辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响

旨在探讨辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。利用添加不同浓度辅酶Q10(4、40、400?滋g/mL)的精液冷冻稀释液对绒山羊精液样本进行冷冻保存,待冷冻精液解冻后,采用流式细胞仪和计算机辅助精液分析系统(CASAS)分别检测不同精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和细胞内ROS水平。结果表明,当冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL辅酶Q10时,经历冷冻—解冻过程的绒山羊精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率均显著高于对照组(P<0.05);在冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL或400μg/mL的辅酶Q10均能显著提高线粒体膜电位并降低细胞内ROS水平(P<0.05)。综上所述,在冷冻稀释液中添加40μg/mL的辅酶Q10能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。     

新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

香菇多糖对牛精液冷冻保存效果的研究

为了研究香菇多糖对牛精液冷冻保存效果的影响,在牛精液冷冻稀释液中添加不同质量浓度(1、5、25、125、625mg/L)的香菇多糖,冻融后检测牛精子活率、动力学参数以及顶体完整率、质膜完整率等。结果表明,25 mg/L组的冷冻保存效果最好,精子活率、质膜完整率、顶体完整率分别达到42.04%、43.57%和63.87%,显著高于对照组(P0.05)。而过高浓度的香菇多糖(125、625mg/L)则显著降低了冻融精子的质量。牛精液冷冻稀释液中添加香菇多糖具有显著的保护作用,其最佳添加浓度为25mg/L。     

生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻效果的影响

为了研究冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响,试验分别在冷冻稀释液中添加0,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL的生物类黄酮和0,2,4,6,8 mg/mL的维生素C以及二者最佳配伍浓度的混合物,分别检测各试验组精液冷冻解冻后的活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活率等指标。结果表明:除了添加4,6 mg/mL维生素C顶体完整率与对照组相比差异不显著(P>0.05)外,添加0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL生物类黄酮或2,4,6,8 mg/mL维生素C精子活率、质膜完整率与对照组相比差异均显著(P<0.05),其中添加0.8 mg/mL生物类黄酮和6 mg/mL维生素C效果最好,但随着添加浓度的增加冷冻效果逐渐降低。说明在猪精液冷冻稀释液中联合添加生物类黄酮和维生素C,解冻后精液质量显著高于对照组(P<0.05)。     

稀释液中添加维生素E对绒山羊冷冻精液品质的影响

在绒山羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的维生素E,比较其对绒山羊冷冻精液品质的影响。结果表明:维生素E添加量为0.8～1.2 mg/mL时精子解冻后活率和顶体完整率显著高于对照组和其他各添加组(P<0.05);维生素E添加量为0.8～2.0 mg/mL时,畸形率显著低于对照组和其他各添加组(P<0.05);维生素E添加量为1.2 mg/mL时,质膜完整率显著高于对照组和其他各添加组(P<0.05)。说明适量的添加维生素E可以提高绒山羊精液冷冻的效果,且稀释液中维生素E的适宜添加量为0.8～1.2 mg/mL。     

海带多糖和枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响

在羊精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度的海带多糖(0、0.5、1.0、2.0、4.0mg/mL)、枸杞多糖(0、2.0、4.0、6.0、8.0mg/mL)以及联合添加海带多糖与枸杞多糖(1.0+0、0+4.0、0.5+2.0、0.5+4.0、1.0+2.0、1.0+4.0mg/mL),比较解冻后精液品质(精子活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性等),以研究海带多糖、枸杞多糖以及海带多糖和枸杞多糖联合应用对羊精液的冷冻保存效果。结果表明:在山羊精液冷冻稀释液中添加一定浓度的海带多糖和枸杞多糖,均能提高山羊精液冻融后的品质,其中二者添加的最适浓度分别为1.0mg/mL、4.0mg/mL;联合添加海带多糖和枸杞多糖能够提高山羊精子活率、质膜完整率、顶体完整率,其中较佳浓度组合为(1.0+2.0)mg/mL组合与(0.5+4.0)mg/mL组合。     

褪黑素对羊精液低温保存效果的影响

为研究精液低温保存稀释液中添加不同浓度褪黑素对羊精液低温保存效果的影响,本试验将不同浓度褪黑素(0、10、20、40、80mg/L)添加到羊精液低温保存稀释液中,通过分析5d内各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性等精子质量评定指标的差异。结果表明:经过5d的保存,20mg/L试验组对山羊精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率以及线粒体活性均显著高于其他试验组(P0.05)。说明适度浓度(20mg/L)的褪黑素有利于提高精子保存品质;但随着添加褪黑素浓度的升高(至80mg/L),精子低温保存效果下降明显。     

冷冻稀释液和抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响

为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...     

