用A蛋白免疫电镜快速检测几种蔬菜作物的两种杆状病毒

 应用A蛋白免疫电镜技术对几种蔬菜作物的长叶车前草花叶病毒(RMV)、烟草花叶病毒(TMV)的检测比常规的电镜负染技术至少要灵敏近10,000倍,比普通的免疫电镜技术要灵敏10~100倍,抗血清浓度稀释至400,000倍,病毒粗提液稀释到1,000,000倍或病毒提纯液浓度为2.5×10^-7 mg/ml时均能观察到病毒粒子。同时由于抗体分子能特异性地结合到病毒粒子表面,能够很容易地区分不同的病毒种类。
应用此项技术作者检测了杭州地区几种常见的蔬菜病毒病,对大白菜(Brassica campestris L.),蕃茄(Lycopersicum esculentum Mill),榨菜(Brassica juncea var.tsatsai Mao),雪里(Brassicajuncea var.multiceps Tsen et Lee)等作物发病期的叶或果的浸提液用A蛋白免疫电镜进行快速检测,结果在大白菜,番茄等病株上检测到较多的病毒粒子,且大多能被RMV抗血清修饰,同时在番茄病株检测到的少量病毒粒子亦能被TMV抗血清修饰,而榨菜及雪里等病株上检测到的病毒粒子很少能被RMV及TMV抗血清所修饰,另外,病毒粒子的含量以番茄病果中为最高,要比其它几种蔬菜作物叶子中高约10~30倍。     

涪陵榨菜上严重发生根肿病

涪陵榨菜是我国的副食珍品 ,它与欧洲酸菜、日本酱菜并誉为世界三大名腌菜。榨菜的原料作物茎瘤芥 (Ｂｒａｓｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ .ｔｕｍｉｄａＴｓｅｎｅｔＬｅｅ) ,当地称青菜头 ,近年严重发生根肿病。据调查 ,涪陵江北办事处和百胜镇菜区重病区 ,一般田块株发病株率     

一种新的适用于ELISA的抗血清纸片保存法

用特异性抗血清制备的抗血清纸片应用于酶联免疫吸咐实验（ＥＬＩＳＡ），取得了良好的结果。目前已将抗血清纸片用于南芥菜花叶病毒（ＡｒＭＶ）、番茄环斑病毒（ＴｏｍＲＳＶ）、烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）、南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）等进境植物危险性病毒的检测，取得与使用冻干保存抗血清相同的效果。应用抗血清纸片方便、经济、便于保存和邮寄。     

杆状病毒表达猪传染性胃肠炎病毒钉状蛋白在血清学诊断上的应用

用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体。实验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种昆虫传代细胞系Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（ｓｆ９），所表达的重组蛋白量在接种后第７２小明达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶ Ｓ蛋白Ａ     

进口悬钩子烟草花叶病毒的鉴定

根据鉴别寄主反应，粒体形态及血清学等试验从美国进口悬钩子上的病毒分离物鉴定为烟草花叶病毒。摩擦接种普通烟表现为花叶，在心叶烟，昆诺阿黎，苋色黎接种叶上表现为局部枯斑，电镜粒体为杆状，约３００ｎｍ，免疫电镜中用ＴＭＶ抗血清诱捕修饰法制片铜网能捕获大量病毒粒体，并在粒体表面有一层抗体外套，ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ中与ＴＭＶ抗血清也呈阳性反应。悬钩子中病毒浓度很低，只有经浓缩后才能对病毒进行鉴定。文中还讨论了     

苹果褪绿叶斑病毒PBM1（李假痘）毒株的提纯、抗血清制备及ELISA检测

从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒（ａｐｐｌｅｃｈｌｏｒｏｔｉｃｌｅａｆｓｐｏｔｖｉｒｕｓ，Ｔｒｉｃｈｏｖｉｒｕｓ组）的ＰＢＭ１毒株能引起李品种“Ｈａｕｓｚｗｅｔｓｈｅ”的假痘病，将其繁殖在昆诺藜（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍｑｕｉｎｏａ）上。感染ＰＢＭ１毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每１００ｇ叶组织的病毒产量平均为１．６８ｍｇ。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，病毒外壳蛋白的分子量为２１．５ｋＤａ。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ＥＬＩＳＡ法，对感染ＰＢＭ１的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。     

