阿尔巴斯白绒山羊胚胎移植技术推广研究与应用

通过对阿尔巴斯白绒山羊供体选择、同期发情、超数排卵、手术采卵、受体羊同期发情处理、手术移植等技术应用,探索了规模化阿尔巴斯白绒山羊胚胎移植技术的组装配套,以加快胚胎移植在养羊业生产中的推广与应用.总结了供体羊选择标准、供体羊同期发情海绵栓法应用经验.供体发情率达100%、利用率为98.33%、输卵管法平均回收胚胎13.9枚、平均可用胚胎10.2枚:受体发情率81.66%、鲜胚移植受胎率77.92%、产羔率105.78%、繁殖率79.28%.结果表明,使用配套技术进行绒山羊胚胎移植较适合目前养羊业种羊改良的生产实际,技术较成熟、稳定,可在农村牧区广泛推广应用.     

蒙古绒山羊胚胎移植效果研究

通过评价双胚胎移植方法和单胚胎移植方法对蒙古绒山羊妊娠率及产羔率的影响,为优质种羊的快速扩繁提供技术支持。选取5只供体母羊进行同期发情与超数排卵处理,供体母羊发情后进行人工授精,收集胚胎;利用收集的可用胚胎对选取的39只受体母羊进行胚胎移植,其中10只受体母羊做双胚移植,29只受体母羊做单胚移植;比较双胚移植和单胚移植受体母羊的妊娠率及产羔率。结果表明:供体母羊经CIDR处理,发情率达100%,超数排卵、人工授精后共收集胚胎64枚,其中可用胚胎49枚,可用胚胎率为76.56%;双胚移植受体母羊的妊娠率为90.00%(9/10),产羔率为180.00%(18/10),单胚移植受体母羊的妊娠率为68.97%(20/29),产羔率为62.07%(18/29)。双胚移植方法比单胚移植方法可获得更高的妊娠率及产羔率,表明双胚移植方法适用性良好,具有极大的推广价值。     

受体因素对萨福克羊鲜胚及杜泊羊冻胚移植效果的影响

文章分析了新疆地区一次萨福克羊鲜胚及杜泊羊冻胚的移植实验数据,旨在讨论受体因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:受体羊在发情后7 d时移植胚胎,杜泊羊冻胚桑椹胚移植后产羔率显著高于囊胚(P0.05)。萨福克羊鲜胚移植时胚胎发育阶段及移植数量对移植后产羔率无显著影响(P0.05)。受体母羊先前手术次数对萨福克羊鲜胚移植后产羔率有显著影响(P0.05),手术2次及以上次数的母羊产羔率极显著低于初次胚胎移植的母羊(P0.01)。受体母羊卵巢黄体数超过1个后,黄体数对产羔率无显著影响(P0.05)。     

MOET技术在阿尔巴斯白绒山羊选育中的应用

通过对阿尔巴斯白绒山羊供体选择、同期发情、超数排卵、手术采卵、受体羊同期发情处理、手术移植等技术的应用,探索了规模化阿尔巴斯白绒山羊MOET技术的组装配套,以加快胚胎移植在养羊业生产中的推广与应用。试验移植供体羊发情率99.0%,可利用率98.5%;平均冲胚胎13.6枚/只;可用胚胎平均9.50枚/只,鲜胚可利用率71.35%。受体羊发情率88.3%,可利用率98.4%,受胎率60.09%,产羔率114.8%,初生重平均2.65 kg。本次移植各项指标均达到较高水平,配套技术比较成熟,稳定性强,具有可操作意义,因此阿尔巴斯白绒山羊规模化应用MOET技术可在畜牧业生产实践中大面积推广应用。     

