辣椒内生菌的分离及拮抗菌的筛选与鉴定

用稀释分离法从健康辣椒植株的茎、叶、果肉中共分离得到植物内生菌88株,其中细菌有65株,真菌有21株,放线菌2株。用平板对峙法从中筛选出内生菌003和X两株对辣椒疫霉病菌、辣椒绿霉病菌、辣椒炭疽病菌3种病原菌具有明显拮抗作用的菌株,得出抑制率为34.80%～48.0%。根据菌株形态、生理生化特性对菌株003和菌株X进行了初步鉴定,结果显示菌株003和菌株X都为芽孢杆菌属(Bacillus)。     

柑橘绿霉病菌拮抗放线菌MY-5的筛选与鉴定

从广东省各地区水果园和蔬菜地采集土壤23份,采用稀释平板法分离获得放线菌212株。以柑橘绿霉病菌为目标菌,采用抑菌带测定法,筛选获得9株具有拮抗活性的菌株,其中菌株MY-5拮抗活性最强,抑菌带宽达18.67mm,同时对其它13种果蔬采后病害也有较强的拮抗作用。通过对菌株MY-5形态观察、培养特征、生理生化反应和16SrDNA鉴定,该菌株为链霉菌属吸水类群（Streptomyces hygroscopicus）。     

辣椒内生菌的分离及拮抗菌的筛选与鉴定

用稀释分离法从健康辣椒植株的茎、叶、果肉中共分离得到植物内生菌88株,其中细菌有65株,真菌有21株,放线菌2株.用平板对峙法从中筛选出内生菌003和X两株对辣椒疫霉病菌、辣椒绿霉病菌、辣椒炭疽病菌3种病原菌具有明显拮抗作用的菌株,得出抑制率为34.80％～48.0％.根据菌株形态、生理生化特性对菌株003和菌株X进行了初步鉴定,结果显示菌株003和菌株X都为芽孢杆菌属(Bacillus).     

番茄内生细菌种群动态分析及拮抗菌株的筛选

摘要：采用研磨组织稀释分离法对3个种植地区的番茄内生细菌的种群分布、数量变化规律进行了初步探讨。共分离、纯化得到内生细菌374株,经形态及理化特征鉴定,分属10个不同的属,13个种。其中假单孢菌属Pseudomonas sp.,黄单孢菌属Xanthomonas sp.;肠杆菌属Entenobacter sp.和芽孢杆菌属Bacillus sp.为优势种群。内生细菌在番茄植株种群数量从0.21x104 到13.82x104 cfu.g -1鲜重之间,但不同品种、组织、生育期及种植地,内生细菌的种群和数量各不相同,各组织中内生细菌的种群及数量根中最多,其次是茎和叶,成株期内生细菌无论种类和数量都明显高于苗期。采用平板对峙法从分离的内生细菌中筛选出对番茄灰霉病菌具有体外拮抗活性的菌株32个,占菌株总数的8.56%; 25个菌株对叶霉病菌有抑制作用,占菌株总数的6.68%;对灰霉病菌和叶霉病菌都具有拮抗作用的菌株20个,占菌株总数的5.35%。对灰霉病菌有强拮抗作用的菌株12个,对叶霉病菌有强拮抗作用的菌株仅1个,其中芽孢杆菌是主要的类群。     

放线菌菌株Ys.03的分离筛选及其抗病毒作用初步研究

从土壤中采集样品,采用平板稀释分离法对采集的样品进行分离、纯化培养,获得形态特征各有差异的放线菌菌株306株,通过室内活体拮抗试验表明,有107个菌株有稳定的拮抗作用,将具有拮抗作用的放线菌菌株进行摇瓶发酵,利用发酵液进行抗病毒作用的初选及复筛,结果表明,放线菌菌株Ys.03发酵液不仅可以在体外钝化病毒,而且对烟草花叶病毒病的保护作用和治疗作用都非常显著。     

