八味中草药对维氏气单胞菌TH0426生物膜形成的影响

为了解中药对维氏气单胞菌(Aerornomas veronii,AV)TH0426株生物膜形成的影响。采用微孔板半定量法,研究五倍子、红花、黄连、鹿衔草、地榆、射干、姜厚朴及黄芩8味中药水煎液对AV TH0426株生物膜的影响。结果显示,低浓度五倍子、红花和黄连水煎液对菌株生长及生物膜形成均无明显影响;而高浓度五倍子和黄连水煎液可通过抑制菌株的生长来影响生物膜的形成,高浓度红花水煎液对生物膜抑制作用明显,且不影响菌株的正常生长;其余五味中药鹿衔草、地榆、射干、姜厚朴和黄芩对菌株的生长及生物膜形成无明显影响。表明高浓度五倍子、红花及黄连水煎液能抑制AV TH0426株生物膜的形成,具有抗AV TH0426株生物膜的作用,这将为从抗生物膜角度防治维氏气单胞菌提供有益参考。     

中草药对致病性维氏气单胞菌体外抑菌活性及 最优组方研究

本研究旨在寻找防治鲟鱼病害的有效中草药药物。用水煎煮法提取天然物中草药有效成分,采用试管法测定各提取物对维氏气单胞菌的最低抑菌浓度,最后通过正交试验确定了4种中草药提取物体外抑菌的最优组方。33种中草药提取物对维氏气单胞菌抑菌效果最好的是五倍子,其MIC为0.97 μg/mL;其次是地榆和黄芩,两者MIC均为1.95 μg/mL;马齿苋和苦参抑菌效果最差,MIC为250 μg/mL。选取五倍子、地榆、地锦草和连翘进行正交试验,其最优组方为1∶2∶4∶8,该组方对维氏气单胞菌有明显的抑制作用,为进一步应用中草药防治水产养殖病害提供依据。     

单味中草药对罗非鱼维氏气单胞菌的体外抑菌试验

为了研究了20种单味中草药对罗非鱼维氏气单胞菌的体外抑菌情况,试验采用琼脂扩散法和试管二倍稀释法测定抑菌圈大小及最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:罗非鱼维氏气单胞菌对五味子、五倍子、黄连等5种药物极度敏感,对黄柏、苏木、石榴皮等5种药物高度敏感,对薄荷、公丁香、鱼腥草等5种药物中度敏感;其中黄连、乌梅、沙棘等5种药物对罗非鱼维氏气单胞菌有较好的抑菌效果,MIC在15.63~62.50 mg/mL之间;黄柏、白头翁、石榴皮3种药物的MIC均为125 mg/mL;苏木、黄芩、薄荷3种药物的MIC均为250 mg/mL;公丁香、鱼腥草、夏枯草等5种药物对该菌抑菌效果比较差,MIC均为500 mg/mL。说明五味子、五倍子、黄连等5种中草药可用来防治罗非鱼维氏气单胞菌。     

中草药水提取物对牛源耐左氧氟沙星大肠杆菌的抑制活性研究

为了解一些中草药水提取物对牛源耐左氧氟沙星大肠杆菌(E.coli)的抑菌作用,本研究检测了7株牛源E.coli分离株对左氧氟沙星的敏感性,并采用打孔法和微量倍比稀释法测定了20种中草药水提取物及其与左氧氟沙星联用对7株牛源耐左氧氟沙星E.coli分离株的抑制活性,评价抗菌活性较强的几种中草药分别与左氧氟沙星联用在体外抑菌效果。结果表明,7株受试菌株对左氧氟沙星的耐药率达100%;20种中草药水提取物中只有黄连、五倍子、乌梅、黄芩、五味子、鹿衔草及地榆的抑菌活性相对较高,但与左氧氟沙星联用后,其抑菌活性大部分降低。本研究结果为抑菌中草药方剂的研制提供了相关的实验依据。     

