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为了构建番茄CRISPR/Cas9介导的多基因编辑体系,用SlU6-2p、SlU6-3p、SlU6-7p、SlU3-5p、SlU3-9p和SlU6-5p启动子分别替换pKSE401和pCBC-DT1T2载体中的拟南芥U6启动子,构建了1个双元载体(p MGET)、2个中间载体(pKC-S2M和pKC-S3M)和3个gRNA模块载体(pCBC-S1、pCBC-S2和pCBC-S3)。为了测试该多基因编辑体系,通过PCR扩增、Goldengate克隆和同尾酶技术,将含有6个番茄果实性状相关基因Green flesh(GF)、Ovate(O)、Locule number(LC)、SlMYB12(Y)、Tangerine(T)、Uniformripening(U)靶点序列的sgRNA聚合构建多基因编辑载体pMGET-OYGTULC和pMGET-TULCOYG,检测6个基因同时被编辑的效率分别为44.00%和11.76%。用携带pMGET-OYGTULC载体的根癌农杆菌转化番茄材料获得2株6个基因均被编辑的植株,序列变异为单个碱基的插入、单个或多个碱基的缺失及大片段的缺失等多种形式。本研究中该多... 相似文献
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《中国瓜菜》2021,(7)
为研究烯效唑对茄子幼苗耐低温性的影响,喷施不同质量浓度的烯效唑后,对茄子幼苗进行低温处理,测定低温下幼苗的茎粗、株高和耐低温指数等指标。结果表明,20 mg·L~(-1)烯效唑处理后,茄子幼苗表现出较好的耐低温性,耐低温指数达0.86。对茄子幼苗进行相同的低温处理,测定可溶性蛋白质含量及保护酶活性,结果发现上述指标在不喷施烯效唑时变化幅度较小,喷施后可溶性蛋白质含量、POD、SOD、CAT活性等指标上升,9 d后分别达13.713 mg·g~(-1)、369.650 U·g~(-1)·min~(-1)、268.349 U·g~(-1)、125.809 U·g~(-1)·min~(-1)。因此,可以在苗期喷施20 mg·L~(-1)烯效唑以提高茄子幼苗耐低温性。该方法操作简单,可以推广。 相似文献
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化肥减量有机替代对茄子生长及土壤养分的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以"新龙长茄"为试材,采用日光温室全膜双垄沟播的栽培方法,研究了不施肥(CK),施100%纯化肥(T1)、75%化肥(T2)、75%化肥+25%有机肥(T3)、50%化肥+50%有机肥(T4)、25%化肥+75%有机肥(T5)、100%有机肥(T6)共7个化肥减量有机替代施肥处理对茄子农艺性状、产量和品质及土壤养分的影响,以期为日光温室茄子生产中合理施肥提供参考依据.结果 表明:施肥可以促进茄子植株生长,明显提高茄子产量和土壤养分含量;与当地常规施肥相比,T1、T2处理对茄子生长、产量和土壤养分的影响均不显著;而化肥减量配施有机肥T4处理可不同程度促进茄子植株生长、提高土壤养分含量,并且可以显著增产33.74%、增加可溶性糖含量63.1%、降低硝酸盐含量35.06%.因此,50%化肥+50%有机肥(T4)的施肥对茄子生长、产量提升和品质改善具有较大的作用. 相似文献
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利用反向长距离PCR技术从银耳(Tremellafuciformis)芽孢gpd基因出发克隆上游gpd启动子序列,将预测的gpd启动子片段与多功能纤维素基因(mfc)连接构建表达载体,与潮霉素抗性质粒pBgGl-hph共转化银耳芽孢,对拟共转化子进行酶活发酵试验。结果表明:4轮反向长距离PCR克隆得到了1761bp的上游序列,经预测启动子落在上游1000bp左右区域内,包含两个高分值的起始转录位点,将gpd启动子分成gpd-Tre1(885bp)、gpd-Tre2(708bp)、gpd-Tre3(466bp)3段区域,分别与多功能纤维素基因(mfc)构建表达载体pgTre1-mfc、pgTre2-mfc和pgTre3-mfc。拟共转化子酶活发酵试验结果发现3个表达载体的转化子均能检测到多功能纤维素酶活,转化子T1-2包含gpd-Tre1启动子大片段,整体酶活最高,CMC酶活为14.12U/mL,比出发菌株Tr01提高34.3%,比工程菌株yLes3提高25.7%,木聚糖酶活为34.8U/mL,比Tr01酶活提高26.3%,略低于yLes3。3个启动子片段均具有表达活性,相比之下885bp的大片段gpd启动子表达活性更高。 相似文献
