响因素的研究

本试验研究了猪卵母细胞的体外成熟体系，着重研究了季节因素、FCS、pFF、胰岛素和17β-E₂对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：①3月~4月和10月~11月卵母细胞成熟率最高，与其它月份相比差异显著（P<0.05）；②卵泡期卵母细胞成熟率和卵裂率均显著高于黄体期；③添加10%FCS、10% pFF、20% FCS和10% FCS+10% pFF的卵裂率差异不显著（P>0.05），添加10% FCS或10% pFF的成熟率差异不显著，与添加20% FCS或10% FCS+10% pFF成熟率差异显著；④培养液中添加一定量的胰岛素和17β-E₂有助于提高成熟率和卵裂率。     

无血清培养液对牛腔前卵泡体外发育的影响

本文研究了基础培养液中不添加犊牛血清(FCS)及添加不同比例FCS对牛腔前卵泡体外发育和激素分泌的影响。结果显示:添加FCS对腔前卵泡体外生长无明显促进作用,对腔前卵泡的体外发育、存活及激素分泌也影响不大。腔前卵泡在无血清条件下可持续生长、分泌性腺激素。     

牛肥胖综合征血中维生素A、E和硒的水平

对29头产后泌乳五周的母牛,测定了气浆中维生素A、E和硒的含量。29头母牛中有20头呈现牛肥胖综合征(FCS)。健康母牛血浆中维A含量为40μg/100ml,维E含量为5μg/100ml;患FCS的母牛,血浆维A为29μg/100ml,维E为8μg/100ml,前者显著高于后者。健康母牛在分娩时,血浆维A水平较低,为25μg/100ml,此后逐渐增加到51μg/100ml,而患FCS的母牛,维A水平更低,接近于缺乏状态。维E能减轻FCS的症状,其原因可能是影响到肝脏的氧化—还原反应。在两组母牛中或在另外随机选择的12头具有FCS的母牛中,血浆硒的水平无显著差异。     

沙溪铜矿选矿自动化控制系统应用

沙溪铜矿330万吨/年选矿项目采用北京矿冶研究总院设计的选矿自动化控制系统,通过采用仪表、自动装置、FCS(现场总线控制系统)、电子计算机等技术和设备,对选矿生产设备状态和选矿生产流程状况实行监测、模拟、控制,实现选矿生产的高效和安全。本文从磨矿、浮选、浓缩脱水、尾矿输送、FCS、工业视频监控等几个方面对自动化控制系统进行说明,为同类矿山建设提供参考依据。     

弗林蛋白酶裂解位点对IBV致病性的影响机制

正传染性支气管炎病毒(IBV)属于γ冠状病毒,是人类分离到的第一种冠状病毒,主要损伤鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,严重影响我国及世界养禽业的健康发展。IBV主要编码4个结构蛋白:S、E、M和N。其中,S蛋白含有S1/S2和S2'两个裂解位点。近年研究表明,S2'位置的弗林蛋白酶裂解位点(FCS)对MHV和SARS-Co V侵入易感细胞的途径具有重要调控作用,对IBV Beaudette株的传代细胞适应性起决定作用,FCS的缺失会导致Beaudette株无法在细胞系中正常生长。而该FCS对目前IBV流行株的影响尚不明确。     

鸡胚骨骼肌细胞增殖和融合培养模型的建立

本实验建立了鸡胚骨骼肌细胞增殖和融合培养模型,增殖和融合培养液分别为添加5％胎牛血清(FCS)和添加10％FCS+0．5％鸡胚浸出液的DMEM培养液。结果表明:培养的骨骼肌细胞增殖和融合情况良好,可存活1周以上。胰岛素(INS,10-1 000 ng/mL)处理48 h显著促进骨骼肌细胞增殖,而100-1000 ng/mL INS处理96 h可显著促进骨骼肌细胞融合。该模型可用来研究激素、生长因子或营养物质对骨骼肌细胞增殖和分化的影响。     

分离纯化鼠腹腔巨噬细胞的改进方法

将小鼠腹腔巨噬细胞在用热灭活的胎牛血清(FCS)包被过夜的FCS平皿培养基内培养45分钟,冲洗除去未粘着的细胞之后,以亚毒性浓度的乙二胺四乙酸盐(EDTA)作短时间的孵育,以分离粘着的细胞。用这种方法能够常规地获得回收所有腹腔巨噬细胞的90％,并保持全部细胞活力。     

动物卵子体外受精技术研究简报

一、猪卵子体外受精技术研究进展显著在最近2次实验中,从屠宰后母猪卵巢中取出卵子并且按照卵子不同发育程度,分别在m—M199溶液中(FCS10％)进行体外成熟培养12—40小时,然后用从“老鼠猪”附睾中取出的精子进行体外受精6—10小时,受精后卵子在BMOC—2溶液中(FCS10％)再培养24—48小时。其中3个     

影响小鼠腔前卵泡体外发育因素的研究

通过在培养液中添加胎牛血清（FCS），牛血清白蛋白（BSA）及卵泡刺激素（FSH），对小鼠腔前卵泡进行体外培养，观察卵泡腔的形成及雌二醇（Estradiolum,E2)和睾酮（Testosteroni propioas,T)的分泌情况.     