12种中草药对金黄色葡萄球菌体外抑菌作用的研究

为了探讨五味子等12种中草药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,试验采用平皿打孔法和试管二倍稀释法,选用五味子、五倍子、连翘、野菊花、蒲公英、夏枯草、大青叶、艾叶、乌梅、大黄、黄连、黄芩共12种中草药对金黄色葡萄球菌进行药敏试验,并测定体外最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:12种中草药对金黄色葡萄球菌均有一定的抗菌活性,其中五味子、五倍子、连翘、蒲公英、大青叶、艾叶、乌梅、大黄、黄连、黄芩抑菌效果较好,夏枯草、野菊花抑菌效果相对较差。     

40种中草药对美洲鲥源温和气单胞菌的体外抑菌作用研究

为筛选出对美洲鲥（Alosa sapidissima）源温和气单胞菌（Aeromonas sobria）体外抑菌效果较好的中草药，采用牛津杯打孔法测定了温和气单胞菌对乌梅（Fructus mume）、苏木（Caesalpinia sappan）、五倍子（Rhus chinensis）等40种中草药的敏感性，并进一步通过微量二倍稀释法以及涂布平板法测定了具有抑菌作用的中草药对温和气单胞菌的最小抑菌质量浓度（Minimum Inhibitory Concentration, MIC）和最小杀菌质量浓度（Minimum Bactericidal Concentration, MBC）。结果表明：温和气单胞菌对苏木、乌梅、黄连、石榴皮（Punica granatum）、五倍子和地榆（Sanguisorba officinalis）6种中草药为高度敏感，其抑菌圈直径为20.00～28.00 mm，其中苏木的抑菌作用最强，抑菌圈直径为（27.12±0.78）mm，对赤芍（Radix paeoniae rubra）、连翘（Forsythia suspensa）、白头翁（Pulsatilla chin...     

维氏气单胞菌生物膜体外模型的建立及影响因素的研究

为探索不同理化因素对致病性维氏气单胞菌(Aeramonasveronii,AV)‘TH0426成膜的影响,采用改良微孔板法建立致病性AV生物膜体外模型并对其进行了研究。结果表明,AVTH0426能够在聚乙烯酶标板表面形成生物膜,PH值4~6,10℃和NaCl浓度4 g/L培养18 h是形成生物膜的最适条件,黄颡鱼(Pseudobagrusfulvidraco)的肝脏提取液对AV TH0426形成生物膜有促进作用。这为进一步探讨维氏气单胞菌生物膜形成机制和致病机理提供了参考。     

中草药对罗非鱼源维氏气单胞菌体外抑菌效果研究

为了探求和补充对维氏气单胞菌引起的水产动物病害防治有效的中草药种类,本试验以从罗非鱼体内分离得到并通过生化鉴定初步确定的维氏气单胞菌作为研究对象,选取27种中草药进行初筛,测定各中草药的抑菌圈直径,对中度敏感且尚无关于维氏气单胞菌抑菌情况报道的几种中草药进行最小抑菌浓度(MIC)试验。结果表明:有14种中草药对维氏气单胞菌有抑菌效果,但抑菌活性差别较大。其中五味子对维氏气单胞菌的抑菌效果为高度敏感,苦楝树皮、山楂、大黄、公丁香、鸡血藤、丹参、决明子、藿香、牡丹皮和生地对维氏气单胞菌的抑菌效果为中度敏感,仙鹤草、没药和玄参等对维氏气单胞菌的抑菌效果为低度敏感。鸡血藤、苦谏树皮和丹参的MIC值最低,均为31.25 mg/mL;山楂为250 mg/mL;而决明子的MIC值最高,为500 mg/mL。说明五味子、鸡血藤、苦谏树皮和丹参这4种中草药对罗非鱼维氏气单胞菌的抑菌效果较好。     

