子宫内膜异位症不孕患者手术前后CD4+CD29+T细胞变化与妊娠率的关系

目的 了解子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)不孕患者手术前后CD4+CD29+T细胞变化及其与妊娠率的关系.方法 收集具有手术指征的EMS致不孕患者36例(手术组),无手术指征EMS患者38例(非手术组),同时选取38例健康女性作对照(健康组).观察EMS患者治疗前后外周血CD4+CD29+T细胞及其细胞因子白介素1(IL-1)、白介素4(IL-4)及CA125水平的变化,并将其与妊娠率进行相关性分析.结果 EMS不孕患者CD4+CD29+T细胞、IL-1、IL-4及CA125水平均显著高于健康女性(P＜0.01).治疗后,手术组和非手术组的CD4+CD29+T细胞、IL-1及CA125水平均显著低于治疗前,且手术组明显低于非手术组(P＜0.01);手术组的妊娠率明显高于非手术组(P＜0.05).CD4+CD29+T细胞、IL-1及IL-4与CA125均呈显著正相关,而与妊娠率呈显著负相关(P＜0.05或0.01).结论 CD4+CD29+T细胞升高是EMS不孕患者的重要免疫学表现,手术可显著降低该细胞及其细胞因子水平,提高妊娠率.     

布地奈德对成年过敏性鼻炎患者调节性T细胞功能的影响

目的 观察布地奈德对成年过敏性鼻炎(AR)患者CD8+CD28-调节性T细胞(Treg)功能的影响.方法 AR患者70例,随机分为观察组及对照组,每组35例,均以孟鲁斯特作为基础治疗,观察组给予布地奈德鼻喷雾剂128 μg/(鼻孔·天),对照组不给予布地奈德喷鼻.另选择32例健康志愿者作为健康对照组.检测健康对照组及AR患者治疗前及治疗12周后的外周血Treg及其胞内细胞因子白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,以及IgE、IgG4和嗜酸性粒细胞(EOS)含量.结果 (1)与健康对照组比较,AR患者CD8+CD28-Treg、IL-10、TGF-β1及IgG4均显著降低(P＜0.01),而IgE及EOS均显著升高(P＜0.01).(2)治疗后观察组CD8+CD28-Treg、IL-10、TGF-β1及IgG4均高于治疗前及对照组(P＜0.01),IgE及EOS均低于治疗前及对照组(P＜0.01或0.05).(3)CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1三者当中任意一者,均与IgE及EOS当中任一者呈负相关(P＜0.01或o.05),但前三者与IgG4均呈正相关(P＜0.05或0.01).结论 CD8+CD28-Treg及其细胞因子下降是AR的重要表现,布地奈德可提高该细胞及IgG4含量,降低ⅠgE及EOS含量.     

IL-35+调节性B细胞在桥本甲状腺炎免疫发病机制中的作用

目的 探讨IL-35+调节性B细胞(i35-Breg)在桥本甲状腺炎(HT)免疫发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测36例HT患者及32例对照者外周血CD 19+IL-12p35+IL-27EBI3+细胞比例及PD-L1、CD169、PD-1、CD43、IL-12p35、IL-27EBI3、IL-12Rp2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测CD19+细胞SHP-2、Vav mRNA表达,ELISA检测血浆中IL-35、TNF-α、IL-12水平.结果 HT患者外周血CD 19+IL-12p35+IL-27EBI3+细胞比例及IL-12p35、IL-27EBI3、IL-10表达明显低于对照组(P＜0.01).HT患者血浆IL-35水平及CD19+B细胞IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达明显低于对照组(P＜0.01),而血浆TNF-α、IL-12水平及CD14+细胞PD-L1、CD169表达明显高于对照组(P＜0.01).结论 i35-Breg细胞数量及功能异常可能是导致HT患者免疫功能紊乱的重要因素之一.     

肺结核患者治疗前后外周血γδT细胞及其记忆表型变化

目的 观察肺结核患者治疗前后外周血γδT细胞及其记忆表型变化.方法 采用流式细胞术检测39例肺结核治疗前患者(治疗前组)、36例肺结核治疗3个月后患者(治疗后组)及28例健康人(对照组)外周血γδT细胞及其记忆表型变化.结果 治疗前组外周血γδT细胞明显高于治疗后组和对照组(P＜0.01或0.05),CD45RA-CD27+γδT细胞明显低于治疗后组和对照组(P＜0.01),而CD45RA-CD27-γδT细胞高于治疗后组和对照组(P＜0.01).结论 肺结核患者外周血γδT细胞及其记忆表型转化可能与结核发生、发展密切相关.     