烟草赤星病菌拮抗链霉菌的多重筛选及发酵液理化性质

以烟草赤星病菌为靶标菌,利用活体对峙拮抗、发酵液抑菌活性和离体叶片防效测定相结合的方法,从土壤中分离得到的371株放线菌中,筛选到2株抑菌效果明显、抗菌谱广、效果稳定的拮抗放线菌菌株。拮抗菌发酵液的理化性质测定表明:两菌株发酵液对温度、紫外线、自然光、酸碱的稳定性及耐贮性和菌株遗传特性虽有一定差异,但均较为稳定,其中,菌株182-2显示出了良好的抑菌防病效果和优良的稳定性,有开发应用价值。     

柑橘皮内生细菌分离及柑橘青霉病菌拮抗菌筛选研究

柑橘青霉病是柑橘贮藏期的主要病害,为利用拮抗内生菌进行生物防治,本研究选取3个品种柑橘的橘皮,采用研磨液培养法分离纯化得到26株内生细菌。通过对峙培养法,发现5株内生细菌对柑橘青霉病菌有明显拮抗作用,占菌株总数的19.2%。对这5株细菌进行初步鉴定,分属于气芽孢杆菌属（Aerobacillus sp.）、芽孢杆菌属（Bacillus sp.）、气单胞菌属（Aeromonas spp.）、假单胞杆菌属（Pseudomonas spp.）和黄单胞杆菌属（Xanthomonas spp.）5个属。不同的柑橘品种橘皮内的内生拮抗细菌的出现频次不同。抑菌结果表明,培养3天时,H-3抑菌圈直径最大,达到了15.3 mm,H-18抑菌圈最小,只有5.6mm;4天时,各抑菌圈直径均有缩小,但缩小幅度不大;5天时H-3拮抗作用仍十分明显,抑菌圈直径为10.3 mm。根据H-3的菌体形态特征、生理生化测定及其16S rDNA序列分析,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,该菌的发现对柑橘青霉病的生物防治有较好的应用价值。     

金龟子绿僵菌对棉花枯萎病菌的拮抗作用研究

在实验室条件下,研究了虫生真菌金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对棉花枯萎病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium f.sp.vasinfectum)的拮抗作用及其机制。对峙培养结果表明,金龟子绿僵菌的3个供试菌株对3株枯萎病菌均有抑制作用,其中以Ma55抑制效果最好。在培养基中加入Ma55不同浓度的孢子悬浮液,当浓度为3.25×106 cfu.mL-1时,5 d后,对3株枯萎病菌菌丝生长的抑制率均超过70%。Ma55液体振荡培养20 d获得的无菌发酵液对3个枯萎病菌菌株菌丝生长的抑制率分别达到59.86%、56.99%和57.09%,对它们的分生孢子产生及分生孢子萌发也都具有显著的抑制作用。显微镜观察未发现金龟子绿僵菌与棉花枯萎病菌菌丝间有重寄生现象。上述结果显示,金龟子绿僵菌对供试棉花枯萎病菌的拮抗机制主要是营养竞争、空间竞争及抗生作用。     

黄瓜白粉病的生防细菌筛选及鉴定

为开发黄瓜白粉病的生防资源,与三七根腐病菌、禾谷镰刀菌和柑橘炭疽病菌进行平板对峙培养,从25株黄瓜根际土细菌和91株烟草内生细菌中筛选出具拮抗功能的菌株;以盆栽试验从拮抗功能菌株中筛选能够防治黄瓜白粉病的生防菌株;用PCR扩增生防菌株的gyrB基因,结合菌株的菌落形态和部分生理生化特征,确定生防菌株分类地位。结果表明,在116株对峙培养细菌中,18株对三七根腐病菌、禾谷镰刀菌和柑橘炭疽病菌有较好拮抗效果。在盆栽试验中,烟草内生菌YN-201490和黄瓜根际菌株WL-1对黄瓜白粉病防效较好,其中YN-201490的1.81×10⁸ cfu/mL和WL-1的1.6×10⁸ cfu/mL稀释液连续施用3次后的防效分别达64.86%和61.26%。最终YN-201490被鉴定为枯草芽孢杆菌,WL-1被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。     

