外源总DNA直接导入植物后的整合与分子验证

通过对已有的几例外源总ＤＮＡ直接导入植物后的变异研究分析，提出外源ＤＮＡ导入植物后，在种细胞中先与蛋白结合形成“小染色体”，同源结构“单元”经“拟联会复合体”与受体基因组发生重组，非同源性外源ＤＮＡ可能以“Ｂ染色体”方式存在的假说。在此基础上，进一步提出分子育种可能从对总ＤＮＡ的操作发展到对重组结构“单元”的操作与对这种结构单元的直接验证。     

水稻分子育种的研究现状

本文综述了水稻分子育种的兴起、发展与研究现状。较全面地介绍了分子育种的由来，外源ＤＮＡ导入的方法，导入后代性状的变异与遗传，外源ＤＮＡ导入的分子验证，ＤＮＡ的提取与纯化，育种效果与育种程序等。作者根据多年从事该项研究的实践，对外源ＤＮＡ导入技术迅速发展的原因及有关机理进行了讨论。     

人工诱变与外源DNA直接导入相结合创造遗传变异的探讨

根据人工诱发突变的原理和实践，结合外源ＤＮＡ导人的方法，提出诱发突变与外源ＤＮＡ导入相结合创造遗传变异的百种新途径。并从理论上分析了这种结合的特点和可行性。实践上以水稻为受体导入玉米、高粱、大豆、稗于等植物的ＤＮＡ，进行了具体研究。结果表明，诱发突变与外源ＤＮＡ导入的农业分子育种相结合，是一种效果更佳的育种新途径     

芸豆和玉米总DNA导入大豆及后代同工酶酶谱分析

本文报道了利用花粉管能道技术,将芸豆、玉米的总ＤＮＡ导入大豆的实验结果及采用不连续双垂直板聚丙烯凝胶电泳法,对其导入后代进行过氧化物酶及多酚氧化酶的酶谱分析。结果表明：远缘材料的外源总ＤＮＡ导入大豆,其后代发生明显变异,过氧化物酶和多酚氧化酶酶谱发生了变化,说明了外源遗传物质已转移到大豆基因组中,并且得到表达。     

玉米杂种优势与核DNA含量

玉米杂种优势与核ＤＮＡ含量Ｄ．Ｐ．Ｂｉｒａｄａｒ，Ａ．ＬａｎｅＲａｙｂｕｒｎ自从１９０９年Ｓｈｕｌｌ提出纯系杂种概念以来，已在玉米育种方面得到广泛应用（Ｓｈｕｌｌ１９０９）。这个育种概念使玉米上存在的巨大的杂种优势得以利用。Ｓｈｕｌｌ（１９１１）把杂...     

利用外源DNA导入技术选育高粱优良品系

利用外源ＤＮＡ导入技术选育高粱优良品系石太渊，杨立国，林凤（辽宁省农科院生物技术室１１０１６１）７０年代以来，随着生物技术的发展，国内外将外源ＤＮＡ导入到水稻、棉花、小麦等植株中，并获得了具有有益性状的植株。这种分子杂交育种法，可以实现远缘间遗传分子...     

导入外源总DNA获得优质高蛋白和双高大豆新品系

导入外源总ＤＮＡ获得优质高蛋白和双高大豆新品系利用开花植物受粉后形成的花粉管通道，直接导入外源总ＤＮＡ，进而实现某些目的基因转移，实现农作物的分子育种，已被世人所公认，并不断在扩大它的应用范围和对其理论的深入探讨。该技术已成为目前我国农业生物技术中最...     

水稻双胚苗的发现及其研究进展

著名杂交水稻育种专家袁隆平提出了杂交水稻育种分为三个发展阶段的战略设想,即:三系法品种间杂种优势利用,两系法亚种间杂种优势利用和一系法远缘杂种优势利用。“一系法”即利用无融合生殖法固定水稻品种间及更远缘的强大的杂种优势。这既是人们愿望,也是杂种优势育种发展的最高阶段。利用无融合生殖特性来固定杂种优势,成功的关键在于获得水稻的二倍体无融合生殖材料。早在1979年袁老师就对我们提出了固定杂种优势的途径和寻找无融合生殖材料的方法。其中不定胚就是二倍体无融合生殖的方式之一。它的主要表现形式是多胚现象。因此从大量…     

玉米总DNA导入水稻后的遗传变异研究

采用穗茎注射法将玉米总ＤＮＡ导入水稻９１－５２４，Ｄ１代未发现任何变化，Ｄ２代出现大量的变异分离，Ｄ３，Ｄ４代大多数株系继续严重分离，个别株系的主要性状趋于稳定。对ＤＮＡ导入对变异率，变异性状分布特点、遗传力、遗传进度等方面的研究结果表明，总ＤＮＡ导入，能产生广泛的性状变异，但又有别于有性杂交和突变育种，具有自身的特点。据此，从育种学的角度，对玉米总ＤＮＡ导入水稻引起的遗传变异及在育种中的利用展开了讨论。     

水稻分子育种法—穗茎注射法

本文主要介绍了“穗茎注射法”导入外源ＤＮＡ的经典实验及作者等用在水稻上的基本情况，并对外源ＤＮＡ注射的有效时期与部位及其在分子育种时的特点，包括与化学诱变的关系等问题的分析与探讨，以达到促进水稻及其他作物分子育种研究的目的     