L-肉碱对猪精液冷冻保存效果的研究

本试验用5%二甲基甲酰胺(DMF)替代甘油作为冷冻保护剂,研究不同浓度(0、0.02、0.04、0.06、0.08 mg/mL)L-肉碱对猪精液冻后常规指标(精子活率、线粒体活性、顶体完整性、质膜完整性)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化酶(T-AOC)活性以及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:添加0.04和0.06 mg/mL的L-肉碱可有效改善猪精液冷冻后效果。0.04 mg/mL组可显著提高精子冻后活率和线粒体活性(P<0.05);0.06 mg/mL组可显著提高顶体完整性和质膜完整性(P<0.05)。添加0.06 mg/mL L-肉碱可显著提高冷冻后精子内T-AOC酶活性并且抑制MDA的产生(P<0.05),但CAT活性与0.04 mg/mL组差异不显著。在冷冻稀释液中添加0.06 mg/mL L-肉碱可以提高猪精液冷冻保存效果。     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

在LEY冷冻稀释液基础上分别添加不同浓度维生素C(0、5、10、20、40、60 mmol/mL)、维生素E(0、0.2、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/mL)、SOD(0、100、200、400、600 IU/mL)、CAT(0、50、100、200、300 IU/mL)、GSH(0、1、5、10 mmol/mL)等抗氧化剂,检测冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、平衡后和解冻后精子MDA含量,以观察5种抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明:在冷冻稀释液中联合添加100 IU/mLSOD和200 IU/mL CAT明显提高冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.01)。     

葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存及代谢的影响

旨在研究葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存及代谢的影响。本研究将混合后的精液样品,在含有不同浓度葡萄糖(0、28、56、84和112mmol·L~(-1))的冷冻稀释液进行冷冻-解冻,利用计算机辅助精液分析系统(CASAS)、流式细胞仪和酶标仪检测精子的运动性能、精子DNA完整性、顶体完整性、质膜完整性和精子中ROS和Ca2+水平,以及精子中ATP浓度、精子悬浮液中乳酸和丙酮酸浓度。结果表明,在冷冻稀释液中添加56mmol·L~(-1)葡萄糖可以显著提高绒山羊精子冷冻-解冻后的精子活力、完整顶体和完整质膜的精子比率(P0.05),但各组间完整DNA的精子比率差异不显著(P0.05)。56mmol·L~(-1)葡萄糖组精子细胞中ROS水平极显著高于其它各组(P0.01);28和56mmol·L~(-1)葡萄糖组精子细胞中Ca2+水平极显著低于其它各组(P0.01);与其它各组相比,56和84mmol·L~(-1)葡萄糖组精子细胞中ATP浓度极显著升高(P0.01)。精液解冻后,在低葡萄糖浓度组(28~56mmol·L~(-1))的精子悬浮液中未检测到乳酸,而112mmol·L~(-1)组检测到大量乳酸(P0.01);当冷冻稀释液中添加低浓度的葡萄糖(28~84mmol·L~(-1)),葡萄糖对精子悬浮液中丙酮酸的产生存在剂量依赖性作用,而高浓度(112mmol·L~(-1))组中丙酮酸产生减少(P0.05)。综上表明,在冷冻稀释液中添加56mmol·L~(-1)葡萄糖可以促进绒山羊精子冷冻-解冻过程中的代谢,提高其冷冻保存效果。     

红景天多糖对牛精液冷冻效果影响的研究

为了进一步提高冷冻-解冻后牛精液品质和精子抵抗低温打击的能力,试验将0.02,0.04,0.06,0.08,0.1mg/mL5个浓度梯度的红景天多糖分别添加到牛精液冷冻稀释液中,比较了不同浓度红景天多糖对牛精液冷冻后精子质量的影响。结果表明:红景天多糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高牛精液的冷冻效果,当添加量为0.06mg/mL时,效果良好,与对照组比较活率提高了13.8%,差异显著(P0.05);顶体完整率、质膜完整率和精子运动的各项参数均高于对照组,差异显著(P0.05)。说明红景天多糖对牛精子冷冻保护效果良好。     

葡萄籽原花青素对猪精液冷冻保存效果的研究

在猪精液冷冻基础液中分别添加0μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL的葡萄籽原花青素,通过对冷冻-解冻后猪精子的动力学参数、生理参数以及生化参数的检测,旨在研究其对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明,当葡萄籽原花青素添加浓度为20μg/mL和50μg/mL时,解冻后精子活力、活率、顶体完整率、线粒体活性、质膜完整性和酶活性都显著高于对照组(P0.05),但是两组间比较差异不显著(P0.05)。与对照组和其他实验组相比,当葡萄籽原花青素添加浓度为40μg/mL时,精子畸形率降低了9.30%,精子活力、活率、顶体完整率、线粒体活性和质膜完整性分别提高了12.59%、11.78%、14.27%、12.53%和11.96%(P0.05)。当葡萄籽原花青素的添加量为40μg/mL时,MDA的量最低为1.16nmol/mg,SOD和GSH-Px酶活性最大分别为77.36U/mg、35.21U/mg。结果显示,在猪精液稀释液中添加一定浓度的葡萄籽原花青素,可以显著提高冷冻-解冻后猪精子品质和抗氧化能力。当葡萄籽原花青素的添加量为40μg/mL时,其对猪精子冷冻保存效果最好。     