腹腔镜技术与传统手术方法在绵羊胚胎移植中的应用对比

为探究腹腔镜技术在绵羊胚胎移植中的应用效果,在陕西省榆林市靖边县某种羊场进行胚胎移植试验。试验分两组进行,每组各选取10头经产健康黑头萨福克羊为供体和100头健康经产小尾寒羊为受体,两组受体一致使用常规胚胎移植药物和程序处理,分别进行腹腔镜和传统手术方法移植。现将结果汇报如下:腹腔镜组(A组)供体有效胚胎102枚,受体发情90头全部移植(12头双胚,其余单胚),受胎率68.9%(62/90),产羔率64.4%(58/90),受体术后创口感染0例;传统手术组供体有效胚胎98枚,受体发情92头全部移植(6头双胚,其余单胚),受胎率61.9%(57/92),产羔率56.5%(52/92),受体术后创口感染2例。利用SPSS分析表明两组受胎率、产羔率均差异不显著(p﹥0.05)。     

西藏绵羊胚胎移植引进试验

本试验采用从内蒙古引进的无角多塞特绵羊冷冻胚胎,以西藏当地绵羊作为受体进行移植试验研究,对从林周引进的彭波半细毛羊鲜胚移植以西藏当地绵羊作为受体进行移植试验研究。同期发情处理了64只受体羊,发情母羊为34只,同期发情率为62.96%;对34只羊进行了胚胎移植,受胎率为77.86%,3个情期内移植妊娠率达74.5%;出生68只,产羔率达66.7%,获得了较好的胚胎移植效果,对西藏绵羊的进一步研究具有重要意义。     

马鹿胚胎移植技术的试验研究

以新疆塔河马鹿为供体鹿和受体鹿 ,经过同期发情、超数排卵、人工授精、胚胎采集和胚胎移植后 ,供体鹿 3年共超排 2 7头 ,获可用胚 116枚 ,同期发情处理受体母鹿 2 2 8头 ,发情母鹿 171头 ,同期发情率 75 % ,采用人工输精后 ,进行胚胎移植 ,其中人工授精受胎率平均达 5 5 .7% ,移植 6 8头 ,受胎数 36头 ,鲜胚移植受胎率 5 2 .9%。     

不同胚胎移植方法对天祝白牦牛受胎率的影响

为提高胚胎移植技术在牦牛上的运用效果,选用51头甘肃省天祝县健康黑牦牛作为受体,以纯种天祝白牦牛作为供体生产胚胎,分别对同期发情处理和自然发情的受体牛进行鲜胚和冻胚移植试验。结果,同期发情处理的受体牛鲜胚移植的受胎率显著高于冻胚移植的受胎率(P0.05),分别为52%和38.5%;在自然发情受体牛的胚胎移植中也得到了相似结果,鲜胚和冻胚的移植受胎率分别为60%和50%,同期发情处理牛的平均妊娠率则低于自然发情受体牛的平均妊娠率(P0.05),二者分别为47.5%和54.5%。结论,牦牛鲜胚移植的受胎率明显高于冻胚移植的受胎率,而且自然发情受体牛的受胎率高于同期发情处理牛。     

特克塞尔绵羊在山西右玉的胚胎移植效果

选取12只纯种特克塞尔羊作为供体,并采用递减法注射FSH进行超数排卵,发情后采用人工授精方式进行配种,手术法回收胚胎,鉴定后移植.164只右玉绵羊作为受体,采用两次PG注射法进行同期发情.结果表明12只供体获得胚胎共129枚,可用胚胎109枚,每只供体羊获得9.1枚可用胚胎,胚胎合格率为84.50%.134只受体表现发情,发情率为81.70%,其中同期发情的羊108只,同期发情率65.85%.109枚胚胎移入97只受体,其中12只移植双胚.61只受体被确认为妊娠,产下52只羔羊,产羔率为53.60%.12只供体手术后产下17羔羊.     

内蒙古细毛羊胚胎移植试验

选取24只内蒙古细毛羊作为供体,300只小尾寒羊作为受体,用FSH CIDR法对供体进行超排,采用人工授精对供体进行配种;采用两次PGF2α注射法对受体进行同期发情;采用手术法子宫角回收供体的胚胎,经过鉴定后移植给受体。结果表明:24只供体获得胚胎共275枚,可用胚胎236枚,每只供体羊获得9.83枚可用胚胎,胚胎合格率为85.82%。287只受体表现发情,发情率为95.70%,其中同期发情的羊219只,同期发情率73.00%。236枚胚胎移入214只受体,其中22只移植双胚,143只受体被确认为妊娠,产下羔羊121只,产羔率为56.54%。     