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杭茄系列茄子品种杂种优势明显 ,早熟丰产 ,抗逆性强 ,品质佳 ,皮色紫红透亮 ,果形细长 ,粗细均匀 ,很受浙江及周边地区消费者的欢迎 ,每年需要大量的种子。杭茄系列茄子种子平均产量可达5 0kg· (6 6 7m2 ) - 1,单株种果 15个左右 ,多的达2 5个。但在杂交制种过程中 ,往往会因自然、机械和人为混杂而影响种子的质量和产量。因此 ,必须严格且熟练地掌握其杂交制种技术。1 制种茄子的栽培技术1. 1 播种与育苗 选择生茬地或与茄科作物实行2~ 3a (年 )以上轮作的地块 ,采用阳畦或电热温床育苗 ,父本种子先于母本 15~ 30d (天 )播 ,出… 相似文献
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《园艺学报》2020,(4)
以茄子‘F142’为材料,通过染色体步移法克隆了花药开裂相关基因SmDAD1上游746 bp的启动子序列。通过生物信息在线软件预测,该启动子中含有多个与植物发育及逆境应答相关的顺式作用元件。为进一步分析SmDAD1启动子的功能,构建prSmDAD1::GUS融合表达载体,转化到拟南芥,并对T3代纯合转基因拟南芥进行GUS染色分析。结果表明,SmDAD1启动子在拟南芥幼苗的根部、叶片和花药均有较强活性,其中在根部活性最强,在茎中没有活性。检测转基因植株GUS基因的表达量发现,SmDAD1启动子受茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA)、生长素(IAA)和1–氨基环丙烷–1–羧酸(ACC)诱导。因此推测SmDAD1可能在茄子发育和抗外界逆境胁迫中起重要作用。 相似文献
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为筛选茄子(Solanum melongena L.)高温胁迫下稳定表达的内参基因,以不同茄子品系(种)为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术对来自茄子高温胁迫转录组数据库8个候选内参基因(SmEF1a、SmEF2、Sm40s RPS29、Sm60s RPL24、SmTRX、SmCK I、SmDAHPS I、SmUCP)和SmActin在不同试验情况下进行表达检测,并结合GeNorm、Norm Finder、Best Keeper和ReFinder软件综合评价9个内参基因的表达稳定性。结果表明,在茄子热敏品系05-1和耐热品系05-4经高温处理不同时间的样品和不同组织样品以及10个耐热性不同的茄子品系(种)中,9个内参基因的表达丰度及稳定性存在差异;茄子热敏品系05-1和耐热品系05-4高温胁迫处理不同时间样品中表达稳定性最好的是SmEF1a和SmUCP;其不同组织中表达水平最稳定的是SmEF1a和SmTRX;高温胁迫下不同茄子品系(种)中以SmTRX和SmEF2的表达稳定性最好。综合来看,SmEF1a和SmTRX在所有茄子试验样品中的表达稳定性最好,而SmActin和SmCK I的表达稳定性较差。 相似文献
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钙调素拮抗剂与Ca2+对茄子幼苗抗冷性的影响 总被引:25,自引:0,他引:25
研究钙调素(CaM) 拮抗剂W7〔N- (6-aminohexyl)-5-chloro-1-naphthalene sulfonamide〕和Ca2+对茄子幼苗抗冷性的影响, 结果表明: W7 浸种处理显著提高了低温胁迫下茄子幼苗叶片电解质渗透率和MDA 含量, 降低了SOD、CAT活性和可溶性蛋白质含量; 而Ca2+浸种处理显著降低了低温胁迫下叶片电解质渗透率和MDA 含量, 提高了SOD、CAT活性和可溶性蛋白质含量, 说明Ca2+-CaM信使系统在茄子幼苗抗冷调控过程中起着重要的作用。 相似文献