一株对番茄枯萎病有拮抗作用的枯草芽孢杆菌的ARTP诱变与筛选

旨在利用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术获得番茄枯萎病高效拮抗突变株。以一株对番茄枯萎病有拮抗作用的枯草芽孢杆菌N为初始菌株进行诱变处理,通过检测抑菌圈进行突变株筛选,并通过盆栽实验初步研究防效。通过拮抗带筛选以及抑菌圈复筛选出5株正突变菌株,其中正突变幅度最高的菌株为62,较初始菌株的抑菌圈直径提高了31.43%。经过6次传代,证实该突变株具有良好的遗传稳定性。盆栽实验表明,突变株62对于番茄枯萎病的防效达到75.76%。通过ARTP诱变获得的突变株稳定性好、拮抗效果提高明显,在防治番茄枯萎病方面有很好的应用前景。     

番茄产后灰霉病的病原鉴定及生物防治

为探索生物防治番茄产后灰霉病,采用柯赫氏法则从罹病的番茄果实上分离得到菌株FQ-2,基于形态学和rDNA-ITS序列,对该菌株进行病原鉴定,采用小麦内生菌解淀粉芽孢杆菌 B9601-Y2(Y2)和球花石斛内生菌贝莱斯芽孢杆菌DJB5(DJB5)对番茄灰霉病进行生物防治。FQ-2被鉴定为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea),且Y2和DJB5对番茄产后果实灰霉病均有较好的预防和治疗效果,Y2 1×10⁷ cfu/mL和DJB5 1×10⁸ cfu/mL悬浮剂在处理当天接种FQ-2,10天后的防效分别达88.10%和73.47%。在接种灰霉病菌当天再接种1×10⁸cfu/mL的Y2和1×10⁷ cfu/mL的DJB5,10天后灰霉病的防治效果分别达68.56%和78.74%。研究结果对番茄产后灰霉病的生物防治具有参考作用。     

解淀粉芽孢杆菌菌株P-r21抑菌广谱性及对番茄灰霉病的防治

为明确内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株P-r21的抑菌广谱性及对番茄灰霉病的防治效果,本研究优化了菌株P-r21发酵条件,利用平板对峙法测定了该菌株对6种病原菌的抑菌活性及对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)孢子萌发的抑制作用,并通过离体接种试验研究了对番茄灰霉病的防效。结果表明：菌株P-r21最佳发酵条件为在PYJ中培养初始pH 6.0,培养时间为12 h。菌株P-r21对供试的6种植物病原菌(Botrytis cinerea、Fusarium proliferatum、Rhizoctonia cerealis、Gaeumannomyces graminis、Fusarium graminearum、Colletotrichum karstii)的生长均表现出抑制作用;对C. karstii和B.cinerea抑制作用最强,抑菌率达到88.0%和84.5%。发酵滤液对B. cinerea孢子萌发抑制率达80.6%,对叶片和果实灰霉病的防效达到100%和80.0%;发酵液10倍稀释后防效也可达到67.1%和60.7%。本研究明...     

Integrated control of citrus green and blue mold and sour rot by Bacillus amyloliquefaciens in combination with tea saponin

A strain of Bacillus amyloliquefaciens HF-01, isolated from citrus fruit surfaces, was screened for in vitro antagonism toward Penicillium digitatum and identified, based on Biolog identification and phylogenetic analysis of 16S rDNA sequences. The isolate was further evaluated alone, or in combination with tea saponin (TS) on artificially inoculated ‘Wuzishatangju’ mandarin fruit. The results showed that the isolate performed significantly better than the water control in reducing the incidence of green and blue mold and sour rot, but was not as effective as the fungicide treatment. Biocontrol activity of B. amyloliquefaciens HF-01 was significantly improved by addition of TS, which might influence the formation of a bacterial biofilm and stimulate the antagonist population in wounds. The treatment comprising HF-01 combined with 50 μg mL^?1 TS was as effective as the fungicide treatment, which gave more than 90% control of green and blue mold and sour rot. B. amyloliquefaciens HF-01 alone or in combination with a low dosage of TS significantly reduced postharvest decay without impairing any of the other fruit quality parameters. The combination of B. amyloliquefaciens HF-01 and TS could be an alternative to synthetic fungicides for the control of citrus postharvest diseases.     