和牛体外受精胚胎玻璃化冷冻与解冻孵化试验

用添加5％犊牛血清(FCS)的TCM-199进行卵母细胞成熟,BO液进行体外受精后,在5％犊牛血清的CR1aa液进行体外培养获得和牛体外受精胚胎。经玻璃化冷冻保存后解冻,进行孵化试验,解冻后透明带完整率为100％,解冻后存活率为90％。用含20％和5％犊牛血清(FCS)的TCM-199培养孵化,经24h、48h存活率分别为77．8％、74．1％;51．9％、49．1％。两者差异不显著。     

供体细胞培养处理方法对水牛核移植效果的影响

以经常规培养法 (DMEM 10 % FCS)、血清饥饿法 (DMEM 0 .5 % FCS培养 5～ 10 d)和 Apidicolin- APD结合血清饥饿法 (0 .1mg/ L APD培养 2 4 h,DMEM 0 .5 % FCS培养 1～ 18d)培养处理的水牛卵巢颗粒细胞和水牛成体耳部成纤维细胞作供核 ,分别采取带下注核法和胞质内注核法进行核移植。同一供核细胞各处理组间的核移植胚融合率 (以颗粒细胞作供核 )以及重组胚的囊胚发育率无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,但经 APD 0 .5 % FCS培养处理供体细胞核移植后的分裂率显著高于其他组 (P<0 .0 5 )。用 7%乙醇处理的成体耳部成纤维细胞进行核移植 ,其重组胚的分裂率和囊胚发育率与对照组 (不含乙醇 )均无明显差异 (P>0 .0 5 )。结果表明 ,(1)血清饥饿处理水牛供体细胞对其核移植效果没有影响 ;(2 ) DNA合成抑制剂 APD结合血清饥饿培养处理水牛颗粒细胞和成体耳部成纤维细胞 ,可提高其核移植效果 ;(3)乙醇预激活处理水牛成体耳部成纤维细胞 ,对其核移植效果没有影响     

绵羊卵巢卵母细胞体外成熟培养的研究

在体外受精过程中,绵羊卵巢卵母细胞体外成熟情况在很大程度上决定着卵母细胞的体外受精率和胚胎发育率.影响卵母细胞成熟的因素很多,主要包括卵泡大小、卵巢的发育阶段、培养基、激素生长因子等.试验从屠宰场采集屠宰后的绵羊卵巢,抽取卵巢表面卵泡中的卵母细胞,选择一级和二级卵母细胞进行体外成熟培养.试验证明,绵羊卵巢卵母细胞体外成熟培养时间以24h为佳,FCS浓度以20%最适宜.试验还发现无菌条件、温度、湿度以及在体外对卵母细胞的操作时间对试验的结果都有很大的影响.通过试验初步探明了适宜绵羊卵母细胞体外成熟的一些基本条件,为全面掌握绵羊卵母细胞体外成熟培养以至整个体外受精技术的完善和规范提供了有益的资料.     

猪胚胎体外培养影响因素的研究

以孤雌激活胚胎为研究对象,对猪胚胎体外培养过程中的相关影响因素进行了探讨。体外成熟的猪卵母细胞经孤雌激活后,用添加0.5%牛血清蛋白(BSA)的NCSU-23(北卡罗来纳州立大学-23)培养基培养的囊胚率(36.7%)极显著高于添加5%、10%和15%胎牛血清(FCS)的NCSU-23(11.8%,18.5%和10.3%,P0.01)。在NCSU-23中添加一定比例的TCM-199(10%,25%和50%),虽然对猪卵母细胞孤雌激活后的分裂率无显著影响(89.6%vs87.0%,83.4%和82.6%,P0.05),但囊胚发育率随着TCM-199比例的增加而显著下降(30.1%vs25.0%,11.1%和1.1%,P0.05)。结果表明:培养液中添加BSA的猪胚胎体外培养效果优于添加FCS;猪胚胎的体外培养不需要成分复杂的培养液。     

山羊卵母细胞体成熟培养条件的研究

从山羊屠宰场收取卵母细胞，置于39％、5％CO2的培养箱中，作24小时体外成熟培养。在含10％犊牛血清(FCS)的成熟培养液里分别添加0％、20％~N卵泡液，试验结果表明，成熟卵母细胞率分别为54．5％、66．7％，差异不显著。在成熟培养液里添加不同血清，即10％犊牛血清(FCS)和羊血清(NGS)，试验结果表明，成熟卵母细胞率分别为54．5％、65.4％，差异不显著。     

微量乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性的几个主要影响因素

对乳酸脱氢酶释放法测定小鼠脾脏 NK细胞活性中的酶促反应时间、效靶细胞比例、检测波长、细胞毒试验孵育时间、维持液中小牛血清 ( FCS)浓度等 5个重要的影响因素进行了探索。结果显示 ,酶促反应时间以 1 0 min最佳 ;效靶细胞比例以 1 5∶ 1为适宜 ;最适检测波长为 570 nm,其结果线性关系好 ;细胞毒试验孵育时间以 2 h为宜 ;维持液中小牛血清以低浓度为宜 ,其结果更接近自然杀伤百分率计算公式 ,并选用 2 %为本试验小牛血清的体积分数     

在体外跟绒毛细胞一同培养的牛、羊胚的发育情况

首先对超排处理牛施行人工授精,回收了1—8细胞胚。这些细胞胚,在加了15%胎儿血清(以下简称 FCS)的 B_2培养液中,或在还加了绒毛膜细胞(trophoblastic vesicle,以下简称 TV)的培养液中,体外培养了3—4天,前者     

体外生产的牛胚胎超微结构研究

利用两种常规体外培养系统研究了体外培养及不同培养条件对牛体外受精胚胎早期发育各时期超微结构的影响。结果显示:体外发育的牛胚胎在发育的各个时期(从原核期到囊胚)胞质中均含有丰富的脂滴,胚胎中特别是在桑椹胚及囊胚阶段可见到一些异常细胞。两系统下发育的胚胎中脂滴形态不同,从桑椹胚阶段开始,胚胎线粒体的发育在M199 BOEC FCS培养系统中明显滞后于其在SOFaa BSA培养系统中的对照。