应用体细胞克隆技术和胚胎移植技术生产克隆水牛

为了解决克隆水牛技术在供核细胞、受体细胞中的选用问题,探索不同条件对移植受孕的影响,完善克隆技术的理论体系。试验以摩拉奶水牛的耳成纤维细胞作为供核细胞,本地水牛卵母细胞为受体胞质进行细胞克隆构建重组胚胎;将发育5～10 d的重组胚胎移植于本地水牛、杂交水牛的子宫内,观察不同发情方式、胚胎类型、胚龄及季节对移植受孕的影响。结果表明:水牛的克隆胚胎妊娠率较低,分别为12.05%、12.04%、13.95%。自然发情和同期发情对克隆胚胎移植受胎率的影响差异不显著;鲜胚胎移植186头,受胎22头,受胎率为11.83%(22/186);冻胚胎移植174头,受胎23头,受胎率为13.22%(23/174)。克隆水牛从出生至12月龄体尺增长明显高于本地水牛;水牛克隆胚胎移植受胎在秋季最好,秋季受胎数占全年的53.33%,显著高于其他季节。     

不同品种受体对绵羊胚胎移植效果及羔羊早期生长性能的影响

旨在探讨以小尾寒羊和蒙古羊作为受体时,二者的胚胎移植效果及所产羔羊的早期生长性能之间的差异。选用南非肉用美利奴羊(n=11)和澳洲白绵羊(n=110)作为供体,以小尾寒羊(n=196)和蒙古羊(n=504)作为受体;对供体母羊进行超数排卵以及人工授精处理,记录供体母羊的收集胚胎总数和可用胚胎数,计算平均每只羊收集的可用胚胎数以及胚胎合格率;对小尾寒羊和蒙古羊进行同期发情及胚胎移植处理,记录受体母羊的产羔数,计算繁殖率;计算并比较不同受体母羊所产羔羊的平均初生重、成活率以及70日龄断奶羔羊数、70日龄断奶重、平均日增重、平均每只母羊提供的断奶羔羊数。结果表明,从供体母羊中共获得可用胚胎549枚,平均每只羊收集可用胚胎4.54枚,胚胎合格率为82.56%;利用胚胎移植技术,移植受体母羊529只,所产羔羊240只,平均繁殖率为45.37%;小尾寒羊的发情率和繁殖率明显高于蒙古羊;共获得70日龄断奶羔羊211只,羔羊成活率为87.92%,平均日增重为280.00g;小尾寒羊和蒙古羊所产的羔羊初生重没有显著差异(P>0.05),小尾寒羊所产羔羊的70日龄断奶重和平均日增重分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于蒙古羊,而蒙古羊所产羔羊的成活率显著高于小尾寒羊(P<0.05);平均每只小尾寒羊母羊可提供的断奶羔羊数(0.42只)略高于蒙古羊(0.39只),小尾寒羊作为胚胎移植受体略具有优势。综合分析表明,在内蒙古兴安盟地区小尾寒羊和蒙古羊均可以作为胚胎移植的受体来使用。     