亚麻外源DNA导入后代的遗传与变异研究

亚麻是我国重要的天然纺织工业原料之一，亚麻加工企业是黑龙江省的支柱型产业和重要的出口创汇企业。近年来随着市场经济的发展， 生产上对亚麻品种提出了更高的要求，生产上急需质佳、丰产、早熟、抗倒、出麻率高的品种。为了尽快地解决这一问题，从１９９３ 年开始，对亚麻外源 Ｄ Ｎ Ａ 导入技术进行了较深入的研究。通过形态学观察，遗传学分析， 发现亚麻外源 Ｄ Ｎ Ａ 导入后代在株高、工艺长度、麻率、抗倒伏性、花色、种皮色等性状有变异，一般 Ｄ３ － Ｄ４ 代可稳定遗传，利用该技术进行育种，可缩短育种年限，加速育种进程。该项技术的研究丰富了亚麻育种的理论与实践的内函，对亚麻事业的发展具有重要的指导意义。     

PCR-ELISA法对大豆品种的转基因定性检测研究

以共价交联在PCR管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行PCR扩增,对PCR扩增的固相和液相产物分别进行杂交和凝胶电泳检测的PCR-ELISA法,对黑龙江省常规选育品种合丰35和黑农37、外源DNA直接导入大豆的分子育种所获品种黑生101、及大连进口的美国2号等大豆,进行转基因定性检测.结果表明:该方法高效可靠,可作为一种快速定性检测转基因产品的方法;检测结果:美国2号为转基因大豆,黑生101、合丰35和黑农37为非转基因大豆.上述结果对分子育种、生态保护、安全监测及对建立黑龙江省非转基因大豆生产保护区等具有重要意义.     

玉米基因组DNA的提取及SSR分析

采用改良的CTAB法,以玉米的黄化苗叶片为材料提取玉米基因组DNA,提取的DNA经0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明:此法具有快速、高效、DNA质量好和纯度高等优点。对所构建的选育高直链淀粉玉米群体的双亲进行了SSR-PCR检测,得到了清晰的多态性SSR标记,为玉米分子标记辅助育种打下了基础。     

银合欢AFLP分子标记体系的优化

以银合欢幼苗为材料,采用CTAB区室法和试剂盒法2种方法提取DNA,通过对影响AFLP反应关键因子,如DNA样品酶切时间、引物等进行优化,建立了适合银合欢AFLP分子标记的反应体系,为利用AFLP标记对银合欢进行分子生物学研究及分子育种奠定基础。     

一种叶片直接用作PCR扩增的新方法及其应用

以水稻为模式植物研究了利用碱处理叶片直接用作PCR扩增的模板,并应用于水稻品种种性和纯度鉴定以及分子标记辅助田间育种材料的选择中。该方法具有快速、简便、结果可信度高,重复性好,对待测植株的损伤小等特点,它无需高速冷冻离心机及相应的提取DNA的试剂,故试验成本低,检测所需的时间短。尤其是群体较大时,此种方法更是显得经济有效,利用此种方法在1 d内可检测300份样品。     

亚麻外源DNA导入的适宜时期与方法的研究

本试验以国外引入的高纤品种及目前生产上广泛应用的品种为材料，首先进行了授粉时间的研究，试验结果可以看出：7：30-8：30为完全授粉时间，然后进行了DNA导入时间和导入方法的研究，试验结果表明：在亚麻开花当天，11；点30分前后为较适宜的时期，以花柱基部切割滴注为较适宜的方法。     

外源DNA导入花生引发变异的几点分析

概述了外源DNA导入花生引发变异的主要方法、性状遗传及选择效果，并对这种育种方法的改进提出一些粗浅的看法。     

一种快速高效的DNA提取方法研究

DNA提取技术是分子实验的一个重要步骤,快速、高效的植物DNA提取方法是样品需要量大的分子实验的一个关键技术。本实验通过改进传统的DNA提取方法,使用96孔联体试管板,而不是单个离心试管,对叶片进行冷冻干燥后粉碎,无需使用液氮。在实验过程中,使用排枪操作,CTAB法提取DNA。以小麦为例,依据该方法提取幼苗叶片DNA,并选取6对引物对DNA样品进行PCR扩增,使用ABI PRISM 3730 DNA分析仪对扩增产物进行分析,以检测提取的DNA质量。结果表明,本实验的DNA提取方法所得到的PCR扩增条带均有较高的强度。在6对实验引物的扩增结果中,扩增条带强度最好的引物有98%的样品在6 935～16 786 RFU( Relative Fluorescence Unit)之间;扩增条带强度较低的引物有93% 的样品在532～1 111 RFU之间;在所有的PCR扩增反应中,最低PCR扩增条带强度为205 RFU,缺带样品数量平均只有0.8%。按照本实验的方法操作,每人每天可提取上千个样品的DNA。因此,该DNA提取方法是一种高效、快速、能获得高质量DNA的有效方法。     

关于超级稻品种培育的资源和基因利用问题

 超级稻育种是矮化育种和杂种优势利用的深化,其本质是资源或基因及基因与环境互作的综合利用。为给超级稻育种提供思路,回顾和分析了超级稻育种中的资源及基因综合利用现状,包括籼粳基因渐渗及利用、栽培稻产量QTL累加及利用、野生稻产量及抗病基因发掘及利用、株型和根系相关基因的发掘及遗传改良等。指出由于真正能用于超级稻育种的有利基因及连锁标记还不多,水稻基因研究成果还不足以支撑超级稻分子育种,目前的超级稻育种仍以常规杂交技术和资源的综合利用为主。需要进一步发掘高产、优质、抗病虫、抗逆基因,常规育种技术与分子育种技术相结合,培育广适性或绿色超级稻。     

T-DNA标签法在水稻功能基因组研究中的应用

农杆菌介导的T-DNA标签法是近年发展的一种有效的分子生物学技术.综述了T-DNA标签法的特点及其在水稻功能基因组研究中应用的进展.