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【目的】基于香蕉基因组数据筛选Walls are thin 1(WAT1)基因,分析它们的序列及表达特性。【方法】以拟南芥WAT1为参考序列,通过本地Blast筛选获得香蕉WAT1基因,分析其核苷酸、启动子及编码蛋白特性,并利用实时定量PCR技术研究其在不同组织部位、不同激素和逆境胁迫处理下的表达情况。【结果】筛选获得5个香蕉WAT1基因(命名为MaWAT1-1~5)。蛋白亚细胞定位预测结果显示,MaWAT1-1、MaWAT1-2、MaWAT1-4主要定位在液泡和细胞膜上,MaWAT1-3主要定位在细胞质和细胞膜,MaWAT1-5定位在细胞膜和叶绿体。基因结构分析和系统进化树分析均将MaWAT1s分为两组,MaWAT1-1、MaWAT1-2、MaWAT1-4聚为一组(含6个外显子和5个内含子),MaWAT1-3和MaWAT1-5归为一组(含7个外显子和6个内含子)。启动子顺式作用元件分析结果显示:MaWAT1s启动子含有大量激素和胁迫响应相关元件。实时定量PCR结果显示,MaWAT1-4在叶片中表达量最高,MaWAT1-1在根和假茎中表达量最高,其余均在根中表达量最高;大多数MaWAT1s的表达受GA3、SA、盐胁迫和干旱等显著诱导,受高温显著抑制,同时部分成员的表达受IAA、ABA、JA、低温、机械损伤和枯萎病影响显著。【结论】MaWAT1s的表达受多种激素和逆境影响显著,可能在香蕉生长发育和抗逆防御反应中发挥着重要作用。 相似文献
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以瓜列当种子为试材,采用不同浓度的磷素溶液(1×10~(-4)、3×10~(-4)、5×10~(-4)、7×10~(-4)、9×10~(-4)、1×10~(-5)、3×10~(-5)、5×10~(-5)、7×10~(-5)、9×10~(-5)、1×10~(-6)、3×10~(-6)、5×10~(-6)、7×10~(-6)、9×10~(-6)、1×10~(-7)、3×10~(-7)、5×10~(-7)、7×10~(-7)、9×10~(-7))对预培养的瓜列当种子进行处理,研究了磷素对瓜列当种子发芽率及瓜列当与加工番茄寄生的关系。结果表明:在磷素溶液为1×10~(-4)、9×10~(-4)、1×10~(-5)、3×10~(-5)、1×10~(-6)浓度下瓜列当发芽率较高,对瓜列当发芽有促进作用,在磷素溶液为7×10~(-6)、9×10~(-5)、9×10~(-6)、9×10~(-7)浓度下瓜列当发芽率较低;在1×10~(-5)和9×10~(-5)级别浓度下瓜列当寄生率最低,且差异不显著,能较好的抑制瓜列当的寄生。因此,10~(-5)浓度的磷在促进瓜列当诱杀发芽和减少寄生方面有很好的应用前景。 相似文献
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江丰一号杂交一代茄子 ,由上海市宝山区高境镇农副公司农艺师夏德兴于 1986年育成并应用于生产 ,种植面积已覆盖上海全郊区及长江流域 ,以武汉地区引种最多 ,目前尚无更好的替代品种。1 特征特性 江丰 1号茄子生长势强 ,抗逆性好 ,中熟 ,门茄着生节位 10~ 11节。条茄形 ,长 30~4 0cm(厘米 ) ,粗 2 5~ 3cm ,乌黑发亮 ,吃口糯性 ,适合上海市民消费习惯。每 6 6 7m2 (亩 )产量一般在 30 0 0~ 4 0 0 0kg(公斤 )。2 栽培要点2 .1 10月中旬育秧 ,11月上旬分苗假植 ,育成壮苗后于翌年 2月中旬在大棚内带蕾移栽。每6 6 7m2 用腐熟… 相似文献
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在不加温温室研究了熊蜂(Bumblebees)对茄子的授粉效果.试验于1996、1997年在土耳其Adana的Cukurova大学进行,供试茄子品种为杂交种Faselis、Mileda和Munica,比较了熊蜂授粉和施用30mg.L-1生长素4-CPA及振荡授粉对产量的影响.利用智利小钝绥螨(P.Persimilis)、橘棘蝽平腹小蜂(A.colemani)及A.cucumeris等生物措施防治红蜘蛛、叶螨等虫害. 相似文献
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为了选出适合本地区(江苏及丘陵地区) 栽培的丰产、早熟、优质的保护地茄子品种,我院蔬菜组育成了(茄18×3)F1、(茄4×20)F1的两个品种。我院从扬州蔬菜研究所、江苏省农科院分别引进扬州一号,苏崎茄作为对照品种,(它们分别是江苏省保护地茄子的主栽品种),与(茄18×3)F1和(茄4×20)F1一道种植进行品种比较试验,现将结果报告如下: 1:材料与方法 1.1供试材料 (1)(茄18×3)F1,选育母本苏州牛角茄×父本龙茄一号7-9的后代,代号为21 (2)(茄4×20)F1,母本龙茄一号7-9×父本新长崎长茄的F1,代号22; (3)扬茄一号:是由扬州市蔬菜所… 相似文献
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