非繁殖季节胚胎移植受体绵羊妊娠效果影响因素的研究

在非繁殖季节应用CIDR法和Progestagen Sponge法对受体绵羊进行同期发情处理后,进行冷冻胚胎移植,研究不同同期发情处理方法、卵巢状况、胚龄、移植方法和移植时间对冷冻胚胎移植妊娠率的影响,以期为当地实现绵羊胚胎移植产业化提供理论依据和技术参考。结果表明:经同期发情处理后,绵羊在去栓后24~72 h集中发情,在去栓后36~48 h发情最为集中;CIDR法和Progestagen Sponge法的同期发情率分别为91.11%和87.78%(P>0.05),同期发情绵羊移植利用率分别为82.93%和78.48%(P>0.05);单侧卵巢上含有1个和2个黄体其妊娠率分别为46.07%和48.78%(P>0.05);桑椹胚和囊胚的妊娠率分别为49.25%和42.11%(P>0.05);腹腔镜法和手术法的妊娠率分别为45.16%和48.52%(P>0.05);11月和12月进行冷冻胚胎移植的妊娠率分别为50.76%和43.08%(P>0.05),该试验的绵羊冻胚移植妊娠率为46.92%,基本接近国内冻胚移植水平,但低于目前国内羊鲜胚移植妊娠率(50%~60%)。由此可以得出,不同同期发情处理方法、卵巢状况、胚龄、移植方法和移植时间对胚胎移植妊娠率的影响均无显著性差异(P>0.05),大规模群体羊同期发情时,可选价格便宜的Progestagen Sponge法;只要受体绵羊黄体质量好即可移植胚胎;为了减轻受体绵羊的应激反应,降低术后子宫粘连的发病率,可广泛应用腹腔镜法进行胚胎移植;该试验的绵羊冻胚移植妊娠率低于目前国内羊鲜胚移植妊娠率,通过筛选高效低毒的抗冻保护剂,以及提高基层技术人员操作水平,则有望进一步提高绵羊冷冻胚胎移植妊娠率。     

高原地区肉羊胚胎移植试验

2003年在青海省东部农业区和环湖牧区开展了以特克赛尔、萨福克和无角陶赛特为主要品种的肉羊胚胎移植试验。对农区55只小尾寒羊受体和牧区76只半细毛羊受体进行了同期发情处理,小尾寒羊同期发情率为81.28%,半细毛羊为63.16%。半细毛羊移植胚胎44枚,产羔13只,流产1只(双羔),移植受胎率为31.82%;每只小尾寒羊移植2枚胚胎,共移植20只受体40枚胚胎,产羔5只,其中1只母羊产双羔,受胎率为12.50%。所产18只羔羊全部成活。     

季节对杜泊羊体内胚胎生产与移植效果的影响

为了研究季节对杜泊羊体内胚胎生产效率及胚胎移植妊娠率的影响,于2016年选取内蒙古赛诺草原羊业有限公司种羊场经产纯种杜泊母羊作为供体,采用同期发情、超数排卵及腹腔镜人工输精等方法对供体羊进行处理后,利用手术冲胚的方法获得纯种杜泊羊胚胎,同时对受体羊进行同期发情处理和胚胎移植。经统计分析,2016年全年该公司共有放栓供体4 241只,超排处理4 180只,配种供体4 131只,冲胚供体3 987只,供体可用率为94.01%;冲出胚胎总数为23 516枚,可用胚胎18 002枚,胚胎可利用率为76.55%,平均每只供体能获得可用胚胎4.52枚。供体在10月、11月、12月冲胚所获得的平均冲胚数和平均可用胚数明显高于4月、5月、6月(P<0.05),其中10月的平均冲胚数和平均可用胚数最高(P<0.01),分别为7.04枚和5.62枚。将获得的部分胚胎用于胚胎移植,移植单胚怀孕受体数为4 446只,妊娠率为53.67%;移植双胚怀孕受体数805只,妊娠率65.02%。此外,受体在1月、3月、6月、12月受胎率较其他月份高(P<0.05)。该研究可为杜泊种羊超数排卵、胚胎移植和肉羊的产业化生产提供一定的数据参考。     

高寒牧区陶赛特绵羊鲜胚移植试验

选取兰州信合牧业34只陶赛特绵羊为供体,采用递减法注射FSH进行超排,采用人工授精配种,30只长途运输到青海省海北州西海镇手术法回收胚胎,鉴定后移植。155只藏系绵羊作为受体,采用两次PG注射进行同期发情,119只受体在西海镇移植,32只长途运输到甘肃兰州信合牧业进行移植。结果表明:34只供体获得胚胎共168枚,、每只供体平均获得4.94枚,合格率89.88%,151只受体表现发情,发情率为97.42%。其中,在西海镇移植的119只产羔73只,产羔率为61.34%,在兰州移植的32只产羔21只,产羔率为65.6%。     

