Re-8株H5亚型禽流感灭活疫苗对野鸟源H5N8流感病毒的免疫保护性研究

为评估当前应用的Re-8株种毒相关禽流感灭活疫苗对野鸟源H5N8流感病毒的免疫预防效果,本研究将重组禽流感病毒(AIV)H5亚型Re-8株灭活疫苗(H5N1亚型,Re-8株)和重组AIV(H5+H7)灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9 H7 Re-1株)分别以0.3 m L/只的剂量接种3周龄SPF鸡,免疫3周时进行HI抗体检测和攻毒试验。结果显示,上述2种疫苗免疫的SPF鸡血清中针对H5亚型Re-8株抗原的HI抗体均在8 log2以上,以105EID50的剂量、鼻腔感染途径攻击野鸟源H5N8病毒BHG/QH/2/16和BHG/Tibet/3/16后,所有免疫组鸡在14 d观察期内均全部健活,不排毒,而对照组鸡在攻毒后4 d内全部发病、死亡、排毒。现地免疫重组AIV H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)的商品蛋鸡直接进行HI抗体检测和攻毒试验,结果显示,免疫蛋鸡血清中针对Re-8株抗原的HI抗体平均滴度为8.3 log2,以相同攻毒方式和剂量分别攻击2株H5N8病毒后,免疫鸡也获得完全免疫保护,不发病、不死亡、不排毒。本研究结果表明,含有重组AIV H5 Re-8株抗原的灭活疫苗可有效防控野鸟源H5N8流感病毒,为我国及其他国家H5N8亚型禽流感免疫防控提供了科学依据。     

樱桃谷肉鸭免疫重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗血清抗体监测报告

为监测重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)在樱桃谷肉鸭免疫效果,于2017年8~9月,对5个樱桃谷肉鸭养殖场开展了疫苗免疫与抗体检测试验。监测结果表明,35日龄时,有4个场的H5N1 Re-8禽流感亚型疫苗的平均抗体滴度高于4log2,3个场的抗体阳性率高于70%;H7N9禽流感亚型疫苗免疫后5个场的平均抗体滴度均高于4log2,抗体阳性率均高于70%。两个疫苗批次间免疫效果差异不显著(P0.05)。但生长前期禽流感H7N9亚型存在母源抗体空白期;生长中期,禽流感H5N1亚型存在抗体低谷阶段。均存在一定程度AIV感染风险。建议进一步加强疫苗应用监测与免疫程序研究,提醒养殖场户加强生物安全防控,防止疫病发生。需要进一步加强疫苗应用监测与技术指导,提醒养殖户加强生物安全防控,防止疫病发生。     

重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫抗体监测试验

为了评估重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫效果以及对白羽肉鸡最佳免疫时间,试验选取3个厂家(a、b、c厂)重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)分别在1日龄和7日龄进行接种,于接种前(1,7日龄)、14,21,28,35,42日龄采血进行抗体检测,以了解不同厂家高致病禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果以及最佳免疫时间。结果表明:3个厂家高致病性禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果没有明显差异,在21日龄后H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9 Re-2抗体效价均在4 lb以上,各毒株抗体效价在28,35,42日龄时,1日龄抗体效价要高于7日龄,且a厂家疫苗产生的抗体效价要略高于b、c厂。说明1日龄免疫效果要好于7日龄,最佳免疫时间为1日龄。     

肉鸡H5、H7亚型禽流感病毒母源抗体消长规律及其对禽流感疫苗接种的影响

为了规范罗斯308肉鸡H5亚型和H7亚型禽流感疫苗免疫程序的制定,研究对不同免疫程序的商品肉鸡进行了血清学调查。结果表明:非免疫肉鸡的H5亚型(Re-8)和H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率均随日龄增长而逐渐下降,两种母源抗体的保护时间均较短。接种H5+H7二价禽流感灭活疫苗前肉鸡的这两种母源抗体阳性率均在70%以上,平均滴度均≥4 log2;接种后各监测时间的两种禽流感抗体阳性率均在70%以下,抗体平均滴度均4 log2,但接种疫苗肉鸡抗体保护时间比不接种肉鸡保护时间长。提示部分商品肉鸡饲养后期存在被H5亚型和H7亚型禽流感病毒感染的风险。     