粉纹夜蛾颗粒体病毒增效因子C-末端片段的克隆表达及其生物活性初步测定

昆虫杆状病毒增效蛋白（ｅｎｈａｎｃｉｎ）也称病毒增效因子（ｖｉｒａｌｅｎｈａｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＶＥＦ）,是由某些杆状病毒基因编码具有促进核型多角体病毒（ｎｕｃｌｅｏｐｏｌｙｈｅｄｒｏｖｉｒｕｓ,ＮＰＶ）感染的一类金属蛋白酶［１］,具酯酶活性［２］。增效因子在颗粒体病毒、昆虫痘病毒［３］及舞毒蛾核型多角体病毒（ＬｙｍａｎｔｒｉａｄｉｓｐａｒＭＮＰＶ）［４］均有发现。粉纹夜蛾颗粒体病毒（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａｎｉｇｒａｎｕｌｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,ＴｎＧＶ）ＶＥＦ基因的开放阅读框（ｏｐｅｎｒｅａ…     

应用单克隆抗体检测香蕉束顶病

应用香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了检测香蕉束顶病的间接ＥＬＩＳＡ方法，其检测香蕉病组织汁液的最大稀释度为１：１２８０，健康香蕉组织汁液无非特异性反应。用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了采自广东、广西９个市（县）的香蕉产区的８０个大田香蕉束顶病样本和２５个荫棚香蕉试管苗样本，其中大田样本ＢＢＴＶ的带毒率为７６．５％，试管苗样本的带毒率为８．０％。香蕉束顶病株不同部位ＢＢＴＶ含量检测表     

四种药用植物炭疽病的病原鉴定

本文以ＶｏｎＡｒｘ和Ｓｕｔｔｏｎ提出的炭疽菌分类系统的依据，对玉竹，朱砂莲，当归，升麻４种药用植物上的炭疽病病原进行了分类鉴定，鉴定出玉竹炭疽病菌Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｃａｐｓｉｃｉ（Ｓｙｄ）Ｂｕｔｌ＆Ｂｉｂｓｙ，朱砂链炭疽病菌Ｃ．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｄｅｓ（Ｐｅｎｚ．）Ｓａｃｃ．和当归炭疽病毒Ｃ．ａｃｕｔａｔｕｍＳｉｍｍｏｎｄｏ３个合格的种。     

南芥菜花叶病毒（ArMV）

南芥菜花叶病毒（ＡｒＭＶ）张有才，陈宪斌，焦慧燕（佳木斯动植物检疫局１５４００２）在新公布的“中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录”中，南芥茶花叶病毒（Ａｒａｂｉｓｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，异名，ＲａｓｐｂｅｒｒｙｙｅｌｌｏｗｄＷａｒｆ；Ｒ...     

烟蚜种群繁殖参数的估计

根据采自不同寄主植物［烟草和菜心（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｈｉｎｅｎｓｉｓｖａｒ．ｕｔｉｌｉｓ）］烟蚜（Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ）个体接于原寄主与新寄主上饲养研究结果数据。本文应用几个描述蚜虫种群数量动态的参数（内禀增长率ｒｍ、净增殖率Ｒ０、周限增长率λ、世代历期Ｔ）讨论蚜虫种群在不同寄主植物上的生长生殖情况。结果显示：采自烟草的蚜虫接于新寄主的蚜虫个体几个参数取值均大于接于原寄主的群体，分别为：接于烟草群体ｒｍ＝０．１９３，Ｒ０＝８．２７４，λ＝１．２１３，Ｔ＝１０．９５１；接于菜心群体ｒｍ＝０．２０８，Ｒ０＝１０．６７０，λ＝１．２３１，Ｔ＝１１．３７４。采自菜心种群接于烟草、菜心上也得到同样的结论，各参数分别为０．２６９，１９．５５１，１．３０９，１１．０４７；０．２４２，１３．１３３，１．２７４，１０．６５２。可见，烟蚜个体在菜心与烟草同样可以良好地生存、生殖，存活率与产仔量与产仔过程均近似。从转换寄主情况可见，采自原寄主上的个体，当转接于其他寄主植物上时，不仅可生存，从几个种群繁殖参数反映出，这种转接更有利于其种群的发展     

香蕉苞片花叶病毒及其检测技术

香蕉苞片花叶病毒（Ｂａｎａｎａｂｒａｃｔｍｏ－ｓａｉｃｖｉｒｕｓ—ＢＢＭＶ）是近年来在菲律宾香蕉产区发现的一种新病原，它能引起香蕉的减产及品质下降，由于这种病毒很容易随病株的无性繁殖材料传播，因而引起了世界香蕉产业的关注，已被许多国家定为进境香蕉组培...     

我国获得世界首例转多基因抗病番茄

我国获得世界首例转多基因抗病番茄唐绂忱（吉林省公主岭市寒地果树研究所，１３６１１８）国家生物工程中心利用现代生物技术，率先地获得了世界首例转多基因高抗烟草花叶病毒（ＴＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）和抗青枯病、晚疫病的番茄植株。...     