一株灰潮土解磷菌的解磷特性及其对花生的促生作用

为研究解磷菌能使土壤中被铁、铝等吸附固定的难溶性的非有效态磷转化为易于被植物吸收利用的有效态磷,促进农作物的生长。从南京长江南岸的潮土中分离筛选获得了一株解磷效果好、性状稳定的解磷细菌Y1。观测了菌株Y1形态及生理生化性状,测定其16S rDNA的保守序列。通过菌株生长和发酵条件试验,研究了该菌株在不同培养条件下的解磷能力。通过设置盆栽实验,研究了Y1菌株对花生生长的作用。实验结果初步确定菌株Y1为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),该菌株在碳源为葡萄糖、氮源为硝酸铵、初始pH 6~8、装液量为50/250 mL时,解磷效果最好。盆栽试验结果表明,接种菌株Y1的花生根长、根表面积、根直径分别比对照增加159.0%、133.0%、18.9%,植株对N、P、K的吸收量分别比对照高73.6%、26.6%、41.0%,差异均达显著水平。本实验从灰潮土中筛选出一株高效解磷菌Y1,不仅能够促进花生的生长、产量,而且能够增加花生植株对N、P、K的吸收。该研究结果为菌株Y1在农业生产中的应用提供了理论依据和实验基础。     

寒地绿肥与烤烟套种对烤烟生长及经济性状的影响

探索发展低碳烟草农业、构建资源节约型和环境友好型农业,促进特色烟叶开发和烟叶产业的可持续发展。本研究通过田间定位试验,以绿肥紫花苜蓿、草木犀（一年生）、黑麦草、小麦与烤烟套种为基础,具体研究不同种类绿肥套种并配以减氮施肥对烤烟大田生长及烤后烟叶经济性状的影响。结果表明,烟田套种绿肥能够明显调节烤烟大田期的生长发育,有助于干物质积累,提高光合特性,进而提高烤烟的经济效益。从烟株生长的农艺性状、干物质积累方面看,烤烟套种紫花苜蓿+减氮30%(Y3)时烟株生长状况好于不减氮的常规施肥(Y5)和套种其他种类绿肥的处理(Y1、Y2、Y4),与不减氮的常规施肥(Y5)相比,套种紫花苜蓿+减氮30%处理最大叶长、最大叶宽、最大叶面积和干物质积累分别提高了11.67%、12.95%、26.25%和22.05%。与不减氮的常规施肥(Y5)相比,烤烟套种不同种类绿肥对SPAD值和光合特性具有一定的提升效果,并且套种绿肥+减氮30%施肥后不会影响烤烟的正常成熟和落黄时间。同时,套种绿肥+减氮30%后能够明显提升烤后烟叶经济效益的相关指标,烤烟套种黑麦草+减氮30%(Y1)对上等烟比例提高效果最好,烤烟套种紫花苜蓿+减氮30%(Y3)上中等烟比例、均价、产量和产值提高效果最好。与不减氮的常规施肥(Y5)处理相比,Y1处理上等烟比例提高了9.86个百分点,Y3处理上中等烟比例、均价、产量和产值分别增加7.88个百分点、1.9元/kg、99.15 kg/hm ²、7584.91元/hm ²。综合来看,紫花苜蓿是黑龙江地区培肥改土效果最佳的绿肥品种。     

Inhibition of green mold disease in mandarins by preventive applications of methyl jasmonate and antagonistic yeast Cryptococcus laurentii

The objective of this study was to evaluate the preventive activity of methyl jasmonate (MeJA) alone and in combination with antagonistic yeast in suppressing green mold decay in citrus fruit, and to explore the mechanisms involved. At 100 μmol/L, MeJA inhibited disease incidence and lesion diameter of mold decay compared with the control (P < 0.05) The preventive application of Cryptococcus laurentii at 1 × 10⁸ cells/mL combined with 100 μmol/L MeJA reduced green mold incidence compared to the control and the other treatment groups (P < 0.05) when tested in wounded citrus fruit inoculated with Penicillium digitatum. MeJA and C. laurentii induced higher activity of polyphenol oxidase, peroxidase and catalase than control. Moreover, treatment with MeJA and C. laurentii induced a rise in the mRNA expression level of PR5 (pathogenesis-related protein family 5), which was stronger than in the single-treatment groups and the control. In addition, 100 μmol/L MeJA improved the rapid proliferation of C. laurentii in citrus fruit wounds. This combined treatment can induce natural resistance and stimulate the proliferation of antagonistic yeast on the fruit surface.     