5种中药提取物及其组合对嗜水气单胞菌的体外抑制作用

试验旨在探讨大黄、诃子、五倍子、黄连、黄芩5种中药及其组合对嗜水气单胞菌的体外抑制作用。试验测定了5种中药的水提物和醇提物对3株嗜水气单胞菌的抑菌圈、最低抑菌浓度（MIC）、最低杀菌浓度（MBC）及对嗜水气单胞菌生长的影响，采用棋盘交叉法测定了5种中药联合抑菌作用。结果显示，大黄和黄芩醇提物的抑菌圈显著高于其水提物（P<0.05），诃子和黄连水提物的抑菌圈显著高于其醇提物（P<0.05），五倍子水提物和醇提物抑菌圈大小相近。五倍子抗菌作用最强，其水提物和醇提物MIC为7.81～15.63 g/L，大黄醇提物和诃子水提物抗菌作用次之，MIC均为15.63～31.25 g/L。选择抑菌作用更强的提取物两两组合，五倍子水提物与其他4种中药提取物组合、大黄醇提物与黄连水提物组合均为协同作用；黄连水提物与黄芩醇提物组合为相加作用；大黄醇提物与黄芩醇提物、诃子水提物与黄连水提物组合均为无关作用；诃子水提物与黄芩醇提物组合为拮抗作用。研究表明，5种中药对嗜水气单胞菌均具有抑制作用，五倍子作用最强，五倍子水提物与其他4种中药提取物两两组合、黄连水提物与黄芩醇提物组合均可增强抗菌活性。     

射干等20种中药对4株真菌的体外抗菌活性

观察射干等20种中药的体外抗真菌活性。通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法提取射干等20种中药中的抗菌活性部位,采用液体微量稀释法(broth microdilution susceptibility method,M38-A)测定射干等20种中药对石膏样小孢子菌、犬小孢子菌、须癣毛癣菌和白色念珠球菌4株真菌的体外抗菌活性,并研究抗菌活性较强几味中药的体外联合抑菌活性。射干、白鲜皮、五倍子和苦参4种中药提取物对4株真菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)范围为1.563¹2.5g/L;姜黄、杜仲、赤芍、栀子、连翘和柴胡6种中药提取物的MIC值范围为6.2512.5g/L;姜黄、杜仲、赤芍、栀子、连翘和柴胡6种中药提取物的MIC值范围为6.25⁵0g/L;藿香、黄芩、板蓝根、黄柏和大黄5种中药提取物的MIC值范围在5050g/L;藿香、黄芩、板蓝根、黄柏和大黄5种中药提取物的MIC值范围在50¹00g/L;金银花、虎杖、何首乌、知母和佛手5种中药提取物的MIC值>100g/L。联合抑菌试验结果表明,射干、姜黄和栀子的联合抑菌指数(FICI)≤2,五倍子和射干、姜黄、栀子的联合抑菌指数(FIC)>2。结果显示射干、五倍子、姜黄、栀子对4株真菌均具有较好的体外抗真菌活性;射干、姜黄、栀子表现出无关或相加、协同的作用;五倍子和射干、姜黄、栀子表现出了拮抗作用。     

中药单味药及复方对嗜水气单胞菌的体外抑菌作用

本试验用煎煮法提取中药有效成分,采用琼脂平板扩散法探讨了黄连、五倍子、大黄、诃子等中药单味药及中药复方对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的体外抑菌作用,测定了抑菌圈大小.采用双倍试管稀释法测得了最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).试验结果表明,16种中药提取物对嗜水气单胞菌有不同程度的抑制作用,其中五倍子、黄连、诃子、大黄的水提物的抑菌效果最好,MIC值分别为7.81 mg/mL、15,63 mg/mL、31.25 mg/mL、62.50 mg/mL.五倍子作为主药,分别与诃子、黄连、大黄接一定比例组成的复方的MIC分别为3.906 mg/mL、7.813 mg/mL、15.625 mg/mL.通过对筛选的复方与市场上销售的3种成品复方的体外抑菌活性的比较,发现本实验室筛选的复方对嗜水气单胞菌的体外抑菌活性更强.     

维氏气单胞菌TH0426株ompW基因的克隆、生物信息学分析及其原核表达

为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)ompW基因的生物信息学特性及相关功能,试验克隆了维氏气单胞菌ompW基因片段,通过生物信息学软件分析其编码蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、二级及三级结构,并对其进行原核表达及反应原性检测。结果显示,ompW基因全长594 bp,编码197个氨基酸,TH0426株ompW基因与A.veronii B5B6株属于同一分支;该蛋白属于外膜蛋白,在19～29位氨基酸之间有一个典型的疏水区域,不存在跨膜区、信号肽,二级结构以β折叠与无规则卷曲为主。Western blot结果显示OmpW重组蛋白能与鼠抗维氏气单胞菌(A.veronii)TH0426株血清发生特异性结合。综上,OmpW重组蛋白具有一定的免疫原性,为进一步研究A.veronii疫苗奠定基础。     