受体绵羊人工授精后移植胚胎的试验

试验通过使用人工授精后绵羊作为受体进行胚胎移植,以寻找一种更加有效的方法提高绵羊胚胎移植的经济效益。试验中使用FSH对10只无角道赛特绵羊进行超数排卵处理,同时对60只受体小尾寒羊进行同期发情。供体羊在发情配种后4.5～5.0d从子宫角收集胚胎。同时,将胚胎移植到同期发情并进行人工授精的受体羊子宫内。总共有57枚可用胚移植给44只受体小尾寒羊,32只怀孕到分娩,共产下羔羊51只(无角道赛特羔28只,道赛特与小尾寒羊杂种羔23只)。此外,经人工授精但未进行手术移植的7只小尾寒羊产下15只杂种羔羊。移胚植受体妊娠率72.7%(32/44),移胚受体繁殖率118%(51/44),受体利用率88.3%(53/60)。移胚受体总妊娠率和受体利用率均显著高于常规ET组(P<0.01)。与常规胚胎移植相比,受体羊人工授精后移植胚胎不仅提高了无角道赛特母羊的繁殖率,而且提高了受体羊的利用率。     

Effect of semen and donor factors on multiple ovulation and embryo transfer (MOET) in sheep

Multiple ovulation and embryo transfer (MOET) is an important tool in the sheep industry for increasing numbers of genetically superior individuals. The objective of this study was to evaluate the effect of semen source (frozen or fresh), the number of embryo collection procedures for each donor (NECP), the season in which embryo transfer and collection was performed, and the age and breed of the donor, on the number of recovered embryos and pregnancy rates after embryo transfer. The Alamos Genetics’ flushing station database was used. This consisted of 140 embryo collection procedures, from 53 Dorper and White Dorper sheep donors, aged between one and eight years, totalling 1,200 collected embryos. Neither the number of retrieved embryos nor the pregnancy rate was affected by the semen preservation method (fresh or frozen), NECP or the age and breed of donor. The season did not affect the number of collected embryos but had a significant effect (p < 0.05) on the recipient pregnancy rate, with higher pregnancy rates reported in the winter (65.57% ± 25.33%) compared with spring (37.11% ± 33.27%), summer (29.95% ± 28.33%) or autumn (35.03% ± 31.66%). There is an estimated increase of 98.4% and 71.5% of embryos recovered in the spring and summer seasons, respectively, when winter is used as reference. The survival of embryos is significantly higher when implanted during the breeding season, more specifically in winter. Embryo collection can be carried out throughout the year in sheep, but there may be a marginal advantage in the use of superovulation and fresh embryo transfer programmes in the autumn and winter.     

胚胎移植试验羊群发情规律的研究

为了有效提高绵羊体细胞克隆和转基因等研究工作的效率,缩短胚胎移植试验羊群中空怀个体的利用周期间隔,试验对采用不同移植方法的胚胎移植受体及供体绵羊进行了移植前后的发情规律研究。结果表明:采用自制孕激素海绵栓和进口阴道孕激素释放装置(CIDR)对绵羊进行同期发情处理时发情率均接近90%,且92%以上的个体发情起始时间均集中在撤栓后24～48 h。在胚胎移植试验结束后,未参加胚胎移植个体和子宫角法未移植受体第2情期发情起始时间主要集中在上次发情后的14～20 d,而输卵管法未移植受体和输卵管法冲卵供体的发情时间则比较分散,呈现明显延后状态。未参加胚胎移植个体和子宫角法未移植受体人工授精后的受胎率接近往年羊场的平均水平,输卵管法未移植受体的受胎率略有下降,且输卵管法冲卵供体的受胎率明显降低。     

荷斯坦牛生产体内性控胚胎的试验研究

本研究采用荷斯坦牛X-性控冻精和超数排卵技术生产奶牛体内性控胚胎。结果显示,使用阴道栓(Cue-Mate)对31头供体奶牛进行同期发情处理,发情率为100%,且发情时间较集中。31头供体奶牛共回收胚胎321枚,头均回收胚胎10.35枚,其中可用胚胎225枚,头均可用胚胎7.26枚。选择36头黄牛受体进行单胚移植,其中21头移植鲜胚,妊娠10头,妊娠率47.62%;15头移植冻胚,妊娠6头,妊娠率40.00%。