灰斑古毒蛾核型多角体病毒病的自然流行

灰斑古毒蛾核型多角体病毒病的自然流行孙发仁（山东省泰安市菜篮子科技园，泰安２７１０００）ＰＲＥＬＩＭＩＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＰＯＬＹＨＥＤＲＯＳＩＳＶＩＲＵＳＩＳＯＬＡＴＥＤＦＲＯＭＯＲＧＹＩＡＥＲＩＣＡＥＳＵＮＦａ－Ｒｅｎ（ＴａｉａｎＳｃｉ...     

福建西番莲病毒病的发生及其病原黄瓜花叶病毒亚组鉴定

１９８８－１９９５年对福建西番莲病毒的发生为害进行调查,发现在西番莲栽培区病毒病普遍发生,发病率通常在３０－４０％,严重的达９０％以上,田间症状主要表现为叶片环斑、皱缩、花叶、环斑花叶、死面和果实木质化等。从田间病株采集４０份样本,经电镜观察和采用Ａ蛋白夹心ＥＬＩＳＡ（ＰＡＳ＿ＥＬＩＳＡ）,用西番莲化木质病毒ＰＷＶ）,西番莲黄花叶病毒ＰＦＹＭＶ）、紫果西番莲花叶病毒（ＧＭＶ）、烟草花叶病毒（ＴＭＶ     

农抗120防治苹果炭疽病效果

农抗１２０防治苹果炭疽病效果曾现春（山东滨州地区果树站，滨州２５６６００）ＣＯＮＴＲＯＬＯＦＧＬＯＭＥＲＥＬＬＡＣＩＮＧＵＬＡＴＡＷＩＴＨＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＡＮＴＩＢＩＯＴＩＣ１２０ＺＥＮＧＸｉａｎｃｈｕｎ（ＢｉｎｚｈｏｕＤｉｓｔｒｉｃｔＦｒｕ...     

病害检测新技术

1.在加拿大,用ＲＤＢＨ法(Ｒｅｖｅｒｓｅｄｏｔｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ反向点印迹杂交法)检测高尔夫球场草地根部的疫菌———Ｐｙｔｈｉｕｎｓｐｐ.,ＲＤＢＨ法为分子生物学技术,比传统方法准确、快,一般2天便完成一次检测,而传统法要14～21天,并且一次可检出多种疫菌,检测结果不易受菌生长速度和繁殖体变异的影响。2.用ＣＺＥ检兰花两种主要病毒———齿兰环斑(ＯＲＳＶ)和建兰花叶(ＣｙＭＶ)。方法的全名为Ｃａｐｉｌｌａｒｙｚｏｎｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ(毛细管区带电泳)。利用两病毒电泳迁移率不同。在毛细管…     

应用A蛋白免疫电镜技术快速检测病株中大麦黄花叶病毒

 用A蛋白免疫电镜技术,检测大麦病汁液中的大麦黄花叶病毒(BaYMV),其捕获抗血清的适宜工作浓度范围很宽,320-20,480倍均能达到满意的结果;抗原孵育条件以室温(约25℃)下30分钟或冰箱(约4℃)中3小时,捕获到的病毒粒子数量较多。应用这项技术,在稀释3,125倍的病汁液中还能检测到BaYMV粒子,比普通免疫电镜方法的灵敏度至少高5倍。BaYMV在病株中的分布以症状明显的花叶中含量最高,黄化叶中较少,茎和根中找不到病毒。利用该技术可以快速而灵敏地进行大麦品种抗病性的鉴定与筛选。本文最后还讨论了BaYMV的稳定性。     

番茄环斑病毒单克隆抗体细胞株的建立及检测方法的研究

用纯化的番茄环斑病毒（ＴｍＲＳＶ）免痊Ｂａｌｂ／ｃ小白鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合。筛选出６株分泌ＴｍＲＳＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。抗体免疫球旦白分属于１ｇＧ２ａ，ＩｇＧ３和１ｇＭ。用免疫电镜诱捕法检测，６个ＭｃＡｂ与加拿大分离物反应均为阳性，其中ＣＥ３，ＣＧ８，９Ｇ９不与西德分离物反应。属于１ｇＧ３的单抗具有与Ａ旦白结合的特性。     

南方菜豆花叶病毒(SBMV)两典型株系特异cDNA和RNA探针的制备及应用

南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）主要有２株系：菜豆株系（ＳＢＭＶ－Ｂ）和豇豆株系（ＳＢＭＶ－Ｃ）,血清学方法不能予以区分。根据已报道的核酸序列设计了２对特异引物,进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆到载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中,序列测定予以证实后利用随机引物法合成放射性ｃＤＮＡ探针,再进行体外转译合成地高辛ＵＴＰ标记的ＲＮＡ探针。２种探针均可分别特异地检测Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ膜上的ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ。ＲＮＡ探针检测ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ灵敏度分别为：０．１μｇ和０．０１μｇ。