SLE患者CD4+CD25+调节性T细胞及Foxp3基因表达的研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD 4 CD 25 调节性T细胞及Foxp3基因的表达水平,了解它们在SLE发病机制中的作用。方法:分别收集25例SLE患者(SLE组)及健康人(对照组)外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。PE标记抗CD 4单抗,F ITC标记的抗CD 25单抗,作双色流式细胞术,分析SLE患者外周血CD 4 CD 25 调节性T细胞百分率,RT-PCR检测T细胞Foxp3 mRNA表达。结果:SLE组外周血CD 4 T、CD 4 CD 25 T细胞百分率及T细胞Foxp3 mRNA水平均低于对照组(P<0.01),并且CD 4 CD 25 T细胞百分率与Foxp3mRNA水平呈依赖关系(P<0.01)。结论:SLE患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD 4 CD 25 调节性T细胞数量减少和Foxp3mRNA表达下调可能与SLE的免疫学发病机制有关。     

共轭亚油酸对环孢酶素A注射仔猪细胞免疫反应的影响

为研究日粮添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对细胞免疫抑制剂环孢酶素A(Ciclosporin A,CsA)注射仔猪细胞免疫反应的影响,采用2×2试验设计即日粮类型(2％CLA或2％大豆油)和细胞免疫抑制处理(注射CsA或生理盐水),48头21 d断奶仔猪随机分为4个处理组,试验期为42 d.注射CsA显著提高仔猪的料重比(P＜0.05),而日粮添加CLA显著降低仔猪的料重比(P＜0.05),且日粮CLA阻止因CsA注射引起的仔猪料重比提高(P＜0.05).CsA注射极显著降低胸腺CD4+和CD8+T淋巴细胞百分数(P＜0.01).日粮CLA显著提高胸腺CD4+ CD8+双阳性和CD8+单阳性T淋巴细胞百分数(P＜0.05),且阻止注射CsA引起的仔猪胸腺CD4+单阳性、CD8+单阳性T淋巴细胞百分数的降低(P＜0.01).CsA注射严重耗竭仔猪外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞(P＜0.01).无论注射CsA与否,日粮添加CLA均提高仔猪外周血CD8+T淋巴细胞数和IL-2诱生活性(P＜0.05),显著缓解注射CsA引起仔猪外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞数的减少和IL-2诱生活性的降低(P＜0.01).在无CsA注射的情况下,日粮CLA对仔猪外周血淋巴细胞转化率没有显著影响(P＞0.05),但日粮CLA显著抑制因CsA注射引起的仔猪外周血淋巴细胞转化率降低(P＜0.05).日粮添加CLA能显著缓解因CsA注射引起的仔猪细胞免疫抑制.     

猪圆环病毒2型感染猪肠上皮细胞对CD4+T细胞分化关键分子mRNA的影响

[目的]探讨猪圆环病毒2型感染的猪肠上皮细胞对CD4+T细胞分化关键分子mRNA的影响.[方法]利用免疫磁珠法分离猪外周血CD4+T细胞,与猪圆环病毒2型感染48 h的猪肠上皮细胞共培养,收集共培养后72 h的T细胞,荧光定量PCR检测CD4+T细胞分化关键分子变化.[结果]荧光定量PCR检测显示,细胞因子 IL-4、IL-17A、IFN-γ、TGF-β1 与转录因子 T-bet、GATA3、RORγt、Foxp3的 mRNA 水平均被显著下调,而IL-10的mRNA水平被显著上调.[结论]感染猪圆环病毒2型猪肠上皮细胞抑制CD4+T细胞分化关键分子mRNA水平,提示CD4+T细胞向Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞、调节性T细胞分化被抑制,而IL-10的上调激活CD4+T细胞向高分泌IL-10的CD4+T细胞分化.     

佛波酯对人外周血CD4+T细胞产生IL-17的影响

观察不同浓度佛波酯(Phorbol myristate acetate,PMA)及不同刺激时间对慢性乙型肝炎患者外周血CD4+T细胞产生IL-17的影响.实验运用流式细胞仪检测不同浓度的PMA及不同刺激时间作用于人CD4+T细胞后其产生IL-17的差异.不同的PMA浓度对CD4+T细胞产生IL-17的能力不同,其中PMA 50 ng/mL组可产生较多的IL-17,而25 ng/mL组和100 ng/mL组产生量较少.不同的刺激时间对IL-17产生量也有显著影响:刺激3 h后IL-17的产生量增加不明显,而刺激至6 h及12 h时,IL-17的产生明显上升,且6 h与12 h无明显差异.运用流式细胞仪检测发现,CD4+T细胞IL-17的产生量与PMA既非浓度依赖又非时闭依赖关系,建议50 ng/mL PMA刺激6 h为淋巴细胞最佳活化方案.     