重组鸡白细胞介素6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用的观察

为评价重组鸡白细胞介素6(rChIL-6)在商品鸡体内对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用,将rChIL-6与重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)采用肌肉注射方式免疫57日龄麻鸡,分别在疫苗接种前和接种后第7、14、21、35、42天,检测H5N1亚型禽流感病毒(Re-6、Re-7)血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明:与灭活疫苗同时注射rChIL-6组比单一注射疫苗组的H5N1 Re-6抗体滴度可提高1.6 log2,Re-7抗体滴度可提高1.8 log2。提示rChIL-6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)有显著的免疫增强作用。     

重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗免疫效果的评价

为了评价重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗的免疫效果,在2016年7月至2017年8月期间,对免疫重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株+Re-8株)的家禽采集了1 999份血清样品,采用血凝与血凝抑制方法进行检测,结果为H5亚型禽流感病毒Re-6株免疫合格率为86.84%,H5亚型禽流感病毒Re-7株免疫合格率71.44%,H5亚型禽流感病毒Re-8株免疫合格率为67.78%。结果表明,免疫重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗后,不同毒株的抗体、不同种类的家禽、不同免疫次数的抗体水平均有差异。     

重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉免疫效果的研究

为评估重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉的免疫保护效果,选取30日龄的雉,按照免疫程序首免后21 d,加强免疫1次,分别于接种前和接种后定期采血,分离血清,检测H5、H7亚型HI抗体滴度。结果显示,免疫前,雉血清中H5、H7亚型HI抗体滴度均为0;免疫后14 d,H5和H7亚型抗体平均滴度分别达到7.0log2和7.07log2,49 d后平均滴度达到峰值,分别为8.04log2和9.20log2;H5亚型免疫有效期可达105 d以上,H7亚型可达189 d以上。结果表明,重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对雉具有良好的免疫保护效果且安全性良好,但疫苗免疫49 d后,H5、H7抗体效价逐渐下降,133 d后明显下降,群体免疫合格率低于70%,因此生产中推荐,30日龄首免后,51日龄和5月龄各加强免疫1次。本研究为珍稀禽的禽流感免疫疫苗选择和程序制定提供了参考。     

禽流感H5N1亚型不同株抗原抗体相互检测相关性试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,在禽流感疫苗免疫效力的评价过程中,监测免疫鸡血清抗体是最常用、最可行的方法。2009年农业部批准重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株＋Re-4株）制造,2012年重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）及重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-6株＋Re-4株）取代以上两个产品,2014年,北方出现了新的7．2分支毒株,而禽流感Re-4株疫苗和Re-6株疫苗对这种新型流行株的保护效力并不佳。2014年4月11日,农业部发布“中华人民共和国农业部公告第2093号”,制定了重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-7株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株＋Re-7株）2种兽药产品制造及检验规程,全国将主要以Re-6与Re-7两种疫苗联合免疫为新的趋势。本试验分别用不同毒株的禽流感试验抗原与不同毒株禽流感疫苗免疫鸡的血清通过HI试验相互检测,对抗体效价进行分析,从而得出不同毒株的相关性。     

禽流感H5N1亚型不同株抗原抗体相互检测相关性试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,在禽流感疫苗免疫效力的评价过程中,监测免疫鸡血清抗体是最常用、最可行的方法。2009年农业部批准重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株+Re-4株）制造,2012年重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）及重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-6株+Re-4株）取代以上两个产品,2014年,北方出现了新的7.2分支毒株,而禽流感Re-4株疫苗和Re-6株疫苗对这种新型流行株的保护效力并不佳。2014年4月11日,农业部发布“中华人民共和国农业部公告第2093号”,制定了重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型, Re-7株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）2种兽药产品制造及检验规程,全国将主要以Re-6与Re-7两种疫苗联合免疫为新的趋势。本试验分别用不同毒株的禽流感试验抗原与不同毒株禽流感疫苗免疫鸡的血清通过HI试验相互检测,对抗体效价进行分析,从而得出不同毒株的相关性。     

乌昌地区三黄鸡免疫不同禽流感疫苗及不同免疫剂量的抗体水平测定和效力对比试验

用5种不同的禽流感疫苗以不同免疫剂量、不同免疫次数接种乌昌地区三黄鸡,定期检测禽流感免疫抗体,结果表明,重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、Inactivated Vaccine of Avian Influenza(H5N2)和禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗(H5N1Re-1+H9N2 Re-2株)等3种疫苗均能刺激机体产生良好的免疫抗体,而禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)和禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗(H5亚型)的免疫抗体十分低下。经不同免疫次数的比较试验表明,重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、Inactivated Vaccine of Avian Influenza(H5N2)和禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗(H5N1Re-1+H9N2 Re-2株)二次免疫的H5抗体水平明显高于经一次免疫的抗体水平,且免疫持续期长。     