中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验

选取28种中草药,研究其对4种大肠杆菌菌株(血清型O78、血清型O41、血清型O24、血清型O1+O148)的体外抑菌效果,抑菌圈的直径越大,抑菌效果越好。本试验筛选了抑菌效果较好的10种中草药,分别是秦皮、厚朴、黄芩、苦参、黄连、穿心莲、马齿苋、鱼腥草、白头翁和大青叶。     

50种中草药体外抑杀嗜水气单胞菌的药效研究

为筛选有效抑制嗜水气单胞菌(A.hydrophila)的中草药,以期为水产养殖业中防治该菌引起的疾病提供实验依据.本研究采用琼脂扩散法(打孔法)测定了地榆等50种中草药对A.hydrophila的抑制作用,并用二倍稀释法测定抑菌效果较强的25种中草药对A.hydrophila的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果显示地榆的抑菌效果最好,其抑菌圈直径达20mm以上,MIC为3.91 mg/mL,MBC为7.81 mg/mL;黄连等24种中草药有一定的抑菌和杀菌效果,巴戟天等25种中草药无抑菌作用.结果表明地榆对A.hydrophila的体外抑制效果最好.     

20味中药对大肠杆菌的体外抑菌作用

研究苏木、黄连、石榴皮等20味中药对大肠杆菌的体外抑菌作用。采用水提法制备20味中药的提取物,通过试管二倍稀释法测定20味中药水提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);再将20味中药组成药对,进行联合抑菌,测定药对的MIC和MBC,计算其部分抑菌浓度指数(FIC)。结果表明,20味中药中,黄连、苏木抑菌效果最佳,MIC均为6.250 mg/mL,茯苓、山楂、火麻仁抑菌效果最差,其MIC和MBC均大于400.000 mg/mL。联合抑菌的28组药对中,苏木与石榴皮、石榴皮与黄柏、石榴皮与黄芩、地榆与苏木、地榆与乌梅、地榆与花椒、地榆与黄柏、火麻仁与旋覆花、旋覆花与山楂等9组药对均呈现协同作用,石榴皮与黄连、石榴皮与乌梅均呈现拮抗作用,其他药对呈现相加或无关作用。说明对大肠杆菌抑菌作用强的单味中药与其他中药联合,其抑菌效果未必会增强。     

9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌体外抑制作用

研究石榴皮、花椒、大青叶等9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用。采用水煎煮法分别提取9种不同中草药的有效成分;采用二倍稀释法、平板培养法分别检测中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),筛选出抑菌功效良好的5味中草药,再分别对2种细菌进行联合用药,测定中草药联用的体外抑菌功效。结果表明,花椒、黄连、石榴皮、诃子、龙胆草等单味药具有较好的体外抑菌功效,在9种中草药中抑菌作用最佳的是黄连,其对沙门菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.625 mg/mL和3.125 mg/mL,MBC值分别为100.000 mg/mL和200.000 mg/mL。对金黄色葡萄球菌,中草药间有拮抗作用的组合有黄连+花椒、黄连+诃子、石榴皮+龙胆草,其他中草药联合时均为无关作用;对沙门菌,中草药间有拮抗作用的组合有黄连+花椒、诃子+龙胆草、石榴皮+诃子、黄连+诃子、石榴皮+龙胆草,中草药间有相加作用的组合是花椒+石榴皮,其MIC值为3.125 mg/mL,FIC值为0.75,其他中草药联合时均为无关作用。结果提示,单独用药对细菌具有良好抑菌功效的中草药,联合用药...     