人外周血CD4+ T细胞F-actin的超分辨SIM成像

通过合成lifeact序列,将其克隆到pEGFP-C1载体上,构建了pEGFP-C1-Lifeact质粒,转染原代CD4+T细胞,实现对CD4+T细胞F-actin的荧光标记,结合超分辨3D-SIM荧光成像技术,研究人外周血CD4+T细胞F-actin的精细结构,并对其动力学过程进行连续观察。结果表明,CD4+T细胞F-actin分布在细胞膜周围,处于解聚和聚合的动态平衡状态,与普通荧光显微镜相比,超分辩SIM成像F-actin结构更加清晰,分辨率提高2~4倍。     

胸腺肽-α1对老年机械通气患者T淋巴细胞亚群的影响

目的 观察胸腺肽-α1对老年机械通气患者T淋巴细胞亚群的影响及其对呼吸机相关性肺炎的预防作用.方法 60例老年机械通气的患者随机分为胸腺肽组和常规组,每组30例.两组均给予常规治疗,胸腺肽组加予胸腺肽α1治疗.监测两组治疗前及治疗3、7、10d后外周静脉血检测T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)、NK细胞百分率,并比较两组ICU机械通气时间、ICU住院时间、呼吸机相关肺炎发生率及病死率.结果 治疗7d,胸腺肽组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞百分率均高于治疗前及同期的常规组(P＜0.05或0.01).治疗10d,胸腺肽组患者CD3+、CD4+及NK细胞百分率仍高于治疗前和同期的常规组(P＜0.05或0.01).胸腺肽组平均机械通气时间较常规组短[(15.8±3.05)d vs (11.09±4.21)d];平均ICU住院时间亦较常规组短[(14.92±5.46)d vs (19.14±4.60)d];呼吸机相关性肺炎发生率、病死均较常规组低(P＜0.05或0.01).结论 老年机械通气患者在常规治疗的基础上加用胸腺肽-α1可提高患者免疫力,有效预防呼吸机相关性肺炎的发生,提高生存率.     

Demethylated CD8 gene in CD4+ T cells suggests that CD4+ cells develop from CD8+ precursors

Mature T cells and medullary thymocytes bear either the CD4 or CD8 differentiation antigen. Precursor cells in the thymus express neither CD4 nor CD8 (CD4-8-), but most cortical thymocytes are CD4+8+. Whether CD4+ and CD8+ mature T cells arise directly from CD4-8- precursors or from a CD4+8+ intermediate remains unresolved. In this study, methylation of the CD8 gene in murine T cells and thymocytes was examined. There was progressive demethylation of the CD8 gene in the thymus during the transition from CD4-8- to CD4+8+. A similar pattern of demethylation of the CD8 gene was seen in CD4+ mature T cells, suggesting previous expression of CD8 in the CD4+ lineage.     

Inhibition of T cell receptor expression and function in immature CD4+CD8+ cells by CD4

Most immature CD4+CD8+ thymocytes express only a small number of T cell receptor (TCR) molecules on their surface, and the TCR molecules they do express are only marginally capable of transducing intracellular signals. TCR expression and function was not intrinsically low in immature CD4+CD8+ thymocytes, but was found to be actively inhibited by CD4-mediated signals. Indeed, release of CD4+CD8+ thymocytes from CD4-mediated signals resulted in significant increases in both TCR expression and signaling function. These results suggest that, in CD4+CD8+ cells developing in the thymus, increased TCR expression and function requires release from CD4-mediated inhibition.     

Toll pathway-dependent blockade of CD4+CD25+ T cell-mediated suppression by dendritic cells

Toll-like receptors (TLRs) control activation of adaptive immune responses by antigen-presenting cells (APCs). However, initiation of adaptive immune responses is also controlled by regulatory T cells (TR cells), which act to prevent activation of autoreactive T cells. Here we describe a second mechanism of immune induction by TLRs, which is independent of effects on costimulation. Microbial induction of the Toll pathway blocked the suppressive effect of CD4+CD25+ TR cells, allowing activation of pathogen-specific adaptive immune responses. This block of suppressor activity was dependent in part on interleukin-6, which was induced by TLRs upon recognition of microbial products.     