褪黑素、谷胱甘肽对猪精液冷冻保存效果的影响

本试验旨在研究褪黑素、谷胱甘肽两种抗氧化剂对精子冷冻的保护效应。以成年杜洛克公猪为研究对象,在猪精液冷冻稀释液中先后单独、联合添加褪黑素、谷胱甘肽,解冻后精子质量通过检测活率、活力、顶体完整性、线粒体活性以及活性氧（ROS）含量来判定。结果表明：分别单独添加0.25mg/mL褪黑素、5mmol/L谷胱甘肽,或联合添加0.125mg/mL褪黑素和1mmol/L谷胱甘肽,均能减少精液冷冻过程中ROS的生成,显著提高冷冻精子解冻后的质量（P〈0.05）,其中联合添加效果显著优于单独添加效果。     

维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响

试验旨在研究维生素C（VC）对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻（37.5 ℃,30 s）后分析0～3 h精子活率及0～4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、2、3 h精子活率与对照组差异显著（P<0.05）。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但数值依然高于对照组。解冻后存放2、3、4 h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著（P<0.05）,2、4 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4～6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。     

芝麻酚对猪精液冷冻保存效果的影响

为了探究芝麻酚对猪精液冷冻保存效果的影响,用手握法采集成年杜洛克公猪精液,预处理后添加不同浓度芝麻酚(0,0.05,0.10,0.15,0.20和0.25g/L)的冷冻稀释液进行稀释,冷冻-解冻后检测猪精子活率、质膜完整性(低渗肿胀试验)、线粒体活性、顶体完整性、DNA完整性以及超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性等。结果显示:当芝麻酚添加浓度为0.20g/L时,解冻后精子活率、线粒体活性、质膜完整率和顶体完整率为最高,相比较于对照组,分别提高了12.67%、19.07%、18.78%和14.09%(P0.05);MDA含量最低为2.04nmol/mL(P0.05);SOD和GSH-Px酶活最高为73.04U/mL和237.59U/I(P0.05)。当芝麻酚添加浓度为0.25g/L时,DNA完整性最高为72.46%(P0.05)。当芝麻酚添加浓度为0.15g/L时,CAT酶活最高为3.44U/mL(P0.05)。结果表明:与对照组相比较,在猪精液冷冻稀释液中添加适当浓度的芝麻酚能显著提高解冻后猪精子活率、功能完整性和抗氧化能力(P0.05),且当芝麻酚的浓度为0.2g/L时对猪精子冷冻保存效果最好。研究结果表明,芝麻酚作为一种天然抗氧化剂,对猪精子冷冻保存具有良好的效果。     

原花青素对猪精液常温保存效果的影响

为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。     

大豆卵磷脂与卵黄在山羊精液冷冻过程中的联合作用研究

试验旨在探究在山羊精液冷冻保存过程中单独使用大豆卵磷脂(SL)、卵黄(EY)及其联合使用的效果。以20%EY(V/V)和2%SL(m/V)为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,冷冻解冻后分别对精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性进行检测,同时利用试剂盒检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量变化。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后该组的精子活力、精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组无显著性差异,较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显著提高;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量和SOD活性无显著性差异,但精子抗氧化能力较另外2个联合添加组显著提高。综上,山羊精液冷冻基础稀释液中添加SL可替代或者部分替代EY,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。     

海藻糖对民猪精液冷冻保存的影响

为研究海藻糖在民猪精液冷冻中的作用,获得最佳民猪精液冷冻液成分,本试验在BTS、Modena和Zorlesco 3种稀释液基础上添加0.15 mol/L海藻糖,及在Zorlesco稀释液中分别添加0 mol/L、0.1 mol/L、0.15 mol/L和0.2 mol/L的海藻糖,研究海藻糖在不同稀释液中及其不同浓度对冷冻的民猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位的影响。结果表明,在Zorlesco稀释液中添加0.15 mol/L海藻糖可明显提高民猪冷冻精子的质量,使精子活率、质膜完整性、顶体完整率和线粒体活性分别达到(44.0±2.4)%、(58.2±2.4)%、(53.2±2.1)%和(51.3±2.3)%,为各组最佳(P<0.05)。将0.15 mol/L海藻糖分别添加在BTS、Modena和Zorlesco3种稀释液中发现,其中在Zorlesco稀释液添加海藻糖效果优于其他两组(P<0.05)。但海藻糖对冷冻前精子的保护作用不明显(P>0.05)。因此,在Zorlesco稀释液中添加1.5 mol/L的海藻糖能够明显提高民猪精子冷冻后质量,是民猪冷冻保存的适宜保护液。