甜瓜采后病害生防细菌的鉴定及生理生化特性测定

分离筛选对甜瓜采后病害具有潜在防治效果的微生物,以建立甜瓜采后病害综合防治体系。采用生物测定的方法从甜瓜表面筛选生防菌株,应用16SrDNA序列分析,并结合生理生化指标的测定进行鉴定。结果表明,从甜瓜表面分离得到1株防治效果明显且稳定的生防菌株2-17,平板对峙测定菌株2-17对采后病害3种病原菌具有明显的拮抗作用;室内生物测定表明,菌株2-17对3种病原菌的防治效果都达到了极显著的水平,特别是对于Trichotheci-umroseum防治效果最好,达到87.5%;对Fusariumspp.和Alternaria alternata的防治效果分别为78.6%和70.8%。应用16SrDNA序列分析,初步鉴定2-17为假单胞属(Pseudomonas);通过形态学观察、革兰氏染色、鞭毛染色以及生理生化指标的测定,2-17鉴定为P.putidabiovar A。     

Effect of ethylene degreening on the development of postharvest penicillium molds and fruit quality of early season citrus fruit

The effect of commercial degreening with ethylene gas on fruit susceptibility and quality and development of postharvest green (GM) and blue (BM) molds on early season citrus fruit was investigated. Each cultivar was harvested with different peel color indexes (CI). Fruit were exposed for 3 d to 2 μL L⁻¹ ethylene at 21 °C and 95–100% RH before or after artificial inoculation with Penicillium digitatum or Penicillium italicum. Control fruit were kept at the same environmental conditions without ethylene. Fruit were stored at either 20 °C for 7 d or 5 °C for 14 d and disease incidence (%) and severity (lesion diameter) were assessed. No significant effect of commercial degreening was observed on fruit susceptibility to both GM and BM on citrus cultivars inoculated after degreening. Likewise, no significant effect was observed on disease incidence on citrus cultivars inoculated before degreening and stored at either 20 °C for 7 d or 5 °C for 14 d. In contrast, in cultivars like ‘Clemenules’ mandarins and ‘Navelina’ oranges, degreening significantly increased the severity on fruit with higher initial CI (−3.6 and 1.7, respectively). GM and BM severity on degreened and control ‘Clemenules’ mandarins incubated at 20 °C for 7 d was 146 and 118 mm and 56 and 46 mm, respectively. In general, commercial degreening did not significantly affect external and internal quality attributes of citrus cultivars. Commercial degreening after inoculation of less green (more mature) fruit showed a trend to increase mold severity, presumably through an aging effect (acceleration of peel senescence).     

响应面法优化木糖发酵产乙醇酵母发酵条件的研究

以诱变筛选的季也蒙毕赤酵母突变菌株C3-10为研究对象,对其发酵培养条件进行研究。采用响应面法研究了木糖发酵产乙醇酵母突变株不同温度、起始pH值、接种量的影响。结果表明,最佳发酵条件为:温度29℃,起始pH值5.6,接种量5%,在此优化条件下乙醇产量达到15.01%。     

基于RGB线性组合模型的柑橘果实为害状识别

为了准确识别柑橘果实病虫害,提高柑橘生产信息化水平,本研究提出了最优RGB线性组合颜色模型来进行目标识别。首先在具有代表性的几幅图像中选取为害状区域与正常区域的点若干,统计这些样本点的R、G、B值及其均值,设计为害状区域与正常区域灰度差最大线性规划目标函数并求解,建立识别模型。最后利用识别模型结合阈值分割法对采集的96幅柑橘果实图像进行处理,发现识别正确率、误检率、漏检率分别81.25%,14.58%,4.17%,识别效果良好。与2R-G-B模型,G-B模型和R-B模型相比,本方法为害状区域与正常区域灰度差最大,故识别正确率最高,误检率、漏检率最低。试验结果表明：RGB线性组合模型法可用于柑橘果实病虫害的识别。