A role for CD40 expression on CD8+ T cells in the generation of CD8+ T cell memory

The delivery of CD4 help to CD8+ T cell responses requires interactions between CD40 and CD40 ligand and is thought to occur through antigen-presenting cell (APC) activation. Here we show that generation of memory CD8+ T cells displaying an enhanced capacity for cell division and cytokine secretion required CD4 help but not CD40 expression by the APCs. Activated CD4+ and CD8+ T cells expressed CD40; and in the absence of this protein, CD8+ T cells were unable to differentiate into memory cells or receive CD4 help. These results suggest that, like B cells, CD8+ T cells receive CD4 help directly through CD40 and that this interaction is fundamental for CD8+ T cell memory generation.     

Induction by antigen of intrathymic apoptosis of CD4+CD8+TCRlo thymocytes in vivo

In order to examine the mechanisms by which clonal deletion of autoreactive T cells occurs, a peptide antigen was used to induce deletion of antigen-reactive thymocytes in vivo. Mice transgenic for a T cell receptor (TCR) that reacts to this peptide contain thymocytes that progress from the immature to the mature phenotype. Intraperitoneal administration of the peptide antigen to transgenic mice results in a rapid deletion of the immature CD4+ CD8+ TCRlo thymocytes. Apoptosis of cortical thymocytes can be seen within 20 hours of treatment. These results provide direct evidence for the in vivo role of apoptosis in the development of antigen-induced tolerance.     

AA肉鸡生长过程中血液CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的变化规律

为了进一步了解AA肉鸡血液T淋巴细胞及其CD4 、CD8 亚群所占比例的变化规律及对免疫系统中的重要作用,使用流式细胞仪对1、3、5、7、14、21、28、35、42、的日龄AA肉鸡血液CD3 T淋巴细胞和CD4 、CD8 T细胞亚群比例进行检测.结果表明,1～5日龄CD3 T淋巴细胞含量逐渐升高,7日龄突然下降,14～21日龄急速升高,并达到最高峰后急速下降至28日龄,35～49日龄时相对趋于平稳状态;CD4 T细胞含量1～3日龄明显低于其余日龄,3～5日龄急速上升,7～14日龄增加缓慢,21日龄时达到最高峰后急速下降至28日龄,35～49日龄时基本趋于平稳状态;CD8 T细胞含量1～5日龄缓慢上升,5～7日龄急速下降后,再急速上升到14日龄,14～28日龄再下降,此后直至49日龄均在此水平上处于平稳状态.CD4 /CD8 比例:1～7日龄缓慢增加,7～14日龄比例急速下降至最低,14～21日龄时比例增加到最高峰后急速下降至28日龄,但比例数值高于前1～7日龄,28～49日龄比例趋于平稳状态.表明AA雏鸡在1～7日龄时其免疫功能逐渐提高,14日龄时细胞免疫功能明显减弱,这可能与CD8 T淋巴细胞含量高有关,21日龄时机体细胞免疫水平达最高状态,在28日龄后肉鸡细胞免疫功能基本保持稳定状态,但仍需要加强饲养管理.     

CD8+ T cell cross-priming via transfer of proteasome substrates

"Cross-priming" describes the activation of na?ve CD8+ T cells by professional antigen-presenting cells that have acquired viral or tumor antigens from "donor" cells. Antigen transfer is believed to be mediated by donor cell-derived molecular chaperones bearing short peptide ligands generated by proteasome degradation of protein antigens. We show here that cross-priming is based on the transfer of proteasome substrates rather than peptides. These findings are potentially important for the rational design of vaccines that elicit CD8+ T cell responses.     

米糠多糖对不同免疫状态雏鸡外周血CD4^＋和CD8^＋ T淋巴细胞亚群的影响

为探讨米糠多糖对不同免疫状态雏鸡免疫功能的调节作用机理,采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺处理雏鸡和人工感染传染性法氏囊病毒雏鸡在服用米糠多糖（剂量150 mg/（kg.d））和不服用米糠多糖情况下,外周血CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果表明：米糠多糖能够提高健康雏鸡外周血CD4^＋T淋巴细胞比率,对CD8^＋T淋巴细胞作用不明显;能够提高环磷酰胺和传染性法氏囊病毒诱导免疫抑制雏鸡外周血中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞数量。