两种重组禽流感病毒H5亚型疫苗免疫效果的研究

为了更好地评价禽流感疫苗免疫效果,有效预防高致病性禽流感的发生,选用两种重组禽流感病毒H5亚型疫苗(Re-6株、Re-6株+Re-8株)对14日龄雏鸡开展免疫效果的比较试验,结果表明:从免疫抗体水平来看,免疫Re-6株疫苗的A组鸡群在首免后90d抗体水平维持在7log2以上,之后逐渐下降;免疫Re-6株+Re-8株疫苗的B、C组鸡群在首免后28d达到高峰,随之下降,当C组在56日龄加强免疫后,至180d抗体水平仍维持在7.6log2以上。从群体免疫抗体合格率来看,A组免疫合格率至180d低于70%标准,B、C组免疫合格率一直保持70%以上,但C组比B组免疫合格率更高。H5亚型疫苗(Re-6株、Re-6株+Re-8株)均能产生较好的免疫效果,但(Re-6株+Re-8株)疫苗的有效保护期更长,尤其是加强免疫之后,免疫保护率更高。因此建议家禽免疫H5亚型(Re-6株+Re-8株)疫苗,蛋鸡适当加强免疫,从而达到有效预防禽流感的目的。     

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫效果检测分析

为了评价不同厂家生产的6种重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 Re-1株)对鸡的免疫效果,为疫苗的选择和制定切实可行的免疫程序提供参考,采用血凝抑制试验检测免疫二价苗后产生的抗体滴度,并进行多重比较和分析。结果:6种二价苗均可提供有效的免疫保护,但对H5和H7亚型的免疫保护存在差异,对H5亚型的免疫效果较好。     

不同种类禽流感疫苗对番鸭的免疫效果对比试验

为评价重组禽流感病毒灭活疫苗鸡胚源H5N1亚型Re-6株、鸡胚源H5N1亚型Re-6+Re-8株灭活疫苗、细胞源Re-6+Re-8株灭活疫苗及水禽专用H5N2亚型D7株灭活疫苗4个产品对番鸭的免疫效果,分别取四种疫苗分别免疫20日龄番鸭,125只/组,免后35日采血测定HI抗体效价。结果表明,4种疫苗免疫后用Re-6抗原检测抗体依次分别为8.1log2、9.3log2、8.9log2、7.0log2,用Re-8抗原检测抗体分别为1.5log2、9.9log2、8.7log2、7.5log2,用D7抗原检测抗体分别为0.3log2、7.6log2、5.6log2、6.5log2。四种疫苗免疫效果由高至低依次为:鸡胚源H5N1亚型Re-6+Re-8株灭活疫苗细胞源Re-6+Re-8株灭活疫苗H5N2亚型D7株灭活疫苗鸡胚源H5N1亚型Re-6株灭活疫苗。     

重组禽流感病毒灭活疫苗(H9N2亚型,Re-9株)对2010年～2011年流行病毒株免疫效力的研究

为评价H9N2亚型重组禽流感病毒(AIV)灭活疫苗Re-9株的免疫效力,本研究选取2010年～2011年分离的5株H9N2亚型AIV进行攻毒保护实验。这5个分离株均为类A/CK/Beijing/1/94病毒株,其HA和NA基因与Re-9株及其亲本株的同源性介于90.6%～97.5%和88.1%～98.7%之间,其抗原相关值在66.67%～100%之间。将Re-9株为种毒制备灭活疫苗,免疫4周龄SPF雏鸡后,3周时平均HI抗体效价达9.5 log2;在免疫后3周以2×107EID50的剂量攻击亲本株和5株流行病毒株,攻毒后采集3 d、5 d、7 d的拭子,免疫组拭子样品病毒检测均为阴性;对照组3 d、5 d拭子病毒检测的阳性率均在80%以上,7 d的阳性率在60%以下。以上结果表明灭活疫苗Re-9株抗原针对性强,而且具有良好的免疫效力,能够抵御近年来分离的H9N2亚型AIV,是理想的H9N2亚型禽流感疫苗株。     