复方中草药对临床分离猪大肠杆菌的体外抑菌作用试验

为了比较8组复方中草药制剂体外抑菌作用效果,筛选对猪大肠杆菌抑菌作用较好的组方,试验选用21种单味中草药配伍组成8组复方(复方1:石菖蒲、五倍子、黄芩、菊花;复方2:石菖蒲、黄芩、大黄、金银花;复方3:大黄、黄芩、秦皮、艾叶;复方4:白头翁、黄连、黄柏、秦皮;复方5:马齿苋、白头翁、黄柏、五倍子、甘草;复方6:郁金、诃子、黄芩、大黄、黄连、栀子、黄柏、白芍;复方7:地榆、石榴皮、土茯苓;复方8:黄连、白头翁、木香、甘草),采用水煎法制备水提物,分别通过平板打孔法、2倍稀释法和平板接种法对从临床病例中分离的猪大肠杆菌进行药物敏感性及最小抑菌浓度体外测定。结果表明:中草药复方3、复方7对猪大肠杆菌为高度敏感,复方6为中度敏感,复方1为低敏,其他复方不敏感;复方3、复方7对猪大肠杆菌体外抑菌效果较好,最小抑菌浓度为250 mg/m L;复方1、复方6、复方8抑菌效果次之,最小抑菌浓度为500 mg/m L;复方5有抑菌效果,菌落数随药物浓度升高呈降低趋势;复方2、复方4无抑菌作用。     

中草药水提物对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果

研究中草药单药及复方联合用药对罗非鱼源无乳链球菌的体外抑菌效果。采用试管二倍稀释法分别测定10种中草药水提物对临床分离的罗非鱼源无乳链球菌的最小抑菌浓度(MIC),筛选出抑菌作用较好的7味中草药,并采用棋盘稀释法测定这7味中草药不同组合联用后对罗非鱼源无乳链球菌的部分抑菌浓度(FIC index)。结果表明,10味中草药水提物中,黄连和五倍子水提物抑菌效果最好,MIC值均为3.9 mg/mL,其次为石榴皮,MIC为15.6 mg/mL,连翘、诃子、鸡血藤及黄芩MIC均为62.5 mg/mL。金银花、板蓝根以及蒲公英抑菌效果较差。在复方联合用药试验中,黄连分别与诃子和黄芩联合,连翘分别与鸡血藤和黄芩联合,诃子分别与石榴皮、鸡血藤和黄芩联合均呈现协同作用;其余药物联用组合均呈现无关或拮抗作用。     

5种中药提取物对金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

采用水提,水浴加热的方法提取黄芩、黄连、黄柏、鱼腥草和五倍子五味中药的有效成分,通过二倍稀释法测出各个药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用肉汤稀释棋盘法测定五味中药的联合抑菌情况。结果显示,金黄色葡萄球菌对黄连高度敏感;对黄芩、黄柏、五倍子和鱼腥草为中度敏感。黄芩、黄连和五倍子的杀菌作用较强,鱼腥草和黄柏的杀菌作用较弱。通过联合抑菌指数(FLCL)可知五倍子与黄芩、五倍子与黄连联合用药为协同作用。五倍子与鱼腥草、黄连与鱼腥草、黄连与黄芩的联合作用,表现为相加作用。黄连与黄柏、黄芩与鱼腥草、黄芩与黄柏、五倍子与黄柏的联合作用,表现为无关作用。鱼腥草与黄柏表现为拮抗作用。     

中草药水提物对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果

研究中草药单药及复方联合用药对罗非鱼源无乳链球菌的体外抑菌效果。采用试管二倍稀释法分别测定10种中草药水提物对临床分离的罗非鱼源无乳链球菌的最小抑菌浓度(MIC),筛选出抑菌作用较好的7味中草药,并采用棋盘稀释法测定这7味中草药不同组合联用后对罗非鱼源无乳链球菌的部分抑菌浓度(FIC index)。结果表明,10味中草药水提物中,黄连和五倍子水提物抑菌效果最好,MIC值均为3.9 mg/mL,其次为石榴皮,MIC为15.6 mg/mL,连翘、诃子、鸡血藤及黄芩MIC均为62.5 mg/mL。金银花、板蓝根以及蒲公英抑菌效果较差。在复方联合用药试验中,黄连分别与诃子和黄芩联合,连翘分别与鸡血藤和黄芩联合,诃子分别与石榴皮、鸡血藤和黄芩联合均呈现协同作用;其余药物联用组合均呈现无关或拮抗作用。