不同禽群免疫H5+H7N9二价苗抗体比较

为了掌握H5+H7N9二价苗在不同禽群中的免疫效果,将该疫苗注射种鸡、肉鸡、肉鹅后,分别进行采样检测,掌握该疫苗在试验动物产生H5N1Re-8株和H7N9H7-Re1株抗体的消涨情况。结果表明,该二价苗在免疫规模场种鸡、肉鸡和肉鹅后均能在21d对H5N1Re-8株和H7N9H7-Re1株产生较高抗体水平,在免疫散养的肉鸡后,整体H5N1Re-8株抗体水平能达到70%以上,H7N9H7-Re1株仅有55.79%,在规模化养殖的禽群中使用该疫苗效果理想。     

重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗免疫鸡群的临床效果评价

为评价重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株,H7N9 H7 Re-2株）免疫鸡群的临床应用效果及当前禽流感免疫程序的合理性,对河南省使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗免疫的940个存栏500只以上的养鸡场开展临床应用效果调查,并抽取328个场开展免疫抗体检测。结果显示：免疫后1周内出现不良反应的养鸡场190个,占20.21%（190/940）;发病的养鸡场140个,占14.89%（140/940）;出现死亡的养鸡场51个,占5.43%（51/940）。免疫后1周内出现不良反应的鸡只占0.11%,发病的占0.09%,死亡的占0.04%。血清样品的血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验结果显示：H5亚型Re-11株场群合格率为97.56%,免疫抗体阳性率为94.20%;H5亚型Re-12株场群合格率为96.34%,免疫抗体阳性率为92.70%;H7亚型Re-2株场群合格率为98.17%,免疫抗体阳性率为94.67%。结果表明：重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的鸡群免疫效果较好,免疫后的临床不良反应率极低。但在免疫过程中,应尽量消除影响疫苗临床效果的不利因素,定期开展免疫效果监测,及时调整免疫程序。本研究为全国高致病性禽流感疫苗的应用提供了参考。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活苗的不同免疫程序对黄羽肉鸡免疫的效果分析

将临床健康的360只黄羽鸡随机分成3组,每组120只,选择广西壮族自治区贺州市常用的3种免疫程序,用重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活苗(即H5N1Re-8株+H7N9 Re1株)免疫黄羽肉鸡,于免疫前及免疫后不同时间采集血清,用血凝和血凝抑制法检测血清中禽流感H5和H7抗体水平。结果表明,在免疫后第120 d时3种免疫程序的禽流感H5抗体阳性率分别为89.17%、83.33%和95.83%,禽流感H7抗体阳性率分别为86.67%、80.83%和92.50%,均高于农业农村部规定的70%群体阳性率,表明该疫苗免疫效果良好;3种免疫程序中在鸡20日龄和40日龄时,每组分别肌肉注射疫苗0.5 mL/只组的黄羽鸡,在免疫抗体滴度值、维持时间、抗体均匀度等三个方面均最高,说明免疫效果最好。     

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫效果评估

对崇左市2017年10月至2018年9月家禽实施免疫重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1亚型Re-8株+H7N9 H7-Re1株)的免疫效果进行了评估,旨在为崇左市家禽禽流感防控决策提供参考。结果表明,H5亚型禽流感免疫抗体合格率为90.35%,H7亚型禽流感免疫抗体合格率为84.94%,禽流感病毒核酸均为阴性。H5+H7免疫抗体水平较高,抗体合格的血清中,H5平均效价为8.33log2,H7平均效价为7.41log2,疫苗安全稳定,可有效抵抗当前禽流感流行毒株的侵袭。     

H5亚型禽流感Re-4毒株疫苗免疫效果调查与分析

为了解H5亚型禽流感Re-4毒株疫苗免疫效果,采用血凝-血凝抑制试验(HA-HI)方法对16个县区102个规模场/散养户送检的1621份鸡血清,进行H5亚型禽流感Re-4毒株免疫抗体检测。结果:Re-4毒株免疫血清抗体合格率为72.9%(抗体滴度≥5log2),Re-4毒株免疫抗体合格率高于50%的蛋鸡场户占80.4%,免疫抗体滴度≥7log2的血清份数占合格数的76.2%;发生过H5亚型禽流感疫情和疑似H5亚型禽流感疫情地区的17个养鸡场户,鸡群抗体滴度≥7log2的血清比例占到免疫合格数90%以上。     

禽流感灭活疫苗免疫效果评价试验

随机抽取6个厂家的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-6株+Re-8株)和6个厂家的禽流感二价灭活疫苗(H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株)进行免疫效果评价试验。结果表明,二免后28 d,H5亚型二价灭活疫苗组的免疫抗体合格率在95.24%以上;二价灭活疫苗组H5和H9亚型抗体合格率在94.74%以上,免疫效果较好。